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2-02 镉接触的易感性标志物的研究
目的建立测定外周血淋巴细胞(PBL)中MT基因表达的方法,在职业和环境接触镉的人群中检测其变化,初步探讨作为镉接触的生物标志物的可行性.方法与结果用密度梯度离心法分离淋巴细胞,抽提核酸后进行差示逆转录多聚酶链反应(dRT-PCR),优化反应条件.本法可检测低至1×10-6μg总RNA中的MT基因表达.RT-PCR操作内和操作间的结果差异无显著性,具应有的稳定性.体外接触镉可迅速诱导PBL的MT基因表达,具有良好的剂量反应关系.表明PBL是分析MT基因表达的合适组织,并初步提示PBL中MT基因表达作为镉接触的生物标志物的可能性.职业接触人群的研究发现,电解车间工人的基础和诱导的MT表达水平显著高于其他两组(P＜0.05),但MT诱导能力在接触组和对照之间差异无显著性.随尿镉、血镉和镉摄入量水平上升,MT基础表达和诱导表达都增高.MT诱导能力在各种分组法中组间差异均未见显著性.MT基础表达水平反映血镉水平的敏感度和特异度都较反映尿镉要好.MT基础和诱导表达与血镉水平显著相关,同时与尿镉也显著相关.环境接触镉的人群研究发现,血镉水平升高,MT基础和诱导表达水平均显著增高.尿镉升高,MT基础表达和诱导表达水平虽有增高,但差异无显著性.高摄入量组MT基础表达和诱导表达水平高于低摄入量组,其中高摄入量组的诱导MT表达水平显著高于低摄入组.MT诱导能力水平差异均未见显著.相关分析可见MT基础表达与血镉、尿镉的对数显著相关,MT诱导表达与血镉、尿镉和镉摄入量的对数显著相关.结论提示外周血淋巴细胞金属硫蛋白基因表达作为镉接触的易感性标志物的可能性.
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2-氯-N,N-二甲基烟酰胺的制备
2-氯-N,N-二甲基烟酰胺(1)可用作医药、农药及染料的合成中间体.可由2-氯烟酸经酰氯化和氨解反应得到,收率95%[1].本文用烟酸(2)经双氧水氧化得到烟酸N-氧化物(3),再经氯化和氨解一锅反应得到1,并优化反应条件,确定氧化反应时2与溶剂冰醋酸的佳配比和反应时间分别为1:1.6(w/v)及5h,收率92%;以SOCl2/POCl3为氯化剂,收率56%.反应总收率52%.
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等温滴定量热法在分子印迹技术中的应用
分子印迹技术是一种制备对特定分子有特异性结合能力聚合物的新兴技术，近年来受到广泛关注。本文即对等温滴定微量热法在分子印迹技术中的应用做一综述，介绍微量热法的基本原理、特点，以及其应用于评价分子印迹聚合物的印迹效果、筛选单体和交联剂、优化反应条件等方面的研究进展。
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RAPD的建立及优化研究
目的:建立优化的RAPD反应条件,为进一步进行遗传监控研究奠定基础.方法:按常规方法制备小鼠基因组DNA,在一定的RAPD-PCR反应条件下分别改变各组份浓度及退火温度.扩增产物在含溴化乙锭的1 5%琼脂糖凝胶中电泳,紫外透射仪上观察照相.结果:当Mg2+浓度为1.5mmol/L,4种dNTPs各为150μmol/L,Taq酶为1 5U,引物为0 2mol/L.模板DNA为50ng,退火温度为38℃,RAPD-PCR扩增效果好.结论:在优化的条件下规范操作,RAPD的稳定性、重复性好.
关键词： RRAPD基因组DNA 优化反应条件
