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用桂敏培养基培养淋球菌时部分病例培养出念珠菌报告
国家性病防治中心推荐桂敏培养基用于淋球菌的分离培养[1].在实际工作中,我们用桂敏培养基培养淋球菌时,部分患者的标本却培养出念珠菌(未做菌种鉴定),经对该部分患者对症治疗,均痊愈.现报告如下:
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肺癌患者继发肺部感染的痰菌及药敏分析
肺癌患者因肿瘤阻塞支气管致排痰不畅，放疗、化疗后及肿瘤晚期阶段患者抵抗力降低均可能导致肺部感染。痰菌培养及药敏检查对临床用药有一定帮助。1 材料与方法1.1 临床资料 76例肺癌患者均经病理学检查证实，根据临床症状或胸部X线片证实有肺部感染。其中男48例，女28例，年龄20～78岁。1.2 标本来源嘱患者晨起漱口，尽量深咳，留痰至痰培养时间不超过半小时。经镜检为合格痰。1.3 细菌培养及鉴定采用普通培养法，将痰接种于血平板和中国蓝培养基中，37℃培养24小时，经培养发现大量致病菌后用Microscan Walk Away96仪器行菌种鉴定及药敏试验。
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分枝杆菌菌种鉴定DNA微阵列的初步研究与应用
目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列.方法根据19种分枝杆菌标准株的16S RNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物.结果该DNA微阵列与9种非分枝杆菌标准株不杂交,具有分枝杆菌特异性;可将19种分枝杆菌标准株鉴定到群或种,具有较高的分枝杆菌种特异性.应用PCR-SSCP分枝杆菌初步菌种鉴定方法对31株分枝杆菌临床分离株进行初步的鉴定,9株为结核分枝杆菌复合群和22株为非结核分枝杆菌.应用DNA微阵列进一步进行菌种鉴定,9株与探针a杂交阳性,为结核分枝杆菌复合群;2株与探针c杂交阳性,为胞内分枝杆菌;8株与探针d杂交阳性,为堪萨斯分枝杆菌或瘰疬分枝杆菌或猿猴分枝杆菌或胃分枝杆菌;1株与探针k杂交阳性,为戈登分枝杆菌;2株与探针p杂交阳性,为龟分枝杆菌脓肿亚种;2株与探针r杂交阳性,为偶然分枝杆菌;1株与探针s杂交阳性,为草分枝杆菌;2株与探针a和p杂交阳性,为结核分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种复合感染株;1株与探针a和r杂交阳性,为结核分枝杆菌和偶然分枝杆菌复合感染株;3株与该芯片杂交阴性.2株临床分离株经基因测序也证实DNA微阵列鉴定的特异性.结论该DNA微阵列有可能简便、快速、准确地鉴定大多数分枝杆菌菌种.
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两株具有将人参皂苷Rg1转化为人参皂苷F1活性的真菌鉴定
目的 对两株具有将人参皂苷Rg1转化为人参皂苷F1的真菌进行菌种鉴定.方法 通过菌落形态、产孢结构的观察及ITS-5.8S rRNA序列与Genbank中的rRNA序列进行同源比对,初步确定该两株菌的种属.结果 与结论 根据形态学特征及同源序列的比对确定菌株2246为菌核青霉(Penicillium sclerotiorum);菌株2367为Penicillium dipodomyicola.
关键词： 人参皂苷F1 菌种鉴定 真菌 青霉 ITS-5.8S rRNA -
真菌2176菌株及其抗真菌活性成分的研究
目的 筛选具有抗多种植物致病真菌活性的菌株,研究其活性成分的化学结构,并对该菌株进行初步的分类鉴定.方法 以常见植物致病真菌为检定菌筛选活性菌株,结合菌落形态、产孢结构、孢子形态特征以及菌株ITS-5.8S rDNA核酸序列分析进行菌株的初步鉴定;利用硅胶柱色谱、凝胶色谱和制备型高效液相色谱等手段分离纯化活性成分;通过UV、IR、ESI-MS、NMR分析进行化合物结构解析.结果 得到1株编号为2176号真菌的阳性菌株,初步鉴定为草酸青霉(Penicillium oxalicum),其抗真菌活性成分有5种.结论 草酸青霉的发酵产物对多种植物致病真菌具有良好的抗菌活性.
