三种不同型号大孔吸附树脂对猪苓多糖纯化的研究

目的研究猪苓多糖的纯化方法.方法采用三种不同型号大孔吸附树脂,以猪苓多糖含量为考察指标,研究不同型号大孔吸附树脂对猪苓多糖纯化的影响.结果三种不同型号大孔吸附树脂对猪苓多糖均有显著纯化作用,以AB-8型大孔吸附树脂对猪苓多糖纯化效果好.结论 选用AB-8型大孔吸附树脂对猪苓多糖进行纯化.

MG-1型大孔吸附树脂纯化猪苓多糖的研究

目的:研究MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖的纯化方法.方法:应用MG-1型大孔吸附树脂,以猪苓多糖含量为考察指标,研究大孔吸附树脂对猪苓多糖纯化的效果.结果:MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖有显著纯化作用,纯化后猪苓多糖的含量可达到,纯化效果好.结论:生产中可选用MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖进行纯化.

拉米夫定联合甘利欣治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的观察联合用药对慢性乙型肝炎(ChronicHepatitisB,CHB)的治疗效果.方法68例CHB病人随机分为3组,拉米夫定联合甘利欣组:拉米夫定100mg口服,1次/d,同时口服甘利欣4片,3次/d,疗程3个月;猪苓多糖联合乙肝疫苗组:猪苓多糖40mg肌注,1次/d,连用20d,休息10d,乙肝疫苗10μg皮下注射,每2周1次,3个月为1疗程.对照组:一般护肝治疗.疗程结束检测乙肝病毒标致物.结果拉米夫定组与对照组比较,猪苓多糖组与对照组比较,HBeAg、HBV-DNA阴转率有显著性差异(P＜0.05).拉米夫定组与猪苓多糖组比较HBeAg、HBV-DNA阴转率无显著性差异(P＞0.05).结论拉米夫定联合甘利欣,猪苓多糖联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎对HBeAg,HBV-DNA阴转有较好疗效.

猪苓多糖介导IL-12激活NK细胞

猪苓多糖对人巨噬细胞形态及免疫功能的影响

目的:分离纯化猪苓多糖,观察猪苓多糖对人巨噬细胞的形态和免疫功能的影响,并进行机制分析.方法:甲醇脱脂、水提醇沉提取猪苓粗多糖,经过滤、Savage法去蛋白、冷冻干燥、DEAE-Cellulose及Sephadex G-100柱层析分离猪苓均一多糖(PPS);Ficoll法分离新生儿脐带血PBMC,并通过CD14磁珠分选及M-CSF诱导人M2型巨噬细胞;观察猪苓多糖对M2形态的影响;FACS检测细胞表型(CD14、CD68、CD86及CD206)、主要组织相容性复合体2(MHCⅡ)与程序性细胞死亡蛋白1(PD1)表达量;ELISA分析细胞因子 [白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)及重组人巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)]含量;检测猪苓多糖对M2和肿瘤细胞共培养的杀伤能力;Western bolt分析TLR2、TLR4及NF-κB蛋白表达;RT-PCR测定层黏连蛋白(LN)、纤维黏连蛋白(FN)、 Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和巨噬细胞表面分子抗原(MAC-1)mRNA水平.结果:分离纯化得到PPS;PPS影响巨噬细胞的黏附和诱变细胞形态;极化M1表型,降低PD1表达(P＜0.01),升高MHCⅡ分子表达(P＜0.05,P＜0.01);促进细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α分泌(P＜0.01);增强M2巨噬细胞对肿瘤杀伤的能力(P＜0.05);升高TLR2、TLR4和NF-κB蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01);降低FN、 COLⅢ和ICMA-1转录水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:PPS抑制M2巨噬细胞的黏附和伪足生成,且具有显著的免疫增强作用,其机制与激活TLR2/TLR4-NF-κB信号通路、下调黏附蛋白和因子有关.

猪苓及猪苓多糖联合卡介苗治疗膀胱癌可行性的分析

膀胱癌是泌尿系统常见的肿瘤,难治疗,复发率高.目前治疗膀胱癌常用卡介苗,但卡介苗毒副作用明显.泌尿系统常用中药猪苓功效利水渗湿,研究显示猪苓可显著抑制大鼠膀胱癌的发生,猪苓多糖可有效抑制卡介苗治疗膀胱癌毒副作用.本文就猪苓及猪苓多糖联合卡介苗做可行性分析.

肝脏炎性假瘤三例

例1 女,54岁,于1996年5月因右上腹不适伴右肝区隐痛1个月住院,患有乙肝病史.化验:HBVM(+),HCVM(-),ALT正常,TBIL<17.1 μmol/L,CEA 6 ng/ml,AFP<25 ng/ml,WBC 11.0×109/L.B超:右肝前叶可探及3.0 cm较均匀,边界清楚的低密度团块.CT:增强后周边可见一晕环.同年6月,在B超引导下经皮肝穿刺活检(FNA),经解放军总医院病理报告:镜下可见大量淋巴细胞及浆细胞浸润,确诊为肝脏炎性假瘤.给予猪苓多糖40 mg肌注,1/d,20 d为1个疗程,间隔10 d后进行第二疗程,治疗3个疗程后CT复查右肝区低密度影消失,随诊5年,局部无复发迹象.

