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  • 白桦脂醇对阿霉素所致大鼠心脏损害保护作用的研究

    作者:刘璐;任艳红;张洁;李猛

    目的 研究白桦脂醇对阿霉素(ADMiamycin,ADM)所致大鼠心脏损害的保护作用.方法 将60只大鼠随机分成正常对照组、ADM模型组和白桦脂醇治疗组.苏木素-伊红(HE)染色检测心肌组织病理,测定比较各组大鼠心率(heart rate,HR)、左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)、左室内压大上升速率(+dp/d tmax)、左室内压大下降速率(-dp/d tmin)、血清肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、超敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,Hs-CRP)、B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、血浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平.免疫染色组化法测定并比较各组大鼠心肌细胞凋亡率、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphonma/leukemia gene 2,Bcl-2)和Bcl-2相关基因X(Bcl-2 Associated X protein,Bax)表达.采用传统阳性染色细胞计数的方法对各组大鼠染色阳性细胞进行计数评分.结果 与对照组和白桦脂醇组相比,模型组大鼠心功能指标降低,血清cTnI、CK、Hs-CRP、BNP、LDH和MDA水平升高,SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05).对照组和白桦脂醇组大鼠心肌细胞凋亡率与细胞Bcl-2表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),心肌细胞Bax表达高于模型组(P<0.05).模型组阳性细胞染色评分均高于对照组和白桦脂醇组.结论 白桦脂醇对阿霉素诱导的大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能白桦脂醇抑制氧化应激相关.

  • 白桦脂醇对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及相关蛋白酶基因的调控机制研究

    作者:张丽宏;熊辉;胡中花;刘国良;徐红丹;张宁;李建民

    目的:研究白桦脂醇对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)相关抗衰老基因 mRNA 的调控作用,探讨白桦脂醇对皮肤皱纹的修复机制。方法将细胞分为空白对照组,雌二醇组,白桦脂醇高、中、低剂量组。采用MTT法测定各组细胞活力,RT-PCR法测定各组细胞中Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白(collagen, Col)、基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP)1和2、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1, MMP-1)mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,雌二醇组与白桦脂醇中剂量组细胞增殖率[(0.455±0.037)、(0.445±0.040)比(0.385±0.601)]增高(P<0.05);ColⅠmRNA[(0.960±0.012)、(0.929±0.015)比(0.842±0.014)],Col Ⅲ mRNA[(0.892±0.009)、(0.824±0.022)比(0.768±0.025)]、TIMP-1 mRNA[(0.938±0.026)、(0.878±0.035)比(0.796±0.022)]、TIMP-2 mRNA[(0.557±0.025)、(0.506±0.036)比(0.436±0.063)]表达水平均升高(P<0.01)。结论白桦脂醇通过促进细胞增殖,提高Col合成及相关蛋白酶的表达等途径发挥对皱纹的修复作用。

  • 白桦脂醇的体内抗肿瘤作用及机制

    作者:宋添添;牟瑛;张桂英

    目的:研究白桦酯醇的体内抗肿瘤作用及机制。方法:采用小鼠肝癌细胞(H22)建立荷瘤小鼠动物模型,白桦脂醇灌胃10 d后,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数;MTT法测定小鼠T淋巴细胞转化功能及NK细胞杀伤活性。结果:白桦脂醇三个剂量组、阳性对照组瘤重均减轻,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),中剂量组抑瘤率高;三个剂量组脾指数与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),中、高剂量组与阴性对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05);中剂量组胸腺指数与阴性、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);中剂量组T淋巴细胞转化率与阴性对照组和阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组在效靶比为25∶1时,NK细胞杀伤活性高于阳性对照组(P<0.05),在效靶比为100∶1,杀伤活性高于阴性对照组(P<0.05);中剂量组在效靶比为25∶1、50∶1、100∶1时,NK细胞杀伤活性均同时高于阴性对照组和阳性对照组(P<0.05);高剂量组在效靶比为25∶1时,NK细胞杀伤活性高于阴性对照组和阳性对照组(P<0.05)。结论:白桦脂醇通过刺激激活免疫器官,提高T淋巴细胞转化功能、提高NK细胞杀伤活性来抑制肿瘤细胞增殖。

