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柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠FN、a-SMA表达的影响
目的：观察柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠纤维连接蛋白（FN）和a-平滑肌动蛋白（a-SMA）表达的影响。方法：采用CCl4复合法制备肝纤维化大鼠模型；用免疫组化方法观察实验动物模型肝脏中FN、a-SMA表达的情况。结果：柴胡桂枝汤可抑制肝纤维化大鼠肝脏中FN、a-SMA的表达，中药中等浓度组FN和a-SMA的表达水平明显低于模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药对照组，具有极显著性差异（P＜0.01）。结论：柴胡桂枝汤能够有效的控制纤维化肝脏中FN、a-SMA的高表达，抑制HSC活化，具有抗肝纤维化的作用。
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通窍化瘀方与针刺结合常规西医治疗对分泌性中耳炎患者耳积液和血清相关因子水平（sIL -2R 及 Fn）的影响
目的：探讨通窍化瘀方与针刺结合常规西医治疗对分泌性中耳炎患者耳积液和血清相关因子水平（sIL -2R 及 Fn）的影响。方法选取2012年3月至2014年4月就诊的分泌性中耳炎患者200例，随机分为试验组和对照组，每组100例。试验组给予通窍化瘀方与针刺结合常规西医治疗，对照组仅给予常规西医治疗，观察两组患者治疗前后血清因子 sIL -2R 及 Fn 的变化。结果治疗后两组患者血清及耳积液中 sIL -2R 水平均降低，且试验组降低程度均大于对照组；而血清及耳积液中 Fn 水平均升高，且试验组升高程度均大于对照组，差异均有统计学意义（P <0.05）。结论通窍化瘀方与针刺结合常规西医治疗分泌性中耳炎较单纯常规西医治疗相比可显著改善患者血清因子 sIL -2R 及 Fn 的水平。
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前列宁胶囊调控MMP-2影响细胞外基质对良性前列腺增生治疗的影响
目的:观察前列宁胶囊(QC)对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)介导的细胞外基质(ECM)的影响,探讨QC对BPH的治疗机制.方法:SD大鼠随机分为空白组,BPH模型组,QC低、中、高观察组,建立BPH模型,QC干预,ELISA法检测大鼠血清MMP-2、FN、Collagen IV、LN;BPH-1细胞培养,分别加入MMP-2和未加MMP-2刺激因子,QC干预,MTT法观察细胞活性,Q-PCR及Western-Blot分别检测MMP-2、FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达(未加MMP-2),加入MMP-2组检测FN、Collagen IV、LN.结果:QC各剂量组大鼠血清中的FN、LN、Collagen IV含量降低,MMP-2升高(P<0.05 or P<0.01);BPH-1细胞培养QC干预,加入及未加入MMP-2刺激因子细胞活力均有下降,以48 h后明显;加入MMP-2刺激因子FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达明显低于未加MMP-2刺激因子,差异有统计学意义.结论:QC对BPH具有治疗作用,QC调控MMP-2介导细胞外基质FN、Collagen IV、LN基因和蛋白表达可能是其治疗BPH机制之一.
关键词： 前列腺增生 前列宁胶囊 ECM MMP-2 FN CollagenIV LN q-PCR Western-Blot -
化痰活血扶正方拆方后的相关药组对肝纤维化大鼠α-SMA、FN表达的影响
目的 观察化痰活血扶正方拆方后的相关药组对肝纤维化大鼠模型肝脏组织病理学,α-SMA、FN表达,胶原面积百分比的影响.方法 选择雄性SD大鼠120只,随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组、化痰低中高剂量组、活血化瘀低中高剂量组、扶正低中高剂量组、化痰活血扶正低中高剂量组.除正常组外,其余各组大鼠均予腹腔注射4％ TAA(水为溶剂)5mL/kg体质量,剂量200mg/kg,每周2次,共8周.造模开始次日,各低、中、高剂量组分别按照0.25、0.5、1.0 g/kg剂量,每日1次、予10mL/kg体质量不同浓度的药物灌胃,水飞蓟宾组给予水飞蓟宾50mg/kg体质量灌胃,每日1次,用药8周.8周后取各组大鼠肝右叶组织,免疫组化法观察各组大鼠肝脏组织α-SMA、FN的表达、胶原面积百分比及组织形态病理学变化情况.结果 中药干预后的各组大鼠肝组织α-SMA、FN的表达及胶原面积百分比均有下降,与模型组相比均有统计学意义(P＜0.05);各组大鼠肝脏病理切片光镜下观察均较模型组大鼠肝组织在炎细胞浸润程度、变性坏死、纤维增生等方面有明显减轻.结论 化痰活血扶正方及其拆方后的各药组可显著降低肝纤维化大鼠模型肝组织中α-SMA、FN的表达;各中药治疗组大鼠的组织形态病理学明显改善,表明化痰活血扶正各药组能够减缓或阻断肝纤维化的进展.
