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HE切片染色不良问题的分析及改进措施
HE切片染色是病理科中制作组织切片常用的方法,其质量好坏直接影响病理诊断的准确性.通过统计2017年1月~2017年6月本科室所有的病理HE玻片,探讨HE切片染色常见的不良问题,对出现质量问题的进行总结和归纳.肉眼观察下的问题包括:切片有皱褶重叠,中性树胶溢出或不足形成气泡,切片呈现搓衣板样,组织有划痕或缺失;镜下观察的问题包括:切片染色模糊不清,核浆染色对比不清晰,切片有白色点状或云雾状不着色或色浅区域,切片有粉色片状异物污染.针对不同问题进行了原因分析并提出了改进措施,对今后病理科室提高HE切片染色技术起到了一定的指导意义.
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脑组织冰冻切片的表片体会
我院属教学医院,日常研究生课题较多,动物脑组织切冰冻切片亦较为常见.由于脑组织较细嫩,细胞少,尤其在做原位分子杂交时,往往要20~30 μm的厚切片,厚切片在表片时极易出现气泡、皱折等,严重影响切片质量.笔者在工作中经过长期的摸索,总结了几种表片的方法,能有效地解决气泡、皱折等问题,明显地提高了脑组织冰冻切片的质罱,现介绍如下.
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活检组织切片方法的改进
活体组织检查是病理解剖学及病理科的重要工作之一,通过活检提高医疗与医学科学水平.日常活检中手术切除的脏器、组织或肿瘤等组织种类不同,而外检切片制作一般采用快速脱水、透明和浸蜡的方法,使某些致密组织出现过硬现象.如:乳腺纤维瘤、子宫肌瘤等标本因处理不当,硬的象树根一样很难制出完整的切片,即使勉强切片也有横行波纹.为提高切片质量,我们经过长期的实践,探索出一种兼顾组织种类不同标本切片较理想的处理方法,报道如下.
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海南省基层医院病理常规制片质控现状及对策
病理诊断在医学的诊断及治疗中起着非常重要的作用.然而,病理诊断的准确性受到许多因素的影响,其中制片技术及质量至关重要.病理切片的质量控制是临床病理质量控制的关键环节和基础[1].规范的、优质的病理学技术是病理学正确诊断的基本保障[2].近年来,病理界甚为关注提高技术操作及质控标准化的工作,从人员配置、实验室建设、业务培训、技术交流、规范化操作等方面去提高技术操作的质量水平.根据病理切片质量评分标准[1],目前国内华东、华北、华南地区的二甲以上医院此项工作有了较好的普及发展,部分三甲医院已接近或达到国际先进水平.海南省几家三级医院在这方面的工作也有了较大的发展,但基层医院病理科在这方面的工作滞后,严重制约着基层医院病理诊断水平的提高与发展,以下就海南省基层医院病理制片质控现状及对策谈谈我们的认识.
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常规石蜡切片技术在高职医学检验技术专业病理实验教学改革中的应用
病理学是医学检验技术专业一门重要的基础医学课程,同时又是临床诊断疾病和手术检验的重要内容。掌握常见疾病的病理检验技术对医学检验技术专业的学生来说很重要,高职医学检验技术专业十分重视技能操作,培养技能型人才[1]。病理学实验课是病理学教学中必不可少的重要环节,长期以来病理学实验教学未能满足注重实际操作能力培养的需求,总是停留在传统的大体标本肉眼观察及 HE染色切片显微镜下观察,对病理学技术一无所知。常规石蜡切片技术是病理学、组织学实验教学中基本、使用广泛的技术方法之一,同时也是临床手术必不可少的诊断方法。将常规石蜡切片技术应用于高职医学检验技术专业的病理实验教学中,使学生掌握切片的制作过程和切片质量好坏的判断,从而让学生明白在观察切片时有很多假象并非病理现象。同时通过学生自己动手制作切片和阅片有利于调动学生的积极性、培养动手能力,并拓宽就业途径,增强工作竞争力[2]。
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浅谈苏木素的配置及使用
苏木素伊红染色在病理组织制片中占有很重要的位置,染色质量的优劣直接影响病理诊断的准确性.其中用于细胞核染色的苏木素染液是决定染色效果和切片质量为重要的因素之一.Harris苏木素是病理技术中经典、常用的染液,用于常规石蜡切片、冷冻切片、细胞学涂片等的HE染色制片.它具有现配现用,颜色鲜艳优点,深受大家喜爱.不足之处在于配制过程中过氧化程度不易控制,容易因过氧化而产生大量沉淀;使用过程中组织切片易被过氧化形成的颗粒沉淀和表层金属氧化薄膜所污染.这两个因素是影响染液染色效果和使用寿命的关键,所以,配制过程中的过氧化控制和使用过程中的防氧化控制至关重要.
