角鲨烯软胶囊的安全性毒理学评价

角鲨烯又名鲨烯,鲨萜,是一种高度不饱和烃类化合物,初由日本人Tsujimoto于1906年在黑鲨鱼肝油中分离得到,也是人类动物组织中早发现的烃类化合物.多年来的研究发现,角鳖烯作为一种脂质不皂化物,广泛分布于生物体中,但目前,角鲨烯主要的来源依然是深海鱼类[1].各方面的研究表明,角鲨烯具有较强的生物活性,在血液中输送活性氧的能力很强,可增强机体生理功能,提高免疫力,还可帮助抵抗紫外线伤害,是性能优良的血液输氧剂和生物抗氧化剂.其用途多种多样,广泛应用于医药、美容、化妆品、保健食品等领域[2].为了解角鲨烯作为保健食品长期食用的安全性,本研究依照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)对其食用安全性进行评价.

MF59佐剂增强热灭活卡介苗的免疫原性

目的 研究MF59佐剂[一种由角鲨烯、山梨糖醇三油酸酯(Span85)、吐温80和柠檬酸缓冲液组成的水包油乳剂]对热灭活BCG(hBCG)免疫小鼠诱导免疫应答的影响,验证自制MF59增强hBCG诱导细胞免疫反应的作用.方法 BALB/c (SPF级)小鼠分成A～G组,每组8只,于第0、2、4周皮下注射0.2 ml MF59、低剂量hBCG(0.025 mg/ml)、中剂量hBCG(0.25 mg/ml)、高剂量hBCG(2.5 mg/ml)、MF59+低剂量hBCG、MF59+中剂量hBCG、MF59+高剂量hBCG.末次免疫2周,解剖小鼠.取小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞,并在体外经BCG PPD刺激培养,ELISA检测培养上清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、Ib-2、IL-4、IL-12含量,酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测脾细胞分泌IFN-γ、IL-2和IL-4的斑点形成细胞数(SFCs).所有试验组的平均值比较采用一元方差分析、每两组平均值比较采用小显著差异法,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 MF59作为高剂量hBCG的佐剂(G组)免疫小鼠,其脾细胞体外经BCG PPD刺激培养,分泌IFN γ的SFCs[(151.3±66.6)个]、IL-2的SFCs[(247.8±58.0)个]和IL-4的SFCs[(65.8±24.6)个]显著高于其他组[其他组IFN-γ、IL-2和IL-4的SFCs的高平均值分别为(30.4±13.0)个、(37.1±10.8)个和(16.4±9.7个)](分泌IFN-γ的SFCs比较,t=3.2,P=0.007;分泌IL-2的SFCs比较,t=3.6,P=0.003;分泌IL-4的SFCs比较,t=3.0,P=0.01).MF59与不同剂量hBCG联合免疫小鼠,其腹腔巨噬细胞体外经BCG PPD刺激培养,培养上清IL-1β水平分别为(663.3±177.5) pg/ml、(813.8±193.4)pg/ml和(742.3±316.1)pg/ml,均显著高于A、B和C组[分别为(104.7±65.8)pg/ml、(82.9±54.8) pg/ml和(66.5±53.5) pg/ml](E、F和G与A组比较:t=2.9,P=0.01;t=3.5,P=0.004;t=2.5,P=0.031.E、F和G与B组比较:t=3.1,P=0.007;t=3.6,P=0.003;t=2.6,P=0.024.E、F和G与C组比较:t=3.0,P=0.01;t=3.5,P=0.004;t=2.5,P=0.031).A、C和G组小鼠的腹腔巨噬细胞体外经BCG-PPD刺激培养,培养上清IL-12水平[分别为(36.3±20.5)pg/ml、(94.5±20.6)pg/ml和(128.2±54.6) pg/ml]均显著低于E和F组[(545.7±97.2) pg/ml和(665.5±295.4) pg/ml](A、C和G组与E组比较:t=-5.1,P=0.000;t=-4.5,P=0.000;t=-3.7,P=0.002.A、C和G组与F组比较:t=-4.4,P=0.001;t=-3.7,P=0.002;t=-2.9,P=0.012).结论 MF59与高剂量hBCG联合免疫小鼠,可以增强脾细胞体外分泌BCG-PPD特异的IFN-γ、IL-2和IL-4;MF59与低、中剂量hBCG联合免疫小鼠,可以增强腹腔巨噬细胞体外分泌BCG-PPD特异的IL-1β和IL-12.

毛细管气相色谱法测定角鲨烯保健品的纯度

本文采用BPX-70(25m×0.33mmId×0.2mmdF)毛细管色谱柱;以线速度为25cm/min的N2为载体;分流比为1:40;汽化室温度:220℃;柱室温度:程序升温100℃恒温3min,10℃/min至250℃.取角鲨烯样品50mg溶入2ml石油醚中,取0.2μl注入气相色谱仪分析.用色谱峰面积归一法进行定量计算.

