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小鼠未成熟睾丸同种异体移植的动物模型建立和改进
目的:初步探索采用同品系ICR小鼠作为受体小鼠,建立小鼠未成熟睾丸同种异体移植的动物模型.方法:采用6天龄ICR乳鼠未成熟睾丸作为供体,移植于已去势的同品系ICR受体小鼠颈背部皮下.移植后3、4、5周处死小鼠,观察移植物成活状况和移植物体积,HE染色评估移植物组织病理学的情况.荧光定量PCR检测异位成活的移植物组织内TESK1 mRNA表达水平,供体睾丸和相应周龄小鼠睾丸组织作为对照.结果:移植后小鼠睾丸体积增长明显,于移植4周后进入平台期,移植前体积(17.3±2.6) mm3,移植3周组体积(203.1±14.3) mm3,移植4周组体积(236.4±27.5) mm3,移植5周组体积(220.9±17.4) mm3.组织病理学显示,移植物组织内曲细精管发育良好,生精功能正常,移植组曲细精管完整性和中空率3组间差异无统计学意义(P＞0.05).TESK1 mRNA表达水平随着移植时间延长逐渐增高,移植前TESK1 mRNA水平为对照组的(1.19±0.1)倍,移植3周组mRNA水平为移植前小鼠的(6.74±0.8)倍,移植5周组为移植3周组的(11.23±1.2)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:采用封闭系ICR小鼠作为受体的ICR小鼠未成熟睾丸移植是可行的.
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父爱天地重--一例异体睾丸移植的动人故事
事业鼎盛时,睾丸没了,爱情飞了1977年9月,唐宪出生在西北一个省会城市,他的父亲唐毅夫是一名普通工人,母亲是一所重点中学的数学教师.1994年,唐宪考上了哈尔滨工业大学,2000年初,唐宪邀约两个大学同学,注册成立洪宪实业有限责任公司,主要经营造纸和印刷机械.
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关于睾丸移植的伦理学讨论
随着器官移植技术的发展,为解决男性不育及性功能障碍等疾患,睾丸移植应运而生.但是睾丸作为精子的生成器官,其移植比其他器官的移植更为敏感,也更易于引发伦理学问题,本文在简要介绍国内外睾丸移植研究进展的基础上,重点对睾丸移植的生命伦理学问题加以探讨.
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输精管动脉供应区域的实验研究
目的探讨同种异体睾丸移植中吻合输精管动脉的临床意义.方法取去势手术病人睾丸10只,在10倍手术显微镜下,经输精管动脉灌注碳素墨水,直接显示输精管动脉的支配区域.结果输精管动脉支配整个输精管,附睾头、体、尾及部分睾丸实质.结论在同种异体睾丸移植时,为提高睾丸存活和术后生育能力,除进行传统的吻合精索内动脉外,同时行输精管动脉的吻合实属必要.
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同种异体睾丸移植术1例手术护理体会
1999年11月,我院1例外伤性无睾症同种异体睾丸移植获得成功.术后随访,患者第二性征与性功能明显改善,睾丸酮逐渐升高,睾丸血流丰富,阴茎勃起强度渐增.现将有关资料及术中护理体会报道如下:1 临床资料1.1 一般资料患者,男,36岁,因枪伤手术摘除左侧睾丸15年,右侧睾丸萎缩13年,血睾丸酮长期低于正常.供睾者25岁,意外脑创伤死亡.取睾丸术前均全身肝素化,阴囊用冰泥局部降温,取平行腹股沟切口解剖出精索,在内环水平以上切断精索,并将精索内动脉进行标记,睾丸置于4℃肾保存液中保存,热缺血时间8 min,冷缺血时间60 min.
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cuff管套入法建立大鼠同种异体睾丸移植模型
目的:探索应用cuff管套入法建立大鼠同种异体睾丸移植模型的新方法.方法:60只健康雄性近交系Wistar大鼠分别作为供、受体,显微镜下(×10),连同左侧供睾的动、静脉一起截取与其相连的腹主动脉段和左髂总静脉段,以丝线结扎左髂总静脉段的远断端,其余3断端分别套上cuff管后袖套状翻转并以丝线环扎之,然后分别将外套cuff管的动、静脉嵌入切开的受鼠的腹主动脉内和左髂总静脉内后再环扎,端端吻合受、供体输精管,摘除受鼠双侧睾丸.结果:30只大鼠正式手术,27只长期存活直至处死,2只死于麻痹性肠梗阻伴感染,1只因术中大出血死亡.27只长期存活的受体中,4、4、5例于术后14 d、28 d、56 d探查植睾,血供情况良好,关腹存活至处死;余14只用于其他实验.受体左下肢术后无明显水肿、淤血和坏死.结论:应用cuff管技术建立的大鼠睾丸移植模型具有操作简便、成功率高、效果可靠等优点,可作为睾丸移植的研究模型.
