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着床期小鼠子宫内膜促血管生成素-2的表达
目的检查促血管生成素-2(Ang-2)蛋白在小鼠着床期子宫内膜的分布及mRNA的表达,以探究Ang-2基因表达在着床过程中的作用和生物学意义(OD).方法取妊娠2、4、6和8 d的小鼠子宫内膜(蜕膜),运用免疫组织化学S-P法和原位杂交技术,检测着床期子宫内膜中Ang 2蛋白的表达及mRNA的转录水平.结合图像分析技术检测不同时期子宫内膜中Ang-2表达的平均光密度(OD).结果结果显示,Ang-2特异性免疫反应产物在基质细胞及腔上皮细胞胞浆中表达,随着妊娠天数的增加,表达逐渐增强(P＜0.01).原位杂交显示,Ang-2 mRNA自妊娠第2天起即表达于基质细胞和腺上皮;第4天血管壁胞浆中也出现阳性表达,且其表达强度在妊娠第6、8天时逐渐增加.平均OD值具有显著性差异(P＜0.01).结论在小鼠妊娠过程中Ang-2和Ang-2 mRNA在着床前小鼠子宫内膜中即开始表达,并随妊娠进程而表达增强,提示Ang-2基因在"胎-母"对话的信号传导过程中起调节作用.
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干扰长单一序列区83基因对人巨细胞病毒感染后人脑血管平滑肌促血管生成素及血管内皮生长因子表达的影响
目的 长单一序列区(unique long region 83,UL83)基因是人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染再激活标志.本研究拟探索UL83对HCMV感染后人脑血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cel s,VSMC)中不稳定斑块破裂相关因子,如促血管生成素(angiopoietin,Ang)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 ①采用流式细胞仪确定amidite荧光素(fluorescein amidite,FAM)标记的小干扰核糖核酸(smal interfering ribonucleic acid,siRNA)通过脂质体转入人脑VSMC的转染效率;②将3条化学合成siRNA通过脂质体转染入已感染HCMV AD169株(MOI=10)的人脑VSMC当中,结合空白组、接毒组及接毒无效干扰组筛选抑制UL83基因强siRNA;③分别检测HCMV AD169株(MOI=10)感染人脑VSMC后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h以及72 h Ang-1、Ang-2及VEGF-A信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)及蛋白表达变化;④分别检测空白组、接毒高效干扰组、接毒无效干扰组及接毒组在感染48 h后Ang-1、Ang-2及VEGF-A的mRNA及感染72 h后上述蛋白表达情况.结果 转染6 h后,95.59％人脑VSMC转染了FAM标记siRNA.感染HCMV AD169株(MOI=10)的人脑VSMC在转染siRNA 48 h后,siRNA转染组与接毒组相比,UL83 mRNA相对表达量多下降78.7％;转染siRNA72 h后,UL83编码的pp65蛋白相对表达量多下降81.3％.人脑VSMC感染HCMV AD169株(MOI=10)0 h、6 h、12 h、24 h、48 h以及72 h时后,Ang-1 mRNA及蛋白相对表达量逐渐下降(P<0.01),Ang-2及VEGF-A mRNA及蛋白相对表达量则逐渐增加(P<0.01).而通过转染高效siRNA抑制HCMV AD169株UL83基因,使得Ang-1表达下降,Ang-2和VEGF-A表达增加均被抑制.结论 HCMV AD169株具有同时促进人脑VSMC中Ang-1表达降低,Ang-2及VEGF-A表达增加功能.而通过siRNA抑制HCMV AD169株UL83基因表达能够阻止上述变化.提示HCMV可能通过UL83基因造成靶细胞产生促血管新生微环境.
