首页 > 文献资料
-
锰诱导PC12细胞凋亡与p-38MAPKs的关系
目的以鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12)为模型,筛选锰对神经细胞增殖抑制作用的时间及剂量,观察细胞形态学、细胞周期和生化指标改变与丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPKs)活化表达间的关系.方法用200,400,600,800μmol/L MnCl2的培养液,分别作用对数生长期PC12细胞1,2,3,4 d后,用噻唑蓝比色(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量;流式细胞仪检测细胞周期分布;透射电镜观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测MnCl2对PC12细胞基因组DNA的影响.蛋白印迹(western-blot)法检测p-p38.结果MTT实验结果显示,200～800μmol/L MnCl2作用1,2,3,4 d对PC12有显著的抑制作用,呈剂量和时间依赖趋势,600μmol/L MnCl2作用4 d对PC12的抑制率可达50%以上.流式细胞仪检测实验表明:600μmol/L MnCl2作用4 d将PC12细胞周期阻滞在S期,诱导细胞凋亡,与电镜结果一致,同样条件下细胞DNA碎片化.Western-blot实验显示600μmol/L MnCl2作用1,2,3,4 d p-p38逐渐升高,3d时较对照组增加6.6倍(n=3,P＜0.05),200,400,600μmol/L MnCl2作用4 d时,磷酸化蛋白38(p-p38)也逐渐升高,400μmol/L MnCl2作用4 d时较对照组升高4.7倍(n=3,P＜0.05).结论锰通过MEK3/6磷酸化下游p38,上调p-p38,诱导细胞凋亡,细胞增殖抑制.
-
活性氧通过MAPKs和PI3K/AKT通路激活Nrf2研究进展
机体在应对过量活性氧(ROS)时能够通过一些细胞信号转导通路,增强细胞内许多保护性蛋白的表达.核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞对抗氧化应激的重要调控因子之一,在ROS诱导的抗氧化蛋白表达中具有重要作用.然而ROS激活Nrf2的具体机制并不完全清楚.有研究表明ROS可通过丝裂原活化的蛋白激酶(MAPKs)和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3 K/AKT)细胞信号通路激活Nrf2,以应对氧化应激对细胞造成的损伤.提示,MAPKs、PI3K/AKT 2个重要的信号通路在ROS诱导的Nrf2活化中具有重要作用.
-
血浆JNK1与肺循环高压发生发展的相关性分析
目的:通过调查湖南地区部分肺循环高压(PH)患者人群及健康人群血浆JNK1浓度水平,揭示PH患者血清中JNK1表达水平与肺循环高压的发生发展之间的相关性,为PH的早期预防、早期诊断治疗奠定基础.方法:采用横断面调查方法,测定64例肺循环高压患者(肺循环高压组)空腹血浆JNK1水平,并与30例正常健康人群(正常对照组)空腹血浆JNK1水平比较.结果:肺循环高压组血浆JNK1水平与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).线性回归分析结果提示:血浆JNK1浓度与肺动脉平均压力之间无明显相关性(P>0.05),与左心疾病相关的肺循环高压(PHALH)小组(n=27)、与缺氧或呼吸系统疾病相关的肺循环高压(PHAHR)小组(n=19)与正常对照组JNK1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);PH患者与左心疾病相关的肺循环高压(PHALH)小组(n=27)、与缺氧或呼吸系统疾病相关的肺循环高压(PHAHR)小组(n=19)血清中JNK1表达水平与肺动脉平均压之间差异有统计学意义(P<0.05).结论:就肺循环高压患者总体而言,血浆JNK1水平与肺动脉高压的发生发展似乎不相关.但是,在发病机制相似的某一PH患者人群中,血清中JNK1表达水平与肺动脉高压的发生发展之间可能存在相关性.血浆JNK1浓度水平,也许可以作为PH疾病发生发展严重程度的一个标志物.
-
MAPK信号转导通路与失血性休克相关性的研究进展
丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号转导通路家族在受到生长因子、细胞因子、神经递质、激素等多种信号分子刺激后发生磷酸化而活化,活化后的MAPKs可参与应激反应、细胞增殖、分化及介导炎症反应和器官损伤等病理生理过程.失血性休克的病理生理改变不仅有血液动力学部分,还有炎症反应部分及休克后缺血/再灌注所致的器官损伤.对失血性休克的治疗不仅仅满足于控制出血及液体复苏恢复组织灌注,同时还应关注其炎症反应,预防多器官功能障碍.随着对创伤及失血性休克与MAPK通路研究的进行,MAPK信号通路与失血性休克的关系进一步明确,更多以该条通路为靶点的药物研发将得到更好的理论支持.本文就MAPK信号通路与失血性休克所致器官损伤、炎症反应等相关性及临床应用前景进行简要综述.
-
泛素特异性蛋白酶19对烟熏诱导慢性阻塞性肺疾病大鼠模型骨骼肌萎缩的作用及机制
目的 通过烟熏制备慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,研究泛素特异性蛋白酶-19(USP-19)在COPD相关骨骼肌萎缩中的作用及机制.方法 烟熏诱导大鼠COPD模型,观察肺及骨骼肌组织的组织形态学变化,利用蛋白质印迹法(Western blotting)及实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)观察骨骼肌细胞内USP-19、肌球蛋白重链(MHC)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)基因的表达情况.结果 烟熏建立的大鼠COPD模型,大鼠肺组织呈肺气肿改变,烟熏12周时,每高倍镜视野下肌纤维数量增多40％,间接提示骨骼肌发生萎缩;骨骼肌细胞肉MHC表达明显下调,与烟熏时间呈负相关;萎缩的骨骼肌细胞内USP-19基因的转录和表达均明显上调,与烟熏时间呈正相关,与MHC表达呈负相关;萎缩的骨骼肌细胞内MAPKs通路磷酸化水平明显增强(P＜0.05).结论 USP-19基因参与COPD模型鼠骨骼肌萎缩的发生,起负性调节作用,此作用可能通过MAPKs通路实现.
-
锰对PC12细胞的增殖抑制及其Erk1/2活化表达
目的探讨锰在细胞丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路Erk1/2活化表达的作用及其相互之间的关系,研究其对基底神经节损伤作用的机制.方法取对数生长期PC12细胞,用含200、400、600、800 μmol/L MnCl2的培养液,分别作用1、2、3、4 d,噻唑蓝(MTT)比色试验、平板集落形成实验和台盼蓝拒法筛选锰的细胞毒性剂量;免疫印记法(Western-blot)检测磷酸化Erk1/2(p-Erk2)水平.结果 MTT和平板克隆形成实验检测结果显示200～800 μmol/L MnCl2作用1、2、3、4 d均对PC12细胞株有显著的抑制作用,且呈剂量和时间依赖效应关系,而且600 μmol/L MnCl2作用4 d对PC12的抑制率可达50%以上.Western-blot结果显示600 μmol/L MnCl2作用1、2、3、4 d可见p-Erk2逐渐降低,其中作用2 d时较对照明降低了75%(n=3,P＜0.05),200、400、600 μmol/L MnCl2分别作用4 d时,p-Erk2亦逐渐降低,当400 μmol/L MnCl2作用4 d时较对照明降低了78%(n=3,P＜0.01).结论使用Erk通路MEK1/2特异性阻制剂PD98059实验结果表明:锰可能通过MEK1/2磷酸化下游的Erk1/2,下调p-Erk.锰对PC12细胞的毒性作用可能是通过关闭胞外信号调节激酶(ERK)通路引发细胞增殖抑制.
