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刺山柑总生物碱对系统性硬皮病小鼠WNT通路相关蛋白表达的影响
目的 观察刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)小鼠组织纤维化密切相关的WNT通路中WNT1、WNT2、Dickkopf相关蛋白2(DKK2)和分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)表达的影响,探讨其对SSc WNT通路的调控作用机制.方法 小鼠皮下注射博莱霉素4周复制SSc模型.90只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、青霉胺组和刺山柑总生物碱组低、中、高剂量组,受试药组小鼠背部外敷刺山柑总生物碱乳膏,青霉胺组给予青霉胺灌胃,正常组和模型组小鼠背部外敷不含药乳膏基质,每日1次,连续8周.HE染色观察小鼠皮肤组织病理形态,ELISA检测小鼠皮肤组织WNT1、WNT2及血清DKK2、SFRP1的蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠皮肤出现明显炎症与纤维化的病变,WNT1、WNT2表达明显升高,DKK2表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,刺山柑总生物碱中、高剂量组小鼠皮肤炎症和纤维化均减轻,WNT1、WNT2表达明显降低,DKK2表达明显升高(P<0.05,P<0.01),对SFRP1水平无明显影响(P>0.05).结论 刺山柑总生物碱可能通过下调SSc小鼠WNT1、WNT2表达和上调DKK2表达,对SSc小鼠WNT通路有一定抑制作用.
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Wnt2在肝细胞肝癌中的表达及对HepG2细胞增殖的影响
目的 探讨Wnt2在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及转染靶向Wnt2的siRNA对人肝癌HepG2细胞的抑制效果.方法 实时荧光定量PCR法和免疫组化法检测Wnt2在肝癌组织,癌旁组织及正常肝组织的表达差异；使用siRNA沉默人肝癌HepG2细胞Wnt2的表达后,检测Wnt2基因和蛋白的表达变化,并检测细胞的增殖和周期变化.结果 1)Wnt2在癌内表达高,癌旁次之,正常肝低.2)使用siRNA沉默人肝癌HePG2细胞Wnt2后,Wnt2基因和蛋白表达下调,细胞增殖受抑制,其生长主要停滞在G0/G1期,而S期细胞所占比例下降.结论 肝细胞肝癌中存在Wnt2的高表达；siRNA可抑制HepG2细胞Wnt2的表达,并抑制HepG2生长,Wnt2基因可能是调控肝癌基因表达的新的靶基因.
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麝香酮对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的抑制作用及机制
目的 探讨麝香酮对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的抑制作用及机制.方法 原代培养胎鼠海马神经元,按照处理方法 不同将其分为正常对照组、氯胺酮组、麝香酮(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组.MTT法检测海马神经元存活率;流式细胞仪检测三组海马神经元凋亡情况;逆转录聚合酶链反应检测三组海马神经元Wnt2、β-catenin mRNA的表达;蛋白质印迹法检测三组海马神经元内Wnt2、β-catenin蛋白的表达.结果 氯胺酮组、麝香酮(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组神经元存活率均显著低于正常对照组(P均＜0.01),麝香酮(10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组海马神经元存活率均显著高于氯胺酮组(P均＜0.01).氯胺酮组海马神经元凋亡率显著高于正常对照组(P＜0.01);麝香酮(10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组海马神经元凋亡率均显著低于氯胺酮组(P＜0.05,P＜0.01).Wnt2、β-catenin mRNA在正常对照组中表达低,在氯胺酮组中表达高;麝香酮+氯胺酮组海马神经元中Wnt2、β-catenin mRNA的表达随麝香酮剂量的增加而降低,麝香酮(10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组海马神经元中Wnt2、β-catenin mRNA表达均显著低于氯胺酮组(P均＜0.05).Wnt2、β-catenin蛋白在正常对照组中表达低,在氯胺酮组中表达高;麝香酮+氯胺酮组海马神经元中Wnt2、β-catenin蛋白的表达随麝香酮剂量的增加而降低,麝香酮(10μmol/L,20μmol/L)+氯胺酮组海马神经元中Wnt2、β-catenin蛋白表达均显著低于氯胺酮组(P＜0.05,P＜0.01).结论 麝香酮对氯胺酮诱导的胎鼠海马神经元凋亡具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制Wnt2、β-catenin的表达有关.