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促血管生成素-2在恶性肿瘤诊断中的价值分析
目的:探讨促血管生成素-2(Ang-2)在恶性肿瘤诊断中的应用价值.方法:对恶性肿瘤(观察组)136例与健康对照组46例,采用单克隆抗体透射比浊法检测血清中的Ang-2.采用ELISA法检测肝癌13例血清中的AFP和直肠癌10例血清中的CEA,并分别与Ang-2比较其阳性率.结果:观察组与对照组Ang-2的阳性率分别为28.7%和52.2%,两组比较,差异显著(P<0.05).直肠癌患者血清Ang-2与CEA的阳性率均为50.0%;肝癌患者血清Ang-2与AFP的阳性率分别为46.2%和92.3%,AFP的阳性检出率显著高于Ang-2(P<0.05).结论:Ang-2在恶性肿瘤中的检出率低,其临床应用价值有待进一步研究.
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Ang-2和VEGF在肾细胞癌患者外周血中的表达及其意义
目的:检测促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾细胞癌患者外周血中的表达,探讨两者的变化及其相互关系.方法:收集56例肾细胞癌患者按肿瘤分期分为实验1、2、3组,30例健康人为对照组,采用ELISA方法分别检测标本Ang-2、VEGF的水平,对以上数据进行比较.结果:四组的VEGF两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验3组的Ang-2高于实验1组、实验2组、对照组,对照组的Ang-2低于实验1、2、3组,差异均有统计学意义(P<0.05).肾细胞癌患者血清VEGF和Ang-2呈正相关(r=0.732,P<0.05).结论:Ang-2、VEGF在肾细胞癌患者外周血中呈高表达,且与临床分期关系密切,Ang-2和VEGF在肾细胞癌血管生成中可能相互影响.
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促血管生成素-2在脓毒症合并ARDS患者中的作用
目的 观察脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清促血管生成素-2(Ang-2)的水平,探讨其在脓毒症合并ARDS患者中的诊断价值.方法 选取贵州省人民医院急诊重症加强治疗病房(EICU)及呼吸科重症加强治疗病房(RICU)2015年10月至2017年3月收治的120例脓毒症患者,根据柏林新标准将患者分为单纯脓毒症组(97例)和脓毒症合并ARDS组(23例).收集两组患者性别、年龄、生命体征、基础疾病、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、氧合指数(PaO2/FiO2)及血清Ang-2水平等指标.采用脉搏指示连续心排血量(PiCCO)技术监测患者血管外肺水(EVLW),并计算EVLW指数(EVLWI)、肺血管通透性指数(PVPI);分析Ang-2与EVLWI、PVPI、PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分的相关性;绘制受试者工作特征曲线(ROC),评估Ang-2、EVLWI、PVPI、APACHEⅡ评分对ARDS的预测价值.结果 脓毒症合并ARDS组患者APACHEⅡ评分(分:21.53±2.03比14.60±1.64)、EVLWI(mL/kg:15.89±2.79比7.59±2.20)、PVPI(4.99±0.47比2.66±0.29)和入组后2 h血清Ang-2水平(mg/L:6.13±1.91比3.44±1.34)均明显高于单纯脓毒症组(均P<0.05);而PaO2/FiO2则明显低于单纯脓毒症组〔mmHg(1 mmHg=0.133 kPa):255±24比314±26〕.相关性分析显示:Ang-2与EVLWI(r=0.804,P=0.001)、PVPI(r=0.710,P=0.004)、APACHEⅡ评分(r=0.826,P=0.000)呈显著正相关,与PaO2/FiO2呈显著负相关(r=-0.790,P=0.001).ROC曲线分析显示:Ang-2、EVLWI、PVPI、APACHEⅡ评分预测ARDS的ROC曲线下面积(AUC)均在0.750以上,均具有较高的诊断能力;AUC分别为0.795、0.806、0.882、0.832,敏感度分别为88.91％、86.36％、92.32％、76.91％,特异度分别为66.82％、66.34％、66.23％、77.84％,95％ 可信区间(95％CI)分别为0.661～0.922、0.757～0.856、0.793～0.961、0.725～0.933,其中以PVPI对ARDS的预测价值准确(其AUC在0.85以上,敏感度也高).结论 脓毒症合并ARDS患者Ang-2的变化与PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分、EVLWI、PVPI密切相关,Ang-2浓度越高,患者肺损伤越严重,发生ARDS的可能性越大,进一步推测Ang-2可作为ARDS早期诊断的分子生物学指标.
