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长白山白眉蝮蛇毒类凝血酶的分离纯化

牟萍;尹家荣;侯瑞鹏;于鸿儒

摘要: 目的建立一种分离纯化长白山白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的方法.方法将长白山白眉蝮蛇蛇毒溶解后离心,取上清进行阴离子交换层析,所得蛋白进行分子筛层析.提纯的蛋白用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定及相对分子量测定.测定酶的N-末端氨基酸序列.结果经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳呈单一区带,相对分子量为35.5kDa.N-末端氨基酸序列分析表明其N-末端氨基酸序列与立止血中巴曲酶N-末端氨基酸序列基本一致.提取率约为5mg类凝血酶/g蛇毒.结论用上述方法可制得高纯度的类凝血酶.

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