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健宝合剂含量测定的实验研究
采用薄层扫描法测定了健宝合剂中黄芪甲甙的含量,该法准确,灵敏,并能消除方中其它成分的干扰,可作为该药的质量控制手段.
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黄芪甲甙分析方法研究概况
黄芪临床应用十分广泛,具有补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮等功效.黄芪的化学成分主要有皂甙、多糖、黄酮、氨基酸等,其中黄芪甲甙为其主要有效成分之一,具有抗炎、降压、镇痛、镇静等作用,对免疫器官也有影响.因此对黄芪药材及含黄芪(君药)的中成药的质量评价均以黄芪甲甙作为评价的指标,且文献报道较多.在新药中以黄芪为君药测定其甲甙含量也有多种已被收入新药质量标准中.为科学评价黄芪及其复方制剂的质量,现对近年来黄芪甲甙的提取纯化及含量测定方法综述如下.
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输卵通胶囊中黄芪甲甙的含量测定
采用薄层扫描法,测定输卵通胶囊中黄芪甲甙的含量测定.本法专属性强,重现性好.可作为输卵能胶囊的质量控制指标之一.
关键词： 输卵通胶囊/薄层扫描法 黄芪甲甙 -
止血灵胶囊质量标准的研究
目的:修订并提高止血灵胶囊的质量控制方法.方法:用薄层色谱法对其中地榆、蒲公英进行了定性鉴别;用薄层光密度法对黄芪中有效成分进行了含量测定.结果:表明本品定性鉴别色谱特征明显,易于区别;黄芪甲甙含量测定线性范围为0.6～3.6μg,平均回收率102.68%,RSD为2.5%.结论:建立了该制剂的质量标准,其鉴别与含量测定方法简便、可靠、实用.
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痫宁片的质量标准研究
采用TLC法对痫宁片中黄芪、三七、白芍及柴胡进行了定性鉴别;并采用薄层扫描法测定黄芪甲甙及人参皂甙Rg1的含量,其平均回收率分别为97.55%、97.30%;RSD分别为3.22%、2.96%.
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超滤法和水醇法制备通脉口服液的实验研究
对水醇法和超滤法制备的通脉口服液在杂质检查定量方面进行比较.结果表明,用5万分子截留值的超滤膜制备的通脉口服液黄芪甲苷的含量低于水醇法(醇沉浓度为75%);在除杂质方面,前者亦不如后者.采用水醇法制备的通脉口服液质量优于超滤法制备的产品.
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糖君康口服液质量标准的研究
采用薄层色谱法对制剂中的牡丹皮、葛根、丹参、黄连进行定性鉴别;采用薄层扫描法对制剂中的黄芪甲甙进行定量.结果:定性鉴别能从样品中检出以上各药的斑点.含量测定黄芪甲甙在0.25～1.75μg有良好的线性关系,回收率为97.04%.
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黄芪甲甙保护阿霉素心肌损伤大鼠抗凋亡作用的机制研究
目的 探讨黄芪甲甙(简称黄芪)抗阿霉素所致心肌细胞凋亡的可能机制.方法 取SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪3个剂量(低、中、高)组.空白组腹腔注射生理盐水,余4组分别给予阿霉素造模(15 mg/kg,隔日腹腔注射1次,共6次).黄芪3个剂量组同时用不同剂量黄芪甲甙灌胃治疗,空白组和模型组同时给予羧甲基纤维素钠.采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,细胞免疫组织化学检测bcl-2、bax蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax基因的表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡发生率增高(P＜0.01),抑制凋亡因子bcl-2基因及蛋白表达下降(P＜0.01),而促进凋亡因子bax基因及蛋白表达增强(P＜0.01),bcl-2/bax mRNA比值降低(P＜0.05).与模型组比较,黄芪高剂量组大鼠心肌细胞的凋亡率显著下降(P＜0.05),bcl-2基因及蛋白水平表达增强(P＜0.05),bax基因及蛋白水平表达下降(P＜0.05),bcl-2/bax mRNA比值明显上升(P＜0.05).结论 高剂量黄芪甲甙治疗可以抑制阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因bcl-2表达有关.
