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UHILIC-MS/MS法同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的含量
目的 建立一种超高效亲水作用色谱串联三重四极杆质谱法(UHILIC-MS/MS),同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺和泛酸钙的含量.方法 采用超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY BEH-HILIC Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以90％ 乙腈(含0.5％ 甲酸)-10 mmol/L甲酸铵水(含0.5％ 甲酸)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.30 ml/min;在电喷雾(ESI)正离子模式下,用多反应监测(MRM)模式进行含量测定.结果 在5 min内,样品中5种维生素分别在各自考察的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.9984;整体加样回收率在93.27％ ～100.39％ 之间,RSD为1.41％ ～4.96％;10批样品中维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺、泛酸钙的含量测定结果分别为32.40～38.91、7.002～8.462、9.677～11.17、33.64～39.58、3.276～3.771 m g/250 g.结论 本研究建立的UHILIC-MS/MS方法可快速实现对复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素类成分定性鉴定或定量检测,为复方三维右旋泛酸钙糖浆的开发利用和质量评价提供了可靠的技术检测方法.
关键词： 复方三维右旋泛酸钙糖浆 超亲水作用色谱-串联质谱 维生素B1 维生素B2 维生素B6 烟酰胺 泛酸钙 含量测定 -
复合维生素B注射液中四种水溶性维生素的离子对-HPLC法测定
复合维生素B注射液是多种维生素的复合制剂.主要成分是维生素B1(1)、维生素B2(2)、维生素B6(3)和烟酰胺(4).临床常用于营养不良、食欲不振、脚气病、癞皮病及缺乏维生素B族所致的各种疾患的辅助治疗.
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2-氯-N,N-二甲基烟酰胺的制备
2-氯-N,N-二甲基烟酰胺(1)可用作医药、农药及染料的合成中间体.可由2-氯烟酸经酰氯化和氨解反应得到,收率95%[1].本文用烟酸(2)经双氧水氧化得到烟酸N-氧化物(3),再经氯化和氨解一锅反应得到1,并优化反应条件,确定氧化反应时2与溶剂冰醋酸的佳配比和反应时间分别为1:1.6(w/v)及5h,收率92%;以SOCl2/POCl3为氯化剂,收率56%.反应总收率52%.
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烟酸缺乏症一例报道
烟酸缺乏症是由烟酸维生素缺乏引起的疾病,临床较为少见.本文报道1例来本院就诊并治疗的烟酸缺乏症,探讨此病的诊断与治疗.
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烟酰胺对白介素-1β引致小鼠糖尿病的防治作用
目的观察白介素-1β(IL-1β)对小鼠体内胰岛β细胞的损害及其引致小鼠糖尿病的情况,并观察烟酰胺(NAA)对IL-1β诱导的糖尿病的防治作用.方法60只C57小鼠随机分为5组:正常对照组予生理盐水0.1 ml/d;IL-1β组予IL-1β 50 ng/d;NAA组予NAA 10 mg/d;防治Ⅰ组同时予上述剂量的IL-1β和NAA腹腔注射,连续治疗7 d;防治Ⅱ组先予IL-1β7 d,再予NAA 7 d.每2～3天测一次血糖,观察各组小鼠糖尿病的发病率,4周后测定小鼠的血清胰岛素、一氧化氮(NO),并分离胰岛,测定胰岛细胞内胰岛素、NO、烟酰胺二核苷酸(NAD)和DNA含量的变化.结果IL-1β组糖尿病发病率为75%,明显高于正常对照组(0),两组间差异有显著性(P＜0.01);防治Ⅰ组小鼠糖尿病发病率仅为8.3%,血清胰岛素、NAD、DNA均接近正常对照组,但明显高于IL-1β组(P＜0.01);防治Ⅱ组除胰岛细胞内NAD含量高于IL-1β组外,其余各项指标与IL-1β组的差异均无显著性(P＞0.05).结论早期应用NAA可有效防止IL-1β对胰岛细胞的损伤及诱导糖尿病发生.