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由二维到三维——睾丸发育及精子生成研究方法的新选择
单一细胞成分的二维培养模型是研究睾丸发育及精子生成的重要方法,但由于相关细胞因子缺乏及生精小管三维构象的破坏,不能有效的模拟睾丸内环境,且较难完成完整的精子生成过程.近20年来,睾丸组织培养及睾丸移植等多种体外及体内培养模型的发展及优化实现了由二维到三维的转变,睾丸内龛境结构的维持或重构及培养条件的优化可较好的模拟睾丸内微环境,睾丸间质细胞、支持细胞及生殖细胞发育过程与体内类似,其中体外模型可将细胞悬液或组织块悬浮于空气-培养基交界处,在体外即可以模拟睾丸体细胞及生殖细胞正常的发育过程;体内模型可建立供体睾丸组织与受体下丘脑-垂体的关联,为精子生成提供内分泌基础.这为研究睾丸形成及发育、睾丸功能调节等提供了重要方法,并极大的促进了男性不育症治疗理念的进展,虽然上述各种方法仍有各自的局限性,但随着细胞及组织处理、冻存、解冻、移植等技术的进步,必将促进其临床应用并有较好的转化医学前景.
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异体睾丸移植的研究进展
异体睾丸移植是治疗男性不育或性腺功能减退的有效方法之一.自18世纪开展第一例实验睾丸移植至今已经历了近3个世纪,有关这方面的研究在不同领域都取得了长足进展,但涉及其中的诸多问题依然值得关注.现结合众多文献资料,就睾丸移植的历史、现状及展望作较全面的阐述.
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睾丸移植研究进展
睾丸移植是治疗高位腹腔型隐睾、男性性腺功能减退和男性不育重要而有效的方法.20世纪90年代以来,在吻合血管的自体、异体睾丸移植,睾丸组织移植和睾丸Leydig细胞移植几个不同领域都取得了较大进展,主要有:腹腔镜在自体移植中的应用、异体移植术后生精功能影响因素的研究、胎儿睾丸移植及精原干细胞移植等新技术的尝试.本文结合近年来的有关文献,就睾丸移植方面的研究进展作一综述.
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MEK抑制剂U0126对大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤的保护作用
目的:探讨大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤与细胞外信号调节激酶(ERK)表达的关系,以及MEK抑制剂(U0126)对移植睾丸的保护作用.方法:应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,将实验动物分为7组:①正常对照组;②冷灌注对照组;③假手术对照组;和应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型的④睾丸移植1组(移植后30 min取材);⑤睾丸移植2组(移植后1周取材);⑥U0126预处理1组(U0126预处理并在移植30 min后取材);⑦U0126预处理2组(U0126预处理并在移植1周后取材).Western blot法测定移植睾丸ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平,光镜和电镜下观察组织学改变,并应用放免法测定移植受体血清T、FSH、LH值.结果:各对照组间的ERK表达、组织学改变及生殖激素水平均无显著差异(P>0.05);睾丸移植1组ERK1、ERK2、pERK1及pERK2表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);U0126预处理1组ERK1和ERK2水平较睾丸移植1组无显著差异(P>0.05),而pERK1和pERK2水平显著低于睾丸移植1组(P<0.05);U0126预处理1组的组织学改变与正常对照组类似,但明显轻于睾丸移植1组;U0126预处理2组组织学损伤轻于睾丸移植2组,生殖激素水平与正常对照组无明显差异(P>0.05),但明显高于睾丸移植2组(P<0.01).结论:大鼠睾丸移植后植睾ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平明显升高,导致移植睾丸组织结构损伤和生殖激素分泌功能减退;U0126可通过抑制ERK1和ERK2磷酸化,减轻移植睾丸的早期出现的缺血再灌注损伤,短期内保护其生精功能,并维持其生殖激素水平.
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睾丸“门”的定位及临床解剖意义
目的 解剖定位睾丸“门”,观察其进出结构的形态位置分布,为睾丸移植提供依据.方法 解剖、测量、记录睾丸动脉、睾丸静脉、输精管及其伴行血管在皮下环和睾丸上端的压径及皮下环至睾丸上端的垂直距离,观察其位置关系.结果 进出睾丸“门”的结构在深环上方1.5 cm容易辨认,而入深环后位置关系不恒定.结论 将睾丸“门”定位在深环上方1.5 cm比较合适.
