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灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸生殖细胞DNA氧化损伤的拮抗作用
目的 研究镉致雄性大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及灵芝孢子粉的影响.方法 48只SD雄鼠,随机均分为4组:对照组、Cd组、灵芝孢子粉低拮抗组(GLSL+ Cd)和灵芝孢子粉高拮抗组(GLSH+ Cd).灵芝孢子粉高低拮抗组分别灌胃1和0.5 g/kg灵芝孢子粉,对照组与Cd组灌胃等量生理盐水,1次/d.Cd组、GLSL+ Cd和GLSH+ Cd组腹腔注射CdCl22 mg/kg,隔天1次.对照组腹腔注射等量生理盐水.60 d后分两批处死,间隔为30 d.硫代巴比妥酸(TBA)法和BCA法分别测定丙二醛(MDA)含量和蛋白浓度,WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,单细胞凝胶电泳检测睾丸细胞DNA损伤(测定慧尾长、慧尾DNA百分含量及Olive尾矩).结果 (1)与对照组比较,Cd组、GLSL+ Cd组体重、睾丸重均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)与Cd组比较,GLSL+ Cd组、GLSH+ Cd组睾丸组织MDA含量降低,SOD活力增加,DNA损伤程度均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).但GLSH+ Cd组DNA损伤程度高于GLSL+ Cd组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸细胞DNA损伤有保护作用,但是发挥作用的优剂量和时间还需要进一步探索.
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维生素C和番茄红素对丙烯酰胺染毒小鼠淋巴细胞和肝细胞的氧化损伤
丙烯酰胺(acrylamide,AA)在工业和科研实验中广泛应用.AA不仅具有较强的神经毒性,还有潜在的致癌性、遗传毒性、生殖及发育毒性[1].遗传毒理学研究发现,AA在体内、外试验中均有致突变作用,能引起哺乳动物体细胞和生殖细胞基因突变和染色体异常[2].
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苯并芘作用下人支气管上皮细胞切除修复交叉互补蛋白Ⅰ表达的变化
目的 探讨苯并芘(BaP)作用下的人支气管上皮细胞(16HBE)核苷酸切除修复蛋白(Nucleotide excisionrepair proteins,NER proteins)表达和DNA损伤的时间效应特征,并分析二者之间可能存在的关联性.方法 用8 μmaol/LBaP染毒16HBE细胞0、1、2、4、8、12、24和48 h,以彗星实验检测细胞DNA损伤并以Olive尾矩值(Olive Tail Moments,OTM)评价DNA损伤程度.以Western-blot检测核苷酸切除修复蛋白XPA、XPC、XPF、XPG和ERCC1的表达水平.结果 染毒1～2 h时OTM值变化率大,与正常细胞相比,除染毒1h组外其余各组OTM值均显著性增高(P<0.01).各蛋白的表达于染毒8h或12 h升高至峰值而后逐渐下降,其中切除修复交叉互补蛋白1(ERCC1)在峰值时蛋白表达量增高4.2倍,等级相关分析显示OTM与ERCC1表达的变化率呈显著正相关(r=0.892,P<0.001).结论 ERCC1可能是核苷酸切除修复途径中的限速因子,其具体机制有待于进一步研究.
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彗星实验检测2种细胞DNA损伤方法
丙烯酰胺(acrylamide,AA)在工业上有广泛的用途,对AA的暴露研究结果均显示其有一定的神经系统毒性和致癌作用.自2002年瑞典国家食品管理局和斯德哥尔摩大学首次报道,在煎烤烹炸类食品中发现高含量AA后,其安全性引起了各国科学家的普遍关注[1].近年来动物实验研究表明,AA也具有一定遗传毒性和生殖毒性,为此本研究通过彗星实验检测其外周淋巴细胞和睾丸细胞的损伤,研究2种细胞对其作用的敏感性及损伤后的修复能力.