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烟酰胺超载增加血中5-羟色胺和组胺水平
甲基化是单胺类神经递质儿茶酚胺、5-羟色胺和组胺降解的关键步骤.没有活泼甲基供应,即使催化甲基化反应的转甲基酶正常,甲基化介导的单胺类神经递质降解将不能进行.已知尼亚新(烟酸和烟酰胺)降解消耗体内活泼甲基,而目前食物中添加尼亚新已使高尼亚新饮食非常普遍.然而,过多尼亚新对单胺类神经递质代谢的影响尚不完全清楚.本文旨在观察烟酰胺超载对人5-羟色胺和组胺代谢的影响.9名健康男性志愿者禁食过夜后,口服100 mg烟酰胺,于口服药物前后取尿液和血浆样本.用高效液相色谱法检测血浆甲基化烟酰胺、甜菜碱和尿中N1-甲基-2-吡啶酮-5-羟基胺水平,用试剂盒检测血浆胆碱、组胺和5-羟色胺水平.结果显示,烟酰胺负荷后,受试者血浆甲基化烟酰胺水平和尿中甲基化代谢产物N1-甲基-2-吡啶酮-5-羟基胺排出均增加,而血浆甲基供体甜菜碱水平降低,同时伴5-羟色胺和组胺水平显著增加.以上结果提示过量摄入烟酰胺可引起单胺类神经递质代谢紊乱,这将有助于揭示饮食与单胺代谢紊乱相关疾病(如精神分裂症和自闭症)的关系.
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慢性烟酰胺超载与2型糖尿病流行的关系
2型糖尿病是全球性日益严重的公共卫生问题.目前人们普遍接受的观点是2型糖尿病是基因与环境相互作用的结果,但二者如何作用尚不清楚.众所周知,饮食因素在糖尿病发病中起关键作用,而全球性糖尿病快速流行发生于尼亚新(烟酸或烟酰胺)强化食物之后,因此不能排除长期尼亚新摄入过量与糖尿病流行有关.我们近的研究显示烟酰胺超载及解毒减慢均可引起氧化应激和胰岛素抵抗.本文结合相关文献资料,就尼亚新代谢、糖尿病人烟酰胺代谢特点、皮肤在烟酰胺代谢中的作用、药物对烟酰胺代谢的影响、以及饮食习惯和食品强化等因素与糖尿病流行的可能关系做一概述.我们认为,糖尿病时基因与环境相互作用的本质可能是长期烟酰胺超载所致的慢性中毒与机体相对较低的解毒/排泄能力的综合反映,因此,减少尼亚新摄入可能是遏制糖尿病流行的关键措施.
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烟酰胺治疗病态窦房结综合征的远期疗效
笔者从1985年至1992年应用烟酰胺治疗病态窦房结综合征(以下简称病窦),共21例,进行长时间的追综观察,长者15年,短者7年,以观察烟酰胺对病窦的远期影响,现报告如下:
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烟酰胺在皮肤科的应用进展
研究显示,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸不但是细胞氧化还原的辅酶,而且是单腺苷酸二磷酸核糖转移酶、多聚单腺苷酸二磷酸核糖聚合酶和去乙酰化酶的底物,在多种细胞生理学功能中超重要作用.烟酰胺是合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的前体,又是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸一消耗酶的抑制剂,其作用已超出于防治糙皮病.在皮肤科,烟酰胺已用于治疗免疫性大疱病、特应性皮炎、痤疮和酒渣鼻等,并在抗皮肤老化和皮肤美容方面有良好的应用前景.烟酰胺外用的安全性已经确认,但大剂量内服尚未经规范的新药安全性评估.
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外用烟酰胺治疗皮肤病的进展
烟酰胺是一种抗氧化剂,它能有效地预防细胞和细胞膜免去自由基的损伤,可消除炎症中起作用的超氧阴离子自由基.评价外用烟酰胺的抗炎作用、改善皮肤角质层屏障及润肤作用、减少皮肤色素沉着作用、改善面部皮肤衰老表现以及预防光免疫抑制和光致癌作用.目前的研究提示,外用烟酰胺制剂在皮肤科有广泛的应用前景,值得开发.
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地氯雷他定联合烟酰胺治疗多形性日光疹
目的 探讨地氯雷他定联合烟酰胺治疗多形性日光疹的临床疗效.方法 137例多形性日光疹患者随机分为2组:试验组69例,给予地氯雷他定分散片5 mg,每天1次,烟酰胺片200 mg,每天3次;对照组68例,给予沙利度胺片50 mg,每天2次,烟酰胺片200 mg,每天3次.两组患者同时给予复方硼酸软膏外用,每天2次,4周为1个疗程.要求所有患者试验期间防晒.分别于治疗开始前(D0)、治疗开始后每2周(D14、D28)评定患者的症状积分下降指数(SSRI)、痊愈率及总有效率.治疗过程中记录不良反应以评估安全性.结果 共有119例完成试验,其中试验组61例,对照组58例.在D14、D28,试验组SSRI分别为0.81±0.23与0.92±0.11,痊愈率分别为47.54％与70.49％,总有效率分别为80.33％与93.44％;与对照组(SSRI分别为0.87±0.17与0.97±0.23,痊愈率分别为48.28％与72.41％;总有效率分别为84.48％与91.38％)比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).部分患者发生不良反应但可耐受,试验组不良反应发生率显著低于对照组(P＜0.01).结论 地氯雷他定分散片与烟酰胺片治疗多形性日光疹临床疗效确切,与沙利度胺疗效相当,不良反应发生率显著减少.