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铅对大鼠骨组织代谢影响
目的 探讨铅中毒对大鼠机体骨代谢影响及机制.方法 选取21日龄SPF级雄性SD大鼠40只,适应性喂养7d后,随机分为4组:对照组(去离子水)、低、中、高剂量铅组(0.1％、0.2％、0.3％醋酸铅水);饲养60 d后,称重;取大鼠后肢股骨,ICP法测定股骨中Pb、Ca含量;采用常规苏木素-伊红染色法(HE)对大鼠骨组织形态进行观察;应用荧光定量RT-PCR法测定大鼠骨骼中过氧化物酶体增长因子活化受体γ(PPAR-γ)、Wnt2、转录因子1(Tcf-1)、和β-catenin基因表达量.结果 与对照组比较,随着染铅剂量增加,低、中、高剂量铅组大鼠骨骼铅含量[分别为(0.221 5±0.033 0)、(0.335 3±0.040 7)、(0.399 2±0.030 9)mg/g]均升高,而骨钙含量[分别为(21.719 4±1.120 8)、(21.559 5±1.094 0)、(21.421 7 ±0.7002)mg/g]均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,低、中剂量铅组大鼠骨小梁相对变薄、变细,高剂量铅组大鼠股骨骨小梁稀疏、变细、变薄或断裂,骨髓腔相对扩大;与对照组比较,高剂量铅组大鼠骨骼中PPAR-γ、Wnt2、Tcf-1及β-catenin mRNA表达量[分别为(0.821 3±0.0202)、(0.852 6 ±0.030 8)、(0.874 3 ±0.077 2)、(0.874 5 ±0.055 3)]均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 铅对大鼠骨组织中钙的吸收具有抑制作用,对骨组织结构具有损伤作用,其机制可能与下调骨骼中PPAR-γ、Wnt2、Tcf-1及β-catenin基因表达有关.
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Wnt2与β-catenin蛋白在食管癌中的表达特点及病理意义
[目的]探求Wnt通路相关蛋白Wnt2和β-catenin在食管癌不同病变组织中的表达特点.[方法]将癌旁相对正常食管组织9例、癌前病变38例与手术切除诊断明确的83例食管癌标本,制成石蜡组织微阵列,用免疫组织化学方法检测微阵列组织Wnt2与β-catenin的表达,分析二者表达与食管癌侵袭、转移的关系以及两种蛋白表 达的相互关系.[结果]癌旁相对正常、癌前病变与食管癌组织,Wnt2表达率分别为22.2％、50.0％和72.3％；β-catenin表达率分别为33.3％、47.4％和69.9％,且二者的表达在各组间差异显著升高趋势明显(P＜0.05)；两种蛋白在鳞癌的表达率(77.9％、75.0％)均显著高于腺癌(46.7％、46.7％),P＜0.05；淋巴结转移组的表达率(86.4％、81.8％)均显著高于无淋巴结转移组(56.4％、56.4％),P ＜0.05；在侵润深度T3、4组的表达率(81.0％、82.8％)均明显高于T1、2组(52.0％、40.0％),P＜0.05.在临床Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期标本Wnt2蛋白表达率分别为62.8％与82.5％,后者显著高于前者(P＜0.05),但β-catenin表达率在两组间差异无显著性意义(P＞0.05).Wnt2与β-catenin表达呈正相关关系(P＜0.05,r =0.740).[结论]Wnt通路中的重要分子Wnt2与β-catenin蛋白异常表达可能为食管癌发生、演进中重要的分子事件,可作为食管癌诊断及预后预测的候选生物标记物.
