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基于单基因的实时荧光定量反转录-聚合酶链反应定性检测猪霍乱沙门菌
目的 建立基于单基因的猪霍乱沙门菌的实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)检测方法.方法 通过对猪霍乱沙门菌基因组及其他血清型沙门菌基因组、人类基因组的生物信息学比对及普通PCR检测分析,获得猪霍乱沙门菌特有而其他细菌及人类基因组中不存在的特异基因SC1242,针对该基因设计特异性引物,通过优化反应条件,建立检测该靶基因的rRT-PCR方法,利用123株多种血清型沙门菌及非沙门菌菌株RNA评价该方法的特异性及敏感性.同时对猪霍乱沙门菌全血模拟标本进行敏感性检测.结果 利用该方法检测20株猪霍乱沙门菌均为阳性,其余菌株均扩增阴性.对纯菌RNA检测中,rRT-PCR的低检测限度为50 fg/反应,约为96个拷贝/反应.在以全血模拟样品提取核酸为模板的检测中,敏感性达90 cfu/ml.结论 rRT-PCR方法检测猪霍乱沙门菌特异性好、灵敏度高,对猪霍乱沙门菌的早期诊断具有潜在应用价值.
关键词： 猪霍乱沙门菌 荧光定量反转录-聚合酶链反应 检测 -
进口快速免疫色谱卡检测结核抗体对肺结核的诊断价值
几年来,结核病在世界范围内呈上升趋势.由于痰涂片和痰培养存在检出率低和时间长的特点,特别是给痰菌阴性肺结核病例的诊断带来了困难,而胸部X线检查也常常不能确定病因.
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应用双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应方法同时检测A组轮状病毒和星状病毒
目的 建立能同时检测轮状病毒A群和星状病毒双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法.方法 根据上述2种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重rRT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证.结果 所建立的双重rRT-PCR检测方法对轮状病毒A群和星状病毒具有很好的特异性和重复性,轮状病毒A群灵敏度达到每个反应101拷贝,星状病毒灵敏度达到每个反应102拷贝.128例粪便标本中,轮状病毒A群和星状病毒的检出率分别为18.0％和3.1％.通过基因测序比对结果相符.结论 构建可用于轮状病毒A群及星状病毒的双重rRT-PCR方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查.
关键词： 轮状病毒A群 星状病毒 双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应 检测 -
利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应方法检测血液中伤寒沙门菌
目的 建立实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction,rRT-PCR)方法检测伤寒沙门菌.方法 针对伤寒沙门菌STY1631基因设计特异性引物,通过优化反应条件,建立检测该靶基因的rRT-PCR方法,利用51个血清型的纯培养伤寒和非伤寒沙门菌菌株、常见非沙门致腹泻病原菌以及发热为主要症状的8种常见病原菌核糖核酸(RNA)评价该方法的特异性及敏感性,同时对伤寒沙门菌全血模拟标本进行敏感性检测.结果 利用该方法检测48株伤寒沙门菌均阳性,其余33种非伤寒沙门菌血清型、致腹泻的其他5种肠道致病菌以及发热为主要症状的8种常见非沙门菌也均扩增阴性.在对纯菌总RNA检测中,rRT-PCR的低检测限为1 pg/反应,即194个拷贝/反应.以全血模拟样品提取核酸为模板的检测中,敏感性达1×102 cfu/ml.结论 建立了敏感性高、特异性好的rRT-PCR检测血液中伤寒沙门菌的方法,为伤寒沙门菌感染的快速诊断及不明原因发热症状的病原初步鉴别提供了简便的手段,可用于对伤寒的早期诊断、预防控制及临床治疗.