  • 白桦脂醇通过ER/MAPK信号通路对A375细胞黑素合成及机制

    作者:单孟瑶;崔悦;雷霞;刘海洋;董蕊;李庆伟;张宁;耿放

    目的:研究植物雌激素成分白桦脂醇及加入受体阻断剂(ICI182780)后对A375细胞的黑素合成及机制的影响.方法:将1 μmol· L-白桦脂醇作用于A375黑素细胞,实验分为空白组(DMEM完全培养液),雌二醇组(1×l0-3μmol· L-1),白桦脂醇组(1 μmol·L-1),白桦脂醇+ICI182780组(1μmol· L-1+1 μmol· L-1).用NaOH裂解法检测黑素含量、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)测定雌激素受体/丝裂原激活的蛋白激酶(ER/MAPK)通路中关键蛋白激酶p38 MAPK,ERβ,c-Jun氨基末端激酶(JNK),细胞外信号调节激酶2(ERK2)和小眼畸形相关转录因子(MITF),酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的蛋白及其mRNA表达.结果:与空白组比较,白桦脂醇组和白桦脂醇+ ICI182780组对A375细胞黑素合成有显著抑制作用(P<0.01);1μmol· L-1的白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达有不同程度的抑制作用(P <0.05,P<0.01),对ERK2,MITF,TRP-1 mRNA的表达也有不同程度的抑制作用(P<0.05,P<0.01).与白桦脂醇组比较,ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞黑素合成的抑制作用(P<0.01);ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达的抑制作用及对ERK2,MITF,TRP-1 mRNA的表达的抑制作用(P <0.05,P<0.01).结论:白桦脂醇能够通过ER/MAPK信号通路下调MITF,TYR,TRP-1及TRP-2蛋白表达量,从而减少黑素合成.

  • 白桦脂醇对A375细胞黑素合成及相关细胞信号通路调控机制的研究

    作者:闫姝;牛春影;徐红丹;熊辉;陈巧云;耿放;张宁

    目的:探讨白桦脂醇治疗黄褐斑的内在作用机制.方法:选择对数生长期的A375细胞,培养24 h,弃掉液体,然后分组并加入不同浓度药液200 μL,组别设定为空白组、雌二醇组(1×10-3μmol·L-浓度的雌二醇)和白桦脂醇组(设定浓度的白桦脂醇),每组均设置6个复孔.用白桦脂醇干预A375细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;NaOH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测TYR,酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的表达,及丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路中关键蛋白激酶ERK1,ERK2,JNK2的mRNA表达.结果:与空白组比较,白桦脂醇在1,1 ×10-1,1 ×10-2,1 ×10-3 μmol·L-1剂量下可明显抑制A375细胞黑素合成及TYR活性,1 μmol·L-白桦脂醇可明显下调A375细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA表达,以及ERK1,ERK2,JNK2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01).结论:白桦脂醇可能是通过抑制TYR活性和/或下调TYR,TRP-1及TRP-2 mRNA表达,抑制了A375细胞中黑素的合成,并且这种作用与抑制ERK1,ERK2,JNK2的基因表达有关.

  • 白桦脂醇拮抗地塞米松诱导成骨细胞内脂质积聚影响细胞凋亡的实验研究

    作者:魏波;宋丽君;祝兆波;郭伟雄;林颢;孙欣;牛艳茹;郑锦畅;李广盛

    目的 观察白桦脂醇和地塞米松共同作用于小鼠MC3T3-E1细胞后,内源性脂质蓄积与细胞凋亡中的关系.方法 以MC3T3-E1细胞为研究对象,采用白桦脂醇和地塞米松共同作用于MC3T3-E1细胞,测定细胞内甘油三酯含量;NileRed荧光染色观察脂质蓄积情况;流式细胞技术测定成骨细胞凋亡率;ELISA法检测Caspase-3酶活性;采用Spearman等级相关进行脂质含量与成骨细胞凋亡相关性分析.结果 白桦脂醇和地塞米松共同作用于小鼠MC3T3-E1细胞后,0.5μmol/L地塞米松(B组)与1.0 μmol/L地塞米松组(C组)较空白组(A组),细胞凋亡率、Caspase-3酶活性均明显增高(P<0.05),细胞内甘油三酯含量明显增加.2.0 μg/ml白桦脂醇作用细胞后,地塞米松所致的细胞凋亡率上升与Caspase-3酶活性升高受到明显抑制,同时细胞内的甘油三酯蓄积降低.Spearman等级相关分析表明地塞米松诱导后的成骨细胞内脂质含量与细胞凋亡率呈正相关,r =0.412,P<0.05.结论 白桦脂醇可显著减轻地塞米松诱导的成骨细胞内脂质蓄积,降低细胞凋亡率;提示地塞米松所致细胞凋亡至少部分与细胞内脂质蓄积有关.