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Wnt2和β-catenin在乳腺癌及其配对癌旁乳腺组织中的表达与临床意义
目的 探讨Wnt2和β-catenin在乳腺癌及其配对癌旁乳腺组织中的表达与临床意义.方法 采用RT-PCR法检测7份乳腺癌及其配对癌旁乳腺组织中Wnt2和β-catenin基因mRNA的转录水平;免疫组织化学方法检测40份浸润性乳腺导管癌及其配对癌旁乳腺组织中Wnt2和β-catenin蛋白的表达水平;分析Wnt2和β-catenin与乳腺癌临床病理特征的相关性及二者联合检测与乳腺癌恶性程度及淋巴结转移的相关性.结果 乳腺癌组织中Wnt2和β-catenin基因mRNA的相对转录水平均显著高于配对癌旁乳腺组织(P＜0.05).Wnt2在配对癌旁乳腺组织细胞质中呈弱表达,在浸润性乳腺导管癌组织细胞质中呈高表达,乳腺癌Wnt2阳性表达率(77.5％)显著高于配对癌旁乳腺组织(15.0％)(P＜0.05);配对癌旁乳腺组织中β-catenin均表达于细胞膜中,在浸润性乳腺导管癌组织细胞质及细胞核中均有表达,异常表达率为67.5％(27/40).Wnt2和β-catenin的表达与浸润性乳腺导管癌患者年龄无关(P＞0.05),与乳腺癌临床分期、病理组织学分级及淋巴结转移有关(P＜0.05).Wnt2和β-catenin均为阳性表达者的肿瘤恶性程度和淋巴结转移的发生率显著高于两者均为阴性或两者之一为阳性表达者(P＜0.05).结论 Wnt2和β-catenin表达在乳腺癌发生和侵袭转移中可能起重要作用,本实验为进一步探讨Wnt2和β-catenin在乳腺癌发病机制中的作用奠定了基础.
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人脑胶质瘤组织中Oct4、Wnt2的表达及其临床意义
目的:探讨Oct4和Wnt2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:选取临床及病理资料完整的长江大学附属第一医院2006-2009年手术切除并经病理证实为胶质瘤的石蜡标本56例,采用免疫组织化学方法检测56例胶质瘤组织(其中15例为术后复发)和10例脑外伤行内减压术切除的脑组织标本Oct4、Wnt2的表达.结果:正常脑组织中Oct4表达均为阴性,Wnt2表达仅1例呈弱阳性;56例胶质瘤组织中Oct4阳性34例(60.7%),Wnt2阳性40例(71.4%).Oct4、Wnt2在低度恶性胶质瘤组中和高度恶性胶质瘤中的阳性率分别为46.2%和73.3%(P<0.05)及57.7%和83.3%(P<0.05),Oct4在复发肿瘤和初诊肿瘤中的阳性率分别为86.7%和51.2%(P<0.05).人脑胶质瘤组织中Oct4和Wnt2表达呈正相关(r=0.537,P<0.01).结论:Oct4、Wnt2的表达与人脑胶质瘤的恶性程度相关,Oct4的表达与胶质瘤的复发相关;Oct4可能是通过Wnt通路而参与了胶质瘤的发生、发展.
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肿瘤相关成纤维细胞促进肝癌细胞HepG2生长及Wnt2基因的表达
[目的]探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAF)对肝癌细胞HepG2生长及Wnt2基因表达的影响.[方法]体外培养CAF并建立CAF与肝癌细胞HepG2相互作用体系,采用MTT法检测CAF对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响,qRT-PCR法与Western Blot检测CAF刺激导致的HepG2细胞中Wnt2基因与蛋白表达水平变化.[结果]通过MTT法检测CAF培养上清制备的条件培养基刺激HepG2细胞发现,与对照组相比,CAF上清刺激48h后能够明显促进HepG2细胞的增殖,96h OD490nm值达到高(2.01 ±0.41,P＜0.05).qRT-PCR与Western Blot法检测CAF上清刺激后HepG2细胞中Wnt2表达发现,CAF上清能够在基因与蛋白水平增加Wnt2的表达,并明显高于对照组(P＜0.05).[结论]CAF能够促进HepG2细胞的增殖,并且在基因与蛋白水平增加肝癌HepG2细胞Wnt2的表达.