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米诺环素联合烟酰胺治疗121例大疱性类天疱疮
目的:了解米诺环素联合烟酰胺治疗大疱性类天疱疮的疗效.方法:121例大疱性类天疱疮患者初诊时给予米诺环素200 mg/d;烟酰胺600～1 500 mg/d,服用2周.2周后复查,根据病情或继续口服米诺环素及烟酰胺;或米诺环素及烟酰胺加服少量泼尼松;或停服米诺环素及烟酰胺,改为单独服用泼尼松或用其他方法治疗,总共随访观察24周.结果:使用米诺环素联合烟酰胺治疗2周后达到完全控制40例(33.1％),基本控制48例(39.7％),无效33例(27.3％).有效者合计88例(72.7％),终完成24周米诺环素联合烟酰胺治疗的有29例(24.0％).严重程度与2周后疗效,经Spearman相关分析,r=0.264,P=0.003,有显著相关性.结论:轻中度的大疱性类天疱疮患者,可以考虑首选米诺环素联合烟酰胺治疗.
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烟酰胺和N-乙酰葡萄糖胺改善色斑效果观察
目的:比较含烟酰胺和N-乙酰葡萄糖胺的护肤品在改善色素沉着方面的效果.方法:双盲、基质对照人体试验.采用REAL3.0系统采集所有图像,用相关软件分析色斑面积百分比、L*a*b值、黑素相关的色斑面积百分比、平均黑素含量(灰度)和黑素相关的皮肤颜色均匀度;Chromameter测量非色斑部位皮肤颜色改变;由皮肤科专家分析使用护肤品前后照片改善情况和受试者自我比较进行主观评价.结果:与基质相比,含烟酰胺和N-乙酰葡萄糖胺的护肤品可以抑制色斑面积的增加,减轻紫外线引起的肤色加深和肤色不均匀.结论:正常人皮肤对含烟酰胺和N-乙酰葡萄糖胺的护肤品有良好的耐受性,与基质相比,该护肤品有一定的减轻色素沉着的效果.
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米诺环素和烟酰胺联合小剂量糖皮质激素治疗62例大疱性类天疱疮
目的:对北京大学第一医院2002-2012年间使用米诺环素和烟酰胺联合小剂量糖皮质激素治疗62例大疱性类天疱疮患者疗效进行临床总结.方法:62例患者(三联治疗组)初诊时均予米诺环素(200 mg,/d)、烟酰胺(600～1 500mg/d)及泼尼松(20～30mg/d)治疗,另选取121例予米诺环素联合烟酰胺治疗的大疱性类天疱疮患者作为二联治疗组.随访观察48周并对两组疗效进行比较.结果:三联治疗组治疗2周和24周后有效率分别为82.3％和75.4％,与二联治疗组比较,差异均有统计学意义(x2=11.33、35.81,P均＜0,01),而治疗48周后有效率为72.5％.三联治疗组疗效明显优于二联治疗组,且加用小剂量糖皮质激素并未增加严重不良反应.结论:米诺环素和烟酰胺联合小剂量糖皮质激素治疗大疱性类天疱疮安全有效.
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4%烟酰胺凝胶治疗炎症性寻常痤疮
为了探讨烟酰胺治疗痤疮的临床效果及其作用机制,自制4%烟酰胺凝胶外用早晚各1次治疗炎症性痤疮55例.结果有效率为81.81%,显著优于安慰剂组.结论:烟酰胺可作为治疗炎症性痤疮的替换药物.
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烟酰胺在皮肤局部外用中的进展
烟酰胺是烟酸的吡啶-3-酸酰胺,局部外用耐受性好,具有减少色素沉着、增加皮肤屏障功能、防止光损伤和光致癌、保持皮肤能量平衡和新陈代谢及辅助治疗多种皮肤病等功效.