  • 野生余甘子树皮的化学成分研究

    作者:杨鑫;梁锐君;洪爱华;王一飞;岑颖洲

    目的 研究野生余甘子Phyllanthus emblica树皮的化学成分.方法 利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20等方法分离纯化,并结合其理化性质及波谱数据鉴定化合物结构.结果 从余甘子树皮的95%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为羽扇豆醇(1)、豆甾醇(2)、β-胡萝卜苷(3)、β-谷甾醇(4)、白桦脂醇(5)、没食子酸乙酯(6)、没食子酸甲酯(7)、3,4,3'-三氧甲基鞣花酸(8)、羽扇豆烷-20(29)-烯-3β,16β-二醇(9)、3-甲氧基鞣花酸-4'-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(10)、没食子酸(11)、吡喃酮[3,2-b]吡喃-2,6-二酮(12)、没食子儿茶素(13)、表没食子儿茶素(14)、3,3'-二甲氧基鞣花酸-4'-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(15)、3,4,3'-三甲氧基鞣花酸-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16).结论 化合物12为一新天然产物,化合物9、15为首次从该属植物中分离得到,化合物2、5、8、10、16为首次从该植物中分离得到.

  • 簇花清风藤的化学成分研究

    作者:黄艳;李齐修;刘元;宋志钊;文志云;刘布鸣

    目的 研究簇花清风藤Sabia fasciculata枝叶的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备液相等多种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.结果 从簇花清风藤枝叶95%乙醇提取物中分离鉴定了15个化合物,其中7个五环三萜类化合物:3-氧代-12-烯-28-齐墩果酸甲酯(1)、白桦脂醇(2)、3-氧-△11,13(18)-齐墩果二烯(3)、齐墩果酸(4)、imberic acid (5)、拟人参皂苷RP1 (6)、竹节参苷Ⅳa (7);3个黄酮类化合物:槲皮素(8)、芦丁(9)、mutabiloside (10);3个生物碱:5-氧阿朴啡碱(11)、N-p-阿魏酰酪胺(12)、N-反式香豆酰酪胺(13);2个甾体类化合物:β-谷甾醇(14)、β-胡萝卜苷(15).结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物1、5、6、7、10为首次从该属植物中分离得到.

  • HPLC-MS法同时测定酸枣仁中9种成分

    作者:张巧月;杨浩天;史贺;张智勇;张兰桐

    目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素、白桦脂酸、白桦脂醇、芦丁、芹菜素、橙皮苷、柚皮苷的量.方法 采用Sapphire C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以水(1 mmol/L乙酸铵-0.1%的甲酸)-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1 mL/min,进样量10μL,柱温30℃;采用电喷雾离子源进行负离子模式监测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析,源喷射电压为-4 500 V,离子源温度为650℃.结果 9种成分的峰面积和质量浓度在测定质量浓度范围内均具有良好的线性关系,加样回收率为98.04%~101.5%,精密度RSD值为0.03%~0.74%.结论 本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于酸枣仁中9种化学成分的测定.