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采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片
采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片,比普通石蜡切片刀的切片效果好,操作简便、快捷、省时、经济适用.光镜下组织结构完整无损,清晰透明,具有推广和应用价值, 本切片技术目前国内未见文献报导.1.材料和方法 1.1 材料沈勒公司产犀牛牌双面不锈钢刀片;日本羽毛公司产Mic rotome Holder;美国产AO型滑动式切片机;人体和各类实验动物不同组织 ,10%甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋.1.2 方法 1)先将刀架固定在滑动式切片机上 ,将固定刀片的压盖螺丝松开,取一双面刀片顺刀刃方向从中间剪断或折断,平行分开同时夹在刀架上,刀刃外留0.5~0.6mm的宽度,再将固定的螺丝紧靠.2)切片时刀锋下倾角调至1.5~2.0mm,刀架的平行角调至130~140度之间.3) 切片过程中应将粗切与细切所用的刀片各自专用.以便于节省刀片,保证切片质量.4)取片用小楷毛笔,当刀刃接触蜡块时,用毛笔尖抵住蜡片的起始端,随着进刀速度,把组织切片同步提起离开刀刃.2.结果用该刀片制作石蜡切片可达3μm,无颤痕,刀痕显著减少,镜下组织细胞结构完整,清晰透明,达到良好的染色诊断和观察的效果.3.讨论长期以来,石蜡切片大都采用双平面型的高碳钢切片刀,统称普通石蜡切片刀, 该刀在使用过程中弊端较多.凡用过一次就须磨一次.磨刀方法不当,会使刀刃损伤,切片刀痕多,既浪费时间,也影响染色和观察效果.我们采用双面刀片制作石蜡切片,既不用磨刀、被刀,操作也简便,省时省力,切片厚度一般在3~5μm.刀痕皱褶明显减少.从双面刀片与普通切片刀的切片效果对比看,普通切片刀的切片之刀痕皱褶高于双面刀片的一倍之多.从适用角度,我们对双面刀片的切片限量方面作了实验统计,每一刀片对小于2.5 cm2硬度不同的各种组织蜡块平均能切3块,连续性切片可切15~30张,因此,肯定此项切片技术不仅提高了切片质量也提高了切片的工作效率.其方法可行可靠.该特别提出的是用双面刀片制作石蜡切片很经济适用.每片双面刀片0.5元,进口单面一次性刀片18元,相当于36张双面刀片.36张双面刀片可切80~90块,若用单面刀片至少需4~6片.折价80~110元.几年来我们已将此技术应用于尸检、活检病理切片和制作教学切片及科研实验动物的石蜡切片工作中,取得了良好的实验效果.应提出的是,该刀片毕竟不是石蜡切片专用刀具,在使用过程中受到一些条件所限,所以操作时注意以下几方面:组织块宽度不能大于刀片的长度;组织固定脱水浸蜡必须充分;骨组织脱钙必须充分;刀刃外留宽度不能大于0.7mm,不小于0.6mm.
