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浙江省丽水山区134份犬脑组织狂犬病病毒抗原检测
目的 对浙江省丽水市山区犬脑组织标本进行狂犬病病毒抗原检测,了解犬狂犬病毒感染状况.方法 收集丽水市山区狂犬病和疑似狂犬病犬以及外观健康犬脑组织标本134份,用直接免疫荧光试验(DFA)检测狂犬病病毒抗原,确定阳性标本.结果 134份犬脑组织标本印片DFA检测9份为阳性,占所检标本的6.72%(9/134),其中外观异常并攻击人/犬导致人或犬间疫情的犬脑组织标本8份,均阳性;外观正常犬脑组织标本共126份,1份阳性,阳性率0.79%(1/126).结论 在丽水市首次用免疫学方法进行狂犬病病毒的实验室检测,狂犬病病毒在丽水山区狂犬病疫区的犬间相互传播,犬狂犬病疫情存在扩散的现象.
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直接免疫荧光对冠状动脉粥样硬化病变的形态观察
目的:为了探讨冠状动脉粥样硬化病变的特异性变化.方法:采用直接免疫荧光技术对35例因冠心病猝死的尸检标本进行了系统的染色观察,并以5例外伤致死者为对照.结果:病变组冠状动脉内膜内皮细胞及外膜有免疫球蛋白沉积,粥样斑块内膜增厚处可见连续性黄绿色荧光光环,硬化的血管内膜增厚处可见斑点状和长条状明亮的荧光物质.结论:上述改变在早、晚期病变中均有不同程度阳性反应,从而直接证实直接免疫荧光技术具有高度的特异性,尤其显示冠状动脉粥样硬化狭窄病变较为敏感.对观察动脉粥样硬化形成过程中的发生与发展变化有重要价值.
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基层医院呼吸道合胞病毒检测方法的筛选
目的：筛选快速、可靠、易推广的适合基层医院的呼吸道合胞病毒(respiratory sycytial virus,RSV)的检测方法。方法双抗体夹心ELISA法、直接免疫荧光法、免疫层析金标法、桥联酶标法检测50例经临床确诊为RSV感染患儿的鼻咽分泌物。结果 RSV阳性检出率依次为40%、88%、84%、80%。结论直接免疫荧光法快速、可靠、易推广，是基层医院RSV感染早期诊断的优选方法。
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开放性肺结核并发大疱性类天疱疮合并皮肤克柔念珠菌感染一例
患者女，89岁，因全身红斑、水疱伴痒2月余就诊。2月余前，患者胸腹部出现少量红色丘疹伴痒，右颊部胶布固定吸氧管处出现红斑、水疱、红色糜烂面。随后全身泛发水肿性红斑、水疱、糜烂面，伴大量渗出，以颈周、双腋下等间擦部位为著。既往肺结核、肺部感染、心功能不全、冠状动脉硬化性心脏病、胃肠功能紊乱、慢性肾脏病Ⅲ期、肾性贫血、低蛋白血症，低钠血症，高钾血症。长期住院并交替使用特治星、复方阿莫西林、头孢美唑、头孢他啶、塞兰欣、舒普深、拉氧头孢、拜复乐、磷霉素、美平、泰能等多种抗生素治疗。查体：呼之有反应，精神弱。双肺呼吸音粗，左下肺呼吸音低，可闻及干鸣音。全身广泛水肿性红斑基础上水疱、大疱、血疱，松弛，疱壁厚，疱液澄清或为血性液，融合成片。尼氏征（-）。部分水疱、血疱已破，露出红色糜烂面，可见游离疱壁。部分皮损表面暗红色、黑色结痂（图1，2）。X线胸片：左肺胸廓变形，肋间隙变窄，双上肺结节病灶。北京结核病控制研究所3次痰涂片均发现抗酸杆菌（＋）～（＋＋＋＋）。PPD检查（＋＋＋＋）。皮损组织病理：表皮下水疱（图3），水疱内为纤维素构成的网架，其中含大量嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞（图4）。直接免疫荧光：基底膜带IgG、C3沉积。