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布鲁菌病半套式PCR检测方法的建立

马鸣潇;刘锴;于洋;周铁忠;张利博

摘要: 目的 建立布鲁菌属半套式PCR检测方法.方法 根据布鲁菌BCSP-31蛋白基因设计三条引物,扩增目的片段长223 bP,通过条件优化,建立了布鲁菌属半套式PCR检测方法.利用所建立的PCR方法对六个种布鲁菌和Y.Center O:9,S.TyPhi,E.Coli O:157进行检测验证其特异性,通过对活菌计数检测验证其敏感性.结果 检测结果表明六个种布鲁菌均可扩出223bP的目的片段,而Y.Center O:9,S.TyPhi和E.Coli O:157不能扩出目的片段.通过对活菌计数低可检测到20个细菌.结论 本研究建立了敏感、特异的布鲁菌病半套式PCR快速检测方法,为布鲁菌的检测和试剂盒的研制奠定了基础.

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