首页 > 文献资料
-
悬浮芯片技术在生物医学领域中的应用
Luminex悬浮芯片技术是美国Luminex公司在20世纪90年代中期开发的一种多功能的液相芯片分析平台,也称xMAP (flexible multiple-analyte profiling)、多功能悬浮点阵(multi-analyte suspension arrays,MASA)或液体芯片(liquidchip).它有机地整合了有色微球(color-coded microspheresor beads)、激光技术、新的高速数字信号处理和计算机技术,集中了分子生物学、免疫学、高分子化学、激光物理学、微流体学和计算机科学等多门学科,使得Luminex悬浮芯片技术的检测特异度和灵敏度得到了前所未有的发展.
-
通过检测包被HLA抗体Luminex微球上补体C4d沉积预测心脏移植后移植物失功
器官移植时受体中存在供体(donor specific antibody,DSA)特异性抗体会导致快速的体液排斥反应.至今为止,检测受体中供体特异性抗体存在的经典方法是供体白细胞补体依赖性的细胞毒性试验(CDC).近几年来,采用包覆人类白细胞抗原(HLA)的多孔塑料板或微球等固相检测法可以更加敏感地检测到移植受体HLA抗体的存在.但这种检测法无法分辨这些抗体是否为补体依赖性的,因此其在临床中的实际应用价值仍不确定.英国皇家医学院移植免疫的相关研究人员采用了一种新的方法来检测Luminex微球上补体C4d结合的HLA抗体从而发现特异性抗体的存在.
-
液态芯片技术为临床医学发展开拓新领域
Luminex XMAP技术(液态芯片技术)又称流式荧光技术,有机地整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术,计算机运算法则等多项新科技组合的成果[1].
-
Luminex液相芯片在微生物多重检测中的应用
液相芯片作为一种新的生物芯片技术,以不同荧光编码微球作为反应及信号检测载体,流式细胞术作为光学检测手段,在液相反应体系中实现蛋白质、核酸等多种生物大分子多重检测.它既保持了生物芯片高通量的特性,又具有高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便等优势.该文对此技术的原理、特点及其在疾控机构微生物多重检测中的应用进行综述.
-
单中心两种方法检测280例群体反应性抗体的对比分析
背景：液态芯片技术(Luminex)检测方法是近年来兴起的检测方法，应用液相芯片技术检测抗群体反应抗体，具有灵敏度高，特异性强，检测干扰少，高通量等优点。
目的：比较ELISA和Luminex两种方法对肾脏病患者血清标本中群体反应性抗体的检测差异及灵敏度。
方法：选取280例肾脏病患者血清标本，同时应用ELISA和Luminex两种方法检测群体反应性抗体阳性率，并运用配对四格表资料的χ2检验进行统计学分析。
结果与结论：ELISA法检测群体反应性抗体阳性率为18.9%，Luminex法检测群体反应性抗体阳性率为33.6%。ELISA法检出抗HLA-Ⅰ类抗体和抗HLA-Ⅱ类抗体阳性率分别为12.8%和12.5%；Luminex法检出抗HLA-Ⅰ类抗体和抗HLA-Ⅱ类抗体阳性率分别为25.0%和20.7%。Luminex法的阳性检出率明显高于ELlSA法且Luminex法能准确检测到低浓度抗体。配对四格表资料的χ2检验P<0.01，显示两种方法检测肾脏病患者群体反应性抗体结果差异有显著性意义。结果显示与ELISA法相比，Luminex技术具有更高的灵敏度和准确性，更适合应用于临床检测。 -
基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法的建立
目的 建立基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法.方法 将百日咳类毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)、百日咳杆菌黏附素(pertactin,PRN)、百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(fimbrial-2 and fimbrial-3,FIM 2,3)分别与4种不同型号的微球耦联,耦联的抗原在同一孔中与血清孵育,通过生物素标记抗体和链霉素标记藻红蛋白双重识别,用Luminex荧光检测得到荧光中位数值(MFI),进行效价分析,并通过百日咳标准血清建立五组分百日咳疫苗血清抗体检测的标准曲线.采用ELISA法检测同一组血清样品中的抗体效价,并对两种方法的检测结果进行比较.结果 与ELISA法相比,Luminex法的线性范围更宽.两种方法检测五组分百日咳疫苗血清抗体效价的分布范围接近,Luminex法检测50份五组分百日咳疫苗免疫小鼠血清抗体效价的平均值分别为FT 65.365 IU/ml、FIM 15.052 IU/ml、FHA 545.236 IU/ml、PRN 7.876 IU/ml,ELISA法检测的平均值分别为PT 72.640 IU/ml、FIM 16.480 IU/ml、FHA 589.474 IU/ml、PRN 7.345 IU/ml,两种检测方法的检测结果具有良好的相关性,相关系数(R2)分别为:PT 0.905 8、FIM 0.979 1、FHA 0.930 9、PRN 0.997 6.结论 与ELISA法相比,基于Luminex的多重分析物的检测方法具有减少样品消耗量、节省成本和测定时间、使多种目标分子之间相关性的分析更准确等优点,可用于五组分百日咳疫苗血清抗体效价的检测.