盐裂皮肤间接免疫荧光：IgG及C3表皮侧荧光。3次皮肤真菌培养（颈、腋下糜烂面）：均为克柔假丝酵母菌，药敏：伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B等敏感。诊断：大疱性类天疱疮合并皮肤克柔念珠菌感染、开放性肺结核。治疗：给予静脉点滴地塞米松5 mg qd，红斑处外用卤米松软膏，糜烂面处外用1∶2000黄连素液＋庆大霉素混合液邮票贴敷。部分红斑、糜烂面基础上出现黑色结痂。遂于颈及腋下行皮肤真菌培养，为克柔假丝酵母菌。根据真菌培养药敏结果考虑给予伏立康唑及米诺环素治疗，但患者家属拒绝使用。1个月后患者死于肺结核、肺部感染、大疱性类天疱疮合并皮肤感染、多脏器功能衰竭。
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Fas死亡受体及FLIP对大肠癌细胞凋亡的影响
目的:比较不同大肠癌细胞Fas受体及其下游通路抑制因子FLIP的表达差异,探讨Fas、FLIP对大肠癌细胞凋亡的影响.方法:体外培养大肠癌细胞,应用直接免疫荧光流式细胞术检测细胞表面Fas表达率,半定量RT-PCR法测定FLIPmRNA的水平,并采用Annexin V法评价细胞对Fas介导的凋亡的敏感性.结果:大肠癌细胞表面Fas表达率不同,其中HT-29细胞的表达率为42.46±4.32%,明显高于其他3株细胞.SW620和HT-29细胞FLIP mRNA含量较高,Colo205居中,Lovo则呈阴性;且相对于任何一株FLIP表达阳性的细胞,FLIPL的表达水平均高于FLIPs.给予凋亡诱导型抗Fas抗体(CH-11)刺激后,4株大肠癌细胞凋亡敏感性均较低.结论:不同的大肠癌细胞株可能通过不同途径逃避Fas介导的凋亡,其中包括下调Fas的表达和上调FLIP的含量.
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嘉兴地区呼吸道感染患儿的病毒病原学分析
目的 检测并鉴定浙江嘉兴地区住院患儿感染的呼吸道病毒,以了解该地区呼吸道病毒感染流行趋势,为预防、控制疾病的流行提供依据.方法 采用直接免疫荧光法(DFA)对2008年7月-2011年6月住院的8594例出生1 d～13岁的呼吸道疾病患儿痰标本中的呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、副流感病毒1、2、3型(PIV-1,2,3)、腺病毒(ADV)、人偏肺病毒(HMPV)共8种病毒进行检测.结果 8594例患儿中病毒检测阳性者2177例,病毒总体阳性率25.33％;检测出的首位病毒为RSV 1143例,占52.50％;3～6岁年龄组病毒检出率高,达37.52％,毛细支气管炎病毒检出率高为53.85％.结论 病毒在呼吸道感染患儿中占有重要的地位,检出率在3～6岁组段高,毛细支气管炎患儿感染率高,以RSV为常见.
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43例皮肌炎患者皮损及肌肉直接免疫荧光检查分析
目的探讨皮肌炎的发病机理.方法采用抗人Ig(IgG、IgM、IgA和补体C3)DIF技术,检查了43例皮肌炎患者肌肉组织和其中21例皮肌炎患者皮肤损害的荧光分布.结果皮肌炎患者肌肉组织IgG、IgM、IgA和补体C3的阳性率分别为72.09%、23.26%、11.63%和51.16%,分布于肌膜;皮损区IgG、IgM、IgA和补体C3的阳性率分别为66.67%、19.05%、4.76%和61.90%,分布于基底膜.患者外周血IgG水平明显升高(70.83%).结论体液免疫亢进在皮肌炎的发病机理中起重要作用.