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贵阳市某医院非结核分枝杆菌流行状况分析
目的:了解2012-2013年贵阳市非结核分枝杆菌(NTM)的流行情况.方法:对贵阳市某医院2012-2013年就诊的可疑结核病患者进行分枝杆菌的培养鉴定,采用PCR-荧光探针及基因芯片法进行鉴定,并对相关结果进行分析.结果:1 500例患者经分离培养和PCR-荧光探针及基因芯片法鉴定为结核分枝杆菌感染的1 469例,鉴定为NTM感染的31例,占2.06％,其中8株为鸟分枝杆菌,10株为胞内分枝杆菌,9株为龟或脓肿分枝杆菌,偶然分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌及蟾蜍分枝杆菌各1株,分别占NTM 25.80％、32.25％、29.03％、3.23％、3.23％、3.23％、3.23％;NTM感染的阳性患者中,男女比例为1.21:1,30 ～59岁年龄段占61.29％;不同性别的感染高峰年龄段不同,男性以75 ～ 89岁、女性则以45 ～59岁年龄段.结论:贵阳市存在一定比例的NTM菌感染,以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、龟/脓肿分枝杆菌为主.
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2 433株结核分枝杆菌的耐药性分析
近年来,结核分枝杆菌的耐药率不断上升,耐多药菌株不断出现,对结核病的治疗和疫情控制产生了很大的影响[1].结核病的耐药是导致结核病流行的主要原因.我国是22个结核病高负担国家之一,同时也是27个耐多药结核病流行严重的国家之一[2].为了解近年来贵州及周边地区结核病患者的耐药情况,笔者收集2009年1月至2011年12月结核病患者的痰、纤刷物或灌洗液,脑脊液,胸腹水进行了结核分支杆菌培养和菌种鉴定,对分离获得的2 433株结核分枝杆菌,进行药物敏感性检测,现报告如下.
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PCR结合酶切-序列比对法鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株
目的 用PCR结合酶切-序列比对法对B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行鉴定.方法 用玻片凝集法对不同来源的15株B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行初步检定,再用PCR结合酶切-序列比对法对上述15株菌株进行进一步鉴定,即用PCR结合酶切法扩增菌株的唾液酸转移酶siaD基因并对PCR产物进行酶切后,用BLAST软件将PCR产物测序结果与GeneBank 中原始siaD序列比对. 结果 15株菌株玻片凝集结果均为阳性;15株菌株的PCR产物片段大小均为460 bp;TaqⅠ酶切后,13株菌株的酶切产物片段大小仍为460 bp,其PCR产物测序比对结果与B群脑膜炎奈瑟菌原始siaD序列同源性均达到99%;其余2株酶切产物片段大小约200 bp,与C群脑膜炎奈瑟菌siaD原始基因序列同源性分别为98%和99%. 结论 15株菌株经PCR结合酶切-序列比对法鉴定,13株为B群脑膜炎奈瑟菌菌株,2株为C群脑膜炎奈瑟菌菌株;该方法可准确鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株.
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一株卡他布朗汉姆菌的重新鉴定
目的 对中国医学细菌保藏管理中心库藏的一株卡他布朗汉姆菌CMCC (B) 29103株进行重新鉴定.方法 用营养琼脂培养基培养CMCC(B) 29103株,对其进行形态观察、生理生化特性、脂肪酸组分、分子生物学等多相鉴定,同时与模式株DSM25388T相对照;分析CMCC(B)29103株的特征属性、进化位置以及与Acinetobacter indicus模式株DSM25388T的同源性.结果 形态学特性、生理生化以及脂肪酸组分构成均与DSM25388T株十分相似,仅存在个别差异;16 S rRNA基因序列比对显示,CMCC(B) 29103株与Acinetobacter(不动杆菌属)相近,与模式株DSM25388T相似性高,为99.85％.基于Acinetobacter属所有成员的16 S rRNA和rpoB基因的系统进化分析均显示CMCC(B)29103与DSM25388T稳定聚类成一个独立分支,且二者的DNA-DNA同源性为78.3％.结论 CMCC(B)29103株属于Acinetobacter indicus种,与模式株DSM25388T为不同的菌株,可将其更名为Acinetobacter indicus.
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疑淋球菌感染者158例分泌物培养及药敏实验结果
为指导临床医生合理用药,对来我院就诊的158例疑淋球菌感染者,采其泌尿生殖道脓性分泌物CO2烛缸培养及菌种鉴定.并对检出的淋病奈瑟氏菌株分析药敏试验结果.
