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  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性大肠癌MAPK和AP-1的影响

    作者:王立生;朱惠明;潘令嘉;王玉林;罗伟香;马晓东;张亚历;周殿元

    目的探索双歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)的完整肽聚糖(WPG)的抑瘤机制. 方法以激光共聚焦显微镜检测大肠癌裸鼠移植瘤丝裂原活化的蛋白激酶家系中的ERK1/2、JNK和p38以及激活蛋白1的主要组分c-fos和c-jun的含量. 结果 WPG注射组大肠癌组织的ERK1/2和c-jun的平均荧光强度均明显低于肿瘤对照组(P<0.01);而JNK、p38和c-fos的平均荧光强度在两组间差异则无显著性 (P>0.05). 结论双歧双歧杆菌的WPG体内能降低大肠癌ERK1/2的活性以及c-jun的表达,这可能是其抑瘤途径之一.

  • 双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的佐剂效应

    作者:谢成彬;王跃;陈淑惠;刘明方

    目的探讨双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的吸附作用及其佐剂效应.方法从双歧杆菌细胞壁提取完整肽聚糖,以不同方式与重组乙肝表面抗原结合,检测其对重组乙肝表面抗原的吸附作用;制备免疫原接种BALB/c小鼠,观察小鼠免疫后状态和生长情况,检测小鼠血清特异性抗体应答情况的变化.结果在磷酸盐缓冲液中,完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原的吸附呈剂量依赖性,作为佐剂免疫小鼠后无毒副反应出现,小鼠血清抗体阳性率和抗体滴度明显提高,IgG2a/IgG1增大.结论双歧杆菌完整肽聚糖能够吸附重组乙肝表面抗原,增强机体相应的体液免疫应答和细胞免疫应答,具备良好的免疫佐剂效应.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性大肠癌PCNA、caspase-3 和 iNOS表达的影响

    作者:王立生;朱惠明;潘令嘉;王玉林;张亚历;姜泊;周殿元

    目的 探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖的抑瘤机制.方法以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用免疫组化法观察了大肠癌移植瘤的PCNA、caspase-3和iNOS基因的蛋白表达水平.结果完整肽聚糖注射组大肠癌移植瘤PCNA、caspase-3和iNOS蛋白的阳性细胞数(个)分别为96±12、85±14和195±29;肿瘤对照组分别为160±14、18±4以及47±12.此外,完整肽聚糖注射组大肠癌移植瘤caspase-3和iNOS蛋白的表达率分别为95%和85%;肿瘤对照组分别为35%和45%.统计学处理表明完整肽聚糖注射组大肠癌移植瘤PCNA阳性细胞数显著低于肿瘤对照组(P<0.01),而caspase-3和iNOS蛋白的阳性细胞密度以及表达率则明显高于肿瘤对照组(P<0.01).结论分叉双歧杆菌的完整肽聚糖能降低大肠癌移植瘤细胞的增殖活性,并能增强他的caspase-3和iNOS基因的蛋白表达.

  • 双歧杆菌完整肽聚糖体外诱导大肠癌Lovo细胞凋亡的实验研究

    作者:齐占朋;王丽萍;温宪春;刘吉成

    目的 探讨双歧杆菌表面分子完整肽聚糖(whole peptidoglycan,WPG)的抗肿瘤作用及其机制.方法 体外培养大肠癌Love细胞,应用MTT法、流式细胞术观察WPG对大肠癌Lovo细胞的增生抑制作用及对细胞的凋亡诱导作用.结果 经WPG处理过的大肠癌Lovo细胞生长被抑制,且具有剂量和时间依赖性;早期凋亡细胞明显增加,与空白组比较有显著性差异(P<0.01).结论 WPG能够抑制大肠癌Lovo细胞的增生,其机制与诱导癌细胞早期凋亡有关.

