首页 > 文献资料
-
多重PCR检测方法和液态芯片技术在呼吸道病毒检测中的应用研究
目的 评估澳大利亚维多利亚感染性疾病参比实验室(The Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory,VIDRL)的呼吸道病毒多重PCR检测方法和Luminex公司多指标同步分析液态芯片技术-呼吸道病毒检测试剂盒(xTAG RVP),应用于多种常见呼吸道病毒检测的优势和缺点,为更好地、有针对性地选择合适技术进行临床实验诊断或公共卫生应急检测提供依据.方法 使用VIDRL的呼吸道病毒多重PCR检测方法和Luminex公司xTAG RVP试剂盒对198份临床流感样症状患者的咽拭子标本进行常见呼吸道病毒的核酸检测.结果 198份临床标本经VIDRL多重PCR方法和xTAG RVP方法检测,阳性率分别为38.89％和45.45％,符合率为72.22％.单一病毒的符合率为87.88％～100％.结论 xTAG RVP方法与VIDRL多重PCR方法相比,两者在常见呼吸道病毒检测中的特异性和敏感性相近,xTAG RVP方法具有明显的快速和高通量的优势.
-
液态芯片技术为临床医学发展开拓新领域
Luminex XMAP技术(液态芯片技术)又称流式荧光技术,有机地整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术,计算机运算法则等多项新科技组合的成果[1].
-
多重荧光定量PCR和液态芯片技术对下呼吸道病毒检测的应用比较
目的 比较荷兰PathoFinder公司多重荧光定量PCR技术(RespiFinder 2SMART试剂盒,简称RespiFinder检测)和加拿大Luminex公司液态芯片技术(呼吸道病毒检测试剂盒,简称xTAG RVP)对下呼吸道标本病毒检测的结果.方法 收集2015年1至12月于北京协和医院疑似病毒性肺炎住院患者100例下呼吸道标本,分别利用RespiFinder和xTAG RVP检测试剂进行常见呼吸道病毒核酸检测,并全部进行PCR及测序分析,比较两种方法的敏感性和特异性.结果 100份下呼吸道标本经RespiFinder和xTAG RVP方法检测,阳性率分别为60.0％和51.0％,混合感染率均为8.0％.两种方法结果一致率为80.0％.以PCR及测序结果为准,经RespiFinder和xTAG RVP方法检测的敏感性分别为97.9％和94.3％,特异性分别为74.5％和97.9％,阳性预测值分别为78.3％和98.0％,阴性预测值分别为95.0％和93.9％,两法检测特异性及阳性预测值差异有统计学意义(P＜0.05).结论 与RespiFinder方法相比,xTAG RVP对常见呼吸道病毒检测的特异性较好,敏感性相当,对呼吸道病毒的检测性能优于RespiFinder检测.
-
液态芯片技术分析RA患者血清免疫复合物对滑膜细胞分泌细胞因子的影响
目的 用液态芯片技术研究类风湿关节炎(RA)患者血清免疫复合物(IC)对关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌细胞因子的影响.方法 用聚乙二醇(PEG)沉淀法分别提取10份抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性的RA患者及健康人对照血清IC,间接ELISA法测定IC中ACCP特异性IC水平.体外培养RA患者关节FLS,分别用RA患者ACCP-IC阳性IC(ACCP+-IC)、ACCP-IC阴性IC(ACCP--IC)及健康人对照血清IC(C-IC)刺激FLS,培养24h后,用液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响.结果 10份RA患者血清中提取的IC,包括ACCP+-IC 6份和ACCP--IC 4份,刺激FLS 24 h后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACCP+-IC组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8水平均显著高于ACCP- -IC组.3组刺激物组刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异.结论 ACCP+-IC具备更强的促FLS分泌GM-CSF、IL-6和IL-8的活性.
-
液态芯片技术在β地中海贫血基因检测中的应用研究
目的 探讨液态芯片技术在检测β地中海贫血基因突变常见类型的应用价值.方法 采用液态芯片技术,使用Luminex 100多功能悬浮点阵检测仪及Lumi2 nex Data Collector Version 1.7数据收集软件检测并通过突变标本与正常标本的荧光强度比值(Mutan/Normal)分析100份正常人标本及68份PCR反向杂交技术确认的β地中海贫血基因突变标本.结果 100份正常标本检测结果正常.68份β地贫基因突变检测结果为密码子CD41/42(TCTF)突变37例(54.41%),IVS2-654(C→T)突变杂合12例(17.65%),-28(A→G)突变10例(14.71%),-17(A→T)突变5例(7.35%),CD71/72(+A)2例(2.94%),-29(A→G)突变杂合1例(1.47%).密码子71/72(+A)复合IVS2-654(c→T)突变杂合1例,-28(A→G)复合密码子CD41/42-TCTT突变2例,单位点突变β地贫病人为95.59%(65/68),多位点突变为4.41%(3/68).7种突变杂合类型与常用方法PCR-RDB检测结果为100%符合率.结论 液态芯片技术能准确区分β地贫基因突变杂合复合突变,可提供快速、敏感的临床β地贫基因突变检测技术平台.
-
Th17细胞因子在原发性肝癌患者血清中的表达及其诊断价值
目的:探讨Th17细胞因子在原发性肝癌(HCC)患者血清中的表达及其诊断价值.方法:通过借助高通量液态芯片技术检测78例HCC患者(研究组)及78例健康体检者(对照组)血清中Th17细胞分泌的14种细胞因子的表达水平,并分析其在肝癌诊断中的价值.结果:与对照组比较,研究组白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-17A和IL-25表达水平升高,IL-4、IL-22和IL-33表达水平降低,差异均具有统计学意义(均P＜0.001);这8种细胞因子用于诊断HCC的灵敏度和特异度均大于80％,曲线下面积(AUC)均大于0.7,具有临床诊断意义.结论:血清中8种Th17分化相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-25、IL-4、IL-22和IL-33的检测有助于提高HCC的诊断.
