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MAPK信号转导通路在CdCl2、HgCl2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应中的作用
目的 探讨MAPK信号转导通路在CdCl2、HgCl2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应过程中的作用。方法 以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50和500 μmol/L浓度的氯化镉(CdCl2)和氯化汞(HgCl2)分别染毒RAW264.7细胞12和24 h；在研究MAPK信号转导通路特异性抑制剂作用时，在染毒前分别用ERK1/2抑制剂PD98059(100μmol/L)、U0126(25 μmol/L)、JNK特异性抑制剂SP600125(25μmol/L)和P38特异性抑制剂SB203580(25 μmol/L)对细胞进行预处理。采用WST-8法测定细胞增殖情况，采用Annexin-V/PI双染流式细胞仪测定细胞凋亡，采用western blot检测MAPK磷酸化蛋白表达水平。结果 CdCl2、HgCl2作用于RAW264.7细胞后，CdCl2、HgCl2浓度为0.5μmol/L(12 h)、0.05μmol/L(24 h)时可引起细胞增殖增加(P＜0.05)，浓度为50、500μmol/L时可引起细胞增殖减少(P＜0.05)；应用ERK通路抑制剂和JNK通路抑制剂对细胞进行预处理后，未观察到细胞增殖增加。应用P38通路抑制剂对细胞进行预处理后，CdCl2、HgCl2浓度为0.5 μmol/L(12h)、0.05μmol/L(24 h)时仍可引起细胞增殖增加(P＜0.05)。CdCl2、HgCl2作用于RAW264.7细胞3和6 h后，CdCl2、HgCl2浓度为0.5 μmol/L时可引起p-JNK蛋白表达降低(P＜0.05),浓度为50 μmol/L时可引起p-JNK、p-P38蛋白表达增加(P＜0.05)；p-ERK蛋白表达无变化(P＞0.05)。结论 低剂量CdCl2和HgCl2作用于RAW264.7细胞可以引起Hormesis效应，该效应可以被JNK、ERK信号转导通路特异性抑制剂阻断。JNK、ERK信号转导通路在CdCl2、HgCl2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应中可能发挥重要作用。
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番荔枝内酯对肺腺癌A549细胞周期及凋亡的影响
目的：探讨番荔枝内酯 Bullatacin 诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用 MTT 法检测不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μg/mL)Bullatacin对A549细胞的抑制增殖作用,依照MTT结果取浓度25μg/mL Bullatacin作用于A549细胞0、12、24、48 h,流式细胞仪分析其对A549细胞增殖周期的影响,观察其对细胞凋亡的干预作用。Western Blot 检测不同实验组 ERK、JNK、p38磷酸化与总蛋白的表达。结果不同浓度Bullatacin作用于A549细胞后,呈明显的剂量依赖性；25μg/mL Bullatacin能将A549细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡；与空白组比较,P-ERK、P-JNK、P-p38的蛋白表达均明显增强。结论 Bullatacin明显抑制A549细胞增殖,并诱导其凋亡,其机理与Bullatacin通过磷酸化各蛋白激酶而激活MAPK通路有关。
关键词： 番荔枝内酯 Bullatacin A549细胞 增殖 凋亡 MAPK信号转导通路 -
p38丝裂原活化蛋白激酶对严重烧伤大鼠肝脏激活蛋白-1和核因子-κB的影响
目的 观察严重烧伤后肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)对激活蛋白(activating protein, AP)-1和核因子(nuclear factor, NF)-κB的影响.方法 采用30%TBSAⅢ度烫伤动物模型,健康成年的雄性SD大鼠24只,随机分为假烫组、烧伤对照组和烧伤+SB203580组.观察烧伤24h后肝脏IκBα含量的变化,并采用凝胶电泳迁移率变化分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)法检测肝脏AP-1和NF-κB DNA结合活性的变化.结果 大鼠烧伤24h后肝脏IκBα含量明显下降(2086±684 vs 4138±1160,P<0.05),肝脏AP-1和NF-κB DNA结合活性均显著增强,使用p38 MAPK抑制剂SB203580能显著抑制肝脏AP-1 DNA结合活性的上升(469±84 vs 1306±486,P<0.01),但对肝脏IκBα含量和NF-κB DNA结合活性的变化无明显影响.结论 严重烧伤后,肝脏中活化的p38 MAPK通过激活转录因子AP-1进而引起细胞因子的产生,在烧伤后肝损伤的发生中起重要作用,p38MAPK这一作用与IκBα降解引起的NF-κB DNA结合活性增强无关.