89例慢性乙型肝炎临床治疗探讨

目的 探讨苦参素治疗慢性乙型肝炎的疗效,寻找治疗慢性乙型肝炎的有效方法.方法 采用开放、对照研究.治疗分3组,分别为苦参素组、苦参素联合猪苓多糖组、肝泰乐组,共治疗慢性乙型肝炎患者89例,观察ALT及病毒标志物的变化.结果 治疗结束时,苦参素组、苦参素联合猪苓多糖组HBV-DNA、HBeAg阴转率、抗-HBe的阳转率均较肝泰乐组高,3组HBV-DNA阴转率分别为43.3%、48.8%、0(P<0.01),HBeAg阴转率分别为33.3%、42.9%、6.9%(P<0.05),HBeAb阳转率分别为16.7%、20.0%、6.9%(P<0.05).ALT的复常率3组差异无显著性(P>0.05).随访6个月,HBV-DNA和HBeAg的阴转率及抗-HBe的阳转率在苦参素及苦参素联合治疗组差异无显著性(P>0.05).总有效率分别2.9%、51.7%、7.7%,差异有显著性(P<0.05).结论 苦参素或苦参素联合猪苓多糖治疗慢性乙型肝炎有较好地抗HBV-DNA疗效及HBeAg阴转及抗-HBe的阳转率.

清肝方在ConA诱导的肝损伤中免疫调节作用的研究

目的:研究以清热利湿、琉肝解郁、柔肝缓急立法的清肝方对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠肝、脾、胸腺指数、转氨酶及病理改变的影响.方法:46只ICR雄性小鼠随机分成A(清肝方组)、B(清肝方加猪苓多糖腹腔注射组)、C(模型组)、D(正常对照组)四组.造模前,各组分别预治疗,其中,A组给予清肝方灌胃,B组予清肝方灌胃加腹腔注射猪苓多糖溶液,C、D组予蒸馏水灌胃,每日两次,共计5次,于末次给药后1h,采用0.2%的ConA溶液予小鼠尾静脉注射造模,分别于2h检测血清TNF-a,8h检测血清IFN-r、IL-4,10h应用改良赖氏法检测血清中转氮酶的水平,并观察肝,脾病理变化情况.结果:A、B两组造模2h后,TNF-a水平明显降低:8h后血清IFN-r升高、IL-4水平降低;10h后,可明显降低肝、脾指数及血清转氨酶水平.组织结构分析表明清肝方及清肝方加猪苓多糖腹腔注射组,可明显减轻肝脏及脾脏的病理损伤.结论:清肝方通过激活细胞免疫,增强清除病毒的能力,发挥扶正祛邪之功效,同时,通过减少TNF-a,抑制NF-kB信号转导途径,减少后续炎症因子的释放,减轻ConA诱导的肝的免疫性损伤.

乙肝疫苗联合猪苓多糖治疗慢性乙型肝炎的临床观察

乙型肝炎(乙肝)是传染病中危害大的病种之一,发病率高,迁延难愈,尤其是慢性乙肝,目前尽管治疗乙肝的药物不少,但临床疗效均不十分理想,近年来,我们采用了乙肝疫苗联合猪苓多糖治疗慢性乙肝36例,现将疗效报告如下.

猪苓多糖联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目前,对慢性乙型肝炎的药物治疗问题,至今尚未有突破性进展.1999年,我们采用猪苓多糖联合乙肝疫苗对36例慢性乙型肝炎患者进行了临床观察,现报告如下.

人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响

目的 观察人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响.方法 分离SD大鼠外周血单个核细胞(PBMC)、派伊尔结淋巴细胞(PPL)、肠道上皮内淋巴细胞(IEL)和黏膜固有层淋巴细胞(LPL),分别与不同质量浓度的人参多糖和猪苓多糖共同培养,检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)水平变化.结果 人参多糖和猪苓多糖均可以使PBMC和PPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;2 mg/mL猪苓多糖可以使IEL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;人参多糖和猪苓多糖可以使LPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平降低.结论 人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能具有调节作用.

猪苓多糖通过HuR调节Cyclin D1表达抑制A549细胞增殖

目的 研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)抑制肺癌A549细胞增殖的作用及其机制.方法 设对照组和PPS低、中、高剂量组,用MTT实验、流式细胞术检测PPS对细胞增殖的影响,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测PPS对A549细胞Cyclin D1 mRNA表达水平及其稳定性的影响,用Western blotting检测PPS对A549细胞Cyclin D1蛋白、人抗原R(human antigenR,HuR)蛋白表达及对HuR蛋白胞浆及胞核内分布的影响.结果 与对照组比较,中、高剂量的PPS作用后,A549细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05),Cyclin D1 mRNA稳定性降低(P＜0.05),Cyclin D1 mRNA及蛋白表达减少(P＜0.05),HuR总蛋白没有明显变化,但胞浆HuR蛋白表达下降(P＜0.05),胞核HuR蛋白表达升高(P＜0.05).结论 PPS可抑制A549细胞增殖,其作用机制可能与改变HuR在细胞内定位,从而降低Cyclin D1 mRNA稳定性及Cyclin D1蛋白表达有关.