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同种异体睾丸移植1例的护理体会
2000年3月1日我院为1例外伤性无睾症患者施行了同种异体睾丸移植获得成功.术后3d,清晨较长时间勃起,经过多普勒血流测量仪及B超检测,移植睾丸血循环好,血供丰富,吻合血管通畅,移植的睾丸无明显肿胀疼痛,体温正常,刀口愈合好.术后40d出现急性排异反应,立即紧急处理,8d后恢复正常.术后50d痊愈出院.这在山东省尚属首例,现将护理体会总结如下.
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重视显微外科技术在男科手术中的应用
男性生殖系统为一精细管道系统,传统手术方式无法实现细小管道的精确吻合,一定程度上影响了手术的治疗效果.过去数十年,显微外科技术作为成熟的外科技术逐渐应用于各种男科手术中,成为男科手术的重要组成部分,极大地提高了男科手术的治疗效果.本文拟对显微外科技术在男科手术中的发展应用进行简要回顾,以促进显微外科技术在男科手术中的广泛应用.
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Bronsther副教授专题讲课纪要
美国纽约州立大学医学院副教授Brons-ther博士,于1981年8月应邀来北京儿童医院讲学,做了七次专题报告,摘述如下:一、小儿手术年龄问题1.隐睾:既往,小儿隐睾在9～12岁手术;后提早至5～7岁;目前公认的手术年龄是2岁以后.即使是单侧隐睾,如不治疗,患侧睾丸对健侧也是有害的.双侧隐睾如不治疗,70%不生育.对高位不能拉下的隐睾,尤是双侧,可用显微外科做睾丸移植.
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自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤模型的建立
目的:建立一种新的移植睾丸缺血再灌注损伤(IRI)的模型,为研究临床睾丸移植奠定实验基础.方法:20只健康成年雄性日本大白兔,采用分别夹闭一侧睾丸动脉上下方腹主动脉后,然后套管针穿刺夹闭间的腹主动脉行一侧睾丸HC-A灌注液灌注,至一侧睾丸变为苍白色后阻断该侧睾丸动脉血流.然后将该睾丸原位低温保存4 h后开放睾丸动脉,成功地建立兔自体原位移植睾丸的缺血再灌注的模型.结果:灌注前睾丸颜色为正常鲜红色,灌注后灌注侧睾丸变为苍白色.开放睾丸动脉血流后可见睾丸变为鲜红色.模型成功率为90％,睾丸热缺血时间为(5.0±1.5)min,冷缺血时间为240.0 min,腹主动脉阻断时间(12.5±2.5)min. 结论:建立了稳定、可行的自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤的模型,为研究睾丸移植的缺血再灌注损伤提供了可靠的研究平台.
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心理型基因动态性动物睾丸移植实验模式
中外许多学者社会调查表明,人类智力具有很大遗传性,但对其遗传机制尚不清楚.笔者经过探讨人类起源以来智力"由低级向高级,先缓慢后快速"进化,以及"智力在进化,体力在退化"两种奇特现象,提出"生理型基因高度稳性与心理型基因随机动态性"的新理论,认为人类在后天得到的体力、智力、耐力、毅力等心理性状完全可以遗传.为取得"心理型基因动态性"的有力科学证据,设计了犬睾丸移植育种的实验方法,并构思了"植睾遗传学"的新学科.
