张文泰老中医妙用僵蚕验案举隅

目的 介绍僵蚕的临床妙用经验.方法 观察僵蚕应用于治疗老年腿灼热症、三叉神经痛、局限性硬皮病、皮肌炎、慢性阑尾炎反复发作的临床疗效.结果 僵蚕治疗上述疾病取得良好效果.结论 只要配伍得当,僵蚕能广泛应用于临床.

基于菌落形态、显微特征、DNA条形码三种策略鉴定僵蚕表面真菌

目的:检测北京市零售药店僵蚕饮片表面所含真菌的种类,为临床安全用药提供参考依据.方法:培养僵蚕表面真菌,进行纯化,获得单一菌株.结合真菌菌落形态、显微结构特征、DNA条形码三种方法鉴定僵蚕表面真菌.结果:从僵蚕饮片表面共获得真菌227株,共计10种.其中的8种真菌得到准确鉴定结果,2种真菌为未知菌株.结论:初步了解北京市零售药店僵蚕表面真菌情况,为临床安全用药提供参考依据.

僵蚕单体化合物抗惊厥活性

目的:对僵蚕抗惊厥活性部位分离鉴定的β-谷甾醇、麦角甾-6,22-二烯-3β,5α,8α-三醇及白僵菌素3个单体活性成分的抗惊厥活性筛选,为僵蚕质量标准提供体现中医药特色的内在指标成分.方法:根据僵蚕祛风定惊的功效,以苯巴比妥药物为阳性对照,5％吐温-80为空白对照,对分离得到的3个单体成分,以高剂量(250 mg· kg-1)和低剂量(125 mg·kg-1)连续3 dsc给药,于后1次给药30 min后sc尼可刹米(750 mg·kg-1)及异烟肼(300mg·kg-1)2种药物所致的动物惊厥进行抗惊厥活性筛选.结果:晶Ⅰ(β-谷甾醇)对2种惊厥模型惊厥潜伏期无明显作用;晶Ⅱ(麦角甾-6,22-二烯-3β,5α,8α-三醇)250 mg· kg-1对尼可刹米所致小鼠惊厥的出现时间均有延长作用,而其低剂量组对异烟肼所致小鼠死亡时间有加速作用;晶Ⅲ(白僵菌素)125 mg·kg-1组对尼可刹米所致小鼠惊厥的出现时间均有延长作用,而250 mg·kg-1组对异烟肼所致小鼠死亡时间有延长作用.结论:晶Ⅲ(白僵菌素)具有抗惊厥活性可作为僵蚕质量控制的指标性成分.

蜜麸炒僵蚕的质量标准研究

目的:建立蜜麸炒僵蚕的质量标准.方法:按照中国药典规定的相应方法进行显微鉴别、水分测定、灰分测定、浸出物测定和含量测定研究,以CIE-LAB色度值为指标,采用色彩色差计测量僵蚕炮制前后颜色的变化,薄层鉴别在已有方法基础之上适当改进,效果良好.结果:研究表明,僵蚕炮制前后显微鉴别特征变化不大.炮制后水分含量约为6.0％,总灰分含量均值为5.4％,酸不溶性灰分含量为0.12％,水溶性浸出物含量均值为21.4％,醇溶性浸出物含量为13.44％.薄层鉴别显示炮制品和生品甲醇提取物没有太大差别,但色彩差别较明显,蜜麸炒僵蚕的总色度值均值为47.269,而生品僵蚕的总色度值的均值为60.595.以L*,a*,b*值为指标,蜜麸炒僵蚕的L*值的数值范围为45.984±3.998,a*值的数值范围为8.315±2.149,b*的数值范围为8.949±3.322.蜜麸炒僵蚕中指标性成分草酸铵的含量初步定为不低于4.0％.结论:除色差鉴别外,本质量标准的各项要求及结果均在中国药典规定的生品僵蚕质量标准范围内,因此可作为蜜麸炒僵蚕质量标准研究的参考.

石墨炉-原子吸收光谱法测定僵蚕中铅、镉含量

目的:利用石墨炉-原子吸收光谱法测定僵蚕中铅和镉两种重金属元素含量.方法:收集6种不同来源的僵蚕药材,采用浓硝酸-高氯酸(4:1)混合溶液湿法消解样品,用石墨炉-原子吸收光谱法测定僵蚕的铅和镉含量.结果:铅和镉的质量浓度分别在40μg·L-1和7.2 μg·L-1以内与吸光度相关性良好,其检出限(3 s)分别为1.02μg·L-1和0.10 μg·L-1；6种僵蚕样品铅含量均小于5.0 mg·kg-1,镉含量均小于0.3 mg·kg-1；用标准加入法测得铅和镉回收率依次为99.5％,103.5％,相对标准偏差(n=6)均小于5.0％.结论:该方法快速、灵敏、准确,稳定性好,可用于僵蚕药材中铅和镉含量测定.

