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cGAMP可显著增强BALB/c小鼠对幽门螺杆菌蛋白抗原的免疫应答
目的 评价环鸟-腺二核苷酸(cGAMP)在非口服幽门螺杆菌蛋白类疫苗研发中作为佐剂的免疫增强效果.方法 以cGAMP为佐剂,与幽门螺杆菌蛋白抗原,包括UreA、UreB和NapA混合,通过皮下途径注射免疫BLAB/c小鼠,同时设置单独抗原组和佐剂组对照,以间接ELISA法测定免疫前后血清中抗原特异性IgG抗体和盲肠灌洗液中IgA抗体;流式细胞术分析脾及腹腔淋巴结(MLN)中T淋巴细胞IFN-γ分泌水平;酶联免疫斑点(ELISpot)分析脾淋巴细胞中抗原特异性IFN-γ的分泌水平.结果 cGAMP可促进小鼠抗幽门螺杆菌蛋白抗原的特异性IgG抗体应答;流式细胞术及ELISpot技术检测结果显示cGAMP可促进淋巴细胞抗原特异性IFN-γ的分泌.结论 cGAMP作为一种稳定的小分子化合物佐剂,通过皮下免疫途径,虽然不能诱导较强的黏膜sIgA抗体反应,但是可诱导较强的特异性T淋巴细胞反应和血清特异性IgG抗体应答,显著减少疫苗中抗原用量,为非口服幽门螺杆菌疫苗研发提供了一种新思路.
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新型隐球菌甘露糖蛋白及TLR-9配体CpG-ODN对树突状细胞的激活作用
新型隐球菌病越来越引起医学界的关注.目前还没有一种针对新型隐球菌的人体疫苗.鉴别可作为候选疫苗的有免疫保护作用的隐球菌抗原已成为必要.鼠模型显示机体对新型隐球菌感染的防御主要由细胞免疫介导.其中CD4+TH1细胞起着积极的调节作用,而TH2细胞则起着消极的调节作用.CpG的寡聚核苷酸(CpG-ODN)在体内可作为佐剂介导TH1型免疫反应.为了探讨CpG-ODN在抗新型隐球菌免疫反应中的作用,我们将新型隐球菌和CpG-ODN接种于实验鼠,取气管旁淋巴节细胞与经甘露糖蛋白(mannoprotein,MP)刺激过的DC共培养可诱导淋巴细胞产生IFN-γ.实验结果提示隐球菌的MP通过DC诱导了TH1型反应并作为抗原激活了新型隐球菌特异的TH1细胞.
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与霍乱毒素A1亚基突变体相互作用蛋白的筛选
目的寻找新的与霍乱毒素A1亚基(CTA1)突变体(S63F)相互作用的蛋白,来探讨CT佐剂活性的分子机理. 方法应用酵母双杂交技术,以CTA1(S63F)为诱饵蛋白筛选人脾细胞cDNA文库,并通过共转染、免疫共沉淀和Western杂交在哺乳动物细胞COS-7中确证诱饵蛋白和候选蛋白之间的相互作用. 结果筛选获得一个与HLAⅠ类分子α亚基高度同源的蛋白,这个蛋白在酵母核内以及COS-7细胞中都显示出与CTA1(S63F)的相互作用. 结论 CTA1(S63F)与HLAⅠ类分子α亚基的相互作用可能导致HLAⅠ类分子进入“膜筏“,引起膜筏不断聚集增大,聚集到一定程度后筏相关酪氨酸蛋白激酶活化,启动胞内信号的级联传递,增强免疫反应.
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CVB3 VP1和hIL-15基因真核双表达质粒的构建及免疫效果观察
IL-15做为佐剂,可增强抗原的提呈和刺激免疫细胞的分化,CVB3的VP1蛋白可以刺激机体产生具有保护性的中和抗体.我们通过构建pcDNA3-VP1/IL-15真核双表达重组质粒并观察其免疫效果而探讨预防病毒性心肌炎的可能性.
