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提高稀释液浓度测定硫酸卡那霉素含量
目的:探讨按中国药典(2000年版)抗生素微生物检定法测定硫酸卡那霉素含量的后稀释液浓度范围;方法:应用ZY-300IV型抗生素抑菌圈面积测量分析仪,测定硫酸卡那霉素抑菌圈面积与对数剂量的线性关系范围;结果:测定硫酸卡那霉素含量时,后稀释液浓度范围在5.5～20.4IU/ml内对数剂量与抑菌圈面积呈直线关系.
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小剂量用药计算图
小儿特别是新生儿的生理特点,决定了药物在其体内的代谢过程与成人不同,如小儿因系统发育不成熟,影响某些药物的代谢灭活,使药物的血液浓度增高;小儿细胞外液容积大,药物分布在细胞外液,血中药物浓度相对低,表现为对水溶性药物有较大的耐受性,药物清除相对缓慢;小儿肾功能发育不全,许多经肾脏排泄的药物,如氨基糖苷类抗生素排泄慢,可使毒性增加,因此肾毒性大的药物,如硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素等要慎用;小儿体内的药物与血浆蛋白结合能力较弱,游离型药物浓度较高;小儿血脑屏障功能亦差,某些镇静催眠药物易进入脑脊液而损伤中枢神经,如可卡因、哌替啶(度冷丁)等;一些中枢性麻醉性镇痛药也易进入中枢,引起呼吸中枢抑制.
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白武松——制贩假药"捐首"第一人
公元1992年,全国共查处假药案达17000多起,涉案金额达3亿多元.人们在电视中见过孟凡会,这位山东的乡村医生,在1992年7月使用假"硫酸卡那霉素",致使两名患儿死亡,其中之一竟是自己的孙女.
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硫酸卡那霉素治疗单纯性龈炎的临床观察
目的:观察硫酸卡那霉素用作牙周冲洗治疗单纯性龈炎的价值和可行性.方法:选用硫酸卡那霉素冲洗牙周龈沟为实验组44例;3%过氧化氢液,生理盐水冲洗作为对照组43例,5d后复查.结果:实验组的治愈率是86.36%,对照组的治愈率是37.21%,二者间有显著性差异(P<0.05).结论:硫酸卡那霉素用做牙周冲洗治疗单纯性龈炎效果显著.
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硫酸卡那霉素对成年大鼠的耳毒性效应
本研究旨在观察硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,KM)对成年大鼠的耳毒性效应.6～7周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,随机分为2组:实验组,每天腹腔注射KM(500 mg/kg)2周;对照组,注射等量生理盐水2周.通过检测脑干听觉诱发电位(auditory brainstem response,ABR)观察大鼠听力改变.ABR检测结束后,分离出耳蜗进行基底膜铺片、耳蜗冰冻切片,观察耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)的密度和耳蜗形态学改变.结果显示,注射KM 2周后,大鼠在各频率的听觉阈值均有明显升高,其上升幅度超过60 dB;随着时间推移,KM组SGCs密度逐渐降低,Corti器结构尚存,但外毛细胞及内毛细胞均有不同程度的缺失,以外毛细胞为甚;内毛细胞缺失与SGCs的密度下降相平行.以上结果表明,6～7周龄大鼠经过KM作用2周后,听力会明显下降,达到重度耳聋甚至全聋.KM的耳毒性作用与SGCs和内外毛细胞的损伤密切相关.
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硫酸卡那霉素注射液含量的快速测定
笔者采用旋光法直接测定硫酸卡那霉注射液的含量,将测定结果与中国药典采用的策生物检定法作出比较,结果本法操作简便、快速,报告如下.
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柱前衍生化HPLC检测硫酸卡那霉素的方法研究
目的 采用拄前衍生化高效液相色谱法建立了快速定性、定量分析食品中的硫酸卡那霉素的方法.方法 首先茚三酮-吡啶溶液作为衍生化试剂考察了衍生化反应条件,包括反应溶液的酸碱度、温度和反应时间,并建立了色谱分离条件.衍生化条件为在pH为5.8条件下,75℃水浴中反应20min.色谱条件为,色谱柱:150×4.6 mm Kromasil C18;流动相:甲醇-水(40:60);流速:0.5mL·min-1;紫外检测波长390nm;进样量:20μL.结果 硫酸卡那霉素的浓度在2.24×10-5mol·L-1～1.12×10-4 mol·L-1之内,浓度与峰面积呈现良好的线性关系,建立的方法线性良好,样品回收丰在95%～98%之间.结论 本方法快速、灵敏,适合日常样品检测的需要.