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口腔鳞癌中促血管生成素-2及受体Tie-2的表达与肿瘤临床病理学参数和微血管特征的关系
);Ang-2的表达和肿瘤微血管密度在有淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05);口腔鳞癌间质微血管与癌旁和正常口腔黏膜微血管相比具有血管密度高、不成熟、形态不规则、周长较小的特点(P均＜0.01);Ang-2及Tie-2的表达与微血管密度显著相关(P＜0.05);Ang-2的表达还与血管成熟指数显著相关(P＜0.05).结论:口腔鳞癌组织中Ang-2及Tie-2表达的上调与肿瘤进展和血管生成密切相关.
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赤芍总苷对人黑色素瘤细胞A375血管生成因子VEG F和Ang -2的影响
目的 探讨赤芍总苷(TPG)对人黑色素瘤A375细胞血管内皮生长因子(VEGF)和促血管生成素-2(Ang -2)表达的影响.方法 体外培养人黑色素瘤A375细胞,分别加入12.5、25、50、100、200mg/LTPG,对照组加入等量生理盐水,孵育24h、48h后,MTT方法测定生长抑制率；RT - PCR、Western blot分别测定TPG处理48h后VEGF和Ang -2 mRNA和蛋白的表达.结果 MTT结果显示TPG对黑色素瘤细胞增殖有显著抑制作用；RT - PCR、Western blot结果显示,TPG可显著抑制人黑色素瘤细胞VEGF、Ang -2 mRNA水平及蛋白水平的表达.结论 TPG具有显著的抗黑色素瘤瘤血管生成的作用,其机制可能与下调VEGF、Ang -2的表达有关.
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Ang-2和TM-1与糖尿病鼠肾新生血管生成关系的初步研究
目的:探讨糖尿病肾脏促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)和血栓调节蛋白(thrombomodulin-1,TM-1)表达变化及其与新生血管生成的关系.方法:用雄性SD大鼠建立STZ诱导的糖尿病肾病模型,设正常对照和模型组,分别于2、4、8、12、16、20、24周清洁取肾,采用免疫组织化学染色,定量分析肾脏Ang-2和血栓调节蛋白TM-1表达变化,用逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测肾脏Ang-2 mRNA的表达.结果:糖尿病组仅于16周和20周时探及肾组织Ang-2 mRNA表达;免疫组化显示糖尿病肾脏12周时皮质区肾小管周围出现Ang-2着染微血管,16周表达强;整个实验期间对照组未探及Ang-2 mRNA和蛋白表达;TM-1突出表达于肾小球,糖尿病组2～20周肾小球TM-1着染显著高于对照组(P＜0.001),峰期在4～16周,24周时低于对照组,但无统计学意义(P＞0.05),TM一1表达变化与肾重/体重、肾小球面积和体积呈正相关.结论:糖尿病肾脏中后期皮质区肾小管管周围存在Ang-2着染的新生微血管,Ang-2和TM-1的异常表达与肾脏新生血管生成有关.
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促血管生成素-1、2及Tie2在血管瘤及血管畸形中的表达及意义
目的 探讨促血管生成素-1(Ang-1)、促血管生成素-2(Ang-2)及其受体Tie2在血管瘤和血管畸形组织中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学S-P方法,测定血管瘤、血管畸形的血管内皮细胞中Ang-1、Ang-2及Tie2的表达. 结果 Ang-2、Tie2的表达在增生期血管瘤强;在退化期血管瘤中的表达次之;而在血管畸形中表达较弱,与小儿正常皮肤表达无显著性差异.而Ang-1的表达,各组差异无统计学意义. 结论 Ang-1、Ang-2及其受体Tie2在血管瘤的血管生成以及血管瘤的自然消退过程中可能起着重要的作用;Ang-1、Ang-2及其受体Tie2的表达可能与血管畸形的发病无明显关系.