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虾青素对60Coγ射线所致小鼠氧化损伤的保护作用
目的 探讨虾青素对60Coγ射线诱导的小鼠氧化损伤的保护作用.方法 50只昆明种小鼠随机分为5组,即对照组、模型组和虾青素高、中、低剂量组(10.2、2.0和4.0mg/kg).辐照前,各剂量组每日经口灌胃不同浓度的虾青素,模型组和对照组则给予等体积植物油,连续30天.30天后,除对照组外,其余各组给予8 Gy 60Coγ射线全身一次性照射.照射后第4天处死小鼠,取肝细胞进行彗星实验以观察细胞DNA损伤,制取肝匀浆测定MDA含量、SOD和GSH-Px活性,同时进行外周血粒细胞和骨髓有核细胞计数.结果 与对照组相比,模型组MDA含量显著升高(P＜0.01),SOD和GSH-Px活性显著降低(P＜0.01)；与模型组相比,虾青素各组MDA含量显著降低(P＜0.01),SOD活性显著升高(P＜0.01),高剂量组GSH-Px活性显著升高(P＜0.01).模型组DNA损伤指标均显著高于对照组(P＜0.01),而虾青素各组DNA损伤显著低于模型组(P＜0.01),且随着虾青素剂量的增加,细胞拖尾率和OTM逐渐减少.与对照组相比,模型组粒细胞和骨髓有核细胞计数显著降低(P＜0.01),而虾青素各组粒细胞和中、高剂量组骨髓有核细胞显著高于模型组(P＜0.01).结论 虾青素对于辐射诱导的氧化损伤具有保护作用.
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氯乙烯染毒大鼠DNA损伤与肝脏某些生化指标的变化
目的研究氯乙烯(VCM)对大鼠肝细胞和血淋巴细胞DNA的损伤作用,及肝脏某些生化指标的变化.方法DNA损伤采用单细胞凝胶电泳(彗星实验)法,代谢酶活性采用分光光度法,肝功能测定使用自动生化分析仪.结果彗星发生率染毒组显著高于对照组,肝细胞和血淋巴细胞彗星发生率显著相关.结论VCM可导致大鼠肝细胞和血淋巴细胞DNA发生损伤,且存在剂量-效应/反应关系.
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基于单细胞凝胶电泳技术快速检测食品添加剂对V79细胞DNA损伤作用的研究
目的 快速检测啤酒花浸膏、溴酸钾和焦磷酸钠等3种食品添加剂对V79细胞DNA的损伤作用.方法 采用V79细胞培养和单细胞凝胶电泳技术,借鉴单细胞凝胶电泳技术(SCGE)图像分析系统IMIl.0对彗星图像进行分析,观察指标有尾长、尾重心、olive尾矩、尾惯量、尾分布矩、尾长/头长比、尾DNA含量(％)等7个计量指标.结果 实验结果表明,溴酸钾和焦磷酸钠的剂量分别在75～300 μg/ml和25～100 μmol/ml范围内,均对V79细胞DNA有明显的损伤作用,存在剂量-反应关系;啤酒花浸膏的剂量在25～100 μg/ml范围内,不引起V79细胞DNA的损伤作用.结论 本研究方法与传统的彗星实验相比,具有分析指标多,操作方便等优点,可应用于快速检测食品添加剂诱变性的筛选试验.
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彗星实验在不明原因复发性流产中对精子DNA完整性的研究
目的:采用单细胞凝胶电泳技术(又称彗星实验)对精子DNA完整性与不明原因复发性流产的相关性进行探讨,进一步明确精子DNA损伤的类型与不明原因复发性流产的关系.方法:收集2014年6月-12月在四川大学华西第二医院妇产科就诊的不明原因复发性流产女性的配偶作为流产组;同时收集有正常生育史的男性作为生育组.采用精液常规分析、中性彗星实验、碱性彗星实验等技术,检测精液常规参数和精子DNA完整性.同时分别人为诱导精子DNA单、双链损伤作为对照.结果:流产组和生育组各纳入50例男性,年龄差异无统计学意义,精液常规参数对比,流产组的精子浓度低于生育组[(91.0±56.8)×106/ml,(121.0±50.4)×106/ml] (P＜0.05),前向运动[(52.5±13.5)％,(54.3±10.8)％]、总活力[(58.9±12.7)％,(61.3±10.5)％]、正常形态精子百分率[(3.4±2.6)％,(3.3±2.2)％]两组差异均无统计学意义(P＞0.05).两组的精子DNA完整性对比,流产组比生育组拥有更高的精子DNA碎片指数[(29.5±4.3)％,(18.2±3.5)％]和精子单链DNA损伤率[(19.0±3.8)％,(8.9±3.0)％](P＜0.05).两组的精子双链DNA损伤率[(10.5±3.4)％,(9.2±2.4)％]未见差异(P＞0.05).结论:精子DNA损伤率过高,特别是DNA单链损伤过多可能是导致不明原因复发性流产的相关原因之一.精子常规参数可能对提示不明原因复发性流产的病因价值较小.