  • 双歧杆菌完整肽聚糖对大肠癌Lovo细胞凋亡诱导作用及机制的研究

    作者:齐占朋;温宪春;刘吉成

    目的 探讨双歧杆菌表面分子完整肽聚糖(Whole Peptidoglycan,WPG)诱导人大肠癌Lovo细胞的凋亡作用及其可能机制. 方法体外培养大肠癌Lovo细胞,应用流式细胞术、免疫细胞化学法观察WPG对大肠癌Lovo细胞的诱导凋亡作用及对凋亡信号分子NF-kB的影响.结果 WPG 处理后的大肠癌细胞早期凋亡增加且NF-kB活化受到抑制,与空白组比较有显著性差异(P<0.01). 结论双歧杆菌WPG具有诱导Lovo细胞凋亡的作用,其作用机制可能与其抑制凋亡信号分子NF-κB的活化有关.

  • 双歧杆菌细胞壁组分免疫调节作用的研究

    作者:谷超;王志锐;魏骏飞;宋立学;陈锦英

    目的:比较两种方法制备的双歧双歧杆菌细胞壁组分即双歧杆菌完整肽聚糖(WPG)和细菌裂解物(BL)的免疫调节作用.方法:分别以化学提取法和超声法制备双歧杆菌完整肽聚糖和细菌裂解物.采用淋巴细胞转化法和溶血空斑法分别研究它们对细胞和体液免疫的调节作用.结果:与对照组比较,BL对T细胞有明显的刺激作用(P<0.05),WPG无此作用(P>0.05);二者对B细胞都有明显的刺激作用(P<0.05或P<0.01).结论:双歧双歧杆菌的BL和WPG均有免疫调节作用,前者优于后者,预示有良好的应用前景.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对小鼠腹腔巨噬细胞细胞骨架的影响

    作者:荀安营;王立生;李迎雪;曾位森;马晓冬;朱惠明;罗深秋

    目的 探讨双歧双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对巨噬细胞细胞骨架的影响.方法 首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞后,用荧光标记的鬼笔环肽染液染色,后采用激光共聚焦显微镜技术检测巨噬细胞的细胞骨架.结果 和对照组相比,WPG刺激巨噬细胞后,其胞内肌动蛋白减少且排列更加紊乱,同时胞膜荧光强度减弱,胞外放射状荧光物质减少,甚至消失.结论 双歧双歧杆菌的WPG在激活巨噬细胞的过程中可影响其细胞骨架.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对小鼠腹腔巨噬细胞膜脂流动性的影响

    作者:魏晓霞;李迎雪;王立生;荀安营;朱惠明;马晓东

    目的 探讨分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对巨噬细胞膜脂流动性的影响.方法 首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞,再用细胞膜磷脂荧光探针标记细胞,后采用激光共聚焦显微镜结合激光漂白后荧光恢复技术检测巨噬细胞的膜脂流动性.结果 WPG刺激组反映小鼠腹腔巨噬细胞膜脂流动性的平均荧光恢复率明显高于对照组(P<0.01).结论 分叉双歧杆菌的完整肽聚糖可提高巨噬细胞膜脂流动性.

  • 长双歧杆菌完整肽聚糖对小鼠免疫功能的影响

    作者:付艳茹;龚虹;刘彦民;李莹;黄少磊

    目的 比较长双歧杆菌及其完整肽聚糖的免疫调节作用.方法 通过研究长双歧杆菌完整肽聚糖对植瘤小鼠淋巴细胞的转化、抑瘤率、生命延长期以及对细胞Bcl-2和Bax表达的影响来探讨它们对小鼠细胞免疫的调节作用.结果 与对照组相比,完整肽聚糖使淋巴细胞转化增加、抑瘤率提高、延长生命期增加、Bcl-2阳性表达率减小而Bax基因表达增加.结论 长双歧杆菌与其完整肽聚糖均有抑制S180肿瘤的作用,但完整肽聚糖的效果优于长双歧杆菌.