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维生素C和烟酰胺对原代培养人角质形成细胞的影响
目的 探讨维生素C和烟酰胺对原代培养人表皮细胞的增殖和分化的影响,为临床应用提供实验基础.方法 取正常人手术切除的包皮,应用热溶素分离表皮与真皮,以胰蛋白酶及EDTA分离表皮细胞为单个细胞.以NIH-3T3作为饲养细胞,单个表皮细胞培养于表皮完全培养基内.将培养的人表皮细胞等分为三份;一份加维生素C,一份加烟酰胺,另一份为完全培养液对照组.应用免疫组化和蛋白质免疫斑点印迹阵列技术检测C-myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达情况.结果 各组集落数不同,维生素C组＞对照组＞烟酰胺组,维生素C组的集落形态与对照组近似,而与烟酰胺组差异较大.与对照组相比,维生素C组C-myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达均上调(P值均＜0.05);烟酰胺组丝聚合蛋白表达显著上调(P＜0.01),内披蛋白表达变动不明显(P＞0.05),而C-myc表达下调(P＜0.05).结论 维生索C对人角质形成细胞的增殖和分化均有促进作用.烟酰胺对人角质形成细胞的分化有促进作用,但对其增殖却有抑制作用.
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表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞接触性共培养方法的建立
目的 研究表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系中的相互作用.方法 胰酶消化游离毛囊和包皮的表皮,分别获取纯化的角质形成细胞和黑素细胞,第3代毛囊角质形成细胞接种于6孔板中,48 h后以表皮黑素细胞:毛囊角质形成细胞为1:2、1:10和1:20的比例接种黑素细胞.在1:10接种体系中,加α-黑素细胞刺激素和烟酰胺,干预6 d后,NKI/beteb单抗染色.结果 毛囊角质形成细胞定植后接种黑素细胞,两种细胞均增殖迅速.以1:10比例接种更能模拟生理状态.1:20接种可清晰观察到黑素细胞树突与角质形成细胞的接触方式.1:2接种可获大量黑素细胞.在单纯黑素细胞和共培养体系中,α-黑素细胞刺激素对黑素细胞增殖无明显影响,但树突明显增多、伸长.烟酰胺对单纯黑素细胞培养无影响,共培养状态下,黑素细胞树突收缩,黑素体聚集在胞体周围.结论 毛囊角质形成细胞与皮黑素细胞接触性共培养,适用于人色素系统的研究.
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建立99Tcm标记联肼尼克酰胺多肽"显像剂"纤维膜组合文库
目的 证明99Tcm标记联肼尼克酰胺(HYNIC)多肽"显像剂"文库是99Tcm显像剂研制中的有效方法.方法 八肽组合文库采用人工点阵方式合成.HYNIC多肽通过C末端以及双β丙氨酸(连接体)共价连接在纤维膜上.用阻断剂阻断非特异结合位点后,将膜文库和人重组热休克蛋白70(HSP70)温育,冲洗.用生物素-亲和素法和抗体法筛选文库.对筛选阳性多肽化合物进行再合成、99Tcm标记(以三羟甲基甘氨酸为辅助配体)以及体内分析.将人肺癌细胞株A549和H460接种于雌性裸鼠胸壁皮下,用于体内研究.结果 99Tcm标记文库显示,"显像剂"文库的质量较好.由于天冬酰胺-亮氨酸-亮氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-甘氨酸多肽(NLLRLTG)对HSP70家族蛋白具有高度特异性,因此,采用99Tcm-HYNIC-NLLRLTG为对照组.经筛选获得的15种阳性多肽化合物中,有8种99Tcm化合物在体内肿瘤中的分布优于对照组,其中99Tcm-HYNIC-谷氨酰胺-甘氨酸-缬氨酸-亮氨酸-苏氨酸-甘氨酸-苏氨酸-精氨酸多肽(QGVLTGTR)在体内肿瘤中的分布佳.活性肽NLLRLTG替代实验和肿瘤热疗研究表明,99Tcm-HYNIC-QGVLTGTR具有HSP70结合肽活性.结论 99Tcm标记HYNIC八肽化合物"显像剂"文库的设计可能为多肽显像剂的研制提供一种模式.
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离子对HPLC法测定五维牛磺酸口服液中4种水溶性维生素
建立HPLC法测定五维牛磺酸口服液中维生素B<,1>、B<,2>、B<,6>和烟酰胺的含量.采用C<,18>柱,甲醇-0.01mol·L<'-1>庚烷磺酸钠溶液(含0.1%冰醋酸)为流动相,检测波长273 nm.平均回收率分别为99.8%、99.7%、99.4%和99.4%.