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焦炉逸散物诱导人支气管上皮细胞O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因高甲基化
目的 通过观察细胞遗传损伤指标和O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)甲基化改变,探讨焦炉逸散物暴露诱导的损伤效应机制.方法 采用1 μmol/L苯并[a]芘[B(a)P]诱导人支气管上皮细胞16HBE 48 h后,分别用1‰二甲基亚砜(DMSO)和2.5、5.0、10.0、20.0 μg/ml浓度的焦炉逸散物有机提取物对16HBE细胞连续染毒5 d,构建细胞损伤模型;采用甲基化特异性PCR(MSP-PCR)检测细胞MGMT甲基化改变,并用RT-PCR检测细胞MGMT mRNA改变,免疫印迹法检测MGMT蛋白改变;采用碱性单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤水平.结果 与DMSO组相比,MGMT基因在各处理组均有高甲基化改变,并随剂量的增加,其mRNA和蛋白表达水平都呈下降趋势.DMSO组及2.5、5.0、10.0、20.0μg/ml各剂量组MGMT mRNA及其蛋白的灰度比值分别为1.0、0.96、0.96、0.85、0.32和1.0、1.0、1.1、0.41、0.52.焦炉逸散物有机提取物处理后,细胞出现不同程度的DNA损伤,DMSO组及2.5、5.0、10.0、20.0μg/ml各剂量组彗星Olive尾距分别为(2.98±1.43)、(4.76±1.79)、(10.09±1.75)、(11.38±1.77)、(11.67±1.88),损伤呈明显的剂量-效应关系(F=41.22,P＜0.05);进一步分析发现,细胞的遗传损伤指数与MGMT蛋白及mRNA表达水平呈负相关.结论 焦炉逸散物引起的DNA损伤与MGMT高甲基化所致的MGMT基因表达水平降低有关.
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核酸内切酶改良型彗星实验用于检测遗传毒物致DNA氧化损伤
目的 建立核酸内切酶改良型体外彗星实验方法,并应用该方法检测DNA氧化损伤.方法 分别应用苯并[a]芘[B(a)P,20 μmol/L]、甲基磺酸甲酯[MMS,25 μg/ml]、秋水仙素(COL,5 mg/L)和长春新碱(VCR,0.5 mg/L)处理人支气管上皮(16HBE)细胞.采用噻唑蓝(MTT)实验评估细胞生存率,常规彗星实验和内切酶改良型彗星实验分别检测DNA损伤和氧化损伤,流式细胞术检测细胞内活性氧改变.结果 MTT实验显示,B(a) P、MMS、COL、VCR染毒后可引起较高水平的细胞内活性氧升高,4个组的细胞生存率分别为:(59.69±2.60)％、(54.33±2.81)％、(53.11±4.00)％、(51.43±3.92)％.常规彗星实验及甲酰胺嘧啶-DNA-糖基化(formamidopyrimidine-DNA-glycosylase,FPG)酶彗星实验均检测到B(a)P、MMS、COL、VCR引发的DNA损伤.FPG酶彗星实验中,Olive尾矩改变明显,缓冲液组的B(a) P、MMS、COL、VCR组Olive尾矩分别为22.99±17.33、31.65±18.86、19.86 ±9.56和17.02 ±9.39,FPG酶处理后Olive尾矩分别为34.50±17.29、43.80±10.06、33.10±12.38和28.60±10.53,较缓冲液组分别增加58.94％、38.48％、66.86％和68.21％(t值分别为3.91、3.89、6.66和3.87,P值均＜0.05).相关性分析显示,Olive尾矩与细胞内活性氧也有较好的相关性(r=0.77,P＜0.05).结论 FPG酶改良型彗星实验可以有效的检测遗传毒物所致的DNA氧化损伤改变.