  • 双歧杆菌及其完整肽聚糖对脐血来源树突状细胞分泌IL-12的影响

    作者:聂晶;程茜

    目的 探讨两歧双歧杆菌和不同剂量双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对脐血来源树突状细胞(DC)分泌IL-12的影响.方法 以双歧杆菌全菌(量)和不同剂量双歧杆菌WPG(1~8 μg/ml)与脐血来源树突状细胞共培养,用ELISA的方法测定培养上清中IL-12的量.结果 双歧杆菌和其WPG(1~6 μg/ml )与树突状细胞共培养后,树突状细胞分泌的IL-12的量显著高于阴性对照组(P<0.01),当WPG量为1~5 μg/ml时树突状细胞分泌的IL-12的量呈剂量依赖性,其中WPG量为5 μg/ml时作用为显著,WPG量为6 μg/ml 时分泌IL-12量减少,WPG量为8 μg/ml时,分泌的IL-12量与阴性对照组差异无显著性(P>0.05).结论 两歧双歧杆菌及其WPG能够刺激脐血来源的树突状细胞IL-12分泌;双歧杆菌WPG的免疫刺激作用呈一定的量效关系

  • 双歧杆菌完整肽聚糖对食物过敏小鼠调节性T细胞影响的研究

    作者:陈玉梅;程茜

    目的 以食物过敏小鼠为动物模型,通过灌喂双歧杆菌完整肽聚糖( Whole Peptidoglycan,WPG),观察其对调节性T细胞的作用.方法 4~6周龄SPF级无鸡蛋喂养BALB/c雌鼠随机分为3组,每组8只.取其中2组建立食物过敏模型,分别为OVA致敏阳性对照组、OVA激发后灌喂双歧杆菌WPG治疗组和生理盐水对照组.采用ELISA法检测各组血清中OVA特异性IgE、IL-10和TGF-β1水平;流式细胞术分析脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞的数量变化.结果 OVA组IL-10、TGF-β1水平显著高于对照组(P分别<0.05和<0.01);WPG组血清IL-10和TGF-β1水平显著低于OVA组(P<0.05).OVA组脾CD4+ CD25+T淋巴细胞的百分比低于对照组(P<0.05),WPG组与OVA组相比有升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05);OVA组脾Foxp3+ CD4+ CD25+调节性T细胞的百分比显著低于对照组(P<O.01),WPG组与OVA组相比有升高趋势,差异有统计学意义(P<0.01).结论 双歧杆菌WPG可以增加食物过敏小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量,刺激细胞因子IL-1O和TGF-β分泌.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对巨噬细胞AP-1的影响

    作者:李迎雪;杨林;王立生;荀安营;朱忠生;朱惠明

    目的 探索信号途径ERK→AP-1在双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)激活巨噬细胞中的作用.方法 以WPG刺激SD大鼠腹腔巨噬细胞,采用凝胶电泳迁移分析技术检测巨噬细胞AP-1的活性.结果 WPG刺激组巨噬细胞AP-1的活性明显高于对照组(P<0.01);巨噬细胞经ERK抑制剂PD98059预孵后,其AP-1的活性显著低于WPG刺激组(P<0.01).结论 双歧杆菌的WPG可通过ERK→AP-1这一信号途径来活化巨噬细胞.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对小鼠腹腔巨噬细胞缝隙链接的影响

    作者:李迎雪;王立生;荀安营;魏晓霞;朱惠明;马晓东

    目的 探讨双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对巨噬细胞缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)的影响.方法 首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞,再用脂荧光探针标记细胞,后采用激光共聚焦显微镜结合激光漂白后荧光恢复技术检测反映GJIC变化的荧光恢复程度.结果 和对照组相比,以WPG刺激巨噬细胞后,其GJIC的平均荧光恢复率明显增加(P<0.01).结论 双歧杆菌的WPG可提高巨噬细胞的缝隙连接介导的细胞间通讯.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对巨噬细胞NF-kB的影响