正交试验优选猪苓多糖长循环脂质体制备工艺的研究

目的 研究猪苓多糖长循环脂质体的处方和制备工艺.方法 采用逆相蒸发法制备脂质体.以紫外分光光度-Sephadex法测定脂质体中猪苓多糖的包封率和载药量,采用单因素和正交试验法优化猪苓多糖长循环脂质体的处方和制备工艺.结果 优化后的脂质体平均包封率为98.24%,平均载药量为27.20%.结论 脂质体制备工艺合理,紫外分光光度-Sephadex法测定猪苓多糖长循环脂质体包封率准确性高,重现性好,简便易行.

猪苓多糖长循环脂质体的制备

目的研究猪苓多糖长循环脂质体的制备方法,并对其质量进行控制.方法用氯仿注入合并硫酸铵梯度法制备猪苓多糖长循环脂质体,并采用紫外-Sephadex法测定脂质体中猪苓多糖的含量和包封率.结果猪苓多糖长循环脂质体平均粒径为100nm,药物包封率为55.3%.结论用氯仿注入合并硫酸铵梯度法可制得包封率高、粒径小的猪苓多糖长循环脂质体.紫外-Sephadex法测定该脂质体的包封率准确性高、重现性好、简便易行.

猪苓多糖对膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响

目的:分析猪苓多糖对体外培养T24膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响.方法:应用免疫荧光法、激光共聚焦显微镜对p53、H-ras基因蛋白表达进行定位、定量观察.结果:猪苓多糖显著增加p53蛋白表达,24小时表达高,呈弥漫性分布,随后逐渐下降;对照组在24小时表达很弱,48小时表达强.猪苓多糖对H-ras基因蛋白表达无明显影响.结论:猪苓多糖对24细胞p53基因蛋白表达有一定的调节作用,对H-ras基因蛋白表达无明显影响.

干扰素合猪苓多糖及乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎

笔者于1995年7月采用随机分组法治疗慢性乙型肝炎110例,进行36个月观察,现总结如下.

猪苓多糖联合白细胞介素15增强人外周血单个核细胞对K562细胞杀伤活性的影响

目的：研究猪苓多糖联合白细胞介素(interleukin,IL)15对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)增殖的影响,探讨该效应细胞对人慢性髓细胞白血病 K562细胞株增殖的抑制作用及可能的机制。方法密度梯度法分离PBMC,分别应用 IL-2、IL-15、猪苓多糖、猪苓多糖+IL-2及猪苓多糖+IL-15刺激PBMC增殖,获得效应细胞,流式细胞仪(FCM)检测 PBMC 中 T 细胞、NK 细胞活化的免疫表型；双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测效应细胞培养上清中干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平；四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测效应细胞对靶细胞的细胞毒作用。结果猪苓多糖联合 IL-15能刺激 PBMC 中 T 细胞及 NK细胞增殖,在促进 NK细胞增殖作用上具有协同作用；能上调效应细胞培养上清中 IFN-γ和TNF-α的水平,且具有协同作用；并能增强效应细胞对靶细胞的杀伤活性,大致呈时间-效应趋势。结论猪苓多糖+IL-15能够增强 PBMC对K562细胞株的细胞毒作用,表现为肿瘤细胞增殖抑制率(IR)提高,杀伤机制可能与其刺激 T 细胞及 NK 细胞增殖,同时细胞培养上清中细胞因子 IFN-γ和TNF-α的水平提高有关。

复方环磷酰胺多相脂质体注射剂的制备与质量的提高(下)

缓冲溶液的配制:环磷酰胺水溶液pH值4.5～6.5,猪苓多糖水溶液pH值6.5～7.5,为保证各种成份的大溶解度和稳定性,确定将复方环磷酰胺脂质体缓冲液pH值定为6.5,采用磷酸盐缓冲液,其配方如下:磷酸二氢钠4.8 g,磷酸氢二钠3.77 g,注射用水加至1 000ml.

小剂量磷甲酸钠联合猪苓多糖治疗慢乙肝疗效分析

目的:观察小剂量磷甲酸钠联合猪苓多糖治疗慢乙肝的临床疗效.方法:选择慢乙肝患者46例,其中轻度23例,中度20例,重度3例.磷甲酸钠每日2.4克静滴,疗程30-60天;猪苓多糖每日40毫克肌注,疗程3个月.HBeAg及HBV-DNA(莹光定量)为主要观察指标.结果:疗程结束后,轻、中、重度慢乙肝HBeAg阴转率分别为42.86%、36.84%和33.33%,总阴转率为39.53%;HBV-DNA的阴转率分别为39.13%、30%和33.33%,总阴转率为34.78%.结论:小剂量磷甲酸钠联合猪苓多糖不失为一种有效、低毒的治疗慢乙肝的方法之一.