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Stevens-Johnson综合征慢性期结膜中Fas-FasL的表达
目的 探讨Fas-FasL通路在Stevens-Johnson综合征(SjS)患者慢性期眼部病变病理机制中的作用.方法 回顾性研究.收集SJS慢性期存在眼部病变的患者14例,在睑球粘连松解术中取结膜组织,病理切片下观察形态学特点,采用免疫组织化学方法(直接免疫荧光染色)评估患者结膜组织中Fas-FasL(CD95/CD178)的表达,并与正常结膜进行对照.结果 结膜组织病理切片可见上皮层增厚和上皮层下空洞样黏液腺泡破坏,SJS组Fas表达多分布于上皮基底层;正常结膜标本Fas表达高于SJS组,在整个上皮层内均匀分布.FasL在SJS组和正常对照组结膜中均微弱表达.结论 SJS患者慢性期结膜组织中Fas-FasL的局部低表达在产生SJS慢性期患者眼部损伤中起到一定的作用.
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直接免疫荧光技术在自身免疫性大疱性皮肤病诊断中的价值
目的 探讨直接免疫荧光(direct immunofluorescence,DIF)技术在诊断自身免疫性大疱性皮肤病(autoimmune bullous dermatoses,AIBD)中的价值.方法 回顾性分析2009年1月至2011年12月间北京协和医院皮肤科确诊的155例AIBD的DIF检查结果,总结各类型AIBD的DIF表现特点,并与组织病理检查对AIBD诊断的敏感性进行比较.结果 各类型AIBD的DIF表现各具特征性.DIF诊断AIBD的敏感性为92.9%,与组织病理检查敏感性(85.2%)比较差异无统计学意义(χ2=2.063,P=0.058).结论 DIF技术敏感性高,对AIBD的诊断和鉴别诊断有重要意义.
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儿童7种呼吸道病毒鼻咽拭子检测分析
目的：研究石家庄及附近地区儿童急性呼吸道感染（ ARI）的病毒病原特征。方法4019例急性呼吸道感染患儿进行鼻咽脱落细胞涂片经直接免疫荧光检测7种呼吸道病毒。结果共有2168份标本为病毒阳性，总阳性率为53 q．9％，其中＜6月年龄组阳性率高占99．9％（742／743），6月～占50．2％（572／1139），1岁～占20．4％（207／1004），2岁～占47．0％（177／377），3岁～6岁占67．0（389／581），＞6岁占46．3％（81／175）。病毒阳性标本中以呼吸道合胞病毒（RSV）为主占65．6％（1427／2172），其次为副流感病毒3（PIV-3）占19．1％（414／2172）。除1岁～组以PIV-3为主66．03％（138／209），其余各年龄段以RSV为主。 RSV阳性标本中73．93％来自2014年3～4月、10～12月、2015年1～2月。结论 RSV是石家庄及附近地区秋冬季儿童急性呼吸道感染首要病毒病原，PIV-3是1岁～2岁儿童急性呼吸道感染的首要病毒病原。直接免疫荧光法检测7种常见呼吸道病毒快速、简便、病毒检出率高，尤以RSV敏感，为临床诊断和治疗提供可靠依据。
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婴幼儿急性下呼吸道感染呼吸道病毒抗原检测分析
目的：了解婴幼儿急性下呼吸道感染常见病毒的感染发生率及探讨病毒感染与性别的关系。方法：在婴幼儿急性下呼吸道感染的病例中随机抽取男性和女性患儿各1000例，取其鼻咽深部的刷检物进行直接免疫荧光法检测。结果：2000例急性下呼吸道感染的婴幼儿中七项呼吸道病毒检出率为27．45％（549/2000），其中以（呼吸道合胞病毒）RSV为主，其次分别为（副流感病毒1型）PIV-1、（副流感病毒3型）PIV-3、（腺病毒）ADV、（甲型流感病毒）IFV-A、（副流感病毒2型）PIV-2、（乙型流感病毒）IFV-B。其中 PIV-3男性与女性感染率比较（χ2＝4．465，P＜0．05），两者差异有统计学意义。结论：引起婴幼儿急性下呼吸道感染的七项病毒中，以RSV为主。并且除PIV-3外，其他六种病毒感染均无性别差异。
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冠心病外周血单核细胞肺炎衣原体病原体检测的意义
目的:探讨冠心病患者外周血单核细胞(PBMC)中肺炎衣原体(Cpn)病原体检测的方法及临床意义.方法:选择150例冠心病(冠心病组)及55例非冠心病(对照组)患者,使用低渗溶血法制备PBMC,直接免疫荧光(DIF)检测Cpn包涵体,巢式PCR(nPCR)法测定外周血单核细胞中肺炎衣原体DNA.结果:150例冠心病患者Cpn包涵体阳性20例,阳性率13.3%,55例对照组中仅1例阳性,阳性率为1.8%,Cpn DNA两组间阳性率分别32.7%(49/150)及1.8%(1/55),冠心病组与对照组比较包涵体及DNA检测的阳性率明显增高,(相对危险度分别为26.2、8.3,95%的可信区间分别为3.52～194.98,1.09～63.46).结论:Cpn病原体阳性反映患者体内存在Cpn感染状态,包涵体与DNA检测两者间具有一致的阳性检出,但包涵体检测更省时省力.