超声波辅助提取甘草角鲨烯及粗脂肪成分分析

确定甘草中角鲨烯的超声波辅助佳提取条件,并分析甘草粗脂肪的组成.方法　分别研究了料液比、浸泡时间、超声温度、超声时间对角鲨烯得率的影响,采用L9(34)正交试验,对提取工艺进行优选；并采用气相色谱-质谱法(GCMS)分析了甘草粗脂肪的组成.结果　甘草角鲨烯的佳提取工艺为料液比1:15,浸泡时间10 h,超声时间50 min,超声温度50℃；甘草粗脂肪中共分离鉴定出26种成分,角鲨烯含量0.8％.结论　超声法操作简便,开发和利用甘草粗脂肪中的角鲨烯具有较好的社会效益和经济效益.

角鲨烯对抑郁模型小鼠行为学及谷氨酸毒性通路相关蛋白的影响

考察角鲨烯对慢性轻度不可预见刺激模型小鼠行为学及其谷氨酸毒性通路相关蛋白的影响.采用13种不同刺激[食物剥夺、噪音、闪光、热刺激(45℃)、制动、冷冻(4℃)、摇晃、湿笼、夹尾、饮水剥夺、游泳、电击和异物]对雄性BALB/C小鼠连续刺激35天建立慢性轻度不可预见应激模型.从第3周开始连续灌胃给予3个剂量的角鲨烯(80、40和20 mg.kg-1.d-1)3周后,测定各组小鼠行为学变化,采用反相HPLC法测定海马谷氨酸(glutamate,GLU)含量,分光光度法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,取海马组织进行蛋白免疫印迹方法测定N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基ε-2(N-methyl-D-aspartate receptor subunits epsilon-2,NMDAε2)、钙调蛋白激酶Ⅱ (calmodulin kinase Ⅱ,CaMK Ⅱ)和神经性一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,NOS1)蛋白的表达.与模型组比较,角鲨烯能增加抑郁模型小鼠的体重、糖水偏好率和水平运动和垂直运动次数(P＜0.05),缩短悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间(P＜0.05),降低海马GLU和MDA含量(P＜0.05),升高SOD、GSH-Px活力(P＜0.05),下调海马NMDAε2、CaMK Ⅱ和NOS1蛋白的表达(P＞0.05).综上所述,角鲨烯对抑郁模型小鼠表现出明显的抗抑郁作用,在此过程中引起的氧化应激降低和GLU-NMDAε2-CaMKⅡ-NOS1通路相关蛋白下调可能与其抗抑郁作用有关.

汤臣倍健:品牌再出征

长时间的谈话让汤晖的喉咙有些发痛,他放嘴里咬破了一颗角鲨烯软胶囊,长年的习惯让这个动作非常自然,作为经营膳食营养补充剂行业多年的专业制造者,传递给消费者健康理念的时候,首先具备的是自身对健康理念的专业理解及对产品的笃定信心.汤晖是广东汤臣倍健科技股份有限公司（以下简称汤臣倍健）的董事总经理.

乌桕叶化学成分研究

目的 研究乌桕叶化学成分.方法 采用多种色谱方法,对乌桕叶体积分数95％乙醇提取物的石油醚、正丁醇部位成分进行分离纯化,根据波谱学数据以及理化性质鉴定化合物的结构.结果 得到12个化合物,分别为角鲨烯(1)、3β-羟基-粘霉-5-烯(2)、秦皮素(3)、无羁萜(4)、β-谷甾醇(5)、没食子酸乙酯(6)、槲皮素(7)、5-羟甲基糠醛(8)、blumenol C glucoside(9)、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖苷(10)、1 '-O-benzyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1”-6’)-β-D-glucopyranoside(11)、莽草酸(12).结论 化合物1～3,8～12为从该植物中首次分离得到.

鬼箭羽化学成分的研究Ⅱ

目的 研究鬼箭羽(Euonymus alatus)的化学成分.方法 采用硅胶,Sephadex LH-20,大孔树脂,制备高效液相色谱仪等柱色谱及重结晶等方法分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定化合物的结构.结果 从中分离得到8个已知化合物分别为:雷公藤内酯甲(1),槲皮素(2),苯甲酸(3),何帕-22(29)-烯-3β-醇(4),5-羟甲基糠醛(5),咖啡因(6),角鲨烯(7),正二十五烷(8).结论 化合物4-8为首次从该植物中得到.