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促血管生成素-2对宫颈癌种植瘤血管形成的影响
目的 探讨促血管生成素-2(Ang-2)对人宫颈癌Hela细胞裸鼠种植瘤血管形成的影响.方法 2004年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学将实验动物裸鼠分4组:Hank平衡盐溶液组(n=8)、Hela空白对照组(n=9)、Ang-2重组质粒组(n=9)、pcDNA3载体质粒对照组(n=9),比较各组裸鼠成瘤体积、微血管密度(MVD).结果 Ang-2重组质粒组肿瘤体积为(296.72±84.56)mm3,明显小于Hela空白对照组及pcDNA3栽体质粒对照组,差异具有统计学意义;Ang-2重组质粒组肿瘤组织中MVD约为12/HP,明显少于Hela空白对照组及pcDNA3载体质粒对照组,差异具有统计学意义.结论 Ang-2转染人宫颈癌Hela细胞在裸鼠体内的致瘤力明显降低.肿瘤的体积、肿瘤组织MVD显著低于对照组,表明Ang-2可通过抑制肿瘤血管生成而显著抑制肿瘤生长.
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促血管生成素-2在反复自然流产绒毛膜中的表达
目的:探讨反复自然流产(RSA)与促血管生成素-2(Ang-2)的关系.方法:用免疫组化法检测33例反复自然流产患者和37例健康早孕人工流产妇女的绒毛膜组织中Ang-2的表达水平.结果:自然流产组Ang-2的表达高于人工流产组,差异有统计学意义(P＜0.05)；两组Ang-2的表达均与年龄无关(P＞0.05)；自然流产组Ang-2的表达与胚胎孕周呈正相关(P＜0.05),而人工流产组Ang-2的表达与胚胎孕周无关(P＞0.05).结论:Ang-2的高表达可能是造成自然流产的原因之一.
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促血管生成素-2在妇科肿瘤检测中的应用
目的:分别选用Ang-2、CA125、CA19-9和SCC检测妇科肿瘤患者及正常人群,以评估Ang-2在妇科肿瘤检测中的应用价值.方法:对256例妇科肿瘤患者(110例官颈癌患者、77例卵巢癌患者、41例子宫内膜癌患者、28其它妇科肿瘤患者)和139例正常人群分别以免疫比浊法检测Ang-2,微粒子酶免疫测定法检测SCC,电化学发光法法榆测 CA125、CA19-9.结果:Ang-2、CA125、CA19-9、SCC在妇科肿瘤患者中的检出率分别为68.0%、43.4%、37.1%和37.5%;在正常人群中的检出率分别为1.4%、10.1%、11.5%和3.6%;其中Ang-2、CA125、CA19-9、SCC在宫颈癌患者中的检出率分别为67.3%、42.7%、39.1%、47.3%;在卵巢癌患者中的检出率分别为70.1%、58.4%、37.7%、31.2%;在子官内膜癌患者中的检出率分别为68.3%、22.0%、29.3%、26.8%.经过CA125、CA19-9、SCC检测为阴性的卵巢癌患者,宫颈癌、子宫内膜癌患者再进行Ang-2检测,发现Ang-2对其它3种检测指标有很好的互补性,低互补检出率48.3%.结论:Ang-2作为一种国际公认的实体肿瘤的广谱标志物,它相对于其它标志物在妇科肿瘤患者的早期筛查及临床辅助诊断方面都有着显著的优势,具有重要的临床价值.
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上皮性卵巢癌中促血管生成素-2的表达及其与微血管密度的关系
目的:研究促血管生成素-2(Ang-2)在上皮性卵巢癌血管生成及肿瘤生长中的作用.方法:应用免疫组化法检测46例上皮性卵巢癌和25例正常卵巢组织石蜡标本Ang-2和CD34表达,并以CD34标记的微血管计算组织的微血管密度(MVD).结果:上皮性卵巢癌组织中Ang-2表达率高于正常卵巢组织(P<0.05),Ⅲ期和Ⅳ期合并组Ang-2表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期合并组(P<0.05);上皮性卵巢癌中Ang-2表达与其病理类型及组织学分级无关,而与MVD呈正相关(r=0.733,P<0.01).结论:Ang-2与上皮性卵巢癌的血管生成及其发展密切相关,可能通过促进上皮性卵巢癌中的血管生成而促进其发展.