关键词： 伤寒沙门菌 实时荧光定量反转录-聚合酶链反应 检测 -
2005-2007年浙江省平湖市不同人群HIV抗体检测结果分析
目的 了解浙江省平湖市不同人群中艾滋病病毒(HIV)感染现状,探讨HIV感染的流行因素.方法 调查2005-2007年平湖市3家综合医院对宾馆、洗浴、美发、歌厅的从业人员和暗娼、羁押人员,术前患者及输注血制品患者所做HIV抗体检测结果.结果 共检测21 569人,检出HIV抗体阳性7例.男性5例,女性2例,男女性别比为2.5:1;年龄小25岁,大37岁;平湖本市户籍1例,外省市6例,占85.71%;7例HIV感染者中,3例有注射毒品史,占42.86%;2例有非婚性行为史,占28.57%.结论 平湖市目前各类人群的HIV检出率均较低,HIV感染者以外来人口为主,传播途径以经血传播为主,经性接触传播也占有一定比例.
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腹泻样本中创伤弧菌的检测分析
目的 了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况.方法 对2010年6 - 10月采集的标本,经3％氯化钠碱性蛋白胨水于37℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40℃培养18～24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定.结果 在144份腹泻患者粪便样本中检测分离到2株创伤弧菌,阳性率为1.39％ (2/144)；均为生物Ⅰ型,其基因型为vcgC/16S rRNA B型.药敏结果显示分离的创伤弧菌对氨基糖苷类抗生素耐药如阿米卡星、庆大霉素.结论 在监测的腹泻样本中分离到具有较强致病能力的创伤弧菌,且氨基糖苷类抗生素耐药,应加强对海水产品和腹泻样本中创伤弧菌的检测及耐药分析,预防创伤弧菌的感染暴发.
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多重实时荧光PCR快速检测沙门菌和单增李斯特菌
目的 建立可同时检测沙门菌、单增李斯特菌的双重实时荧光PCR快速检测方法,并应用于食品样品的检测.方法 根据GenBank上下载的沙门菌invA基因、单增李斯特菌hlyA基因的保守区序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,建立并优化双重实时荧光PCR反应体系.对该方法的特异性、敏感性和稳定性进行评估,并应用于食品标本的检测.结果 实验结果表明,该检测方法特异性强,对大肠埃希菌、志贺菌、副溶血性弧菌等其他病原菌进行检测均未产生交叉反应.对沙门菌和单增李斯特菌纯培养物的低检出限分别可达10 cfu/ml和100cfu/ml;并且重复性好,变异系数均小于5%;对80份食品标本同时采用本文建立的双重荧光PCR方法和单重荧光PCR方法以及传统的分离培养方法进行检测,结果显示本文建立的双重荧光PCR方法对两种病原菌的检测效果明显优于单重荧光PCR方法以及传统的分离培养法,整个检测过程可在10 h内完成,包括前增菌所用的6 h.结论 本研究建立的多重实时荧光PCR方法能同时对沙门菌和单增李斯特菌进行快速检测,并且灵敏度高、特异性好,可为食源性疾病的病原学快速检测提供新的手段.
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副溶血弧菌耐药现状及耐药机制
副溶血弧菌是一种重要的食源性疾病致病菌,其引起的感染已成为严重的全球性公共卫生问题.水产养殖业和临床上抗生素使用不规范,会直接导致或加剧副溶血弧菌耐药.一方面,耐药菌可通过食物链进入人体,给临床治疗副溶血弧菌感染带来巨大挑战;另一方面,耐药菌中的可移动遗传元件可以将耐药基因传递给其他细菌,从而产生更大的威胁.本文主要概述了副溶血弧菌的耐药现状、耐药机制及相应的耐药检测方法,为副溶血弧菌耐药产生、传播及控制提供参考.