气相色谱法测定角鲨烯的含量

目的:用气相色谱内标法测定角鲨烯及其制剂中角鲨烯的含量.方法:采用气相色谱法,以甲基硅氧烷(OV-17)为固定相,涂布浓度为2%,载体为ChromosorbWAW80-100目的气相柱.柱温为250℃.结果:平均回收率为99.38%,RSD为0.60%.结论:该法操作简便、准确、重现性、稳定性好,可作为角鲨烯的含量测定方法.

广金钱草挥发油基于TRP通道的抗炎作用研究

目的 筛选广金钱草挥发油抗炎作用的关键化学成分及靶标蛋白.方法 采用水蒸气蒸馏法提取广金钱草中的挥发油,通过气相色谱-质谱联用法鉴定其化学成分,采用峰面积归一化法测定其化学成分的相对含量.基于中药系统药理学技术平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)建立小分子配体库,借助Swiss Target Prediction在线进行反向靶标预测,通过KOBAX 3.0筛选抗炎通路,采用分子对接技术(SYBYL2.1)将关键小分子与瞬时受体电位(TRP)通路中的靶标蛋白进行能量匹配,基于Cytoscape 3.5.1构建化学成分-靶标网络模型.结果 从广金钱草挥发油中共检测出48个色谱峰,通过质谱库及文献检索确定33种化合物结构,占挥发油总量的90.1％.关键化学成分17个,共筛选出88个靶标蛋白,TRP通路包括11个潜在靶标.分子对接发现叶绿醇、三十一烷、法尼基丙酮和角鲨烯等为广金钱草挥发油发挥抗炎作用的关键化学成分.TPRV1、PRKCB和PRKCD为抗炎关键靶标蛋白.结论 初步筛选了广金钱草挥发油抗炎的关键靶点及活性成分,为其产品的开发和应用提供理论依据.

甘草综合利用中角鲨烯的提取工艺研究

目的:提取甘草中抗癌活性物质角鲨烯,对提取溶剂、提取方法及工艺参数进行选择优化.方法:以浸膏得率和角鲨烯含量为评价指标,对提取溶剂和提取方法进行选择,并通过单因素实验和正交试验对实验参数进行优化.结果:以石油醚为提取溶剂,采用超声波法,在50℃下超声处理40min.在此条件下,浸膏得率为0.78％,浸膏中角鲨烯含量为0.33％.结论:超声波法提取简便易行,优化后的工艺能有效提取甘草中的角鲨烯,为甘草综合利用提供了依据.

RP-HPLC法测定柴胡中角鲨烯含量

目的:建立柴胡中角鲨烯含量测定的高效液相分析方法.方法:采用ODS-C8色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶乙腈-40:60,检测波长为203 nm.结果:柴胡药材中角鲨烯含量为0.104 mg/g,在进样量0.2064～6.1920μg范围内呈良好线性关系(r=0.9994),平均回收率为100.78％,RSD为1.13％(n=6),重复性RSD=1.60％,精密度RSD=0.27％.结论:该方法准确可靠,可用于角鲨烯含量测定.

酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对甲型肝炎和乙型肝炎抗原诱导小鼠体液免疫应答的增强作用

目的 探讨酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对甲型肝炎(简称甲肝)和乙型肝炎(简称乙肝)抗原诱导小鼠体液免疫应答的增强作用,并对皮下和鼻腔接种的免疫效果进行比较.方法 将酵母多糖与角鲨烯按一定比例混合,制成复合佐剂,将不同剂量的复合佐剂与HBsAg混合,并设生理盐水对照组、HBsAg对照组、铝佐剂对照组和酵母多糖对照组,均经皮下免疫ICR小鼠1次,分别于免疫后2、4、8、16周,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HBsAg IgG抗体水平,筛选复合佐剂的佳免疫剂量.以复合佐剂的佳免疫剂量与甲肝抗原混合,并设生理盐水对照组、甲肝抗原对照组、铝佐剂对照组和酵母多糖对照组,均经皮下免疫ICR小鼠1次,分别于免疫后2、4、8周检测小鼠血清中抗甲肝抗原IgG抗体水平.以复合佐剂佳免疫剂量分别与HBsAg和甲肝抗原混合,并设生理盐水对照组、HBsAg对照组和甲肝抗原对照组,经鼻腔免疫ICR小鼠,共免疫3次,间隔2周,分别于末次免疫后4、8周检测小鼠血清中抗HBsAg和甲肝抗原IgG抗体水平.在试验期间,对小鼠的健康状况进行观察,并对小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织进行病理分析.结果 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HBsAg的佳免疫剂量为2 mg酵母多糖+8μl角鲨烯,该组抗体水平明显高于铝佐剂对照组和酵母多糖对照组(P＜0.05)；复合佐剂对甲肝抗原也有较好的体液免疫增强作用,抗体水平显著高于铝佐剂对照组和酵母多糖对照组(P＜0.05)；复合佐剂通过鼻腔免疫,对HBsAg和甲肝抗原的体液免疫应答也有增强作用,但效果不如皮下免疫,甲肝抗原鼻腔免疫效果优于HBsAg(P＜0.05).在试验期内,小鼠均未出现异常反应,各器官均未发生病变.结论 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂能显著增强甲肝和HBsAg抗原对小鼠的体液免疫应答,免疫效果优于铝佐剂；皮下免疫效果优于鼻腔免疫；在免疫剂量范围内,复合佐剂安全性良好.

