临床检验杂志
Chinese Journal of Clinical Laboratory Science 림상검험잡지
- 主管单位: 江苏省卫生厅
- 主办单位: 江苏省医学会
- 影响因子: 0.74
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1001-764X
- 国内刊号: 32-1204/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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未转移结直肠癌患者术后转移风险预测列线图的构建
目的 构建结直肠(colorectal cancer,CRC)患者预后列线图预测模型,并验证其准确性.方法 回顾性分析就诊于苏州大学第三附属医院的438例CRC患者的临床病理资料.建立COX单因素、多因素回归模型确定预后的独立危险因素.用R软件建立列线图,绘制术后3年、5年无病生存率(disease free survival,DFS)校准图线并与实际观察情况比较.用Bootstrap法进行内部验证,计算一致性指数(C-index)评估模型准确性.分析时间依赖的ROC曲线比较其与第7版美国癌症联合委员会(American Joint Committee On Cancer,AJCC)分期系统(TNM系统)在预测术后的3年、5年的DFS的敏感性和特异性.结果 438例CRC患者中233例患者出现转移,其中肝脏转移105例,肺转移57例.COX回归模型分析示肿瘤分化程度,肿瘤TNM分期,癌胚抗原(CEA)水平,糖类抗原19-9(CA19-9)水平,中性粒细胞与淋巴细胞之比(Neutrophil lymphocyte radio,NLR),抑癌基因P53是患者预后的独立影响因素.列线图用于预测生存的C指数为0.678.校正曲线表明预测的3年、5年DFS与实际观察情况高度符合.时间依赖的ROC曲线结果表明,相较于传统AJCC-TNM分期,列线图预后模型在预测术后3年和5年的DFS具有更高的敏感性和特异性.结论 列线图可较准确预测个体CRC患者的预后,利于临床工作者对其随访或及时开展对患者有益治疗.
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1个X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良家系的TRAPPC2基因突变分析
目的 确定1个迟发性脊椎骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)家系的致病基因.方法 收集先证者及家系的临床资料,提取先证者及亲属外周血DNA,用高通量测序技术对先证者的COL2A1、COL1A1、MATN3、TRAPPC2、FGFR3等189个骨骼相关基因的外显子编码区测序,对发现的致病突变进行Sanger测序验证,并对家系其他成员进行该突变的检测.结果 在先证者TRAPPC2基因第5外显子上发现了1个移码突变c.271275delCAAGA半合子缺失,为X-SEDT的致病性突变,同时发现患者母亲为该突变的携带者,而患者父亲和妹妹未检测到该突变.结论 用靶向二代测序和Sanger测序结合的方法确定了1个X-SEDT家系的移码突变c.271275delCAAGA半合子缺失,为临床遗传咨询提供了分子依据.
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miR-374-5p调控微环境间质干细胞促进胃癌增殖与迁移
目的 探讨miR-374-5p调控人胃组织来源间质干细胞(MSCs)体外促进胃癌细胞增殖和迁移的作用.方法 体外分离培养获得人胃癌组织来源间质干细胞(GC-MSC)和配对的癌旁组织来源间质干细胞(GCN-MSC);体外采用GCN-MSC和GC-MSC培养上清液处理胃癌细胞,平板克隆实验检测胃癌细胞增殖能力,划痕实验检测胃癌细胞迁移能力;采用miR-374-5p模拟物和抑制剂分别过表达和抑制GCN-MSC及GC-MSC中miR-374-5p的表达水平,收集转染后MSC的培养上清,体外处理胃癌细胞,观察胃癌细胞增殖和迁移能力的改变.结果 GC-MSC培养上清处理组形成的单细胞集落数目[(112±7)个]多于GCN-MSC组[(48±6)个],细胞间距[(6.5±0.5)cm]小于GCN-MSC组[(15±1)cm],可明显促进胃癌增殖(t=12.02,P<0.01)和迁移(t=13.17,P<0.01).GCN-MSC过表达miR-374-5p后,其培养上清可增加单细胞集落形成数目[(115±12.1)个],缩小细胞间距[(7.83±1.08)cm],促进胃癌增殖(t=9.31,P<0.01)和迁移(t=4.88,P<0.01).抑制剂组中培养上清处理组单细胞集落数目[(60±10.2)个]减少,细胞间距[(12.17±1.47)cm]增加,miR-374-5p抑制剂可逆转GC-MSC促进胃癌增殖(t=5.47,P<0.01)和迁移(t=4.95,P<0.01)能力.结论 miR-374-5p是调控微环境MSC促进胃癌增殖与迁移的重要分子.