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苯和二甲苯混合剂与单纯二甲苯对组织块透明效果的比较
石蜡包埋术是组织切片中常用的技术,而组织脱水透明方法和程序对后续包埋及切片产生重大影响.二甲苯是普遍采用的一种透明剂,但是二甲苯很容易引起组织收缩、变脆、硬化,影响切片质量[1],为改善这一情况,有一些代替二甲苯的透明剂的报道[1-4],苯作为一种常用透明剂也被实验室采用,其特点是比二甲苯对组织收缩小,一般不会使组织过度硬化变脆,经我们将苯与二甲苯作透明效果对比,认为苯的透明效果明显优于二甲苯,且较二甲苯更适合作为透明剂在实验室使用,但苯在透明时间上要长于二甲苯,一般在3h以上,不利于快速切片,为此,我们将苯和二甲苯按一定比例混合作为透明剂,并与单纯二甲苯对几种软硬程度不同的组织的透明效果进行比较,取得了较好的效果.
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酵素水溶液在冰冻切片中的应用
目的分析探讨酵素水溶液在冰冻切片中的应用,探索能提高冰冻切片质量的方法。方法选用我院临床科室提供的各种系统组织100例,采用抽签分组法分为实验组(n=50)和对照组(n=50)。实验组采用酵素水溶液作为分化液,对照组采用1%盐酸乙醇溶液作为分化液,分析比较两组分化液的使用时间、所制切片质量及其稳定性。结果实验组的酵素水溶液使用时间明显大于对照组,比较差异有统计学意义(<0.05);实验组四种组织冰冻切片质量评分差异无统计学意义(>0.05),酵素水溶液为分化剂制作冰冻切片质量稳定;实验组冰冻切片的质量高于对照组冰冻切片的质量,差异显著,有统计学意义(<0.05)。结论酵素水溶液作为分化液制作冰冻切片能显著提高切片质量且质量稳定,值得推广使用。
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关于美国外科病理解剖学会淋巴瘤分会淋巴瘤病理诊断内容推荐报告的介绍
恶性淋巴瘤(Malignant lymphoma)的病理诊断是临床诊断中的主要难题之一.常由于病史不详、组织固定不当、切片质量不佳等因素,造成淋巴瘤的误诊.同时,由于淋巴瘤病理诊断报告内容的不规范,也会引起临床医生和病理医师之间的理解偏差.近,美国外科病理解剖学淋巴瘤协会(ADASP)对淋巴瘤病理诊断报告单中应包括的内容提出建议,同时建议将免疫表型、基因型等分子生物学信息纳入淋巴瘤的诊断病理报告中,希望能为各个实验室建立完整的淋巴瘤工作流程、解决淋巴瘤的病理诊断难题以及促进多方合作意识有所帮助.现将报告具体推荐内容介绍如下.
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石蜡切片机巧用的方法及体会
我科使用的是徕卡系列2245石蜡切片机,在日常工作中我们实践总结出利用切片机刀架与夹持器蜡块之间存在着的水平夹角,有效控制切片操作,更好的保护蜡块,提高切片质量.具体使用方法介绍如下.
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医用冷冻切片机的维护保养及常见故障应急处理
制作冰冻切片是目前医院临床病理诊断中常见的快速制片方法,冷冻切片机优良的性能可以满足低温下的切片需要,是医院病理科必备的设备。冷冻切片是借助低温使组织快速冻结,达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片,速冻可减小冰晶直径,避免组织细胞损伤。因此,冰冻切片质量的好坏直接影响病理诊断。
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影响冷冻切片质量的原因及改进方法
冰冻切片是一项特殊的病理制片技术,冷冻切片的质量直接关系到手术中能否迅速作出正确的病理诊断。我们病理科采用的SHANDON冷冻机,它的速冻装置可以在几分钟之内使温度下降至-50℃~60℃之间,不仅缩短了制作时间,而且可以有效地保证良好的切片质量,从而提高了病理诊断的准确率。我们在多年的切片制作中,总结了一些影响冷冻切片质量的因素及处理方法。
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常规病理制片流程注意事项
病理学诊断和技术被视为一辆车的两个车轮,缺一不可,互为依存,互相促进,两者的结合决定着病理工作的正常开展及发展进步,而过硬的病理技术是病理诊断的前提和基础,常规病理制片技术流程包括:取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片、贴签、归档等流程,每一步操作都关系着切片的质量。如果切片质量不好,病理诊断将很难做到准确,甚至还可能会导致误诊。多年来我们科室在常规病理制片技术上累积了丰富的经验,现将制片中常见的问题及相应解决办法归纳总结如下。