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黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响
目的 探讨中药黄芪的活性成分黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响及其相关机制.方法 80只Balb/c小鼠随机分为3组,分别为空白对照组(对照组,20只)、慢性心肌炎组(模型组,30只)和黄芪甲甙干预心肌炎组(干预组,30只).模型组和干预组小鼠每月1次腹腔接种柯萨奇病毒B3(CVB3),对照组腹腔注射等量病毒培养液.对照组和模型组小鼠每日以饮用水喂养,干预组小鼠以加有羧甲基纤维素钠助溶的黄芪甲甙饮用水(浓度300 mg/L)喂养.3个月后处死所有存活小鼠,小鼠心脏组织经苦味酸天狼星红染色后以自动图像分析系统计算胶原容积积分(CVF),以Western blot方法检测各组小鼠心脏组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其组织抑制物(TIMP-1)、MMP-13和MMP-14的表达情况.结果 黄芪甲甙干预后,与模型组比较,小鼠死亡率降低(53.3%、23.3%,χ2=4.23,P＜0.05)、心脏CVF明显下降[模型组为(17.4±1.2)%、干预组为(8.6±0.9)%,χ2=5.38,P＜0.05];与对照组比较,TGF-β1、MMP-1和TIMP-1表达减少而MMP-13和MMP-14的表达增多.结论 黄芪甲甙可以降低慢性心肌炎小鼠死亡率、减轻其心肌纤维化,其抗纤维化作用是通过抑制TGF-β1、促进MMP-13和MMP-14在心脏中的表达而实现.
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黄芪注射液和葛根素联合使用对血管、脑及心脏疾病治疗的概况
黄芪是祖国医学中常用的扶正固本、补中益气药物之一,内含糖类、多种氨基酸、蛋白质、叶酸等,尚含微量元素硒、铁等成分.黄芪注射液的主要成分有黄芪多糖、C-氨基丁酸、黄芪甲甙等.葛根素注射液是豆科植物野葛的干燥根所提取制成,其中葛根素及总黄酮含量较高.
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黄芪甲甙对小鼠扩张型心肌病心室重构和心功能的影响
目的:应用高频超声心动图评价黄芪甲甙对病毒性扩张型心肌病小鼠左室重构和心功能的影响.方法:以CVB3重复增量感染Balb/c小鼠建立病毒性扩张型心肌病动物模型(n=30);小鼠感染CVB3后以9%黄芪甲甙灌胃作为黄芪甲甙干预组(n=20);同期腹腔无菌注射等容积不含病毒的EMEM液设立为正常对照组(n=10).应用高分辩力超声测量小鼠左室收缩末内径(LVEDs)、左室舒张末内径(LVEDd)及左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(Fs),通过苦味酸天狼猩红胶原特异染色和偏光显微镜显像,并辅以图像分析软件检测心肌胶原容积积分(CVF)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原增生的情况及计算Ⅰ/Ⅲ比值.结果:高频超声检测心肌病组小鼠左室LVEDd和LVEDs明显增加(p＜0.001),EF和Fs显著降低(p＜0.001),黄芪甲甙干预后增大的左室内径有明显减小(P＜0.001),心功能显著改善(p＜0.001),但未达到正常对照组小鼠水平;黄芪甲甙干预组CVF、Ⅰ型和Ⅲ型胶原增生及Ⅰ/Ⅲ比值较心肌病组明显降低(p＜0.001),但较正常对照组增高(p＜0.001).CVF及Ⅰ/Ⅲ比值与EF及Fs呈负相关,与LVEDd和LVEDs呈正相关.结论:通过高频超声对左室大小和心功能的动态、实时监测,可准确、可靠评估黄芪甲甙对胶原增生的影响.黄芪甲甙可能通过部分阻逆胶原增生从而改善胶原网络重构,在一定程度上逆转左室重构和提高心功能.
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黄芪甲甙对阿霉素心肌损伤的保护作用的研究
目的 研究黄芪甲甙对阿霉素心肌损伤的保护作用.方法 30只SD大鼠随机分为3组,对照组(C组),阿霉素组(ADR组),阿霉素+黄芪甲甙组(ADR+黄芪组).观察大鼠心率和肝、肺干湿重比变化,检测心肌铜-锌-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活力,半定量聚合酶链反应测定心肌CuZn-SOD基因表达及bcl-2,bax基因表达.结果 与ADR组比较,ADR+黄芪组心率变化率明显下降(P＜0.05),肝、肺干湿重比明显上升(P＜0.05),心肌铜-锌-超氧化物歧化酶活力明显提高(P＜0.05),铜-锌-超氧化物歧化酶基因表达增加(P＜0.05),bcl-2基因表达增加而bax基因表达下降.结论 黄芪甲甙对阿霉素心肌损伤有保护作用,其机制可能与其抑制氧化应激从而抑制心肌细胞凋亡有关.