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EGFR基因G719 S和T790 M突变载体的构建及临床应用研究
目的 构建与宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S和T790M位点突变型重组载体,利用其建立分子开关平台检测宫颈癌EGFR基因突变.方法 以野生型重组质粒为模板,利用重叠PCR技术,得到突变型融合目的DNA片段,再将此目的片段连接入pMD19-T质粒中,构建成突变型重组载体,将其转化入大肠埃希菌E.coli DH5α感受态细胞进行表达,用菌液PCR和基因组测序进行鉴定.设计特异性检测引物,建立分子开关检测平台用于临床宫颈癌样本的检测.结果 通过基因组测序证实G719S和T790M突变位点成功引入,定点突变载体构建成功.成功建立了分子开关检测平台用于宫颈癌组织DNA的检测.结论 利用重叠PCR技术简便、高效地构建了EGFR基因突变重组载体,并建立了分子开关检测平台,为基因定点突变及临床上检测EGFR基因突变提供了新的技术手段.
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上皮卵巢癌细胞系LncRNAs、mRNAs表达谱基因芯片分析
目的 通过基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系中差异表达的LncRNAs、mRNAs表达谱,为研究上皮卵巢癌相关LncRNAs的功能提供实验依据.方法 采用基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系A2780、HO8910、SKOV3与卵巢上皮细胞系HOSEpiC中LncRNAs和mRNAs的表达差异;对差异表达的mRNAs进行KEGG通路富集分析;用qRT-PCR在上皮卵巢癌细胞系及卵巢上皮细胞系中验证差异明显的6条LncRNAs的表达水平.结果 基因芯片结果发现在3个肿瘤细胞系中上调的LncRNAs有227条,下调的有483条;3个上皮卵巢癌细胞系中差异表达的mRNAs主要富集在PI3K-AKT、mTOR及TNF-α等肿瘤相关通路中(P<0.05);PTPRG-AS1、CCNT2-AS1、XLOC 009869、LINC01138在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、和OVCR3中表达上调(P<0.05);RP11-252P19.2、RP11-744I24.2在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、HO8910、OVCR3和3AO中表达下调(P<0.05).结论 基因芯片筛选出在上皮卵巢癌细胞系中差异表达的LncRNAs和mRNAs,差异表达mRNAs与PI3K-AKT、mTOR及TNF-α等肿瘤通路有关,有望为卵巢癌的诊断及治疗提供新的靶点.
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抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究
目的 纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能.方法 利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及阻断人TIM-3融合蛋白(TIM-3 Ig-huFc)与凋亡细胞表面TIM-3配体磷脂酰丝氨酸(PtdSer)结合的能力;混合淋巴细胞反应(MLR)及ELISA法检测4E8对CD4+T细胞分泌IFN-γ的影响.结果 4E8可与人TIM-3分子结合,但不可阻断TIM-3与PtdSer的结合.与阴性对照组(958.3±153.2)相比,4E8(10μg/mL组:2563±150.3,3.33μg/mL组:1981±211.5)可增强MLR实验中CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,差异有统计学意义(P<0.05).并且与单独使用4E8(10μg/mL组:1981±211.5,0.33μg/mL组:844±76.2)相比,4E8与程序性死亡受体1(PD-1)抗体nivolumab联合使用(10μg/mL组:3049±80.5,0.33μg/mL组:1957±321.3)有协同作用,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功纯化出抗人TIM-3单克隆抗体4E8.4E8具有增强CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,但对CD4+T细胞的作用不依赖于阻断TIM-3与其配体PtdSer的结合.