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浙江省丽水山区134份犬脑组织狂犬病病毒抗原检测
目的 对浙江省丽水市山区犬脑组织标本进行狂犬病病毒抗原检测,了解犬狂犬病毒感染状况.方法 收集丽水市山区狂犬病和疑似狂犬病犬以及外观健康犬脑组织标本134份,用直接免疫荧光试验(DFA)检测狂犬病病毒抗原,确定阳性标本.结果 134份犬脑组织标本印片DFA检测9份为阳性,占所检标本的6.72%(9/134),其中外观异常并攻击人/犬导致人或犬间疫情的犬脑组织标本8份,均阳性;外观正常犬脑组织标本共126份,1份阳性,阳性率0.79%(1/126).结论 在丽水市首次用免疫学方法进行狂犬病病毒的实验室检测,狂犬病病毒在丽水山区狂犬病疫区的犬间相互传播,犬狂犬病疫情存在扩散的现象.
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内蒙古锡林郭勒盟境内滦河及其水系水质卫生学监测评价
目的 分析评价流经锡林郭勒盟境内多伦县地段的滦河及其水系的水质卫生学现状.方法 将滦河及其水系7条主要支流(羊肠子河、一家河、黑风河、闪电河、小河子河、吐勒根河、乱泥河)的水质检测结果进行统计学分析.结果 8条河水的水质属低矿化度重碳盐钙镁质软水,毒理学指标全部符合标准,各条河多项污染物的健康危害综合指数Kt<1.结论 各条河的理化指标,毒理学指标安全可靠.
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浙江省梅毒检测实验室质量管理现状分析
目的 了解浙江省梅毒检测实验室现状,为提高实验室检测能力提供依据.方法 以调查表的形式对345个梅毒检测实验室的概况进行分析.结果 近3年345个机构中,79.42％(274/345)接受梅毒实验室检测专业培训;294个拥有水平旋转仪,11.88％(4t/345)的实验室仍在采用普通振荡器或手摇方式;梅毒螺旋体和非梅毒螺旋体抗原血清试验均开展的占96.52％(333/345),梅毒血清学检测策略以特异性试验和非特异性试验同时做为主;在梅毒规范化报告方面专科医院符合要求,其次为医学独立实验室;非特异性试验和特异性试验均开展室内质控的机构比较少,特别是非特异性试验的室内质控只占38.84％(134/345).结论 浙江省性病梅毒检测实验室现状有待提高,需加大实验室质量管理和培训力度,从而更好地为性病诊疗、流行病学监测以及科研提供有效支持.
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滨海新区健康体检人群体脂百分比及体质量指数的检测与分析
目的 调查天津滨海新区健康体检人群不同年龄段成年人体脂百分比及体质量指数(BMI)情况,分析BMI及体脂百分比检测法对超重判定的准确率.方法 选取2015年3月~2015年12月在本院参加健康体检的天津滨海新区居民2198例,其中青年组(20~39岁)男性566例、女性400例,中年组(40~59岁)男性645例、女性456例,老年组(≥60岁)男性77例、女性54例,对其进行BMI及体脂肪比例检测及分析.结果 滨海新区健康体检居民在体脂百分比检测中各年龄阶段平均值均超过正常范围,且体脂百分含量随着年龄的增长而增长.体脂百分比法的超重检出率明显高于使用BMI检测法的超重检出率,其中中年男性体脂百分比超标率达到84.9%,老年女性体脂百分比超标率达到81.5%.随着年龄的增长,BMI检测法出现的漏检率增加,并且会出现肌肉超重型的误判,在BMI正常的中老年男性人群中体脂百分比超标率达到77.3%,而老年女性达到75.0%;对于BMI超标的青年男性人群中体脂百分比正常的比率为9.7%.结论 在超重的判定中,BMI受年龄、运动情况的限制会造成误判情况,而脂肪百分比检测可以更准确反映脂肪情况及是否超重,更有助于营养评估和运动指导及患者的临床营养治疗.
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高敏C反应蛋白血白细胞测定与2型糖尿病大血管病变的关系
大血管病变是2型糖尿病(T2DM)的常见并发症,也是T2DM的主要致死原因,其基本的病理变化是动脉粥样硬化(AS).近年来的研究表明高敏C反应蛋白(hsCRP)与AS关系密切,外周血白细胞(WBC)对预测急性大血管事件的发生有一定作用[1,2].笔者检测了糖尿病大血管病变患者外周血上述因子水平,以探讨它们之间的关系.