    作者:朱忠生;王立生;杨林;朱惠明;赖卓胜;姜泊;潘令嘉;周殿元

    目的从NF-kb角度探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)激活巨噬细胞的信号机制.方法首先分离培养SD大鼠腹腔巨噬细胞,然后以不同浓度的WPG刺激巨噬细胞,后采用凝胶电泳迁移分析技术检测巨噬细胞NF-kb的DNA结合活性.结果分叉双歧杆菌的WPG作用于巨噬细胞后,其NF-kB的DNA结合活性明显高于对照组(P<0.01).结论分叉双歧杆菌的WPG能活化巨噬细胞的NF-kb.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性大肠癌诱导型一氧化氮合酶表达的影响

    作者:张金浩;王立生;潘令嘉;周殿元

    建立大肠癌裸鼠移植瘤模型,以免疫组化法观察大肠癌移植瘤一氧化氮合酶(iNOS)基因的蛋白表达水平.结果显示完整肽聚糖(Wholepeptidoglycan,WPG)注射组大肠癌移植瘤iNOS蛋白的表达率、表达强度以及阳性细胞密度均明显高于肿瘤对照组(P<0.01).提示分叉双歧杆菌的WPG能增强大肠癌移植瘤细胞iNOS基因的蛋白表达,这可能是其抑瘤机制之一.

  • 双歧杆菌的完整肽聚糖对大鼠腹腔巨噬细胞ERK的影响

    作者:王立生;杨林;李迎雪;朱忠生;荀安营;朱惠明

    目的 探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2的调控作用.方法 以WPG刺激大鼠腹腔巨噬细胞或以PKC抑制剂Chelerythrine预先孵育巨噬细胞,再用WPG刺激巨噬细胞,后用Western blot检测巨噬细胞ERK1/2的表达水平.结果 未受WPG刺激的正常大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2处于低活性状态,给予WPG刺激巨噬细胞,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01).但经Chelerythrine预先孵育巨噬细胞后,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显低于WPG刺激组(P<0.01).结论 分叉双歧杆菌的WPG可通过PKC激活巨噬细胞的ERK1/2.

  • 双歧杆菌WPG抑瘤作用的给药方法和剂量研究

    作者:粟敏;龙昱;黄春霞;陈琳;罗玥佶;周建波;刘立鹏

    目的 研究双歧杆菌完整肽聚糖的不同给药方法及剂量对小鼠体内肿瘤的抑制效果.方法 用肝癌细胞腋下接种制备肿瘤模型,观察双歧杆菌WPG对小鼠体内肿瘤的抑制作用;观察不同给药方法和剂量对淋巴细胞转化率、肿瘤的生长、抑瘤率及荷瘤小鼠生存期的影响.结果 通过灌胃和注射给药都能明显抑制小鼠体内肿瘤的生长、提高淋巴细胞转化率、延长荷瘤小鼠的生存期,其中,注射给药优于灌胃给药;注射给药,双歧杆菌WPG量达0.5~0.6 mg/只时,对肿瘤的抑制效果好.结论 双歧杆菌WPG通过注射给药抑瘤效果好,抑瘤作用的适浓度为0.5~0.6 mg/只.

  • 双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原细胞免疫应答的影响

    作者:王跃;谢成彬;刘明方;陈淑惠

    目的:探讨双歧杆菌完整肽聚糖(BWPG)对重组乙肝表面抗原(rHBsAg)诱导细胞免疫应答的影响.方法:以BWPG作为rHBsAg的佐剂免疫BALB/c小鼠,观察免疫小鼠的生长状态及中枢淋巴器官的发育情况,检测NK细胞和CTL杀伤活性的变化,脾淋巴细胞的增殖和细胞因子的产生.结果:免疫小鼠未出现可见的毒副反应,胸腺和脾脏组织呈增生状态,脾脏NK细胞和CTL的杀伤活性增强,脾淋巴细胞体外增殖活跃,细胞因子产生增多.结论:BWPG能促进中枢淋巴器官增生,增强机体对rHBsAg的细胞免疫应答.

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