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胃癌组织标本中lncRNA RN7SK的表达及其筛查价值
目的 检测胃癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)RN7SK表达水平,并探讨其在临床筛查中的价值.方法 qRT-PCR检测lncRNA RN7SK在胃癌细胞、胃癌组织中的表达水平;绘制ROC曲线,分析其用于筛查胃癌的效能.结果 lncRNA RN7SK在人胃癌细胞系SGC-7901(3.91±0.53)、MGC-803(3.44±0.29)、HGC-27(4.04±0.87)和BGC-823(4.30±1.13)中的表达水平明显高于人胃粘膜上皮细胞系GES-1(1.02±0.27),差异具有统计学意义(t分别为12.33、7.48、7.20、4.90,P<0.05).lncRNA RN7SK在55例胃癌组织中有47例(85.5%)表达上调,8例(14.5%)表达下降.lncRNA RN7SK筛查胃癌患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.827,95%可信区间(CI)为0.746~0.907,当cut-off值为0.618时,敏感性为0.836,特异性为0.782.结论 lncRNA RN7SK在胃癌组织中高表达,且具有较高的筛查效能,可作为潜在的胃癌诊断分子标志物.
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广西人群miR-181 rs77418916和rs8108402多态性与系统性红斑狼疮的关联性研究
目的 分析miR-181a rs77418916和miR-181c rs8108402单核苷酸多态性(SNP)与系统性红斑狼疮(SLE)患病的关联性.方法 用流式细胞术分析SLE患者淋巴细胞亚群,单碱基延伸PCR分型和DNA测序检测miR-181基因多态性,RT-qPCR检测miR-181a和miR-181c在单个核细胞中的表达水平.结果 rs8108402位点存在CC、CT和TT 3种基因型,CT和TT基因型及隐性和显性模型在SLE组与对照组比较差异均有统计学意义(CT vs CC:OR=1.50,95%CI:1.03~2.19,P=0.033;TT vs CC:OR=2.65,95%CI:1.18~5.98,P=0.019;CC/CT vs TT:OR=2.23,95%CI:1.01~4.93,P=0.048;TT/CT vs CC:OR=1.61,95%CI:1.12~2.31,P=0.010);rs77418916位点检测到AA、AT和TT 3种基因型,但未发现其与SLE遗传易感性相关;SLE组miR-181a和miR-181c基因的表达水平明显低于对照组(Z=-3.22,P<0.01;Z=-3.24,P<0.01),携带rs8108402 CT和TT基因型的患者miR-181c表达水平低于CC基因型携带者(Z=-2.51,P<0.05);SLE组CD3+、CD4+、CD8+和NK细胞绝对计数明显低于对照组(P<0.01).结论 miR-181c rs8108402多态性可能与广西人群SLE的遗传易感性相关,且CT或TT基因型携带者患SLE的风险增加,携带CT或TT基因型的个体可能通过抑制miR-181c基因表达从而增加SLE的发病风险.
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一罕见 β地贫基因CD37(TGG→TAG)突变复合 ɑ地贫家系的分子遗传学特征
目的 探讨1个罕见β地贫基因CD37(TGG→TAG)突变复合ɑ地贫家系的分子遗传学及血液学表型特征.方法 采集该家系两代成员外周全血样本,并进行血液学表型以及红细胞参数和血红蛋白(Hb)分析.采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)方法、PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)法以及DNA测序方法对家系成员外周全血样本进行常见的地贫基因类型检测和β-珠蛋白基因序列分析.结果 该家系成员中先证者及其父亲、大姐平均红细胞体积(MCV)分别为55.4 fL、67.8 fL和63.0 fL,平均红细胞血红蛋白量(MCH)分别为17.5 pg、21.0 pg和19.5 pg,血红蛋白A2(HbA2)分别为5.9%、6.2%、4.9%;其母亲和二姐的MCV和MCH降低,但Hb分析结果均正常.基因分析结果示:先证者携带罕见β地中海贫血CD37(TGG→TAG)突变,其父亲和大姐携带CD37(TGG→TAG)突变复合-ɑ3.7杂合缺失,二姐携带-ɑ3.7杂合缺失,母亲未见异常.结论 罕见β地贫基因CD37(TGG→TAG)突变复合-ɑ3.7杂合缺失的血液学表型与单纯CD37(TGG→TAG)突变杂合子类似,表现为轻型β地贫特征.