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芦荟提取物对衰老模型鼠抗自由基氧化损伤DNA作用的实验研究
目的:探讨芦荟延缓衰老的疗效及其可能机理.方法:利用小鼠吸入臭氧(O3)制造衰老模型,并在其造模过程中以不同浓度的芦荟提取液实施治疗,9周后检测小鼠全血超氧化物歧化酶(SOD)的活性,肝组织过氧化脂质代谢产物丙二醛(MDA)的含量,并用彗星实验(Comet Assay)检测肝、脾组织细胞DNA氧化损伤的程度.结果:与模型组相比,经芦荟治疗后,模型小鼠不仅全血SOD活性及肝组织MDA含量两项指标明显改善并趋向正常,而且肝、脾细胞DNA拖尾尾长减短,有效地减轻了肝、脾细胞DNA的损伤程度,作用较复方丹参片对照组全面.结论:芦荟能提高机体抗自由基氧化损伤的能力,减轻肝、脾细胞DNA损伤程度,从而达到延缓衰老的目的.
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孕期亚硝酸盐暴露对仔鼠海马的影响
目的 探讨孕期亚硝酸盐暴露对海马损伤的作用.方法 利用C57BL/6J小鼠建立孕期亚硝酸盐暴露模型,分为对照组(生理盐水)、低剂量亚硝酸盐组(60mg/kg)和高剂量亚硝酸盐组(120mg/kg).收集出生当日(P0)、P7、P14及P30各年龄点仔鼠大脑,用于免疫荧光染色、彗星实验、Western blotting蛋白半定量分析,对海马损伤进行研究.结果 不论是亚硝酸盐暴露组还是对照组,仔鼠齿状同增殖的神经干细胞数目均随着年龄的增长逐渐减少;在P0、P7、P14和P30年龄点,暴露组仔鼠增殖的神经干细胞的数量明显比对照组少,且具有剂量依赖性(P＜0.05,n=96).为了鉴别这种抑制作用是否具有选择性,我们对P0仔鼠室管膜下区神经干细胞的增殖情况进行了观察.结果发现,亚硝酸盐暴露组室管膜下区的神经干细胞增殖较对照组也减少,同样具有剂量依赖性(P＜0.05);亚硝酸盐暴露组仔鼠门区炎症损伤细胞和凋亡细胞的数目比对照组多,具有剂量依赖性(P＜0.05);彗星实验结果显示,亚硝酸盐暴露组P0仔鼠海马细胞的彗尾比对照组长,具有剂量依赖性(P＜0.01);与对照组P0仔鼠相比,亚硝酸盐暴露组仔鼠海马组织内Caspase-8和核因子κB(NF-κB)蛋白的表达量较高(P＜0.05).结论 孕期亚硝酸盐暴露可通过抑制神经干细胞增殖,促进细胞损伤和凋亡而对仔鼠海马造成损伤.
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单细胞凝胶电泳技术在运动医学中的应用
单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis, SCGE)又称彗星实验(comet assay),是近年来发展起来的一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的新技术.SCGE实验初由Rydbery和Johanson(1978)提出,以后经Ostling和Johansont[1](1984)及Singh[2](1988)等对实验条件进行改良,使其具有简便快速、灵敏性高、重复性好、无需放射性标记等优点,目前已被广泛应用于临床药物筛选、肿瘤诊断与治疗、衰老和细胞凋亡机制的探讨以及遗传毒理学和生物监测等研究领域[3-5].
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体内外遗传毒性实验组合评价纳米银的遗传毒性
目的 采用小鼠淋巴瘤细胞tk+/-位点突变实验、大鼠肝细胞碱性彗星电泳实验以及大鼠外周血网织红细胞微核实验观察纳米银的体内外遗传毒性. 方法 (1)以2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0 μg/ml浓度纳米银处理L5178Y细胞3 h,确定细胞毒性水平;再以0.63、1.25、2.50和5.00μg/ml浓度处理细胞3 h,分析纳米银致基因突变频率. (2) SD大鼠单次尾静脉注射纳米银0.63、1.25、2.50、5.00 mg/kg,24 h后分别采用碱性彗星电泳和流式细胞术检测肝细胞DNA损伤和外周网织红细胞血微核形成率. 结果 (1) L5178Y细胞相对悬浮增殖率随纳米银浓度的增加而降低,在5.0 μg/ml时已降至阴性对照组的11.42%;在测试浓度下,tk+/-基因位点突变频率呈浓度依赖性升高,与阴性对照组差异显著(P<0.05). 同时,小集落比例较阴性对照组均有显著提升(P<0.01).(2)纳米银5.0 mg/kg组给药后10 min内2只大鼠死亡,至24 h时死亡数增至3只,样本数不足不能参与统计. 与阴性对照组相比,1.25、2.5 mg/kg剂量组尾部DNA百分含量均有显著性差异(P<0.05),0.63 mg/kg组未见明显异常. 与阴性组相比,纳米银0.63、1.25、2.5 mg/kg 3个剂量组诱发外周血网织红细胞微核发生率均有显著性差异(P<0.05),并与暴露剂量呈正相关(Pearson r=0.98, P<0.05). 结论 实验条件下检测出纳米银具有诱发诸如基因突变、染色体畸变和原发性DNA损伤等体内外遗传毒性的潜在风险.