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甲异靛对1型糖尿病大鼠心肌损伤的修复作用
目的 观察甲异靛对糖尿病大鼠Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白在1型糖尿病大鼠心肌中表达的影响,明确其在糖尿病心肌病发生、发展中的作用.方法 SD♂大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型,取模型成功大鼠分为糖尿病4、8周模型组以及甲异靛4、8周给药组.尾静脉采血检测空腹血糖值;HE染色法观察心肌病理结构变化;Western blot和免疫组织化学法检测心肌GSK-3β、p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65蛋白表达变化.结果 与正常对照组比较,1型糖尿病大鼠血糖值明显升高,体质量明显下降(P<0.01),8周甲异靛给药组大鼠血糖与糖尿病组比较明显下降(P<0.01);显微镜下能观察到糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞肥大、溶解性坏死、纤维组织增生等,甲异靛给药组大鼠心肌病变较糖尿病模型组有不同程度的缓解.糖尿病模型大鼠相对于正常对照组,心肌p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、p-NF-κB-p65表达升高,尤其是8周时,差异有显著性(P<0.01),给药组的蛋白表达与DM模型组比较明显降低(P<0.01).结论 甲异靛可能是通过降低Wnt2、β-catenin、GSK-3β等蛋白的表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路在糖尿病大鼠体内的激活,参与修复糖尿病大鼠的心肌损伤及炎症过程,进一步研究该药在糖尿病大鼠心肌损伤修复中的作用机制,将为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点提供理论依据.
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2型糖尿病大鼠主动脉Wnt/β-catenin信号通路的变化及SIRT1的调节作用
目的：检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及沉默信息调节因子( SIRT1)在2型糖尿病大鼠主动脉中的表达变化,探究SIRT1对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用,明确二者在糖尿病主动脉病变发生发展中的作用。方法高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为空白对照组、糖尿病2、4、8和12周模型组,血清检测空腹血糖( FBG),总胆固醇( TC)、甘油三酯( TG)、高密度脂蛋白( HDL-C)、低密度脂蛋白( LDL-C),空腹胰岛素( FINS), HE染色法观察主动脉病理结构变化,RT-PCR法和Western blot法检测主动脉Wnt2、β-catenin、TCF4、SIRT1和sFRP2等相关蛋白基因转录及表达变化。结果与正常组比较,2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,随着时间延长,糖尿病大鼠各时间点模型组与2周模型组相比较,TC、TG、LDL-C水平升高越来越明显,HDL-C水平降低更明显,差异均具有显著性( P<0．01)；显微镜下糖尿病组大鼠主动脉可见不同程度局灶性内皮细胞空泡变性、甚至坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组主动脉Wnt2和β-catenin的表达在2周及4周明显增加( P<0．01),4周后维持在较高水平；而TCF4、SIRT1的表达与正常对照组相比表现为持续的增加( P<0．01)；sFRP2的表达在持续的降低(P<0．01)。结论2型糖尿病大鼠主动脉病变发生发展过程中, SIRT1通过调节 sFRP2的表达来调控 Wnt/β-catenin信号通路的激活,参与糖尿病主动脉损伤的发生发展过程,进一步研究其在糖尿病主动脉损伤中的作用机制可能为糖尿病主动脉病找到新的治疗靶点。
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早期糖尿病大鼠心肌Wnt/β-catenin信号通路的变化