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串联质谱和高效液相色谱-串联质谱二次筛查联合应用于新生儿MMA筛查
目的 探讨串联质谱和高效液相色谱-串联质谱二次筛查联合应用在甲基丙二酸血症(MMA)中的筛查价值.方法 收集新生儿串联质谱初筛结果中C3、C3/C2、C3/C0单一或多个指标异常的新生儿干血滤纸片标本,用高效液相色谱-串联质谱的方法定量检测原始血片中甲基丙二酸、甲基枸橼酸和高半胱氨酸,对二次筛查后疑似阳性的新生儿进行召回复查,并进行尿气相色谱/质谱检测.临床诊断患儿进一步予以基因检测进行确诊.结果 共收集423例C3、C3/C2、C3/C0单一或多个指标异常的新生儿筛查标本,初筛阳性率约为1%,行联合筛查检测结果发现8例标本中甲基丙二酸和同型半胱氨酸表达水平明显升高,召回复查尿气相色谱质谱提示甲基丙二酸轻度升高.结论 串联质谱和高效液相色谱-串联质谱联合应用可以提高新生儿MMA筛查的阳性预测值、降低假阳性率,在新生儿遗传代谢病筛查中具有重要价值.
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IGFBP 6在结直肠癌组织中的表达及其意义
目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)在结直肠癌(CRC)组织中的表达水平及其在CRC中的临床意义.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CRC患者癌组织及其相应癌旁组织中IGFBP6 mRNA的表达水平;免疫组织化学法(IHC)检测CRC患者癌组织及癌旁组织石蜡切片中IGFBP6蛋白的表达;分析其与CRC患者临床病理参数及预后关系.结果 CRC患者癌组织中IGFBP6 mRNA表达水平(0.26±0.39)低于癌旁组织(1.22±0.75),差异有统计学意义(t=8.288,P<0.01);CRC患者癌组织中IGFBP6蛋白阳性率(38.1%)低于癌旁组织(61.9%),且与TNM分期相关(P均<0.01).生存曲线分析显示,IGFBP6低表达的CRC患者生存时间明显缩短.结论 低表达的IGFBP6可作为CRC诊断及预后判断潜在的生物学标志物.
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舌鳞状细胞癌患者血清多配体聚糖-1的检测及临床意义
目的 探讨血清多配体聚糖-1变化筛查舌鳞状细胞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)的临床应用价值.方法 收集2015年3月至2016年6月就诊的OTSCC患者65例(OTSCC组)和体检健康者74例(对照组)血清样本.ELISA法检测各组血清中多配体聚糖-1的表达水平.ROC曲线分析血清多配体聚糖-1对OTSCC筛查的临床应用价值.结果 OTSCC组血清多配体聚糖-1的表达水平[(91.87±43.80)ng/mL]明显低于对照组[(162.32±83.80)ng/mL,t=1.977,P=0.002];OTSCC组TNM分期、浸润深度、淋巴结转移者血清多配体聚糖-1的表达水平差异均具有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果示血清多配体聚糖-1<95.54 ng/mL可用于筛查OTSCC[(AUCROC=0.944,P<0.01,95%CI(0.915~0.974)];血清多配体聚糖-1<74.54 ng/mL可筛查OTSCC淋巴结转移[(AUCROC=0.783,P<0.01,95%CI(0.697~0.867)].结论 血清多配体聚糖-1水平对筛查OTSCC或其淋巴结转移具有重要的临床应用价值.
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湖北和河南地区汉族人群NEIL3 rs12645561多态性与冠状动脉硬化严重程度的相关性研究
目的 评估湖北和河南两地区汉族人群Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白3(NEIL3)基因rs12645561多态性位点与冠状动脉硬化严重程度的相关性.方法 以947例经冠状动脉造影病例为研究对象,采用病变支数得分和Gensini得分评估冠状动脉硬化严重程度;采用高分辨率熔解曲线进行rs12645561基因分型;ELISA法检测血浆NEIL3蛋白水平.结果 rs12645561 T风险等位可增加冠心病风险(χ2=12.165,P<0.05),并与病变支数得分和Gensini得分明显相关(χ2分别为14.745和15.615,P<0.05);rs12645561 CT+TT风险基因型、体重指数>25 kg/m2、高脂血症和吸烟是Gensini得分增高的独立危险因素(OR分别为1.50、1.54、2.01、1.42,P<0.05);血浆NEIL3蛋白表达水平与rs12645561基因型分布、病变支数得分和Gensini得分呈负相关(P<0.05).结论 rs12645561与湖北和河南地区冠状动脉硬化严重程度密切相关,并可影响NEIL3蛋白表达.