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单细胞凝胶电泳用于放射工作者DNA损伤评价的研究
目的 评价不同级别医院放射工作人员的DNA损伤情况,探讨不同工种、工龄与DNA损伤程度之间的关系.方法 用碱性单细胞凝胶电泳技术检测放射组和对照组外周血淋巴细胞的DNA单链断裂水平.CASP软件分析彗星图像,主要观察彗星尾部DNA百分含量(TDNA%)、彗星尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)等指标.结果 放射组的TDNA%,TL、TM、OTM明显高于对照组(F=3.93.P<0.01),不同工种、工龄间均有统计学差异(F=1.83,P<0.05),不同级别医院之间放射工作者上述指标也差异存在统计学意义(F=1.91,P<0.05).结论 所观察医院的放射工作者外周血淋巴细胞DNA均存在不同程度的损伤,高级别医院略好于低级别医院,而且DNA损伤程度与放射工龄和工种有一定的相关性.
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碳纳米管对小鼠肝和肺细胞DNA损伤的彗星实验研究
目的 检测碳纳米管进入小鼠体内后对小鼠肝细胞和肺细胞DNA的损伤作用.方法 将小鼠分别用不同剂量多壁碳纳米管(0.1、0.2、0.4mg/ml)暴露14天,每次0.2ml,每隔24h暴露1次,用单细胞凝胶电泳技术检测肝细胞和肺细胞DNA的损伤程度.结果 0.1mg/ml剂量大小的碳纳米管可造成小鼠肝细胞和肺细胞DNA的严重断裂(P＜0.01),而0.2、0.4mg/ml剂量则引起了明显的交联作用.结论 碳纳米管可造成机体内肝细胞和肺细胞DNA的断裂和交联.
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S-异戊烯基-L-半胱氨酸对辐射诱导小鼠DNA损伤的保护作用
目的 采用动物急性辐射损伤模型评估S-异戊烯基-L-半胱氨酸对辐射诱导DNA损伤的保护作用.方法 将40只ICR小鼠随机分为空白对照组、1.0Gy伽马射线照射组、1.0Gy伽马射线照射联合S-异戊烯基-L-半胱氨酸给药组、7.2Gy伽马射线照射组、7.2Gy伽马射线照射联合S-异戊烯基-L-半胱氨酸给药组5组,每组8只,采用外周血淋巴细胞彗星实验和骨髓嗜多染红细胞微核实验检测1.0Gy和7.2Gy伽马射线照射后不同处理组小鼠DNA双链断裂情况.结果 7.2Gy伽马射线照射组小鼠外周血淋巴细胞的尾部DNA百分含量、尾长、尾矩和Olive尾矩明显高于空白对照组(P均＜0.01).7.2Gy伽马射线照射联合S-异戊烯基-L-半胱氨酸给药组的DNA百分含量、尾长、尾矩和Olive尾矩明显低于7.2Gy伽马射线照射组(p均＜0.05).1.0Gy伽马射线照射组和7.2Gy伽马射线照射组的微核率明显高于空白对照组(P均＜0.01);照射前给予S-异戊烯基-L-半胱氨酸可明显降低1.0Gy与7.2Gy伽马射线所致的微核率,分别由(39.5000±3.3141)‰降至(28.1667±4.1345)‰(P=0.033)和(76.5000±4.6242)‰降至(22.8333±3.6553)‰(P=0.000).1.0Gy伽马射线照射组和7.2Gy伽马射线照射组的骨髓嗜多染红细胞(PCE)与正染红细胞(NCE)的比值(PCE/NCE)明显低于空白对照组(P均＜0.05);照前给予S-异戊烯基-L-半胱氨酸可明显升高相应剂量组的PCE/NCE值(P均＜0.05).结论 S-异戊烯基-L-半胱氨酸具有良好的DNA辐射损伤防护作用.
