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恒河猴与食蟹猴血清多重细胞因子检测及分析
目的 测定和比较健康恒河猴与食蟹猴基础血清细胞因子水平.方法 分别采集15只健康恒河猴和15只健康食蟹猴血清,采用luminex xMap技术测定血清43种细胞因子的浓度,根据正态性检验(W检验)结果选择随机t检验或非参数检验(Mann-Whitney test)比较群体间差异.结果 测定的43种细胞因子中,1种促炎症因子(IL-15)、3种抑炎症因子(IL-1RA、IL-6Rα 和sCD27)和1种趋化因子(CCL5/RNATES)存在显著性群体间差异.结论 研究结果表明,恒河猴与食蟹猴基础血清细胞因子水平差异不显著,用于生物医学研究中具有一定的可比性.同时,本研究结果可为相关研究提供基础数据.
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转基因小鼠常见传染病血清学液相芯片技术多重检测方法的建立
目的 制备小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片,建立转基因小鼠传染病抗体的xMAP多重检测方法.方法 将荧光微球分别与小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白进行偶联,并且对佳蛋白偶联量、检测抗体佳工作浓度和Streptavidin?PE佳工作浓度进行优化,制备小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片,对56个转基因小鼠血清样品、阴性血清、阳性血清和质控血清进行xMAP多重检测.并应用传统的ELISA方法对xMAP检测结果进行验证.结果 1)小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白的佳偶联量分别为20μg、20μg、40μg和20μg,检测抗体佳浓度分别为2μg/mL、2μg/mL、2μg/mL和4μg/mL;Streptavidin?PE抗体佳浓度均为2μg/mL;(2)xMAP检测结果显示,14号、23号、55号和56号转基因小鼠血清MHV MFI值和index值均高于质控血清,其余小鼠血清的MFI值和index值均低于质控血清,表明14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV抗体阳性,其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗体阴性;(3)ELISA检测结果显示,14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV A450值和index值均高于质控血清,其余小鼠血清的A450值和index值均低于质控血清,表明14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV抗体阳性,其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗体阴性,该ELISA检测结果与xMAP检测结果相一致.结论 建立的xMAP多重检测技术可应用于转基因小鼠的传染病检测.
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Luminex液相芯片在微生物多重检测中的应用
液相芯片作为一种新的生物芯片技术,以不同荧光编码微球作为反应及信号检测载体,流式细胞术作为光学检测手段,在液相反应体系中实现蛋白质、核酸等多种生物大分子多重检测.它既保持了生物芯片高通量的特性,又具有高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便等优势.该文对此技术的原理、特点及其在疾控机构微生物多重检测中的应用进行综述.
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诊断急性呼吸道感染的新方法:Luminex xMAP(@)技术
急性呼吸道感染(ARTI)是常见的传染病.在美国,仅季节性流感每年至少造成约36 000人死亡,成为致死的第四大原因.目前常用的病毒培养、直接免疫荧光法(DFA)、免疫层析法及定量PCR等方法中,无一种方法能够及时检测出导致ARTI发生的主要病毒种类.由Luminex公司研制的xTAG呼吸道病毒诊断试剂盒(RVP)填补此项空缺,已经通过美国FDA认证.该试剂盒同时保证高敏感性及高特异性,xMAP技术是其核心技术.
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应用流式液相芯片技术分析厦门地区女性人乳头瘤病毒感染现状
目的 利用流式液相芯片技术检测人乳头瘤病毒基因的27个亚型,研究厦门地区女性HPV隐性感染及亚型分布状况,为女性人群宫颈癌健康筛查提供依据,做到早预防、早治疗,进而减低宫颈癌发生的风险.方法 利用流式液相芯片技术对本院517例健康体检女性宫颈脱落细胞进行人乳头瘤病毒基因的27个常见亚型的检测.统计分析整体总人群和不同年龄组:总的、HPV低危型的、HPV高危型的和HPV低/高危型混合的感染率;以及HPV亚型分布特点.结果 总的HPV感染占受检人群的19.3％,低危感染占5.8％、高危感染占15.5％,各年龄组差异不明显;HPV阳性例数中混合感染例数占27.0％,在31～35、36～40和46～50岁这三个年龄段中混合感染率较大;HPV亚型分布特点:31～50年龄段低危亚型感染呈多样化,而25～30年龄段和>50岁年龄段低危亚型感染较单一;HPV高危亚型25～30年龄组感染以18型和52型为主;31～35年龄组16和52型多,其次是18和59型;36～40年龄组51、52、53、56和59型较其他型多见;41～45年龄组52型较多见;46～50年龄组39、51、52、58较其他型多见;51～55年龄组亚型分布较简单,仅有51、52和53型,其中以52型多见;>55年龄组HPV阳性的7人检出的高危亚型有16、39、52、56和58.结论 总的HPV感染率、低危型HPV感染和高危型HPV感染各年龄段无明显差异,但高危感染率均高于低危感染率;低/高危型混合感染率人群中有较高比例;本地区女性各年龄段都有宫颈癌常见亚型感染,不同年龄段高发感染的型别略有不同.因此,各年龄段的妇女都应重视HPV筛查,并进行HPV亚型检测,以便更好地评估宫颈癌患病风险,及早预防、监测、治疗.
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液相芯片技术的原理与应用进展
液相芯片是20世纪90年代中期发展起来的被喻为后基因组时代的新型芯片技术,具有高通量、灵活、快速、准确、重复性好、操作简便等众多优点,可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台.本文简要介绍其原理、优点,并对该技术在基础研究、临床诊断等方面的应用进展作一综述.