目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在早期糖尿病大鼠心肌中的表达变化,明确其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法采用链脲佐菌素(60μg·g-1)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,喂养2周,HE染色法观察心肌病理结构变化, Western blot和免疫组化法检测心肌Wnt2、β-catenin、c-Myc和 DKK1蛋白的表达变化。结果
显微镜下糖尿病组大鼠心肌可见局灶性心肌细胞变性、坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组心肌 Wnt2、β-catenin和c-Myc的表达明显增加( P<0．01) ,而DKK1的表达与正常对照组相比没有明显差异( P =0．885)。结论 Wnt/β-catenin信号通路的激活参与早期糖尿病心肌损伤,进一步研究其在糖尿病心肌中的变化可能为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点。 -
大鼠ALPPS术后残肝再生与Wnt2蛋白表达关系的研究
目的 探讨大鼠联合肝脏分割和门静脉结扎分阶段肝切除术(A LPPS)后残余肝再生Wnt2蛋白的表达变化,进一步了解肝再生过程中的分子机制.方法 选取200 ～ 240g健康SD雄性大鼠40只,随机分为ALPPS组和假手术(Sham)组;Sham组仅游离出门静脉各分支,不结扎即关腹;ALPPS组行大鼠肝左外叶、左中叶、右叶门静脉分支结扎,切除尾状叶,保留肝右中叶分支,并行肝中叶实质离断.分别于术后1、2、4、7d处死5只大鼠,称取大鼠肝右中叶重量,计算肝再生率;光学显微镜下观察肝右中叶细胞的形态学变化,免疫组化法检测肝右中叶Ki-67和Wnt2蛋白表达变化,并进行统计分析.结果 ①ALPPS术后保留侧肝脏开始再生,第2天肝再生率升高快,随后肝再生率升高速度逐渐降低,第7天与Sham组相比肝再生率升高速度两者相近;②ALPPS术后Ki-67与Sham组比较,第1天开始升高,第2天达到高,此后逐渐降低,第7天有少量阳性细胞,与Sham组相比差异无统计学意义;③Wnt2阳性表达主要在中央静脉周围,可能与肝干细胞的产生相关;与Sham组相比,肝右中叶Wnt2蛋白在ALPPS术后第1天即开始升高,第2天达到高,然后逐渐降低,第7天时仅有少量表达,与Sham组相比差异无统计学意义;④大鼠肝脏ALPPS术后Wnt2的表达与术后Ki-67的表达呈正相关性.结论 Wnt2在ALPPS术后肝脏再生及肝干细胞表达过程中起重要的调控作用.
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Wnt2、β-catenin在多柔比星诱导心肌损伤中的表达及其与p53的关系
目的 研究Wnt2、β-catenin蛋白在多柔比星(DOX)诱导心肌损伤中的表达情况,探讨Wnt2、β-catenin分子在DOX损伤心肌细胞凋亡中的作用.方法 将不同质量浓度(1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L、4 mg/L)DOX处理心肌细胞72 h后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同质量浓度DOX对心肌细胞生长曲线的影响.用1 mg/L DOX建立心肌细胞损伤模型,将心肌细胞分为4组,A组:DOX损伤心肌细胞12 h;B组:DOX损伤心肌细胞24 h;C组:DOX损伤心肌细胞48 h;D组:正常心肌细胞.利用蛋白印迹法(Western blot)、实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测各组细胞中Wnt2、β-catenin、p53蛋白及mRNA的表达变化.结果 DOX抑制对心肌细胞的增殖具有浓度依赖性;Wnt2蛋白和mRNA的表达在DOX各组中表达水平均高于D组,差异有统计学意义(F =224.115,P＜0.05);β-catenin、p53蛋白在DOX各组中的表达水平显著高于D组,且随时间的延长,表达程度越高,差异均有统计学意义(F=188.145、231.927,P均＜0.05);β-catenin与p53呈正相关(r=0.940,P＜0.05).结论 Wnt2、β-catenin可能在DOX诱导的心肌细胞损伤中起着重要的作用,为进一步探讨心肌细胞损伤的分子机制提供了重要依据.