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FN、vWF、GPIb在子痫前期及子痫患者的检测及意义
目的:通过检测子痫前期及子痫患者纤维连接蛋白(FN)、血管性血友病因子(vWF)、血小板膜糖蛋白GPIb水平,以探讨血小板活化对子痫前期及子痫患者的影响.方法:分别采用生化分析仪、ELISA法及流式细胞术,检测正常未孕妇女、正常孕晚期、子痫前期及子痫患者血浆FN、vWF及全血中GP Ib水平.结果:重度子痫前期-子痫组FN、vWF水平明显升高,与正常未孕组、正常孕晚期组、轻度子痫前期组比较具有显著性差异(P<0.01).重度子痫前期-子痫组GPIb水平明显降低,与正常未孕组、正常孕晚期组、轻度子痫前期组比较具有显著性差异(P<0.01).结论:子痫前期及子痫患者FN、vWF、GPIb急剧改变,提示体内存在血内皮损伤、血小板活化、粘附聚集,进而提示病情恶化.
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星形细胞瘤中FN、MMP-2、Ki-67表达及临床意义
目的 探讨基质金属蛋白酶MMP-2、 FN、Ki-67与星形细胞瘤的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法(SP法)对68例大脑星形细胞瘤和12例对照者组织中FN、MMP-2、Ki-67的表达进行检测.结果 Ⅲ级(间变性星形细胞瘤)26例,Ⅳ级(胶质母细胞瘤)13例FN、MMP-2、Ki-67的表达显著高于Ⅰ级(毛细胞性星形细胞瘤)13例,Ⅱ级(弥漫性星形细胞瘤)16例,而在正常脑组织中无表达.结论 MMP-2和FN表达与脑星形细胞瘤的恶性程度和侵袭性有明显关系;Ki-67表达与星形细胞瘤的增殖和预后有关.
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芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织PDGF和FN的影响
目的 观察中药复方芪益强肾饮对系膜增生性肾炎大鼠肾组织血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)的影响.方法 试验大鼠随机分为正常对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组.制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型;以芪益强肾饮、肾炎康复片灌胃;免疫组化法观察各组大鼠肾组织中PDGF和FN的表达情况.结果 芪益强肾饮组及肾炎康复片组大鼠肾组织系膜细胞中PDGF、FN的表达均降低,芪益强肾饮组更为明显.结论 芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织中PDGF和FN的表达有抑制作用,可能会延缓肾小球疾病的发展,在防治肾小球硬化方面有帮助.
关键词： 芪益强肾饮 系膜增生性肾小球肾炎 PDGF FN -
真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾问质纤维化防治的实验研究
目的:探讨中药真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化防治的效果及机制.方法:将36只大鼠随机分为:假手术组、模型组、中药组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)制作动物模型,术后7、14 d检测肾组织TGFβ1及FN的表达.结果:中药组较模型组大鼠肾组织TGFβ1表达减弱,而FN生成减少.结论:真武壮肾汤可抑制TGFβ1表达,对抗肾间质纤维化.