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PCR方法鉴定结核分枝杆菌临床分离株
目的:用3对引物PCR扩增的方法对结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定.方法:将3对特征性的结核分枝杆菌标记基因:MPT40基因、α抗原基因和IS6100插入序列,分别放入PCR体系中,在各自的退火温度下进行PCR扩增,通过对扩增产物的不同带型进行分析,对结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定.结果:用3对引物PCR扩增的方法可将各种类型的结核分枝杆菌以及结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌鉴别开.结论:3对引物PCR扩增的方法是一种有效的结核分枝杆菌菌种鉴定的方法,可用于结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌以及各种类型的结核分枝杆菌的区分.
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传统培养法和PCR法在分枝杆菌菌种鉴定中的对比研究
目的:对结核分枝杆菌复合群菌种鉴定的传统方法与PCR法进行对比研究,为临床应用提供科学依据.方法:将临床确诊结核病患者的317份痰标本做罗氏培养,分别用传统培养法和PCR法进行鉴别菌种,随机抽出一部分进行测序(金标准),用金标进一步鉴定两种结果的可靠性.结果:传统培养法敏感度、特异度、符合率分别为55.68％、58.33％、54.00％,而PCR法检测的敏感度、特异度、符合率分别为98.86％、50.00％、93.00％,明显优于传统培养法,两者检测的总符合率为53.00％,检测结果间差异有显著性(x2-918.64,P=0.00).结论:传统培养法检测分支杆菌菌种的结果不符合临床检验要求,且所需时间长,而PCR法方便、快速,可以较准确地确定分支杆菌菌种.
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2013～2017年徐州市非结核分枝杆菌菌种鉴定、三间分布和耐药性分析
目的 分析徐州市非结核分枝杆菌菌种、三间分布和耐药性.方法 将2013～2017年就诊患者及临床标本作为研究对象,分离出非结核分枝杆菌菌株70例,分析非结核分枝杆菌感染患者的三间分布;对标本进行抗酸染色,PCR-反向点杂交,行分枝杆菌培养,并进行菌群菌种鉴定及耐药性分析,制作耐药性分析统计表.结果 非结核分枝杆菌感染率呈上升趋势,绝对增长量中累计增长量与逐年增长量均为正值;非结核分枝杆菌患者的年龄分布呈现双峰分布,即26～<66岁组、≥66岁组感染人数较多;非结核分枝杆菌患者地区之间无明显差异;胞内分枝杆菌感染人数多,戈登分枝杆菌占比少;胞内分枝杆菌对各种常见抗结核药物的耐药性较高,鸟分枝杆菌具有普遍耐药性,其他菌种的耐药性同样较高.结论 徐州市地区的非结核分枝杆菌感染呈上升趋势,耐药性情况较为严峻,应该给予重视.
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烧伤创面痂下活组织细菌定量培养与植皮存活率分析
烧伤创面是病原菌侵入机体造成侵袭性感染的主要途径之一,其病原菌数量会与日俱增[1].及早、彻底清除烧伤坏死组织并封闭创面是救治严重烧伤患者的关键措施之一[2],植皮是覆盖创面的根本方法.影响创面植皮存活率的因素较多,痂下组织细菌定量培养是预测植皮存活率、判断感染预后及指导临床治疗的重要指标之一[3].笔者通过对严重烧伤患者伤后不同时间痂下活组织细菌进行定量培养和菌种鉴定,试图探讨其与植皮存活率的关系.
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微生物鉴定现状的观察与思考
目的 了解目前微生物鉴定状况,发现存在问题,为采取有效的措施提供依据.方法 对考核的肠道致病菌和非致病菌经目前基层常用的形态学、培养特性、生化学、血清学等常规微生物学鉴定,确定未知菌的菌群、菌型.结果 通过对未知菌全面的微生物学鉴定,确定为B群沙门菌(04:Hb:-)、阴沟肠杆菌和产硷普罗威登斯菌.结论 应该对市场上用于疾病诊断、检测用的常规培养基、微量生化培养基,血清学诊断用品等进行规范化管理和整顿.生产厂家在资质认定基础上统一生产模式、生产程序、生产标准,提高质量,提高效价,大限度减少由于试剂存在的问题造成微生物检验(测)工作中出现误差,以进一步提高微生物学检验(测)工作水平.