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复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变大鼠Wnt信号通路中Wnt2、β-catenin蛋白表达影响的研究
目的 研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂治疗对胃癌前病变大鼠Wnt信号通路中Wnt2、β-catenin细胞增殖蛋白表达的影响,从分子生物学水平揭示其治疗PLGC的机制及其效果.方法 将120只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、复方蜥蜴散80目、100目、80+ 100目混合组及维酶素组,除空白组外,余均采取MNNG配合饥饱失常及情绪刺激综合因素8周制备PLGC模型.病理检测造模成功后,模型组给予生理盐水,治疗组分别用复方蜥蜴散不同微粒组合剂及维酶素混悬液治疗,应用免疫组化法检测大鼠胃组织Wnt2、β-catenin蛋白表达,光镜观察胃黏膜病理组织学变化.结果 通过图像分析系统对免疫组化图像光密度的测算,复方蜥蜴散80目、100目、80+ 100目组细胞增殖基因Wnt2、β-catenin蛋白的阳性表达率显著低于模型组(P＜0.01),复方蜥蜴散80+ 100目等量混合组细胞增殖基因Wnt2、β-catenin蛋白的阳性表达率显著低于维酶素组(P＜0.01).结论 胃黏膜细胞增殖基因Wnt2、β-catenin蛋白表达异常是PLGC发生的重要因素之一,复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃黏膜的损害具有保护作用,且能降低或抑制胃癌前病变组织中增殖蛋白Wnt2、β-catenin的表达,部分逆转胃黏膜病理变化,揭示了复方蜥蜴散不同微粒组合剂治疗PL-GC的作用机制,可能是通过干预黏膜增生、分化,抑制细胞过度增殖,促进细胞凋亡,恢复细胞增殖与凋亡的平衡,从而阻断胃癌前病变的.
关键词： 胃癌前病变 复方蜥蜴散不同微粒组合剂 WNT2 β-catenin 增殖分化 -
食管鳞状细胞癌中Wnt2、β-catenin、c-myc和cyclinD1的表达及临床意义
目的 研究Wnt2、β-catenin及其下游的靶基因c-myc、cyclinD1在食管鳞癌中的表达情况,以期探讨其在食管鳞癌发生发展中的作用及意义.方法 用免疫组织化学SP法检测40例食管鳞癌患者石蜡包埋的癌组织、癌旁组织及正常组织中wnt2、β-catenin、c-myc、cyclinD1表达情况,分析Wnt2、β-cate-nin和c-myc、cyclinD1表达之间的相关性及与临床病理特征的关系.结果 Wnt2、β-catenin和c-myc、cyclinD1在食管癌组织、癌旁组织及食管正常组织中表达阳性率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.01),β-catenin和c-myc与肿瘤浸润和有无淋巴结转移相关(P<0.05).结论 Wnt2/β-catenin/Tcf4通路在食管鳞状细胞癌发生发展中起重要作用,该通路有可能成为基因治疗的潜在靶点.
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BMP7,WNT2与PCNA在小肠克隆氏病及小肠腺癌中的临床研究
目的:探讨小肠克隆氏病和小肠腺癌中骨形态发生蛋白7(BMP7),WNT2的表达及其与增殖细胞核抗原(PCNA)的关系.方法:选取广州市中西医结合医院2000年1月-2014年12月病理科确诊的人小肠标本54例进行分组分析,其中,小肠腺癌标本22例,为小肠腺癌组;小肠克隆氏病标本15例,为克隆氏病组;正常小肠标本17例,为正常对照组.观察免疫组化检测BMP7,WNT2在不同标本中的表达水平;检测PCNA的表达水平;根据阳性细胞的比率和染色强度进行半定量评分;试剂携带阳性片作为阳性对照,PBS液作为一抗为阴性对照.结果:BMP7在小肠腺癌组中的表达明显升高,且与PCNA呈显著正相关,说明BMP7在小肠腺癌的发生发展中有着重要作用,组间比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);WNT2在小肠腺癌中的表达明显升高,且与PCNA表达呈显著正相关(P＜0.05).结论:BMP7,WNT2与PCNA在小肠腺癌中的关系十分密切,在临床上有着重要的意义.