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Toll样受体激动剂在疫苗研发中的研究进展
固有免疫细胞具有抗感染和疾病防御作用.这方面的核心是通过建立广泛的特异性联系,即通过固有免疫细胞表达模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)来检测病原体相关模式和危险物相关模式.Toll样受体(TLR)是模式识别受体中研究的为广泛的一种受体.因此,TLR的激活具有促进固有炎症因子的释放和诱导特异性免疫两种作用.充分利用TLR的特点,在疫苗设计中加入相应的TLR受体激动剂,可以加速疫苗的免疫应答,产生更持久的保护.
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cGAMP:一种新型疫苗佐剂
目前广泛用于人疫苗的铝盐佐剂诱导的细胞免疫较弱,对于某些新型疫苗来说佐剂活性较差,尤其是对相对分子质量小的多肽抗原几乎没有佐剂活性,不能完全满足新型疫苗发展的需要.cGAMP(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate)是近来被发现的哺乳动物第二信使,该分子在固有免疫信号通路中发挥着重要的作用,可以提高疫苗的免疫原性,激活抗原提呈细胞,增强特异性T细胞应答,有望成为人类抵御传染病甚至是癌症的新一代疫苗佐剂.本文综述了目前疫苗佐剂的应用和现状,介绍了cGAMP的发现及作为疫苗佐剂的作用机制,重点阐述了其在传染病疫苗、皮内免疫、肿瘤免疫治疗等方面的相关研究进展,并指出cGAMP作为新型疫苗佐剂,将在传染病防御和肿瘤免疫治疗等领域具有广阔的前景.
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双歧杆菌菌处理体对疫苗诱导免疫应答的影响
杆菌为人体益生菌,富含细胞壁肽聚糖(WPG)、脂磷壁酸(LTA)及细菌核酸(DNA)等佐剂成分.口服双歧杆菌制剂具有免疫调节作用得到许多实验证实.
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鸡IL-2、IL-1 8、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用
目的 探讨鸡IL-2、IL-18、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用.方法 将携带禽流感病毒(AIV)DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pVAX1-HA-IL2)、SL7207(pVAX1-HA-IL18)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1)经口服和滴鼻途径首免1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,测定免疫鸡的体液和黏膜免疫应答水平,并进行攻毒保护试验.结果 二免后3周,SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)免疫组以及SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1-IFN-γ)联合免疫组鸡产生了较高水平的特异性黏膜免疫应答(P＜0.05),但重组菌免疫鸡血清中抗AIV HI抗体水平与空载体组相比差异无统计学意义.SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)的免疫保护指数显著高于阴性对照组.结论 初步观察佐剂效应依次为:CpG＞IFN-γ＞IL-18,IL-2未表现出佐剂效应.
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核酸疫苗Sj14-3-3联合CpG和mIL-12免疫小鼠抗日本血吸虫攻击感染的研究
目的在证明核酸疫苗pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3具有部分抗血吸虫感染的基础上,联合使用CpG和pcDNA3.1(+)-mIL-12,观察此二种佐剂在攻击感染小鼠的免疫效果及其抗血吸虫感染的保护机制.方法分别用pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+pcDNA3.1(+)-mIL-12、pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+CpG、pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG免疫小鼠.攻击感染后6 w计数成虫负荷和肝虫卵数;检测免疫后0 w、6 w和12 w小鼠血清总IgG、IgG1和IgG2a水平;检测小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4;流式细胞术检测免疫鼠脾细胞中CD4+和CD8+T细胞的比率.结果pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+pcDNA3.1(+)-mIL-12和pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+CpG免疫小鼠的减虫率分别为41.2%和28.7%;减卵率分别为52.6%和41.2%.单独使用pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG也有一定的免疫保护作用.保护性免疫主要通过诱导宿主产生CTL、TH1型和体液免疫应答.结论pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG具有较强的增强核酸疫苗pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3抗血吸虫攻击感染作用.