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胃安康口服液的稳定性研究
目的:建立预测胃安康口服液有效期的方法.方法:根据化学动力学原理,以黄芪甲甙为指标,薄层扫描法定量,采用Q10法和经典恒温法,分别对胃安康口服液稳定性进行了研究.结果:本品室温下贮存期分别为569.6d和568.5d.结论:两种方法均可预测本品的有效期,Q10法更为简便、省时,数据处理简单.
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肝康胶囊中黄芪甲甙的测定
肝康胶囊是由板蓝根、贯众、黄芪、灵芝、大黄、栀子、茵陈等制成的口服胶囊剂型.具有清热解毒,疏肝理气,除湿退黄,和中健脾之功效,临床上用于肝炎急性发作期的辅助性治疗.本文选择肝康胶囊中的黄芪甲苷为含量测定指标,采用薄层扫描法对其进行含量测定,方法简便,结果可靠.
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黄芪赤风颗粒剂的薄层鉴别
采用TLC法对黄芪赤风颗粒剂中黄芪、赤芍、防风、金银花进行了鉴别.结果表明,色谱斑点清晰,重复性好,可用于成品的定性鉴别.
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降糖合剂中黄芪甲甙的薄层扫描法测定
用氧化镁吸附杂质后,再用氧化铝-大孔树脂混合柱净化处理样品,采用双波长薄层扫描法(TLCS)测定降糖合剂中黄芪甲甙的含量.该法线性关系良好、精密度高、重现性好.平均回收率为99.19%,RSD为2.71%.
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HPLC法测定川黄醒脑口服液中黄芪甲甙的含量
目的 建立川黄醒脑口服液中黄芪甲甙的含量测定方法.方法 采用HPLC法,固定相YWG-C18色谱柱,流动相为乙腈:水(1:2),用磷酸调pH=3,检测波长205 nm.结果 黄芪甲甙的线性范围为2.5～12.5ug (r=0.9998),加样回收率为95.32％,RSD为1.69％.结论 本法操作简便、快速、准确、重复性好,可作为川黄醒脑口服液的质量控制的方法.
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薄层扫描法测定黄芪补血胶囊中黄芪甲甙的含量
目的:建立测定黄芪补血胶囊中黄芪甲甙含量的测定方法.方法:采用薄层扫描法测定,用氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2下层溶液为展开剂,10%的硫酸乙醇溶液为显色剂,波长为530 nm.结果:黄芪甲甙在线性范围1～5 μg,平均回收率为98%,RSD为1.98%,n＝6.结论:薄层扫描法测定黄芪甲甙简便、准确.
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黄芪甲甙对肺缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用
目的 探讨黄芪甲甙对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用及机制.方法 30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、干预组,每组10只,干预组缺血前1h给予10%黄芪甲甙溶液2mL灌胃.比较各组肺湿/干质量比(W/D)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 模型组W/D、MDA、MPO及TNF-α含量显著高于对照组(P均<0.01),黄芪甲甙干预后,W/D、MDA、MPO及TNF-α含量明显降低,与模型组比较均有显著性差异(P<0.01).结论 黄芪甲甙对肺缺血-再灌注损伤大鼠有显著的保护作用,其机制可能与抗氧化自由基损伤、抑制中性粒细胞激活和炎性因子TNF-α分泌有关.
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黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞多种造血相关因子表达的影响
背景:黄芪甲甙是中药黄芪的主要有效成分,能促进骨髓间充质干细胞的增殖及诱导分化,但涉及具体作用机制的报道较少.目的:探讨中药黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞造血相关因子表达的影响.方法:全骨髓贴壁法和单克隆培养法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,接种于96孔板中,加药组分别用25,50,100,200 g/L黄芪甲甙100 μL孵育72 h,对照组仅加等量DMEM-LG培养液.间接免疫荧光法鉴定其生物学特性,MTT法检测黄芪甲甙对骨髓间充质干细胞增殖的影响,RT-PCR法检测黄芪甲甙干预后骨髓间充质干细胞造血相关因子的表达.结果与结论:第3代骨髓间充质于细胞高表达CD44,低表达造血细胞表面标志CD45.与对照组比较,黄芪甲甙呈时间及剂量依赖性促进骨髓间充质干细胞的增殖,以200g/L黄芪甲甙干预72 h促增殖作用强(P＜0.05).与对照组比较,加药组骨髓间充质干细胞SCF的表达显著增加(P＜0.01),TPO,GM-CSF,TGF-β1等细胞因子的表达无明显变化(P＞0.05),不表达自细胞介索3.黄芪甲甙可促进骨髓间充质干细胞的体外增殖,可能与其诱导骨髓间充质干细胞分泌SCF有关.