不同炮制方法对僵蚕体外抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制能力的影响

目的:探讨不同炮制方式对僵蚕提取物体外抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制能力的影响.方法:以生品僵蚕为对照,以二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、三价铁离子还原能力及小鼠肝微粒体脂质过氧化为指标,考察不同僵蚕炮制品甲醇提取部位体外抗氧化能力的差异;以L-多巴为底物,考察不同僵蚕炮制品提取物对酪氨酸酶抑制能力的差异;采用HPLC比对和确定甘蒸僵蚕新增成分的归属.结果:当提取液生药质量浓度为2～30 g·L-1时,生品、微波品、甘蒸品和麸炒品对DPPH·的清除率基本一致,清蒸僵蚕的清除率低;生药质量浓度为20 g·L-1时,各炮制品对·OH的清除率均达到大,清除能力顺序为生品＞甘蒸品＞微波品＞麸炒品＞清蒸品;生药质量浓度为8～80 g·L-1时,各炮制品的总还原能力大小为甘蒸品＞微波品＞生品＞清蒸品＞麸炒品;生药质量浓度为80 g·L-1时,各炮制品对小鼠肝脏微粒体脂质过氧化的抑制率均达到大,抑制能力顺序为生品＞甘蒸品＞微波品＞麸炒品＞清蒸品;生药质量浓度为20 g·L-1时,各炮制品对酪氨酸酶的抑制率达到大,抑制能力排序为甘蒸品＞生品＞清蒸品＞麸炒品＞微波品.HPLC图谱比对结果显示,与生品及其他炮制品相比,甘蒸僵蚕甲醇提取部位增加了芹糖甘草苷、甘草苷和甘草酸铵等抗氧化活性成分.结论:僵蚕经加热炮制后,体外抗氧化活性与对酪氨酸酶的抑制能力有所降低.甘蒸僵蚕的整体抗氧化活性不低于生品是因为辅料甘草汁中活性物质起到了相应的贡献作用.

僵蚕抗凝活性部位中化学成分的初步研究

目的 探索僵蚕水煎液、醇沉液和凝胶色谱馏分各部位中的抗凝活性成分.方法 用水煎煮、60%醇沉处理和凝胶色谱方法制备抗凝活性部位,用化学反应鉴别、氮测定法、电导、紫外吸收光谱和高效液相色谱方法检测各部位中的蛋白质或多肽和氨基酸类及草酸铵等成分.结果 僵蚕的水煎煮提取、醇沉和凝胶色谱分离所得抗凝活性部位中,多肽,氨基酸类和草酸铵都是其中的主要成分,其含量在80%以上.醇沉处理使草酸铵含量下降约52%,而多肽、氨基酸类含量仅降低约8%.凝胶色谱净化后,多肽、氨基酸类含量与水煎部位比约提高28%,与醇沉处理部位比约提高39%,而草酸铵含量与醇沉液部位相当,但比水煎煮部位降低约1倍.各部位的固形物中,15种氨基酸含量在40%～50%,占定氮法测定的蛋白质含量的60%～76%;多肽类成分的分子量为1.0～4.4 kDa.结论 本研究为僵蚕抗凝活性成分的进一步分离纯化提供了实验基础.

僵蚕、蜈蚣提取工艺的研究

目的:通过药效学试验探讨僵蚕、蜈蚣醇提的必要性,采用正交试验优选醇提工艺.方法:以镇静、镇痛及抗惊厥作用为药效学指标,比较醇提、水提及醇提后药渣的作用,并以含氮量及醇浸膏得率为考察指标,优选提取工艺.结果与结论:醇提样品有明显镇静、镇痛及抗惊厥作用.醇提工艺为醇提2次,第1次加4倍量60%乙醇回流提取1.5 h,第2次加3倍量60%乙醇回流提1.0 h.

僵蚕的化学成分研究

目的:研究僵蚕的化学成分.方法:应用硅胶柱层析和重结晶方法进行分离、纯化,并利用谱学方法进行结构鉴定.结果:分离并鉴定出7个化合物.结论:其中6个成分为首次从僵蚕中分离得到.

动物药僵蚕高温麸炒的科学合理性

该研究旨在通过比较僵蚕麸炒前后总蛋白含量的差异及炒制后黄曲霉素限量的变化,探究动物药僵蚕高温炮制的科学合理性.采用考马斯亮蓝法测定水溶性蛋白质含量;SDS-PAGE法比较僵蚕生品及麸炒僵蚕的蛋白质差异性;柱前衍生-高效液相色谱法对样品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2进行限量检查.结果显示生僵蚕的水溶性蛋白质质量分数为(47.065±0.249) mg ·g-1,麸炒僵蚕的水溶性蛋白质质量分数为(29.756±1.961) mg·g-1;生僵蚕的蛋白质电泳条带和麸炒僵蚕的电泳条带皆约为6条.在31.90,26.80,18.71,15.00 kDa左右分别有一个蛋白片段,生品丰度大于麸炒品;而在10.18,8.929kDa处条带麸炒品明显深于生品,即麸炒品蛋白丰度大于生品,推测可能是部分蛋白质降解为小分子多肽所致.生品中黄曲霉毒素G1,B1,G2,B2的质量分数分别为0.382,0.207,0.223,0.073μg· kg-1,而麸炒僵蚕中未检出.以上结果表明动物药僵蚕经过高温麸炒,蛋白质含量下降.这与炮制缓和药性的目的相吻合,而且僵蚕在麸炒过程中,通过炮制辅料的作用,毒性成分黄曲霉毒素完全被吸附,未检出毒性成分,增加了药材的安全性.麸炒僵蚕作为一种传统的炮制方法,具有科学合理性.