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新疆野生一枝蒿粗多糖作为流感病毒疫苗佐剂的免疫效果
目的 初步探讨新疆野生一枝蒿粗多糖(wild Artemisia rupestris L.crude polysaccha-rides,WARCP)对流感病毒疫苗(influenza virus vaccine,IVV)的免疫增强效果和节约疫苗用量的作用.方法 将0.3μg或1.5μg的流感病毒疫苗与200μg的WARCP配伍后,分别在第0天和第14天皮下免疫ICR小鼠,间接ELISA法检测免疫后血清抗体水平,MTT法检测淋巴细胞的增殖,并观察小鼠生长状况.结果 WARCP对小鼠生长并无显著影响(P>0.05);WARCP能够显著提高流感疫苗特异性IgG及其IgG1、IgG2a的抗体水平(P<0.05);WARCP配伍低剂量流感疫苗的IgG抗体水平显著高于高剂量流感疫苗单独组(P<0.05),WARCP能显著性地增强淋巴细胞的增殖(P<0.05),可以至少节约流感疫苗用量的80%.结论 新疆野生一枝蒿粗多糖具有较好的安全性,作为佐剂增强了流感病毒疫苗的体液免疫和细胞免疫水平,并且可以节约流感疫苗用量.
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以壳聚糖为佐剂的幽门螺杆菌蛋白抗原对幽门螺杆菌感染的免疫保护作用
目的探讨以壳聚糖为佐剂的幽门螺杆菌(Hp)抗原对Hp感染的免疫保护作用.方法 BALB/c小鼠随机分为9组:(1)空白对照组:PBS溶液;(2)壳聚糖酸溶液组;(3)壳聚糖颗粒组;(4)Hp抗原组;(5)Hp抗原+壳聚糖酸溶液组;(6)Hp抗原+壳聚糖颗粒组;(7)Hp抗原+CT组;(8)Hp抗原+壳聚糖酸溶液+CT组;(9)Hp抗原+壳聚糖颗粒+CT组.各组于第O、7、14、21天灌胃各免疫1次,免疫后4周给予109CFU/ml的SSI Hp菌液0.5 ml/只进行攻击,隔日1次,共2次.4周后,采用定量Hp培养和病理改良Giemsa染色法检测胃黏膜内Hp感染情况.结果 (1)以壳聚糖为佐剂的Hp抗原的免疫保护率达60%,与以CT为佐剂的Hp抗原的免疫保护率(58.33%)相似,显著高于单纯Hp抗原组及其他不含Hp抗原组(P＜0.05),同时以CT+壳聚糖为佐剂的Hp疫苗的保护率为84.62%、85.71%,高于CT或壳聚糖单独作佐剂组.(2)病理组织学检测含佐剂组的Hp定植计分显著低于无佐剂组和无抗原组(P＜0.05),壳聚糖和CT联合应用组的Hp定植计分低,显著低于单以CT为佐剂组(P＜0.05).(3)Hp定量培养Hp定植密度在佐剂中含壳聚糖组均显著低于对照组和单纯Hp抗原组(P＜0.05),而单以CT为佐剂组Hp定植密度与对照组和单纯Hp抗原组差异无统计学意义(P＞0.05).结论以壳聚糖为佐剂的Hp抗原对Hp感染具有免疫保护作用,并且与CT有协同作用.
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不同佐剂对随机组合多表位恶性疟疾疫苗M. RCAg-1的免疫原性及体外抑虫率影响的研究
目的 研究弗氏佐剂及3种人用佐剂[Al(OH)3、Montanide ISA720、Montanide ISA51]对重组多表位蛋白M.RCAg-1(malaria random constructed antigen-1)在BALB/c小鼠及新西兰大白兔体内产生免疫效果的影响.方法 以弗氏佐剂、Al( OH)3佐剂、Montanide ISA720以及MontanideISA51佐剂分别与M.RCAg-1蛋白进行配伍,分别免疫BALB/c小鼠及新西兰白兔；采用ELISA法检测M.RCAg-1蛋白及其所组成各个表位特异的血清IgG含量；间接荧光免疫试验分析不同配伍组免疫血清对天然疟原虫抗原的识别；酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测特异性鼠T淋巴细胞的活化；另借助生物传感器评价抗原与不同佐剂配伍组血清的亲和力,并用体外生长抑制试验(GIA)对恶性疟原虫的体外生长的影响进行评价.结果 不同佐剂可诱发不同水平的抗体滴度,Montanide ISA51佐剂配伍组的效果与弗氏佐剂组为接近,并可使蛋白包含的11个表位肽能都较好诱发出特异性抗体,可有效激发以IFN-γ为主的细胞免疫应答,而且Montanide ISA51佐剂组免疫产生的抗体和M.RCAg-1蛋白质的亲和力高于其他两种佐剂；而Montanide ISA720佐剂和Al(OH)3佐剂免疫组不能诱发小鼠产生显著的IFN-γ反应(P＞0.05).Montanide ISA51配伍蛋白质免疫产生的IgG在浓度为2mg/ml时对3D7和Dd2的抑制率分别为60%和100%,Al(OH)3佐剂组免疫兔血清IgG体外抑虫率较低(10%左右),而Montanide ISA720佐剂免疫组血清不能有效抑制疟原虫生长.结论 通过比较3种人用佐剂和弗氏佐剂对BALB/c小鼠和新西兰兔的免疫辅助效能显示,Montanide ISA51佐剂能很好的辅助M.RCAg-1蛋白疫苗诱发动物体内的体液免疫和细胞免疫应答,可做为疫苗的候选佐剂之一.