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黄芪山甲方抗肾间质纤维化的多靶点抑制作用
目的：动态观察黄芪山甲方（HQSJ）对大鼠肾间质纤维化（RIF）多靶点的治疗作用，探讨HQSJ方在不同阶段的可能作用机制。方法实验采用UUO大鼠模型，将雄性SD大鼠54只随机分成3组：假手术组（Sham）、模型组（UUO）、治疗组（HQSJ）。术后14、28、56d分别处死6只大鼠，观察肾功能变化；对肾小管基底膜（TBM）、肾小管萎缩、炎细胞浸润及间质纤维化情况进行半定量评分；采用免疫组织化学法及RT-PCR法检测肾组织TGF-β1、FN蛋白及mRNA的表达。结果（1）肾功能方面：与Sham组比较，UUO及HQSJ组大鼠BUN、SCr值在14～28d进行性升高，在28～56d相对稳定。HQSJ组大鼠BUN、SCr值在同一时相均较UUO组低（P＜0.05）。（2）病理改变方面：与Sham组比较，UUO及HQSJ组大鼠炎细胞浸润与肾间质慢性病变程度均有增高趋势，同一时相比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。UUO与HQSJ组比较，炎细胞浸润程度在14、28d有统计学意义（P＜0.05），56d无统计学意义（P＞0.05）；肾间质慢性病变程度14、28、56d均有统计学意义（P＜0.05）。（3）TGF-β1、FN表达：与Sham组比较，UUO及HQSJ组TGF-β1、FN表达均增高，在同一时相比较均有统计学意义（P＜0.05）；与UUO组比较，HQSJ组TGF-β1、FN在14、28、56d的表达均不同程度下降（P＜0.05）；同一时相下降幅度比较：免疫组化示TGF-β1、FN蛋白阳性率分别下降64％、47％、7％及82％、72％、70％；RT-PCR法检测TGF-β1、FN的mRNA分别下降72％、57％、27％及83％、72％、68％。结论 HQSJ方抗肾间质纤维化的多靶点作用，可能与减少炎性细胞、抑制TGF-β1分泌，减轻肾脏固有细胞的活化及转分化，从而减少细胞外基质的沉积有关。其作用从病变早期开始，在14～28d主要是减少炎性细胞浸润和降低TGF-β1表达，对FN的抑制作用贯穿始终。
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依那普利及黄芪当归合剂对组织型转谷氨酰胺酶在肾间质纤维化表达的比较研究
目的探讨组织型转谷氨酰胺酶在肾间质纤维化中的表达及依那普利、黄芪当归合剂对其表达的影响.方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、依那普利治疗组、黄芪当归治疗组.术后9天处死各组大鼠,肾组织标本用PAS染色观察肾间质纤维化病变.免疫组织化学染色方法观察各组tTG和细胞外基质成份FN的表达及半定量分析.Western蛋白印迹方法分析肾组织内tTG蛋白表达水平.结果模型组tTG和FN的表达明显高于假手术组(p＜0.05),黄芪当归和依那普利治疗后明显低于模型组(p＜0.05).各组大鼠肾内组织型转谷氨酰胺酶蛋白水平和肾间质内FN半定量水平为正相关关系.结论黄芪当归合剂及依那普利可能通过下调组织型转谷氨酰胺酶而减轻肾间质纤维化.
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心力衰竭患者心肌组织p38 MAPK,MMP-2、3、9,FN表达与心肌重构的关系
目的 分析心力衰竭患者心肌组织p38 MAPK,MMP-2、3、9,FN表达与心肌重构之间的关系.方法 选择接受二尖瓣置换术的心力衰竭患者51例,其中美国纽约心脏病协会心功能分级Ⅱ级16级,Ⅲ级19例,Ⅳ级16例.另选取10例发生意外事故伤亡捐赠者的健康心脏器官(心功能Ⅰ级).利用现阶段为先进的光镜检查方式来对患有心肌组织病变的患者进行相对应的检测;然后再利用免疫沉淀法对患者心肌组织中的p38 MAPK进行磷酸化程度的检查,并且对p38 MAPK、MMP-2、3、9进行蛋白的有效表达;利用免疫荧光法对心肌组织的FN分布进行详细检查.结果 免疫沉淀法对具有心力衰竭患者的心肌组织结构中的p38 MAPK磷酸化程度经过凝胶成像分析其吸光度发现,心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的患者p38 MAPK磷酸化程度明显比Ⅰ级程度的强(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级磷酸化程度比Ⅱ的强(P<0.05),而Ⅲ、Ⅳ级的差异无统计学意义(P>0.05).心脏功能Ⅱ级患者的MMP-2蛋白表达在心肌组织结构中的表达与Ⅰ级无统计学差异(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ级患者MMP-2蛋白表达高于Ⅰ级和Ⅱ级.MMP-3、9蛋白表达随着心脏功能的恶化,其蛋白表达相应增加,各级间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 心力衰竭患者一般通过激活p38 MAPK而对心肌细胞进行肥大、坏死等情况的诱导,通过MMP-2、3、9蛋白的表达数量来对心肌细胞外基质FN的降解,共同参与心肌重构病变过程.
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肾炎四味片对肾硬化大鼠肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达的影响
目的:探讨肾炎四味片对肾硬化大鼠肾组织纤维黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响.方法:建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠肾硬化模型,予肾炎四味片干预8周后取肾脏,用HE染色及免疫组化法观察其对硬化肾组织细胞外基质FN、LN、Col-Ⅳ表达的影响,对结果进行半定量分析.结果:肾硬化大鼠经肾炎四味片治疗8周后,肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达较模型组减少(P<0.05).结论:肾炎四味片在一定程度上可以抑制肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达,改善肾硬化程度.