僵蚕含药血清对肝癌细胞侵袭能力的影响

目的 探讨僵蚕抗肝癌转移的可能作用机制.方法 10只SD大鼠给予630 mg/100g僵蚕水煎剂溶液灌胃,10只大鼠给予等体积生理盐水灌胃,连续灌胃3天后1h心脏采血,制备大鼠含药血清.将肝癌Hepa1-6细胞分为对照组和实验组,分别给予对照血清和僵蚕含药血清培养.用5-乙炔基-2-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组Hepa1-6细胞染色阳性率判定增殖情况;用Transwell小室法检测各组细胞侵袭能力;设立空白组,采用RT-PCR法检测Hepa1-6细胞上皮细胞间充质转化标志物E-cadherin、N-cadherin mR-NA水平.结果 实验组肝癌细胞Hepa1-6EdU染色阳性率低于对照组,肝癌细胞侵袭数目亦低于对照组(P＜0.01).与空白组比较,对照组E-cadherin mRNA下调,N-cadherinmRNA上调(P＜0.05);与对照组比较,实验组E-cadherin mRNA表达增加,N-cadherin mRNA表达减少(P＜0.05).结论 僵蚕含药血清能抑制肝癌细胞Hepa1-6体外的增殖、侵袭,可能通过减弱上皮细胞间充质转化发挥抑制肝癌转移的作用.

僵蚕为主治疗脑卒中后假性球麻痹

僵蚕,因其既能止痉熄风,又善化痰除湿,故对脑卒中后引起的假性球麻痹具有很好的临床疗效.现介绍如下.患者王某,男,57岁,2006年11月9日初诊.患者因右侧肢体无力逐渐加重4天,伴吞咽困难,不能进食而人院.察脉弦,舌边紫暗、苔薄黄.头颅CT示:双侧基底节区及左侧放射冠区腔隙性脑梗死.给予常规治疗后,其他症状恢复,惟吞咽困难,不能饮食.给予加味止痉散口服(僵蚕15g,全蝎6g,蜈蚣2条,桃仁6g,黄芪10g,当归6g,生地黄10g,白芍6g,粉碎,混匀,过筛),每次10g,每日2次,10日为1个疗程,服药20余日,症状明显缓解,半年后随访未再复发.

僵蚕临床应用举隅

僵蚕有祛风止痉,化痰散结,解毒利咽等功效.除此之外,笔者在临床应用中发现还有软化肿块,消疣等功效.举例如下.

僵蚕治疗肠易激综合征

僵蚕善熄风,止痉挛抽搐,又能祛外风,用于风中经络,口眼歪斜.兼具疏散风热,止痛止痒之效.我们近年来,在辨证的基础上,适当配伍僵蚕,治疗肠易激综合征,取得了满意疗效.现举例介绍如下.

重用僵蚕治疗糖尿病周围神经病变/僵蚕治疗慢性迁延性肝炎患者丙氨酸氨基转移酶升高/僵蚕是治疗病毒性感染的良药

僵蚕治疗哮喘/僵蚕治疗强直性脊柱炎/僵蚕治疗扁桃体炎、咽炎效佳

僵蚕治疗痔疮

痔疮是肛门直肠底部及肛门黏膜的静脉丛发生曲张而形成的一个或多个柔软的静脉团的慢性疾病.临床分内痔、外痔、混合痔.中医认为,此病与过量饮酒、过嗜辛辣鱼腥等发物,湿热内生,起居不时,外感湿热,久忍大便,久泻久痢,老人气虚,妇女妊娠以及久坐久行等因素有关.痔疮常反复发作,缠绵难愈.

单味僵蚕治疗头痛/僵蚕擅治咽痒咳嗽/重用僵蚕治疗咳嗽变异性哮喘/僵蚕治疗崩漏有良效

僵蚕治疗慢性阑尾炎反复发作

僵蚕,主要用于治疗抽搐惊痫、风热头痛、瘰疬结核、疔毒等症.家父张文泰老中医善用僵蚕治疗痰瘀互结所致的慢性阑尾炎反复发作,疗效满意.现举例介绍如下.

僵蚕善治功能失调性子宫出血/僵蚕善治带下阴痒/僵蚕治疗遗尿疗效佳