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佐剂LTN增强新型CVB3黏膜疫苗病毒性心肌炎保护效果的机制探讨
目的 对黏膜佐剂淋巴细胞趋化因子(LTN)的机制进行初步探讨.方法 共凝聚法制备chitosan-pLTN和chitosan-pVP1复合物,混合后隔周滴鼻免疫小鼠,共4次,每次每种质粒50μg.末次免疫后2周以3LD50 CVB3腹腔感染小鼠诱导病毒性心肌炎,7 d后行心肌病理学观察.同时检测脾脏、肠系膜淋巴结(MLN)和颈部淋巴结(CLN)部位T细胞免疫应答、DC比例及CD86的表达.结果 LTN共免疫明显改善了CVB3性病毒性心肌炎炎症损伤;显著促进了脾脏、CLN和MLN部位特异性T细胞增殖和分泌IFN-γ的能力,显著上调了DC比例和DC表面共刺激分子CD86的表达.结论 黏膜佐剂LTN通过促进局部DC的招募和成熟来增强全身和黏膜部位特异性T细胞免疫应答,进而增强CVB3病毒性心肌炎黏膜基因疫苗的免疫保护效果.
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重组质粒pcDNA3.1IL-2/Fc对HBV preS2S DNA疫苗免疫作用的影响
目的 探讨IL-2/Fc融合表达后对HBVpreS2S基因疫苗诱导免疫反应的佐剂效应.方法 采用HBV preS2S DNA疫苗作为基础免疫,重组质粒pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂加强免疫BALB/c小鼠,采用0、2、4周的方案接种,检测各次接种后抗体水平.初次免疫后7周,测定免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性和细胞因子的分泌水平.结果 pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂在HBV preS2S注射3 d后免疫组小鼠抗体滴度、免疫脾细胞的杀伤活性和增殖活性、TH1型细胞因子的分泌水平,均比各对照组明显增强.结论 IL-2/Fc是有效的HBV preS2S DNA疫苗佐剂之一.
关键词： HBV DNA 疫苗 IL-2 佐剂 -
二甲基三十六烷基铵及卡介苗多糖核酸佐剂在结核亚单位疫苗加强BCG免疫中的效应研究
目的 探讨二甲基三十六烷基铵(dimo-thylidioctyl ammonium bromide,DDA)和卡介苗多糖核酸(BCC-PSN)佐剂在结核融合蛋白疫苗加强卡介苗(BCG)免疫中的不同免疫辅助效应.方法 选择DDA、BCG-PSN作为融合蛋白AMM(Ag85B-MPT64190-198-Mtb8.4)的佐剂,在BCG初免小鼠后,AMM疫苗加强免疫两次,其中一组联合使用两种佐剂(DDA/BCG-PSN),另一组单独以DDA作为佐剂,同时设立BCG或磷酸缓冲液(PBS)免疫组为对照.应用ELISA及ELISPOT检测免疫小鼠的体液与细胞免疫反应,后一次加强免疫后第12周,以H37Rv尾静脉攻毒并检测小鼠肺脾组织细菌载量和病理改变,评价不同佐剂疫苗的保护效果.结果 在BCG初免基础上,联合佐剂组(AMM/DDA/BCG-PSN)和单独佐剂组(AMM/DDA)加强免疫两次后,脾脏淋巴细胞经抗原Ag85B和PPD(purified protein derivative)刺激后,皆可产生分泌较BCG组高的IFN-γ.毒力株攻击后菌落形成单位(colony-forming unit,CFU)计数显示,联合佐剂组(AMM/DDA/BCG-PSN)脾脏荷菌量少于PBS组和BCG组(P<0.05);而单独佐剂组(AMM/DDA)肺部荷菌量少于PBS组和BCG组(P<0.05).组织病理分析结果 表明AMM/DDA/BCG-PSN组肺组织病理损伤较轻,而AMM/DDA组病理损伤个体差异较大.结论 DDA是较为理想的结核亚单位疫苗佐剂,能诱导较强的细胞免疫和免疫保护作用;BCG-PSN可能具有免疫调节作用,可以减轻免疫病理损伤.