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胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达下调PI3K/AKT信号通路的体内外研究
目的:研究人脑胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达对PI3K/AKT信号通路的影响.方法:向U251细胞转染靶向Wnt2的siRNA后,免疫印记及免疫荧光检测转染后,Wnt2、Frizzled2、β-catenin、PI3K、磷酸化AKT的表达变化.建立裸鼠胶质瘤皮下动物模型,瘤内注射Wnt2 siRNA观察以上指标的表达变化.结果:体外应用RNA干扰敲低Wnt2的表达后,frizzled2、β-catenin、PI3K、p-AKT的表达均下调.结论:胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低Wnt2的表达后,PI3K/AKT信号通路活性受到抑制.
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Wnt2在不同肿瘤患者血清中水平的探讨
目的：检测多种肿瘤患者（乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、肝癌）血清中Wnt2水平，评价Wnt2在肿瘤中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测多种肿瘤患者血清中Wnt2水平。结果与健康者比较，乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌患者血清中Wnt2水平均明显升高（均P＜0．05），肝癌患者血清中Wnt2水平明显降低（P＜0．05），肺癌患者血清中Wnt2水平无明显变化（P＞0．05）。结论Wnt2在不同类别的肿瘤中水平不一致，可能在不同类别的肿瘤中起不同的作用。
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Wnt2在乳腺癌组织及患者血清中的表达及意义
目的 检测乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)、乳腺癌患者组织中Wnt2的表达,同时检测乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153表达量,并对二者的相关性进行分析.方法 采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中Wnt2 mRNA及蛋白水平；采用免疫组织化学对5例配对的癌旁组织、9例乳腺原位癌及9例侵袭性乳腺癌进行检测；同时采用ELISA检测15例健康成年女性、30例乳腺癌患者血清中Wnt2蛋白水平；电化学发光技术检测CA-153水平,并收集完整的病理资料与血清中Wnt2蛋白水平比较分析.结果 Wnt2在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中未见表达；在乳腺癌组织上皮及间质细胞中呈高表达,而在配对的癌旁组织呈不表达或弱表达状态；30例乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153平均表达量显著高于健康成年女性(P＜0.05),且Wnt2表达水平与CA-153呈正相关.结论 血清Wnt2可与CA-153同时作为乳腺癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高乳腺癌检出的灵敏度.
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丙戊酸钠通过上调Wnt/β-catenin信号通路促进培养神经元的生长
目的:丙戊酸盐(丙戊酸 valproic acid,VPA)在过去数十年应用于临床治疗癫痫和偏头痛.然而,母亲怀孕早期使用VPA将大大增加子代罹患孤独症群谱障碍的易感性.鉴于Wnt/β-catenin信号通路对神经元增殖、分化、突起生长及凋亡的重要作用,本文旨在研究VPA在原代培养神经元中对Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:用VPA处理原代培养神经元,以生理盐水处理为对照,运用Western Blot检测Wnt/β-catenin通路相关信号分子Wnt1,Wnt2,WIF-1,Dickkopf 1及效应分子β-catenin的表达变化,同时运用免疫荧光技术观察神经元形态变化.结果:与对照组比较,VPA处理显著增加Wnt1及Wnt2的表达(P<0.05～0.01),而未增加WIF-1及Dickkopf 1的表达(P>0.05);VPA处理也导致Wnt/β-catenin通路活性上调,表现为神经元内β-catenin含量显著上升.此外,与对照组比较,VPA处理促进神经元生长,表现为神经元突起数目(P<0.05～0.01)及总长度显著增加(P<0.05～0.01);Wnt/β-catenin通路抑制剂能部分抑制VPA引起的Wnt/β-catenin通路活性上调及神经元生长.结论:VPA通过上调Wnt/β-catenin信号通路促进神经元生长,可能是VPA增加子代罹患孤独症群谱障碍易感性的原因.
关键词： 丙戊酸盐 Wnt/β-catenin通路 WNT1 WNT2 神经元生长