-
Eales病患者血清中T淋巴细胞因子的检测及临床分析
目的 检测Eales病患者血清中的T淋巴细胞(T细胞)因子.方法 采用Luminex技术分别检测Eales病首发病例组、治愈病例组和健康对照组血清中辅助性T细胞1(TH1)亚群分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和Th2细胞亚群分泌的白细胞介素4(IL-4)的浓度变化.结果 TNF-α在首发病例组、治愈病例组和健康对照组的浓度分别为(23.08±0.22)、(12.36±0.16)、(12.38±0.13) pg/mL; IFN-γ 的浓度分别为(18.23 ±0.26)、(7.07±0.19)、(6.66±0.22) pg/mL.首发病例组和治愈病例组(P＜0.001),首发病例组和健康对照组(p＜0.001),治愈病例组和健康对照组(P=0.04),各组比较差异均有统计学意义.IL-4在首发病例组、治愈病例组和健康对照组的浓度分别为(4.18±0.19)、(4.16±0.13)、(4.15 ±0.12)pg/mL.首发病例组和治愈病例组(P=0.03),首发病例组和健康对照组(P=0.01),各组比较差异均有统计学意义;治愈病例组和健康对照组(P=0.79)差异无统计学意义.Th1和Th2细胞代表因子的比值IFN-γ/IL-4在首发病例组、治愈病例组和健康对照组分别为4.26±0.11、1.70±0.08和1.49±0.06.首发病例组与治愈病例组(P＜0.001),首发病例组与健康对照组(P＜0.001),治愈病例组与健康对照组(P=0.02),各组比较差异均有统计学意义.结论 Eales病患者血清中T细胞因子的浓度均有不同程度升高,且Th1/Th2比值升高.可见Th1亚群分泌的细胞因子占优势,可以证明T细胞亚群的失衡参与了Eales病的免疫机制.
-
液相芯片技术及其在蛋白质和核酸检测中的应用
Luminex液相芯片技术是1990年代兴起的,集合流式细胞技术、激光技术、微球数字信号处理技术为一体的新型检测技术.与传统的临床检测方法相比,其主要优点在于高通量、高敏感、重复性高、检测范围广、反应速度快,仅需微量样品即可进行检测等.Luminex具有两大核心技术:xMAP(R)技术和xTAG(R)技术.xMAP(R)技术利用抗原-抗体反应的原理,可用于蛋白质和核酸的检测;xTAG(R)技术能够测定若干基因组形式,如基因表达分析、微RNA分析、单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分析、特定序列的检测等.
-
Luminex液相芯片的发展及应用
液相芯片技术是20世纪90年代兴起的,集合流式细胞技术、激光技术、数字信号处理技术及传统化学技术为一体的新型生物分子检测技术.它的大特点是通量大、灵活性好.Luminex公司利用液相芯片技术先后推出了Luminex 100、Luminex 200和Flexmap 3D液相芯片检测平台.现对Luminex液相芯片的发展、原理及应用作一简介.
关键词： Luminex 液相芯片 Flexmap 3D -
HLA-B新等位基因B*51:02:03的确认和分析
人类白细胞抗原系统(HLA)在造血干细胞和器官移植中具有重要意义,供受者HLA相合程度与移植后移植物抗宿主病(GVHD)的发生率以及移植物的存活率等密切相关[1-2],目前已有多个国家建立造血干细胞捐献者资料库,作为临床患者造血干细胞移植的供者来源.笔者近期在常规的造血干细胞捐献者标本分型中,采用Luminex PCR-SSO分型方法发现1例HLA-B疑难分型标本,进而测序分析发现其为新的等位基因,被世界卫生组织HLA命名委员会正式命名为HLA-B*51:02:03,现将结果报道如下.
-
Luminex RVP与qPCR的对比及Luminex平台PCR产物污染的处理
目的:与qPCR对比,评估Luminex RVP试剂盒的检测效能.探讨Luminex平台的PCR产物污染的处理.方法:使用RVP检测了100例咽拭子,并对三种病毒用qPCR检测其中20例标本.采用实验排查了Luminex平台的PCR产物污染源,并针对会出现污染的各环节制定了预防措施.结果:RVP与qPCR结果一致.该研究的Luminex PCR产物污染是由于PCR扩增部分的一个组份被污染,换成新试剂后得以解决.结论:RVP和qPCR结果一致.总结了PCR产物污染的防治策略,再次出现污染时可采用上述方法进行排查.