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甲氨蝶呤加中药治疗异位妊娠56例疗效分析
近年来,异位妊娠的发病率有逐年上升的趋势,随着超声诊断技术的提高,血、尿绒毛膜促性腺激素(β-hCG)检测敏感性的提高,以及妇科医师对异位妊娠警惕性的提高,大部分异位妊娠均可在未破裂前得到早期诊断,使药物治疗未破裂异位妊娠已成为主要手段.本文对56例未破裂异位妊娠采用甲氨蝶呤(MTX)加中药保守治疗取得了较好的疗效,现分析报告如下.
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你也可以撬动地球
上个世纪,美国宇航局曾悬赏10万美金向全世界征集设计一种可供宇航员在太空使用的笔.要求这种笔必须不受地球吸引力限制,不用吸水,并且可以在任何方向下都能较长时间地书写.这真是一道难题,什么样的笔能够同时满足这些要求呢?于是全世界很多科学家都在日夜研制,设计出了很多科技含量极高的笔,但都无法通过终的检测.
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双环醇联合熊去氧胆酸治疗非酒精性脂肪性肝病临床疗效分析
近年来由于人民饮食结构和生活方式的改变,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在我国发病率迅速上升,并与肝纤维化、肝硬化及原发性肝癌等的发生密切相关.本研究采用基础治疗加双环醇联合熊去氧胆酸治疗NAFLD患者,与单用一种药物治疗进行对比,治疗前后检测肝功能、血脂情况,以评价联合用药的疗效.
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义乌着力探索创新计划生育服务工作
2008年12月19日,浙江省政府发布了《关于实施免费婚前医学检查和免费孕前优生检测的意见》,从该意见发布之日起,在浙江范围内全面实施免费婚前医学检查和免费孕前优生检测,简称"优生两免政策".浙江省人口计生委表示,实施"优生两免政策"目的是遏制浙江出生缺陷高发态势,提升该省出生人口素质.浙江地处沿海,地少人多,提升出生人口素质也有利于该省人口与资源环境、与经济社会的协调可持续发展.
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胆囊结石患者血清胆囊黏膜幽门螺杆菌的检测及意义
为进一步研究幽门螺杆菌(helicobacter pylori)与胆结石形成的关系,本实验通过对胆囊结石患者血清和胆囊黏膜幽门螺杆菌的检测,以明确胆囊结石患者幽门螺杆菌的感染情况,研究幽门螺杆菌与胆结石形成的关系.1 对象与方法
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2型糖尿病患者358例踝肱指数测定及分析
下肢动脉病变(PAD)是全身动脉硬化的表现之一,是2型糖尿病患者的一种严重并发症.在一定条件下容易造成糖尿病足坏疽甚至截肢致残,因此对PAD的早期诊断和治疗十分重要.踝肱动脉血压指数(ABI)检测具有操作简便、快速无创、价廉实用等特点,有助于早期发现PAD.2008年7月至2009年3月,我们测定了358例2型糖尿病患者的ABI,现分析报告如下.
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慢性肾功能衰竭患者血浆脑钠肽前体N末端片段含量分析
研究表明脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)的检测为充血性心力衰竭的诊断提供了客观指标.脑钠肽前体N末端片段是脑钠肽前体(proBNP)的降解产物,主要在肺和肾内降解.proBNP主要由心室肌合成,肾上腺髓质和大脑也少量合成.影响proBNP分泌的关键在于心室负荷及室壁张力的改变.脑钠肽通过提高肾小球滤过率、利钠利尿、扩张血管降低体循环血管阻力及血浆容量,在心脏功能异常时发挥作用.本研究检测慢性肾功能衰竭患者血浆NT-proBNP的水平,探讨其与肾功能损害等临床指标及心脏结构功能改变之间的相关性.