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微管抑制剂C9抑制新生血管生成的作用机制
目的:研究微管抑制剂C9对新生血管生成的抑制作用及其机制.方法:利用流式细胞术和TUNEL法,检测C9逆转血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)抗无血清诱导的内皮细胞凋亡;Western Blot法检测C9对生长因子VEGF和bFGF刺激的下游与新生血管生成相关的两条通路Raf-Mek-Erk和PI3K-AKT中Raf,Mek,Erk,Akt磷酸化影响.结果:C9能够逆转VEGF和bFGF抗无血清诱导的内皮细胞凋亡,可以剂量依赖性地下调生长因子VEGF和bFGF下游与新生血管生成相关的两条通路Raf-Mek-Erk和P13K-AKT中Raf,Mek,Erk,Akt磷酸化,但是对VEGF受体KDR及bFGF受体FGFR1的磷酸化没有影响.结论:C9主要通过直接抑制Raf-Mek-Erk信号通路而抑制生长因子的抗内皮细胞凋亡作用,并产生抑制新生血管生成作用.
关键词： c9 新生血管生成 内皮细胞 MAPK信号转导通路 -
TGF －β1／M APK 信号转导通路与肺纤维化的关系
肺纤维化（Pulmonary Fibrosis）以肺部炎症导致肺泡持续性损伤及细胞外基质（ECM ）的过度沉积为病理特征，同时又是多类慢性肺部相关疾病的共同结局，其发病机制颇为复杂，近研究发现在这一过程中，信号转导通路发挥关键作用。丝裂原活化蛋白激酶（ mitogen － activated protein kinase ， MAPK）是生物体内重要的信号转导系统之一，其将细胞外刺激信号传递到细胞核内引起一系列细胞生物学反应，参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程［1］，同时它是一组可被多种信号激活，分布于胞浆中具有丝氨酸和酪氨酸双重磷酸化能力的蛋白激酶，广泛存在于包括酵母和哺乳动物细胞在内的各种生物，可被多种细胞因子刺激，从而影响细胞外基质的沉积，导致纤维化的发生［2］。已经发现 MAPK 由细胞外信号调节激酶（extracellular － signal regulated protein kinase ，ERK ），c－Jun氨基末端激酶（c－Jun amino－terminal kinase ，JNK）／应激激活蛋白激酶（stress－activated protein kinase ，SAPK ）、P38和 ERK5／BMK1（big MAP kinase 1）等亚族组成［3－5］。M A PK信号通路采用保守的三级激酶级联反应，即MAPKKK → MAPKK → MAPK［6］。研究发现不同的刺激会激活M A PK家族中的不同通路，介导各自相应具有独立性的生物学效应［7］。
关键词： TGF-β1 MAPK信号转导通路 肺纤维化 -
MAPK信号转导通路与神经损伤研究进展
丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是一种胞浆内广泛分布的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在真核细胞中,由4条平行的信号转导通路组成.细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK 1/2)通路、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和(或)应激活化蛋白激酶(SAPK)通路、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路和细胞外信号调节蛋白激酶5(ERK5)/大丝裂原活化蛋白激酶1(BMK 1)通路.近年来的研究发现MAPK信号通路与神经损伤相关.ERK 1/2和p38在神经损伤的区域迅速磷酸化激活,减少神经损伤对机体带来的影响;磷酸化JNK在神经损伤部位聚集,促进神经细胞的凋亡,加重神经损伤的发生;ERK 5是细胞增殖与分化、器官发生与胚胎发育中不可缺少的信号蛋白,磷酸化ERK 5通过促进胰岛素在神经元中的表达促进神经细胞存活.除此之外MAPK各分子在不同刺激和不同疾病中的作用不同.
关键词： MAPK信号转导通路 神经损伤 研究进展 -
MAPK信号转导通路与失血性休克相关性的研究进展
丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号转导通路家族在受到生长因子、细胞因子、神经递质、激素等多种信号分子刺激后发生磷酸化而活化,活化后的MAPKs可参与应激反应、细胞增殖、分化及介导炎症反应和器官损伤等病理生理过程.失血性休克的病理生理改变不仅有血液动力学部分,还有炎症反应部分及休克后缺血/再灌注所致的器官损伤.对失血性休克的治疗不仅仅满足于控制出血及液体复苏恢复组织灌注,同时还应关注其炎症反应,预防多器官功能障碍.随着对创伤及失血性休克与MAPK通路研究的进行,MAPK信号通路与失血性休克的关系进一步明确,更多以该条通路为靶点的药物研发将得到更好的理论支持.本文就MAPK信号通路与失血性休克所致器官损伤、炎症反应等相关性及临床应用前景进行简要综述.