气相色谱法同时测定人血清中角鲨烯和5种非胆固醇类固醇的报告

目的:建立气相色谱-氢火焰离子化检测器同时测定人血清中角鲨烯及2,4-脱氢胆甾烷醇、7-烯胆甾烷醇、菜油固醇、豆固醇和β-谷固醇等5种非胆固醇类固醇的分析方法,为了解患者胆固醇代谢个体差异提供检测手段.方法:通过碱性醇溶液皂化、正己烷提取、硅烷化试剂衍生等步骤对血清样品进行前处理.选用以下条件检测:HP-5石英毛细管柱(30 m×0.32mm×0.25μm);初始柱温150℃,保持3 min,程序升温速率30℃/min至250℃,再以5℃/min升至280℃,保持30 min;氢火焰离子化检测器(FID)温度290℃;进样口温度290℃;进样口压力:15 psi;不分流模式;进样1μL.结果:角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇、7-烯胆甾烷醇、菜油固醇、豆固醇和β-谷固醇的检出限分别为0.011 mg/dL,0.0058mg/dL,0.018mg/dL,0.0089mg/dL,0.047mg/dL,0.018 mg/dL;加标回收率分别为在95～102%之间,日内变异系数为0.98%～2.71%(n=5),日间变异系数为1.26%～5.83%(n=5).结论:气相色谱-氢火焰离子化检测法可同时测定人血清中角鲨烯和5种非胆固醇类固醇,并具有良好的准确度和精密性,12h内的稳定性好,可用于患者胆固醇代谢个体差异分析.

角鲨烯对硝酸羟胺中毒小鼠网织红细胞计数和脾脏含铁血黄素沉积的影响

目的观察角鲨烯对硝酸羟胺中毒小鼠网织红细胞、脾脏含铁血黄素沉积的影响.方法ICR雄性小鼠硝酸羟胺1/2 LD50染毒,每天1次,连续染毒3 d,角鲨烯130mg/kg灌胃给药治疗1周,染毒后第2、4、6、8天小鼠尾静脉取血煌焦油染色计数网织红细胞,第8天处死小鼠观察脾脏中含铁血黄素沉积情况.结果角鲨烯可抑制硝酸羟胺染毒后网织红细胞以及脾脏含铁血黄素沉积的显著增多.结论角鲨烯对硝酸羟胺中毒小鼠具有一定的治疗作用.

气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯含量

目的 建立角鲨烯软胶囊中角鲨烯的气相色谱测定方法.方法采用气相色谱内标法,FID检测器,硅酮OV-17填充柱(2 m×3.2 mm),柱温250 ℃,进样口温度280℃,监测器温度300 ℃.结果 角鲨烯在1.2～19.2 μg内呈良好的线性关系,加样回收率为99.8%.结论 该方法简单可靠,精度高,适用于角鲨烯软胶囊中角鲨烯的含量测定.

角鲨烯的生物意义及其应用

1 角鲨烯的生物合成在生物体内,由乙酰辅酶A开始,经二羟基-甲基戊酸→角鲨烯→羊毛固醇→麦角固醇→胆固醇.在合成上,角鲨烯闭环生成固醇环,后合成胆固醇,作为细胞膜结构的组分.在表皮内,存在一定量固醇衍生物,即维生素D3前体,经紫外线照射转化为维生素D3.角鲨烯是机体内脂质代谢的中间产物,在所有脏器内仅瞬间存在,难以发现,若给以阻止固醇环闭环的阻制剂,则在皮肤表面可大量检出(见表1表2).

前列通软胶囊的质量标准研究

前列通软胶囊为我所研制的用于治疗前列腺增生和前列腺炎的5类新药,由南瓜子等药味经提取分离得到的有效部位制成,具有抗炎止痛、抑制前列腺增生的作用[1,2].

角鲨烯提高人类生命质量的奥秘

地球表面积的70%是海洋.21世纪将是海洋生物科学的世纪.随着海洋生物技术的发展,越来越多具有防病治病作用的海洋生物活性物质,在海洋生物中被发现和利用,角鲨烯便是其中之一.

B33-20 角鲨烯发酵生产的研究