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贵阳地区儿童下呼吸道感染常见病毒的流行特征
目的:了解近年来贵阳地区儿童下呼吸道感染常见病毒的流行特征.方法:采用直接免疫荧光法对2006年6月～2011年4月在贵州省人民医院住院的1 396例下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒A、B型(IFVA、B)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)共7种病毒抗原检测.结果:1 396例患儿中,345例病毒检测为阳性,阳性率为24.7％,其中RSV感染检出率高,其次为PIV3和ADV,混合感染3例；1岁以内的婴幼儿病毒检出率高,冬春季为患儿呼吸道病毒感染的高发季节；支气管肺炎和毛细支气管炎患儿的病毒检出率较高,分别为53.9％和34.2％,均以RSV为主.结论:在7种常见呼吸道病毒中,RSV是引起贵阳地区儿童下呼吸道病毒感染的主要病原体,其次是PIV3和ADV,发病年龄集中在婴幼儿阶段,并以冬春季节高发,RSV是支气管肺炎和毛细支气管炎的主要病原体.
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经生理盐水浸润病损上皮标本的直接免疫荧光诊断口腔天疱疮
目的:对取自存有上皮分离征的口腔黏膜病损周缘上皮标本,经生理盐水浸润后作直接免疫荧光(DIF)检查,以观察这种检材对诊断天疱疮是否能增强其敏感性.方法:选取26例临床可疑为口腔天疱疮患者,在病损周缘分离上皮剪取标本,标本再一分为二,一种用生理盐水浸润置入标本瓶,另一仅置入洁净标本瓶内送至实验室做DIF技术检查.结果:26例经生理盐水浸润的标本的DIF全部阳性(IgG)(100%),呈现棘层细胞间清晰易辨的特征性亮绿色网状荧光,而26例未作标本生理盐水浸润只有17例阳性(65%),绿色荧光偏暗.结论:对临床可疑为口腔天疱疮患者,其口腔黏膜病损周缘的分离上皮组织标本,经生理盐水浸润后作DIF检查,可增强DIF的敏感性,方法可靠、得当和标本取材便易.
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急性呼吸道感染患儿呼吸道病毒检测结果临床分析
目的:对急性上呼吸道感染(URTI)患儿和急性下呼吸道感染(LRTI)患儿进行呼吸道病毒检测,分析病毒感染在急性呼吸道感染中的发生率,以及其与外周血的白细胞及C-反应蛋白的相关性,指导临床合理用药.方法:提取患儿的鼻咽拭子采用直接免疫荧光法(DFA)检测7种呼吸道病毒,包括流感病毒A(Flu A)、流感病毒B(Flu B)、副流感病毒1(PIV1)、副流感病2(PIV2)、副流感病3(PIV3)、合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV).结果:1 430例URTI患儿呼吸道病毒检出率为53.78%,563例LRTI患儿呼吸道病毒检出率为18.12%.结论:在急性呼吸道感染患儿中进行呼吸道病毒的检测对早期明确病原体,合理用药,减少抗生素的使用有积极意义.