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双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的佐剂效应
目的探讨双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的吸附作用及其佐剂效应.方法从双歧杆菌细胞壁提取完整肽聚糖,以不同方式与重组乙肝表面抗原结合,检测其对重组乙肝表面抗原的吸附作用;制备免疫原接种BALB/c小鼠,观察小鼠免疫后状态和生长情况,检测小鼠血清特异性抗体应答情况的变化.结果在磷酸盐缓冲液中,完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的吸附呈剂量依赖性,作为佐剂免疫小鼠后无毒副反应出现,小鼠血清抗体阳性率和抗体滴度明显提高,IgG2a/IgG1增大.结论双歧杆菌完整肽聚糖能够吸附重组乙肝表面抗原,增强机体相应的体液免疫应答和细胞免疫应答,具备良好的免疫佐剂效应.
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MF59与氢氧化铝佐剂对 HIV-1 gp140三聚体蛋白诱导的体液免疫增强效应的研究
目的：研究MF59佐剂与氢氧化铝佐剂对HIV gp140三聚体蛋白诱导HIV抗原特异性体液免疫应答的增强效应，为HIV疫苗寻找更加有效的新型佐剂。方法豚鼠随机分为3组：MF59全剂量组、MF59半剂量组和Al（ OH）3组。于第0、3、6周按抗原佐剂体积比1∶1（ MF59全剂量组）、1∶0．5（MF59半剂量组）和1∶1[Al（OH）3组]免疫豚鼠，第9周取血分离血清。 ELISA间接法检测血清抗HIV-1 gp120结合抗体和抗HIV-1 gp70V1V2结合抗体，TZM-bl假病毒方法检测血清对4个亚型8个假病毒的中和抗体。结果 HIV-1 gp120结合抗体滴度，MF59全剂量组与MF59半剂量组均显著高于Al（OH）3组（P＝0．027和P＝0．041）；HIV-1 gp70V1V2结合抗体A405读数MF59全剂量组显著高于Al（OH）3组（P＝0．029），MF59半剂量组与Al（OH）3组比较差异无统计学意义（P＝0．34）。假病毒中和活性检测，除去MF59半剂量组不能中和B亚型的两个假病毒REJO4541和TR-JO4551外，各组对8个假病毒均有不同强度的中和活性。8个假病毒中和活性半数抑制剂量（ ID50）的几何平均值比较：MF59全剂量组＞Al（ OH）3组＞MF59半剂量组。结论与传统的氢氧化铝佐剂相比，全剂量的MF59佐剂与HIV-1 gp140三聚体蛋白共同免疫豚鼠，血清抗原特异性结合抗体的水平显著提高，中和抗体的水平亦有提高的趋势。
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复合佐剂 MF59／hBCG 对结核病蛋白疫苗免疫原性的影响
目的：探讨复合佐剂[MF59和热灭活BCG（hBCG），MF59/hBCG]对结核分枝杆菌重组融合蛋白PstS1-LEP 免疫原性的影响。方法 BALB/c 小鼠分为6组，1组：MF59＋PstS1-LEP；2组：MF59/hBCG＋PstS1-LEP；3组：hBCG＋PstS1-LEP；4组：MF59；5组：PstS1-LEP；6组：hBCG。分别于第0、2、4周皮下免疫小鼠。末次免疫2周后解剖小鼠，PstS1-LEP体外刺激培养脾细胞和腹腔巨噬细胞。间接ELISA检测血清抗PstS1-LEP抗体，夹心ELISA检测培养上清细胞因子含量。