  • 女贞子用于防病与食疗

    作者:芳子

    女贞子为木樨科植物女贞的干燥成熟果实,味甘,苦,性凉,归肝肾二经。女贞子中含有齐墩果酸、女贞子酸、女贞苷、熊果酸、硬脂酸、油酸、甘露醇、白桦脂醇、磷脂以及糖类如女贞子多糖、阿拉伯糖、葡萄糖等,还含有15种氨基酸,11种微量元素及挥发油等。
      近年研究认为女贞子有降血糖及降血脂并有抗动脉粥样硬化作用,还有抗菌、抗病毒作用,女贞子煎剂对金黄色葡萄球菌,福氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有抑制作用。对B型腺病毒有中等度抑制作用。

  • 白桦脂醇对大鼠酒精性肝损伤保护作用

    作者:张桂英;吴光健;王宝贵;狄英波;龚守良;赵刚

    目的 观察白桦脂醇对大鼠酒精性肝损伤的抗氧化作用.方法 将大鼠随机分为6组,正常组、低剂量组、中剂量组、高剂组量、阳性对照组(益肝灵组)和模型组.采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模式,给予白桦脂醇保护.测定肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性和还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,同时进行肝脏的病理切片观察.结果 高剂量白桦脂醇组中SOD、GSH-Px和GST活性和GSH含量明显升高,MDA含量明显降低,和模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).阳性对照组可明显提高酒精性肝损伤大鼠肝组织中SOD、GSH-Px、GST活性和GSH含量,明显降低MDA含量,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).高剂量白桦脂醇还能明显改善由酒精引起的肝组织脂肪样变和坏死.结论 白桦脂醇能抑制酒精诱导脂质过氧化反应对肝组织的损伤,对酒精性肝损伤有明显的保护作用.

  • 文冠果果柄的化学成分

    作者:李巍;李铣;李占林;张鹏;许婧;汪毅

    目的首次研究文冠果果柄的化学成分.方法采用大孔树脂、硅胶柱色谱分离化学成分,IR、1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定.结果从文冠果果柄95%(ψ)大孔树脂乙醇(ψ=95%)洗脱物中分离鉴定了6个化合物,分别为β-谷甾醇(β-sitosterol Ⅰ)、α-菠甾醇(α-spinaste-rolⅡ)、白桦脂醇(betulinⅢ)、21-O-angeloyl-R1-barrigenolⅣ、21,22-O-di-angeloyl-R1-barri-genol Ⅴ、胡萝卜苷(daucosterol Ⅵ).结论化合物Ⅲ首次从本属植物中分得.

  • 白桦脂醇脂质体的制备及其制剂学研究

    作者:韩雪冰;于莲;乔越;张灵芝

    目的:制备白桦脂醇脂质体,优化其工艺并进行制剂学研究.方法:采用薄膜分散法制备白桦脂醇脂质体.进行单因素考察并采用L9(34)正交试验优化工艺.结果:佳制备处方为白桦脂醇16mg,卵磷脂80mg,胆固醇35mg,PBS pH为7.0.由此制备的白桦脂醇脂质体溶液为乳白色半透明液体,观察到其脂质体为类球形粒子,形态圆整,分布均匀,平均粒径为200 ~ 500nm,ζ电位为-25 mv,包封率为43%,载药量为1.22%,体外释放试验结果表明其具有一定的缓释作用.结论:薄膜分散法制备白桦脂醇脂质体粒径较小,方法简便,重复性高,适用于白桦脂醇脂质体的制备.

  • HPLC-DAD法同时测定酸枣仁皂苷中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸、白桦脂醇

    作者:曹相兰;周雯;谢宪斌;孟飞;符敬伟;乔卫

    目的 采用HPLC-DAD法同时定量测定酸枣仁皂苷中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸、白桦脂醇.方法 酸枣仁以甲醇提取,采用Agilent TC-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,体积流量1 mL/min,运行时间120 min,检测波长204 nm,柱温35℃.结果 4种成分的进样量与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 0);加样回收率为99.2% ~ 100.2%.结论 经方法学验证,所采用的测定方法准确稳定,灵敏度高,可作为酸枣仁皂苷多指标定量测定方法.