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儿童急性感染人类偏肺病毒的诊断及临床分析
目的:总结人类偏肺病毒急性感染患儿的诊断经验和临床特点.方法:采用直接免疫荧光法对79例急性感染人类偏肺病毒的婴幼儿进行快速诊断,及时给予抗病毒治疗及对症治疗.结果:79例患儿,临床诊断为肺炎22例,支气管肺炎18例,毛细支气管炎17例,急性支气管炎11例,喘息性疾病如哮喘、喘息性支气管炎等11例,全部患儿痊愈,未出现并发症,病程5～21 d,平均住院天数8d.结论:采用直接免疫荧光技术检测人类偏肺病毒抗原,操作和实验方法简便,诊断快速准确,有利于早期病因治疗,缩短病程,具有重要的社会经济效益.
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人7型腺病毒的分离与鉴定
目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检，将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养，并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩增腺病毒五邻体、六邻体基因，将扩增的PCR产物进行基因测序，并将测序结果BLAST比对，初步判断其型别。结果从采集的标本中分离到1株人腺病毒毒株。 BLAST比对五邻体、六邻体测序结果，表明该毒株与人7型腺病毒五邻体、六邻体的同源性为100％，初步判定该毒株为人7型腺病毒。结论从哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本中分离到1株人7型腺病毒。
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外周血单核细胞中肺炎衣原体特异性抗原的检测
目的:肺炎衣原体(Cpn)特异性抗原检测方法的建立及其应用.方法:分离人外周血单核细胞(PBMC),用直接免疫荧光(DIF)检测PBMC中的Cpn特异性抗原,同时用间接微量免疫荧光(MIF)检测Cpn抗体.结果:颈动脉粥样硬化病人和正常人PBMC中Cpn特异性抗原检出阳性率分别为62%和30%(P＜0.01);血浆中Cpn IgG的检出阳性率分别为72%和28%,P值＜0.001;血浆中Cpn IgM的检出阳性率分别为16%和12%(P值＞0.05).结论:PBMC中的Cpn特异性抗原和血浆中Cpn-IgG的高检出率均见于颈动脉粥样硬化病人,但抗原的检测具有更大的临床意义.
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检测人动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的临床意义
目的:探讨肺炎衣原体(Cpn)特异性抗原与动脉瘤的关系.方法:利用直接免疫荧光(IF)方法检测新鲜-冰冻或福尔马林-固定标本中Cpn特异性抗原的存在.结果:新鲜-冰冻标本中Cpn特异性抗原的阳性率是:腹主动脉瘤组为83.0%(15/18),正常血管组12.5%(1/8),P＜0 01.此外,用IF方法检测了40例档案保存的石蜡包埋冠状动脉瘤标本和正常血管组织切片,Cpn特异性抗原检出率分别是:87.5%(35/40)和0(P＜0.001).结论:Cpn特异性抗原的高检出率见于人动脉瘤体组织中,推测Cpn引起的动脉粥样硬化可能是形成人动脉瘤的病因之一.
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南京地区住院儿童副流感病毒感染监测
目的 监测南京地区儿童急性呼吸道副流感病毒感染的特征,了解副流感病毒流行情况,为临床诊治提供依据.方法 采集2009年3月至2012年2月住院的急性呼吸道感染患儿7830例鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒,包括副流感病毒1、2及3型抗原(HPIV1、2、3)等.结果 7 830份标本中呼吸道病毒检出高为呼吸道合胞病毒(RSV),达2 527例(占32.27％).副流感病毒病原检测阳性776例(总阳性率为9.91％),其中以副流感病毒3型为主,达504例,占副流感病毒检测阳性的64.95％；副流感病毒2型感染少,仅44例占5.67％.副流感病毒检出率在婴儿组和幼儿组较高,分别为366例(46.86％)和249例(31.88％)；春季检出率高；所致疾病中以支气管肺炎为多见.结论 南京地区住院儿童副流感病毒感染以HPIV3为主,婴儿感染率较高,儿童HPIV1、HPIV3病毒感染好发于春夏季节,HPIV2散发感染.