-
Luminex技术监测抗HLA抗体对肾移植受者预后的影响
目的：探讨Luminex技术检测受者体内抗人类白细胞抗原（HLA）抗体水平在预测肾移植受者预后的价值。方法选取2013年6月至2015年11月在解放军第181医院拟行肾移植患者1105例（其中354例成功接受肾移植手术），收集肾移植术前、术后血清标本共1923例次。采用Luminex技术检测术前和术后的抗HLA抗体的阳性率和抗体荧光强度，同时并对移植受者进行移植肾功能检测。结果术前抗HLA抗体阳性血清样本占总数的51.0％（546／1071），其中抗HLAⅠ类抗体阳性占26.0％（279／1071），抗HLAⅡ类抗体阳性占24.9％（267／1071），其中抗HLA抗体Ⅰ、Ⅱ类均为阳性占11.4％（122／1071）。354例肾移植患者中，术后出现抗HLA抗体者占17％（59／354），其中单独抗HLAⅠ类抗体阳性者25例（术后新发阳性4例），单独抗HLAⅡ类抗体阳性者占15例（术后新发阳性1例），两者皆阳性者19例（术后新发阳性4例）。随访期间，术后抗HLAⅠ类、Ⅱ类及两种抗体均阳性者出现移植肾功能异常者分别为13例、5例和11例，其中术后抗体新发阳性者均出现移植肾功能异常。结论 Luminex技术可动态监测肾移植术后受者抗HLA 抗体水平，而抗HLA抗体阳性对预测肾移植受者预后有重要的价值。
关键词： 肾移植 Luminex 抗人类白细胞抗原抗体 移植物排斥 -
用液相芯片技术定量测定人血清CEA、AFP和HBsAg
[目的]采用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和乙肝表面抗原(HBsAg),并对该方法进行评价.[方法]制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法对临床血清标本进行测定.[结果]同时检测CEA、AFP和HBsAg时的线性范围分别为0.032～200 ng/mL、0.022～55 U/mL、0.26～1 000 ng/mL,低检测限分别为8.90 pg/mL、0.013 U/mL、0.24 ng/mL,批内变异系数(CV)＜9%,批间CV＜14%.检测CEA、AFP、HBsAg的灵敏度分别为96.4%、95.8%、92%,特异度分别为95.6%、94.2%、100%,准确度分别为96%、95%、96%.其检测结果与化学发光免疫分析法(CLIA)或时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)之间呈显著的等级相关关系.该方法仅需1 μL标本,3 h即可完成检测.[结论]液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有临床应用潜力.
-
液相芯片技术一步反应法联合定量测定人血清CEA、AFP和tPSA
目的 建立用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和总前列腺特异性抗原(tPSA)水平的一步反应法,并对该方法进行评价.方法 制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法测定临床血清标本.结果 联合测定CEA、AFP和tPSA的线性范围分别为0.063～200 ng/ml、0.052～66.6 ng/ml、0.016～20 ng/ml;低检测限分别为31.3 pg/ml、26.0 pg/ml、7.8 pg/ml;批内精密度<10 %,批间精密度<14 %;血清标本CEA、AFP和tPSA检测值与化学发光免疫分析法(CLIA)测值的相关系数为0.920～0.940,与液相芯片两步反应法测值的相关系数为0.952～0.979.该方法仅需1 μl标本,2 h即可完成检测.结论 液相芯片一步反应法具有高通量、检测范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有较大临床应用潜力.
-
液相芯片技术的原理与应用进展
液相芯片是20世纪90年代中期发展起来的被喻为后基因组时代的新型芯片技术,具有高通量、灵活、快速、准确、重复性好、操作简便等众多优点,可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台.本文简要介绍其原理、优点,并对该技术在基础研究、临床诊断等方面的应用进展作一综述.
-
液相芯片技术原理及应用简介
液相芯片技术,又称悬浮阵列、流式荧光技术,它有机地整和了编码微球、激光技术、应用流体学、高速数字信号处理和计算机运算等多种技术,具有高水平的检测特异性和灵敏度.基于美国 Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪(Luminex 100TM)该技术可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究.
-
子痫前期患者血清细胞因子表达谱及其临床意义
目的:研究子痫前期患者血清中细胞因子表达谱的变化及其临床意义.方法:①以Luminex液相芯片技术检测子痫前期患者(A组)16例、正常妊娠妇女(B组)19例、正常非孕妇(C组)12例3组人群血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、TNF-α、MCP-1、VEGF、NT-proBNP等细胞因子表达水平,并进行比较;②收集、整理和分析3组对象血压、白细胞计数、尿蛋白及尿酸等临床常规检查指标,并与细胞因子表达谱的变化间进行对比分析.结果:①与B比,A组血清中IL-8、MCP-1、IL-6、TNF-α和VEGF 5种细胞因子表达水平升高,有统计学差异(P＜0.05＝,与疾病严重程度无明显相关性;②与B比,轻度(A1组)和重度(A2组)子痫前期者白细胞计数、尿酸水平均升高,有统计学差异(P＜0.05或0.01＝;A1组与A2组间比较,尿酸水平有统计学差异(P＜0.05＝,而白细胞计数水平则无统计学差异(P＞0.05).结论:子痫前期患者血清细胞因子表达呈炎症及血管损伤特征,尿酸水平可作为其疾病严重程度的监控指标.