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人肺腺癌细胞系中SIRT1表达与奈达铂敏感性的关系
目的 探讨5株人肺腺癌细胞系HCC827、H1650、H1975、A549和H1299中沉默信息调节因子1(Sirtuin 1,SIRT1)与奈达铂(Nedaplatin,NDP)药物敏感性的关系.方法 采用实时定量PCR及western blot检测5株人肺腺癌细胞系SIRT1 mRNA及蛋白质表达水平;NDP作用于细胞后,用CCK-8法检测细胞活力并计算半数生长抑制浓度值(the half growth inhibition con-centration,IC50);通过siRNA干扰技术下调A549、H1299、H1650和H1975细胞系中SIRT1的表达,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测NDP对细胞存活率和细胞凋亡的影响.结果 与HCC827细胞(mRNA和蛋白质相对表达量分别为1.00和0.11±0.02)相比,H1650、H1975、A549和H1299细胞中SIRT1 mRNA(分别为4.53±0.74、3.11±0.64、15.76±2.28和18.09±1.17)和蛋白质表达水平(分别为0.23±0.03、0.21±0.02、0.52±0.11和0.56±0.08)均明显上调,差异有统计学意义(F分别为122.10和26.50,P<0.01);A549和H1299细胞对NDP的敏感性[IC50值分别为(7.38±1.59)μmol/L和(8.14±1.43)μmol/L]明显高于HCC827、H1650和H1975细胞[IC50值分别为(26.16±4.35)μmol/L、(22.29±3.26)μmol/L和(24.41±2.58)μmol/L],差异有统计学意义(F=30.86,P<0.01).A549和H1299细胞转染并经NDP处理后,siSIRT1组细胞存活率明显高于NC组(F分别为235.10和39.20,P<0.01),细胞凋亡率明显低于NC组(t分别为7.29和6.68,P<0.05);而在H1650和H1975细胞中,siSIRT1组细胞存活率明显低于NC组(F分别为185.40和60.09,P<0.01),细胞凋亡率明显高于NC组(t分别为6.15和31.36,P<0.01).结论 在SIRT1高表达的A549和H1299细胞中SIRT1表达增加了细胞对NDP敏感性,而SIRT1中表达的H1650和H1975细胞中SIRT1表达降低了细胞对NDP的敏感性,提示在人肺腺癌细胞中SIRT1可能在铂类耐药发挥双重作用.
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单核苷酸多态性微阵列芯片技术检测Prader-Willi综合征患儿染色体微缺失
目的 采用单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism array,SNP-array)分析l例因生长发育迟缓而诊断为Prader-Willi综合征患儿的染色体微缺失,探讨其分子遗传发病机制.方法 用SNP-array检测方法分析患儿及其父母的DNA拷贝数变异,并对缺失区段进行数据库比对和文献分析.结果 SNP-array检测结果示患儿父母结果未见异常.患儿的父源性15q11.2-q13.1区段23699701-28525460缺失了4.826 Mb,该缺失区段与Prader-Willi综合征相关.结论 SNP-array技术可以明确诊断Prader-Willi综合征.
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全外显子测序产前诊断Walker-Warburg综合征
目的 利用全外显子测序技术对患有脑积水和先天性心脏病的胎儿进行产前诊断,并指导再次妊娠.方法 提取胎儿羊水细胞DNA以及父母外周血DNA,采用外显子测序技术进行检测,经过建库、杂交捕获、测序等过程,将得到的数据经过比对、软件分析、查找数据库及文献等,根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG,2015)原则寻找胎儿的致病基因,并利用Sanger测序对致病位点进行验证.结果 全外显子测序技术检测结果发现患儿POMT1基因发生复合杂合突变,分别遗传自母亲的经典剪切位点突变c.605+1G>A(IVS7)和遗传自父亲的移码突变c.1367 c.1368(exon 15)insGA,p.L456Lfs?80;Sanger测序验证结果与外显子捕获测序结果一致.胎儿为Walker-Warburg综合征患者.胎儿父母终决定终止妊娠.结论 利用全外显子测序技术可快速可靠地诊断Walker-Warburg综合征患者,在临床决策及产前咨询中发挥重要作用.