结果1组IFN-γ、IL-1β、IgG、IgG1和IgG2a水平显著高于4组、5组和6组（P＜0.05），IL-2和IL-4水平显著高于4组和6组（P＜0.05）。2组IFN-γ、IL-1β、IL-12、IgG、IgG1和IgG2a水平显著高于4组、5组和6组（P＜0.05），IL-2水平显著高于4组和6组（ P＜0.05）。3组IL-4水平显著高于4组（ P＝0.05），IL-1β水平显著高于4组和5组（ P＜0.05），IgG水平显著高于4组和6组（ P＜0.05）， IgG1水平显著高于4组、5组和6组（ P＜0.05）。结论以PstS1-LEP为抗原，hBCG佐剂偏向诱导Th2型免疫反应，MF59佐剂诱导Th1/Th2型免疫反应，MF59和hBCG联合抑制脾细胞分泌IL-4，但增强巨噬细胞分泌IL-12。
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三种类型CpG-ODN作为蛋白亚单位疫苗佐剂的比较研究
目的 比较A、B和C3种类型CpG-ODN在动物模型中的疫苗佐剂活性,为设计高活性的新型人用疫苗佐剂提供理论基础.方法 用不同CpG-ODN刺激体外培养的小鼠脾细胞,检测上清中的IFN-γ和IgM,从而确定3种类型的CpG-ODN.以基因工程乙肝表面抗原(HBsAg)为模型抗原、不同类型CpG-ODN为佐剂免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测被免动物血清中抗原特异性ISG、IgG1和IgG2a抗体.结果 小鼠免疫结果表明,与Al(OH),对照组相比,3种类型CpG-ODN均具有良好的疫苗佐剂活性,但B和C型CpG-ODN诱生的抗原特异性IgG和IgG2a抗体水平远高于A型CpG-ODN.虽然A型CpG-ODN也能够显著增强总抗体水平,但并不改变IgG1和IgG2a抗体亚型的比值.这与B和C型CpG-ODN能够极大地促进TH1类免疫应答并降低IgG1/IgG2a比值明显不同,提示不同类型CpG-ODN可能通过不同机制起到疫苗佐剂作用.结论 不同类型CpG-ODN具有不同疫苗佐剂活性,B和c型CpG.ODN在小鼠体内的体液免疫佐剂效果优于A型CpG.ODN.
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不同佐剂及免疫途径对重组NTHi外膜蛋白P6免疫效果影响的研究
目的 研究几种佐剂及免疫途径对重组NTHi P6蛋白抗原在小鼠体内产生的免疫效果的影响.方法 以A1(OH),佐剂、CpG ODN佐剂以及两种联合的复合佐剂分别与rP6蛋白混合,经滴鼻、肌肉注射免疫途径免疫6周龄雌性BALB/c小鼠;相同剂量、免疫途径加强免疫2次.采用ELISA法检测rP6蛋白特异的血清IgG和黏膜IgA滴度;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测特异性T淋巴细胞的活化.结果 3次免疫后,CpG ODN+rP6滴鼻免疫组和A1(OH)3+CpG ODN+rP6肌肉注射免疫组产生高滴度的特异性血清IgG抗体(F=41.259,P=0.000).同时ELISPOT试验显示,CpG ODN+rP6无论通过滴鼻还是肌肉注射免疫均能诱导大量抗原特异性T淋巴细胞的活化,与其他实验组比较差异有统计学意义(F=66.046,P=0.000).而且CpG ODN+rP6滴鼻免疫组能诱发高滴度的特异性黏膜IgA抗体(F=70.966,P=0.000).结论 重组NTHi外膜蛋白P6与CpG ODN佐剂联合后经黏膜途径免疫,小但能保证体液免疫的高滴度血清IgG抗体,而且能从黏膜免疫和细胞免疫两方面对该蛋白的免疫效果进行增强.