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MAPK信号转导通路在托瑞米芬非雌激素抗肿瘤中的作用
目的 探讨托瑞米芬(TOR)对乳腺癌细胞株MCF7的非雌激素抗肿瘤作用及促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在其中所发挥的作用.方法 采用SRB法测量TOR单独或联合MEK抑制剂PD98059对乳腺癌细胞株MCF7活性的抑制;Western blotting检测不同浓度TOR对MCF7细胞株磷酸化ERK的影响.结果 TOR抑制乳腺癌细胞株MCF7的活性,抑制强度呈浓度依赖性.PD98059与TOR联用,可显著增强TOR对MCF7细胞株的细胞毒作用,对细胞株抑制率大于两药单独应用之和.5、10、20μmol/L的TOR对MCF7细胞株中磷酸化ERK有明显的浓度依赖性抑制作用.结论 MAPK信号转导通路在TOR非雌激素抗肿瘤中发挥重要作用,MAPK通路抑制剂与TOR联合应用可发挥协同作用,增强其抗肿瘤效用.
关键词： 托瑞米芬 乳腺癌 MAPK信号转导通路 雌激素受体 -
基于MAPK信号转导通路的银杏苦内酯调控哮喘小鼠Th1/Th2免疫偏移的机制研究
目的 探讨基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的银杏苦内酯调控哮喘小鼠Th1/Th2免疫偏移的机制.方法 采用卵蛋白致敏和激发建立慢性哮喘小鼠模型,根据不同的处理方法将其分为哮喘组、地塞米松干预组、银杏苦内酯干预组和对照组,HE染色观察小鼠肺组织结构,免疫组化检测p38、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、促分裂原应力激活蛋白激酶(MSK1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达,ELISA测定血清白细胞介素-4(IL-4)和干扰-γ(IFN-γ)水平.结果 与对照组银杏苦内酯干预组比较,哮喘组和地塞米松干预组p38和ERK阳性表达率均明显增高,比较差异具有统计学意义(P＜0.05),哮喘组和地塞米松干预组血清IL-4水平均明显增高,而血清IFN-γ水平均明显降低,比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 MAPK信号转导通路可能参与了支气管哮喘的发病过程,银杏苦内酯可能通过下调MAPK相关蛋白表达而纠正Th1/Th2免疫偏移,减轻哮喘小鼠肺组织病理改变程度.
关键词： MAPK信号转导通路 银杏苦内酯 哮喘 Th1/Th2免疫 -
硫化氢与MAPK/Nrf2信号通路关系的研究进展
生理浓度的硫化氢(H2S)可抑制JNK、P38和ERK1/2磷酸化,促使Nrf2的活化,发挥减轻氧化应激反应、炎症和抗凋亡等作用.MAPK信号通路生理作用复杂,体外实验发现H2S通过抑制P38、ERK和JNK磷酸化,从而抑制胶原诱导的血小板聚集,其与肿瘤细胞的增殖和凋亡密切相关,目前以成为攻克肿瘤的一个重要靶点.另外,MAPK信号通路信号分子间交叉交互作用及H2S与ERK3/4和ERK5信号转导途径之间关系还有待迸一步研究.该综述介绍了H2S与MAPK(ERKs、ERK5、JNK和p38 MAPK)信号转导途径及Nrf2的生理功能及关系.
关键词： 硫化氢 MAPK信号转导通路 磷酸化 -
胰腺癌中MAPK信号转导通路的研究进展
本文对近年在胰腺癌发生发展过程中起重要作用的MAPK信号转导通路的研究进展进行综述,为胰腺癌的针对性治疗的研究提供可靠依据.