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黄芪山甲方对UUO模型大鼠TGF-β1、FN蛋白及mRNA表达的影响
目的：通过观察黄芪山甲（ HQSJ）方对单侧输尿管结扎（ unilateral ureteral obstruction，UUO）模型中转化生长因子-β1（ transforming growth factor-β1，TGF-β1）、纤维黏连蛋白（ fibronectin，FN）表达的影响，探讨HQSJ方抑制大鼠肾间质纤维化（ renal interstitial fibrosis，RIF ）的机制。方法：采用 UUO 大鼠模型，雄性 SD 大鼠30只随机分5组：假手术组（Sham）、模型组（UUO）、中药组（UUOA）、西药组（UUOE）、中西药组（UUOAE）。观察术后第28天光镜肾脏病理改变；采用分子生物学技术检测肾脏TGF-β1和FN表达。结果：（1）与Sham组比较，UUO组肾小管间质损伤评分及TGF-β1、FN表达明显增高（ P﹤0．05）。（2）与UUO组比较，各治疗组第28天肾脏病理改变肾小管间质损伤评分及免疫组化TGF-β1、FN表达均有不同程度降低（ P﹤0．05），Western blot法检测肾脏TGF-β1、FN蛋白和RT-PCR法检测肾脏TGF-β1、FNmRNA表达均有不同程度下调（ P﹤0．05）。（3）各治疗组间比较，UUOAE组病理改变减轻程度、TGF-β1、FN蛋白及mRNA表达下调幅度大，UUOA组次之，UUOE组小（ P﹤0．05），提示UUOAE组优于UUOA组，UUOA组优于UUOE组。结论：HQSJ方可通过下调UUO大鼠肾组织TGF-β1、FN的表达，减轻肾小管间质损伤，抑制RIF的进展。
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复方鳖甲软肝片方对TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞增殖及分泌细胞外基质的影响
目的：观察中药“复方鳖甲软肝片方”对TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞(NRK-49F)增殖及分泌细胞外基质的影响。方法：以2 ng/ml hTGF -β1诱导 NRK -49F 细胞，并以软肝片方大、中、小剂量(分别以7g/kg、3.5 g/kg、1.75 g/kg)药物血清进行干预，分别应用MTT法、ELISA、免疫细胞化学方法，观察肾间质成纤维细胞增殖、细胞上清FN浓度及ColⅠ、ColⅢ的表达。结果：软肝方含药血清对hTGF-β1诱导的细胞增殖无影响；但大、中剂量软肝方能不同程度地降低FN的分泌及ColⅠ、ColⅢ的表达，软肝方大剂量组作用强(P<0.01)。结论：复方鳖甲软肝片方在一定程度上抑制TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞ColⅠ或ColⅢ的表达，大剂量软肝方作用强。
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中药肾糖组方对糖尿病肾病大鼠肾保护作用的实验研究
目的:研究中药肾糖组方对糖尿病肾病大鼠C-Ⅳ、FN表达影响,探讨其在DN大鼠肾保护中的作用机制.方法:采用高脂饲料喂养+STZ腹腔注射制作DN大鼠模型. 分正常对照组、模型对照组、中药治疗组、西药治疗组(洛汀新组)、雷公藤治疗组、中西药治疗组(肾糖组方+洛汀新组) ,测定大鼠24 h尿蛋白定量,免疫组化方法测定大鼠肾组织中C-Ⅳ、FN表达. 结果:经中药肾糖组方治疗2个月后,24 h尿蛋白定量各治疗组均明显低于模型组(P<0. 05);大鼠模型组C-Ⅳ、FN分别呈现高阳性表达,明显高于各治疗组(P<0. 05). 结论:中药肾糖组方对DN大鼠有一定的治疗效果,可以改善肾功能,延缓糖尿病肾脏损伤,其可能机制是抑制了大鼠肾纤维化进展,与抑制了C-Ⅳ、FN在大鼠肾组织中表达有关.