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肺癌患者血清促血管生成素2水平及其临床意义
目的 分析不同病理分型、不同临床分期的肺癌患者中促血管生成素-2(Ang-2)的表达水平,进一步探讨该病的发病机理,为临床诊断提供依据.方法 对112例肺癌患者,16例健康体检者进行血清Ang-2检测,同时进行血清中其他相关肿瘤标志物检测.比较不同病理分型、临床分期及远处转移患者血清Ang-2的不同.结果 非小细胞肺癌患者血清Ang-2水平高于正常对照组(与鳞癌比较Sig 值为0.049,P＜0.05;与腺癌比较Sig值为0.011,P＜0.05)；非小细胞肺癌Ⅲ、Ⅳ期患者血清Ang-2水平高于对照(与Ⅲ期比较Sig值为0.013,P＜0.05;与Ⅳ期比较Sig值为0.000,P＜0.001)；远处转移患者血清Ang-2水平非常显著高于非远处转移者(Sig值为0.008,P＜0.01)；结论 分析血清Ang-2水平对肺癌患者的临床诊断、预测转移和预后判断均有临床价值,应用Ang-2与其他肿瘤标志物联合检测可提高患者诊断阳性率.
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促血管生成素-2在肺癌、食管癌早期诊断中的应用
目的 分别选用促血管生成素(Ang-2)、CEA、CA125、NSE和SCC检测肺癌、食管癌患者及健康人,以评估Ang-2的应用价值.方法 对156例肺癌患者(鳞癌67例、腺癌47例、小细胞肺癌42例)、89例食管癌患者(鳞癌41例、腺癌30例、小细胞肺癌18例)和119例健康人分别以增强化学发光法检测Ang-2,微粒子酶免疫测定法检测SCC,电化学发光法检测CEA、CA125、NSE.结果 Ang-2、CEA、CA125、NSE和SCC在肺癌中的阳性率分别为69.2%、39.1%、30.1%、38.5%和28.8%;在食管癌中的阳性率分别为69.7%、34.8%、34.8%、20.2%和39.3%;在健康人组中的阳性率分别为3.4%、12.6%、14.2%、11.8%和7.6%.Ang-2在肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌中的阳性率分别为69.2%、69.4%、69.0%、;在食管鳞癌、食管腺癌、食管小细胞癌中的阳性率分别为68.3%、73.3%、66.7%,均优于另4种标志物.CEA、CA125、NSE和SCC检测为阴性的肺癌、食管癌患者再进行Ang-2检测,发现Ang-2对其他4种检测指标有很好的互补性,低补检率也有44.8%.结论 Ang-2作为一种实体肿瘤的广谱标志物,相对于其他标志物在肺癌、食管癌的筛选临床辅助诊断方面都有显著的优势.
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奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长及促血管生成素-2的影响
目的:观察小剂量奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中促血管生成素-2(Ang-2)的影响.方法:体外进行Ishikawa细胞的培养扩增后种植于裸鼠皮下,建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型.将20只成瘤裸鼠随机分为两组:奥沙利铂组和阴性对照组,分别应用奥沙利铂2.0 mg·kg-1和5%葡萄糖20 ml·kg-1进行治疗.治疗27 d后测量肿瘤体积,计算抑瘤率.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测各组肿瘤组织中Ang-2的mRNA和蛋白的表达.结果:奥沙利铂组移植瘤体积(458.20±77.56)mm3,阴性对照组移植瘤体积(771.87±89.80)mm3,二者比较差异有统计学意义(P<0.01).奥沙利铂组Ang-2在mRNA及蛋白水平的表达低于阴性对照组,二者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:奥沙利铂具有抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的作用;能抑制肿瘤组织中Ang-2的表达,可能与其抗肿瘤血管形成有关.