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地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应
目的 探究地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应.方法 于2010年6-8月,采集某江流域18个采样点水样并提取有机物.将处于对数生长期的人B淋巴母细胞悬液分别暴露于0(对照)、250、500、1 000 ml/ml水样有机提取物培养24 h;采用CCK-8活细胞计数试剂盒和彗星试验分别研究水样有机提取物对细胞存活率的影响及其DNA损伤效应,并检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量的变化,以评价水样有机提取物的氧化损伤效应.结果 与对照组比较,除250 ml/ml采样点5、11、12水样外,各采样点水样有机提取物在各暴露剂量下对人B淋巴母细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P＜0.01);且随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞的存活率呈下降趋势.与对照组相比,采样点4、5、6水样有机提取物在250、500、l 000 ml/ml剂量下对人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量无明显影响,采样点9、11、12和15水样有机提取物仅在1 000 ml/ml剂量下导致人B淋巴母细胞尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);其余各采样点水样有机提取物在500、1 000 ml/ml剂量下均可导致人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与对照组相比,采样点16水样有机提取物在500 ml/ml剂量下对人B淋巴细胞内ROS含量无显著影响(P＞0.05),其余各采样点水样有机提取物在250～1 000 ml/ml剂量范围内均可显著诱导人B淋巴细胞内ROS的产生,差异有统计学意义(P＜0.01);除采样点15外,随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞中ROS的含量均呈上升趋势.结论 该流域江水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA有显著的损伤效应,可能与细胞内ROS含量增加有关.
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香烟烟雾对2种肺细胞的DNA损伤与修复
目的探讨经香烟烟雾溶液染毒的人正常肺间质细胞和人肺腺癌细胞的DNA损伤及其修复效应.方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF)和人肺腺癌A549细胞,以二甲基亚砜(DMSO)和磷酸缓冲液(PBS)作为吸收液,采集香烟主流烟雾.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定香烟烟雾-DMSO吸收液和香烟烟雾-PBS吸收液(分别简称DMSO烟液和PBS烟液)的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的毒性(分别以DMSO和PBS为阴性对照),以无明显细胞毒性的浓度进行彗星实验(分别以DMSO和PBS为阴性对照,以重铬酸钾为阳性对照),测定细胞的DNA损伤及修复情况.结果DMSO烟液原液及其1/2稀释液染毒的细胞存活率低于80%,而PBS烟液染毒的细胞存活率均高于80%.DMSO烟液的1/4、1/8、1/16倍稀释液以及PBS烟液的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤与阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.01),且存在明显的剂量-效应关系.DNA损伤在两种细胞间差异无统计学意义(P＞0.05),但DMSO烟液所致的DNA损伤高于PBS烟液(P＜0.01).细胞在去除受试物后培养30 min时开始修复,随着修复时间的延长,拖尾细胞数减少,DNA迁移长度缩短(P＜0.05),且A549细胞修复得更快(P＜0.05).结论DMSO烟液的细胞毒性和遗传毒性均高于PBS烟液.香烟烟雾对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤差异不明显,A549细胞的DNA损伤修复能力较HLF细胞强.
关键词： 烟草烟污染 DNA损伤 彗星实验 人胚肺成纤维细胞 人肺腺癌A549细胞 -
二氯苯醌对秀丽隐杆线虫胚胎细胞DNA的损伤作用
目的 研究新型饮用水氯化消毒副产物二氯苯醌对秀丽隐杆线虫胚胎细胞的DNA损伤作用.方法 提取秀丽隐杆线虫的胚胎细胞,分别暴露于0(溶剂对照)、0.781 25、3.125、12.5、50、200、800 μmol/L含二氯苯醌的L-15液体培养基染毒1h,并设阳性对照(含300 μmol/L过氧化氢的L-15液体培养基染毒15 min).采用单细胞凝胶电泳技术测定DNA损伤情况.结果 3.125～800 μmol/L二氯苯醌暴露组彗星实验Olive尾矩值均高于溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);且随着二氯苯醌暴露浓度的升高,秀丽隐杆线虫胚胎细胞Olive尾矩呈上升趋势.结论 二氯苯醌对秀丽隐杆线虫胚胎细胞的DNA具有损伤作用.