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健脾祛湿和络方对LPS诱导的小鼠系膜细胞FN、LN及TGF-β1表达的影响
目的:探索健脾祛湿和络方(JQHD)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的增殖系膜细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)中FN、LN及TGF-β1的影响.方法:空白组、福辛普利钠(ACEI)组及低、中、高剂量JQHD含药血清培养LPS诱导的小鼠肾小球系膜细胞株,收集上清液,ELISA法检测上清中FN、LN及TGF-β1指标.结果:与正常组比较,模型组上清LN、FN及TGF-β1含量明显增高(P<0.01);JQHD低、中剂量组,LN、FN及TGF-β1含量较模型组含量减低,且作用时间越长效果越明显(P<0.05);JQHD高浓度含药血清及ACEI组培养的上清LN、FN及TGF-β1表达浓度较低、中浓度含药血清培养的细胞上清中浓度低,差值具有统计学意义(P<0.01).中药高浓度组和ACEI组之间差值不具有统计学意义(P>0.05).结论:健脾祛湿和络方可以抑制增殖GMCs对ECM的分泌,进而缓解肾脏病进展.
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益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路及α-SMA、FN的影响
目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠24 h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、JAK/STAT及α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的影响及其机制.方法:SD大鼠55只,随机留取10只为正常对照组(N).利用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DN大鼠模型.造模成功大鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病模型组(DN)、益肾胶囊治疗组(DN+Y)、氯沙坦钾治疗组(DN+L)、氯沙坦钾+益肾胶囊治疗组(DN+L+Y),每组10只,连续灌胃12周.于实验的12周检测24 h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血糖、BUN、Scr;取大鼠肾组织做组织病理学观察;免疫组化法检测肾组织磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-SMA、FN的表达.结果:实验12周末,与DN组比较,益肾胶囊治疗组24 h尿蛋白定量、BUN、Scr明显降低(P＜0.05),肾组织形态学改变较轻,p-JAK2、p-STAT3、α-SMA、FN的表达显著降低(P＜0.05).氯沙坦钾联合益肾胶囊治疗组与氯沙坦钾治疗组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:益肾胶囊可能通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的活化,下调α-SMA、FN的表达,延缓了糖尿病肾病的进展;益肾胶囊联合氯沙坦钾可更好地保护肾脏功能,提示二者联合使用有协同作用.
关键词： 益肾胶囊 JAK/STAT信号通路 α-SMA FN -
沙参对肺纤维化大鼠FN、LN的影响
将大鼠按照性别、体重随机分为正常组、模型组、激素组、沙参1.5 g/kg组和3.0 g/kg组.按照博来霉素(BLM)5 mg/kg体重复制大鼠肺纤维化模型.结果 显示模型组肺组织羟脯氨酸(HYP)、血清层连粘蛋白(LN)含量不断升高,28 d达高峰;血清纤维连接素(FN)含量第7天明显升高,14 d达高峰.用药各组上升幅度较模型组低(P＜0.05或P＜0.01).提示沙参可降低肺组织的HYP、血清FN、LN含量,对肺纤维化有一定的治疗作用.
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黄芪、水蛭、大黄及其复方含药血清影响大鼠MC产生FN及Col -Ⅳ的研究
目的:研究黄芪、水蛭、大黄及其复方抑制大鼠系膜细胞(mesangial cells,MC)产生纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Col -Ⅳ)的强弱.方法:在大鼠MC体外培养的基础上,将脂多苷糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的MC增生模型分为9组:控制组、模型组、对照组、黄芪组、水蛭组、大黄组、雷公藤多苷组、复方组、复方+雷公藤多苷组.采用ELISA法检测黄芪、水蛭、大黄及其复方等含药血清对MC表达FN及Col -Ⅳ的影响.结果:各含药血清组均能明显降低经LPS刺激后的大鼠MC产生FN及Col -Ⅳ的量,以复方+雷公藤组作用佳,水蛭组、大黄组抑制作用较强,优于黄芪组.结论:证实了化瘀、泄浊中药水蛭、大黄在抑制MC产生FN及Col-Ⅳ方面优于益气类中药黄芪,复方+雷公藤组作用效果佳.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 系膜细胞 含药血清 FN Col -Ⅳ -
健肾片对IgA肾病模型大鼠肾组织LN FN局部沉积的影响
目的:探讨健肾片治疗IgA肾病的机理.方法:采用口服牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B感染的复合方法,复制大鼠IgA肾病模型,并分别给予健肾片和雷公藤多甙片治疗,根据染色程度半定量分析各组肾组织内LN、FN的含量.结果:健肾片对IgA肾病模型肾组织中LN、FN的沉积具有明显的抑制作用.结论:健肾片可明显抑制IgA模型肾组织中LN、FN的沉积可能是其治疗IgA肾病的机理之一.