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促血管生成素-2在肿瘤早期筛查中的应用初探
目的:研究Ang-2在肿瘤患者与正常人血清中的表达水平,并探讨其在肿瘤诊断中的应用价值.方法:采用免疫比浊法检测74例肿瘤患者和30例正常人血清中Ang-2的表达水平.结果:肿瘤患者血清中Ang-2表达水平显著高于正常对照组(P＜0.05),肝癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、前列腺癌和胃肠肿瘤中阳性检出率分别为89.5%、66.0%、100.0%、100.0%、94.1%.结论:Ang-2可作为肿瘤早期筛查和诊断的指标.
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促血管生成素-2抑制裸鼠种植瘤生长的研究
目的 探讨促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)转染入人宫颈癌Hela细胞后对裸鼠种植性肿瘤生长的抑制作用.方法 建立Ang-2转染的Hela细胞株,实验动物随机分为:Ang-2组(A组,n=9)、Hela空白对照组(B组,n=9)、pcDNA3空白质粒对照组(C组,n=9)、Hank's平衡盐溶液组(D组,n=8)4组,比较各组裸鼠成瘤时间和肿瘤体积.结果 A组平均成瘤时间为(9.57±1.05)天,较B组[(3.85±0.83)天]和C组[(4.14±0.90]天]明显推迟(P＜0.01);A组肿瘤体积为(296.72±84.56)mm3,明显小于B组[(2 100.36±404.52 mm3]和C组[(1 887.31±355.03)mm3](P＜0.01).D组无皮下肿瘤形成.结论 转染Ang-2的人宫颈癌Hela细胞在裸鼠体内的致瘤力明显降低,肿瘤生长成瘤时间延迟,肿瘤的体积显著减小,表明Ang-2可显著抑制肿瘤生长.
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中药防治结肠息肉术后再发疗效观察及对血浆Ang-2水平的影响
结肠息肉为临床常见病、多发病,随着结肠镜技术的不断优化发展,目前结肠息肉在肠镜下切除已取得不错的疗效,但术后再发一直困扰着外科医生和病人.笔者自拟中药方辨证施治,治疗结肠息肉术后53例,对防止息肉再发取得了较好的效果,并观察了其对血浆促血管生成素-2(Ang-2)水平的影响,结果报告如下.
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促血管生成素-2在胃癌组织中的表达及意义
目的:探讨促血管生成素-2(Ang-2)在胃癌组织中的表达情况及与患者的临床病理特征、远期预后的关系.方法:收集104例经石蜡固定的胃癌组织标本(胃癌组)、80例胃癌癌旁组织标本(癌旁组)、因胃部良性疾病行胃镜检查取正常胃黏膜的组织标本60例(对照组),分别采用免疫组织化学方法检测Ang-2蛋白的表达情况;同时分析Ang-2与患者的临床病理特征、远期预后的关系.结果:胃癌组患者的Ang-2阳性表达率72.12％,显著高于癌旁组的43.75％和对照组的36.67％,差异均具有统计学意义(P＜0.05).胃癌患者的Ang-2阳性表达情况与肿瘤的分化程度、浸润深度、TNM分期及发生淋巴结转移、远处转移有关(P＜0.05);与患者的年龄、性别、肿瘤直径无关(P＞0.05).随访60个月,Ang-2表达阳性的75例患者存活38例(50.67％),Ang-2表达阴性的29例患者存活18例(62.07％),两组患者的5年存活率比较差异不具有统计学意义(x2=1.092,P=0.196);Ang-2表达阴性的患者中位生存时间51个月,显著长于Ang-2表达阳性的患者(43个月,x 2=3.984,P=0.037).结论:Ang-2在胃癌组织中的表达显著高于正常组织,同时Ang-2阳性表达与胃癌的临床病理特征、预后有一定的关系.