  • 脂肪酸通过固醇调节元件结合蛋白1诱导足细胞的损伤

    作者:仇丽茹;唐锦辉;周建华;Moshe Levi

    目的:确定脂代谢和固醇调节元件结合蛋白在糖尿病和肥胖相关肾病和足细胞损伤发病机制中的重要作用,为白桦脂醇治疗糖尿病肾病提供理论依据.方法:游离脂肪酸250μm处理分化后的人足细胞48 h,检测足细胞脂滴形成和TLR2/TLR4mRNA和活化的SREBP1以及TLR4的蛋白表达情况以及炎性细胞因子IL-6的mRNA的表达;SREBP1c脂质体转染足细胞,检测足细胞脂滴形成和TLR4和IL-6的表达.结果:游离脂肪酸250 μm作用足细胞24 h即诱导人足细胞凋亡,CARS成像显示足细胞脂滴增加,活化的SREBP1的65 kD部分表达增加,TLR2/TLR4的mRNA和TLR4的蛋白表达增加,IL-6的mRNA增加;SREBP1 c转染足细胞后,足细胞内脂质合成明显增加,TLR4的蛋白表达上调,IL-6mRNA表达上调.结论:SREBP1表达上调促进足细胞脂质沉积,诱导TLR2/TLR4通路活化,炎性细胞因子IL-6合成增加.SREBP1在2型糖尿病和肥胖肾病足细胞损伤过程中发挥重要作用,为2型糖尿病肾病和肥胖性肾病提供新的治疗靶点.

  • HPLC-ELSD法同时测定复方小酸枣咀嚼片中4种指标性成分的含量

    作者:张立峰;刘灿仿;张东平;陈亚;卫茹;褚燕

    目的:建立同时测定复方小酸枣咀嚼片中4种指标性成分含量的方法.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射法.色谱柱为Grace Brava C18-BDS,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为20 μL,漂移管温度为100℃,载气流速为2.9 L/min.结果:白桦脂酸、白桦脂醇、茯苓酸、甘草酸检测质量浓度线性范围分别为44.50~890.0 μg/mL (r=0.999 3)、20.28~405.6 μ.g/mL(r=0.999 7)、20.50~656.0 μg/mL(r=0.999 7)、10.50~336.0 μg/mL(r=0.999 6);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为99.44%~101.12% (RSD=0.57%,n=6)、99.41%~100.39% (RSD=0.34%,n=6)、99.31%~100.46%(RSD=0.51%,n=6)、98.96%~101.19% (RSD=0.84%,n=6).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性较好,可用于复方小酸枣咀嚼片中4种指标性成分含量的同时测定.

  • UPLC-DAD-ELSD切换波长法同时测定复方酸枣仁颗粒中8种成分的含量

    作者:李莉;叶晓川;宋小英;杨楠;孙志猛;刘焱文

    目的:建立UPLC-DAD-ELSD切换波长法测定酸枣仁颗粒中芒果苷、阿魏酸、甘草苷、斯皮诺素、知母皂苷BⅡ、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸、白桦脂醇的含量.方法:采用Agilent Zorbax Eclipse plus C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL· min-1,检测波长250 nm(0~5.8 min,芒果苷,阿魏酸)、280 nm(5.8~25 min,甘草苷,斯皮诺素),柱温40℃;蒸发光散射检测器(知母皂苷BⅡ、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸、白桦脂醇),雾化器温度为40℃,漂移管温度为100 ℃,气体流速1.60 L· min-1.结果:各待测组分分离度良好;芒果苷、阿魏酸、甘草苷、斯皮诺素、知母皂苷BⅡ、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸、白桦脂醇的进样量分别在0.021~0.412μg(r=0.999 9)、0.004~0.083μg(r=0.999 0)、0.020~0.402μg(r=0.999 9)、0.019~0.348 μμg(r=0.999 9)、0.094~1.890μg(r=0.999 0)、0.020~0.410μg(r=0.999 2)、0.051~1.025μg(r=0.999 1)和0.013~0.270 μg(r=0.999 5)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;芒果苷含量为0.534~0.911 mg·g-1,阿魏酸含量为0.114~0.213 mg· g-1,甘草苷含量为0.534~0.552 mg· g-1,斯皮诺素含量为0.641~0.733 mg·g-1,知母皂苷BⅡ含量为1.066~1.208 mg· g-1,酸枣仁皂苷A含量为0.644~0.845 mg· g-1,白桦脂酸含量为2.181~2.211 mg·g-1,白桦脂醇含量为0.307~0.309 mg·g-1.结论:经方法学验证,本法可用于复方酸枣仁颗粒的质量控制.

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