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同种异体睾丸移植1例报告
我院于1999年1月29日成功地做了1例同种异体睾丸移植。患者系重庆市垫江县人，男性，22岁，汉族，未婚，于15年前双睾被猪咬去，致外伤性的双侧睾丸缺如。入院时检查：患者无胡须，无喉结，皮肤细腻；生殖系统：无阴毛，幼稚型阴茎，阴茎长3.0cm、周径3.1cm，双侧阴囊未发育，内无睾丸，阴茎根部有瘢痕形成。实验室检查：睾酮(T)19.8ng/dl，孕酮(PRO)1.1ng/ml，泌乳素(PRL)15.1ng/ml，雌二醇(E2)21.1pg/ml，促黄激素(LH)39.2miu/ml，促滤泡激素(FSH)36.1miu/ml，其它常规检查均正常。于1999年1月29日在持续硬膜外麻醉下行同种异体睾丸移植术，将供者右侧睾丸的精索动脉、内静脉分别与受者右侧的腹壁下动、静脉作端-端吻合，供体的输精管与同侧受体的 输精管行对端吻合，由于阴囊未发育，钝性分离阴囊纵膈，将移植的一只睾丸放置在整个阴囊内。术后采用环孢素A4mg/kg*d、硫唑嘌呤50mg/d、强的松60mg/d，递减至20mg/d维持，三联免疫治疗方案，同时预防性地使用抗生素、抗凝剂、扩血管药物。术后第7d始每天出现阴茎勃起，持续时间3min左右。复查性激素：睾酮(T)56.1ng/dl，孕酮(PRO)0.1ng/ml，泌乳素(PRL)10.1ng/ml，雌二醇(E2)1.5pg/ml，促黄激素(LH)32.6miu/ml，促滤泡激素(FSH)38.8miu/ml。作彩色多谱勒超声检查：移植的睾丸形态、大小、血流均正常，2月15日出院。 讨论 睾丸移植是否成功，与手术和术后用药有密切的关系。我们的体会是：(1)取材：取睾时要尽量保留精索，好同时标明精索的动静脉，以便灌注和移植时识别；(2)灌注：采用低压灌注，灌注液量10～20ml；(3)吻合技术：血管和输精管吻合，要在放大镜下进行，保持吻合口通畅，避免血肿形成，因血肿形成后，会压迫精索，导致移植物血供障碍；(4)术后用药：睾丸移植较其他大脏器移植，出现排斥的机会较小，发生排斥反应的程度也较轻，故使用免疫抑制剂的剂量较小，使用时间也可较短；(5)排斥反应观察：观察指标有体温、局部体征、移植物血流情况、血流指数及性激素水平。出现排斥反应时体温升高，移植物疼痛，睾丸肿大，移植物血流减少，血流指数升高及睾酮下降，泌乳素升高，本例患者术后未出现排斥反应。
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成年大鼠皮下移植的幼年大鼠睾丸组织的发育和雄激素的分泌
目的 探索成年大鼠皮下微环境对移植的幼年SD大鼠睾丸中睾丸间质细胞存活、发育及雄激素分泌的影响.方法 将成年雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、去势组和未去势组.对照组大鼠不进行任何处理;假手术组大鼠去势后不进行睾丸移植;去势组大鼠于去势1周后行背部双侧睾丸移植手术,每侧移植1个5～7 d SD大鼠睾丸组织;未去势组直接在正常大鼠背部两侧各移植1个幼年SD大鼠睾丸组织.移植后第4周取材、称量移植睾丸组织质量,HE染色分析移植睾丸组织的组织学特点,免疫组织化学染色法检测移植睾丸组织中17β-羟基类固醇脱氢酶1 (HSD-17β1)表达和分布,同时采用ELISA检测受体血清睾酮水平.结果 去势组移植睾丸组织质量明显大于未去势组.去势组和未去势组均可见睾丸间质细胞,免疫组织化学染色发现去势组移植睾丸组织中HSD-17β1阳性细胞较未去势组多.ELISA分析发现对照组和未去势组的血清雄激素水平均高于假手术组和去势组,且去势组明显高于假手术组.结论 移植的幼年大鼠睾丸组织可在成年受体大鼠皮下进一步发育,形成的睾丸间质细胞还具备一定的雄激素合成和分泌功能.
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69例睾丸扭转诊断与治疗
目的 提高睾丸扭转诊断及治疗水平.方法 对69例睾丸扭转患者的临床资料进行回顾性分析.结果 8例12 h内手术者,睾丸均存活;6例12-24 h手术者,3例睾丸存活;39例超过24 h手术者仅7例睾丸存活.未手术者16例,随访7例扭转睾丸均发生不同程度萎缩,尚未发现生育能力受影响者.结论 早期诊断、及时治疗是提高疗效的关键.睾丸移植是治疗双侧睾丸扭转后功能性无睾症的一种有效方法.
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同种异体睾丸移植的性伦理思考
作为有效解决不育及性功能障碍等疾患的睾丸移植手术,在给患者带来福音的同时,也产生了一系列性伦理问题.它不仅涉及患者、睾丸供体的性快乐,也涉及供体妻子的性权利,更牵涉性行为的"成果"归属问题与子女的知情权.睾丸移植在解决中老年人性功能障碍之后,一些旧的性观念将受到影响,随之增多的老年人的性需求、再婚等问题亟须子女及时更新性现念.