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MAPK信号通路及STAT3、STAT5A/B在银屑病皮损中表达增高
目的 检测寻常型银屑病患者皮损中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、蛋白S6激酶1(p70S6k)、核因子-кB(NF-кB)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)、信号传导及转录激活因子5(STAT5A/B)、钙反应元件结合蛋白(CREB)的蛋白表达情况,探讨这些因子在银屑病中的作用.方法 收集27例寻常型银屑病患者皮损(银屑病组)及19例健康者皮肤组织(对照组),应用高灵敏MILLIPLEX MAP试剂及Luminex仪检测并定量9种因子的蛋白表达,比较两组之间的表达水平.结果 p38、ERK1/2、JNK、STAT3、STAT5A/B在银屑病组的表达量高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);STAT5A/B与p38、ERK1/2、JNK、STAT3呈正相关(均P<0.05).结论 JNK、p38、ERK1/2、STAT3、STAT5A/B在寻常型银屑病中表达增高,且STAT5A/B与p38、ERK1/2、JNK、STAT3有正相关性,表明STAT5A/B与MAPK因子互相作用,可能共同参与银屑病发病机制.
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妊娠大鼠吸入异氟烷、七氟烷对子代海马MAPK信号传导的影响
目的 观察大鼠妊娠前后暴露于低肺泡有效浓度(1MAC)的异氟烷或七氟烷是否会引起子代海马中与MAPK信号转导通路相关的指标的变化.方法 大鼠妊娠前后吸入麻醉药模型的建立,Western方法检测子代大鼠海马中p-ERK1/2及PKCα蛋白的表达.结果 子代海马p-ERK1/2及PKCα蛋白的表达与对照组相比无明显差异,而母体于妊娠6、10、14和18d暴露于1MAC值的异氟烷或七氟烷,可使子代大鼠0、7、14d海马p-ERK1/2蛋白的表达显著减少(t=2.63,P＜ 0.01),PI组较PS组表达减少(t=2.13,P＜ 0.05),而这种变化于出生后28d消失.结论 大鼠妊娠前后暴露于1MAC的异氟烷或七氟烷引起的子代大鼠海马中MAPK信号转导通路相关的指标发生变化.
关键词： 异氟烷 七氟烷 MAPK信号转导通路 P-ERK1/2 PKCα -
紫杉醇对三阴性乳腺癌JNK信号转导通路的影响
目的：研究紫杉醇对人乳腺癌细胞HCC1937的增殖抑制作用，探讨ERK1/2及JNK/SAPK信号转导通路蛋白表达与三阴性乳腺癌细胞增殖抑制的相关机理。方法①采用CCK-8试剂盒检测不同浓度紫杉醇对HCC1937细胞增殖的抑制作用；②JNK特异性阻断剂sp600125、MEK1/2ERK特异性阻断剂 U0126与紫杉醇联合应用对HCC1937细胞增殖的抑制作用；③采用流式细胞术检测不同浓度紫杉醇给药48h后HCC1937细胞周期的变化；④应用 Western Blot分别检测不同浓度紫杉醇作用72h后P-ERK1/2、P-JNK/SAPK、ERK1/2、JNK/SAPK蛋白的表达。结果紫杉醇对HCC1937细胞的50%抑制率（IC50）为4-5μg/ml，细胞对紫杉醇不敏感；sp600125可以明显抑制hcc1937细胞的生长，U0126对细胞的抑制不明显，sp600125联合紫杉醇对细胞的抑制作用大于 sp600125、U0126和紫杉醇三药联合作用(P<0.05)。
关键词： 紫杉醇 ERK1/2 JNK/SAPK MAPK信号转导通路 -
益气消癥法方含药血清干预EA.hy926细胞MAPK信号转导通路ERK1/2表达的研究
目的 研究益气消癥法方含药血清对EA.hy926细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)表达的影响,探索其抑制子宫肌瘤血管新生的作用机制.方法 SD大鼠随机分为:对照组,益气消癥法方高、中、低剂量(生药剂量24、12、6 g/kg)组,ig给药,每天给药1次,连续给药5d,腹主动脉取血,分离血清,灭活、过滤除菌;体外培养EA.hy926细胞,随机分为6组:对照血清组、模型组及益气消癞法方高、中、低剂量血清组和氟维司群(ICI,阳性药)组,除对照血清组外,其余组别给予雌二醇(E2),诱导细胞增殖,制备子宫肌瘤血管模型;通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)及Western blotting法检测MEK2和ERK1/2基因与蛋白的表达.结果 模型组MEK2和ERK1/2基因与蛋白的表达水平明显高于对照血清组(P＜0.01);与模型组比较,ICI和益气消癥法方高剂量血清组MEK2和ERK1/2表达水平显著降低(P＜0.01).结论 益气消癥法方含药血清通过降调ERK1/2表达,阻断MAPK/ERK1/2信号转导,抑制雌激素诱导的血管内皮细胞增殖,减少子宫肌瘤血液供应.