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TaqMan-ARMS法快速检测人MTHFR基因多态性
目的 利用PCR引物的错配扩增和荧光定量PCR技术,建立一种针对人亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofo-late reductase,MTHFR)基因多态性的快速荧光扩增检测方法.方法 收集已经测序验证的MTHFR基因C677T,A1298C位点的野生型、杂合型和突变型样本,并据此构建野生型和突变型质粒;根据野生型MTHFR基因序列设计ARMS(扩增阻碍突变系统)引物和TaqMan探针并筛选出合适的突变检测体系,与已知突变信息的214例样本进行比较,以验证该检测体系的可行性.结果 建立的TaqMan-ARMS法性能评估优异,样本的低检测限为10 copies/μL,样本间交叉检测无核酸扩增,体系检测阴性对照无核酸扩增;重复性及实验室内精密度结果良好,MTHFR-667位点和1298位点重复性检测的标准差介于0.11~0.44,纯合和杂合样本的变异系数(CV)均<4.52%.214例临床样本用该法检测结果与测序法的一致性为100%.结论 基于TaqMan-ARMS法检测MTHFR的基因多态性方法简单,快捷,精确,适合用于临床样本快速诊断.
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自噬参与肿瘤上皮间质转化的研究进展
在肿瘤的发生、发展中,自噬和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发挥着重要作用.研究表明,自噬和EMT以复杂的关系紧密相关.一方面,自噬促进EMT的发生和发展;另一方面,在肿瘤的早期阶段,自噬可作为抑癌信号,通过选择性地使该过程的关键介质失稳来对抗EMT的激活.然而,现阶段关于自噬参与肿瘤EMT的作用机制并不十分清楚.该文对其作用机制的进展作一综述.
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DNA甲基化及miRNAs在动脉粥样硬化性心血管疾病中的研究进展
动脉粥样硬化性心血管疾病是危害人类健康的重要疾病之一.近年来研究发现,DNA甲基化及微小核糖核酸(miRNAs)均参与动脉粥样硬化性心血管疾病的发生、发展过程,并被认为是其早期诊断的潜在检测标志物.目前,明确动脉粥样硬化性心血管疾病发病机制,做好高危患者的筛查及早期诊断,实现个体化治疗依旧是困扰医学的重大难题.该文就近年来DNA甲基化及miRNAs在动脉粥样硬化性心血管疾病中的研究进展作一综述.
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豚鼠耳炎诺卡菌引起儿童颌下皮肤感染1例
诺卡菌属( Nocardia)是革兰阳性、需氧丝状菌,寄生于土壤、腐物中,经呼吸道或皮肤伤口侵入人体造成感染. 利用表型和分子生物学方法,诺卡菌属已被鉴定出89 个种[1].豚鼠耳炎诺卡菌( Nocardia otitidiscaviarum)引起人类感染的报道相对较少,可能与其致病力低、土壤中分布不广泛或病例漏报有关[2]. 本院于2016年12月自1例儿童颌下脓肿脓液中分离出1株豚鼠耳炎诺卡菌,报道如下.
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POCT核酸检测试剂的冷冻干燥处理及其应用
目前应用于核酸现场检测的床旁检验(Point of care testing,POCT)产品均为通过将液态试剂脱水处理,让试剂以固态形式在室温下保存,使得试剂的保存运输不再受到低温的限制,其中,应用广泛的脱水形式是冷冻干燥处理.冷冻干燥技术是使混合物中已经冻结的固态冰不经融化成液态水的过程而直接升华成气态,终去除水分并保留其他有效组分的新式高效干燥技术.由于生物活性原料在固态干粉状态下的稳定性远高于液态,因此,通过冻干脱水处理,即能实现PCR体系中各组分在室温下的长期保存及稳定运输.该文综述了PCR扩增体系冻干试剂的制备工艺,包括冻干保护剂的添加与赋形剂的使用,并对核酸冻干试剂的应用前景进行了展望.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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