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旋光法测定硫酸卡那霉素注射液的含量
目的探讨测定硫酸卡那霉素注射液含量的佳方法.方法根据硫酸卡那霉素具有旋光性的特点,取不同批号的硫酸卡那霉素注射液4批,用旋光法测定其含量,并与微生物检定法进行比较.结果旋光法平均回收率为99.73%,微生物检定法回收率为99.48%,二者经统计学处理无显著性差异.结论旋光法测定硫酸卡那霉素注射液含量,结果可靠、操作简便、快速,优于微生物检定法.
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硫酸卡那霉素联合呋塞米快速致聋大鼠模型的研究
目的：观察硫酸卡那霉素（kanamycin sulfate ，KM ）与呋塞米（furosemide ，Fur）联合用药建立药物性快速致聋大鼠动物模型的效果。方法32只SD大鼠随机分为A组（KM＋Fur后1天组）、B组（KM＋Fur后7天组）、C组（KM＋Fur后14天组）、D组（对照组），每组8只动物。A、B、C三组分别经一次性腹腔注射KM 500 mg/kg ，30分钟后再经腹腔注射Fur 0．2 ml/kg ，空白对照组按体重给予相同剂量生理盐水。各组在相应的时间点完成听性脑干反应（auditory brainstem response ，ABR）检测当天，分别行耳蜗基底膜铺片及扫描电镜观察耳蜗毛细胞损伤情况，免疫荧光染色观察螺旋神经节细胞亡情况。结果 A、B、C组各频率ABR阈值较正常对照组明显升高（ P＜0．05）；而A、B、C组各频率ABR反应阈差异无统计学意义（P＞0．05）。A、B、C组耳蜗底回外毛细胞明显缺失，纤毛排列紊乱，螺旋神经节细胞的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved caspase -3）的表达量较正常对照组均明显增加（P＜0．05）。结论硫酸卡那霉素和呋塞米联合单次腹腔用药24小时后大鼠 ABR反应阈明显增高，并可见耳蜗底回毛细胞的明显缺失，KM＋Fur联合应用是简单、快速而有效的大鼠耳聋动物模型建模方法。
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更正启示
由于本人失误，《听力学及言语疾病杂志》2014年第3期第277～281页刊登的《硫酸卡那霉素联合呋塞米快速致聋大鼠模型的研究》一文中第2作者邢蔚的单位应更正为“兰州军区临潼疗养院第二疗养区耳鼻咽喉科”，并删除“2新疆生产建设兵团医院（石河子大学医学院第二附属医院）耳鼻咽喉科”，将“3兰州军区临潼疗养院第二疗养区耳鼻咽喉科”改为“2兰州军区临潼疗养院第二疗养区耳鼻咽喉科”。
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大鼠卡那霉素耳中毒后耳蜗TMPRSS3蛋白的表达
目的:建立氨基甙类抗生素(aminoglycoside antibiotics,AmAn)致聋动物模型,观察内耳跨膜丝氨酸蛋白酶3(transmembrane protease,serine 3,TMPRSS3)的表达变化,探讨其在AmAn致聋中的作用机制.方法:选取健康SD大鼠40只,随机分为4组:对照组、硫酸卡那霉素3日组、硫酸卡那霉素7日组、硫酸卡那霉素14日组(n=10).建立AmAn致聋动物模型,以听觉脑干反应(ABR)阈值作为评价听功能指标,采用免疫组织化学、Western印迹分析AmAn致聋后耳蜗TMPRSS3蛋白表达的变化.结果:成功建立了AmAn致聋动物模型,随着卡那霉素注射时间延长,大鼠ABR阈值逐渐升高,耳蜗TMPRSS3蛋白表达水平逐渐降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:蛋白酶TMPRSS3对于正常听觉功能维护起重要作用,它参与了AmAn致聋过程,其表达水平下调可能是AmAn耳毒性发生机制中的一个重要环节.
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硫酸卡那霉素体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究
目的评价硫酸卡那霉素体外抗呼吸道合胞病毒作用机制.方法采用细胞培养技术观察硫酸卡那霉素对细胞的毒性和抗呼吸道合胞病毒作用.结果用空斑减数实验测得半数有效剂量(EC50)为(1.71±0.23)mg/ml,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(12.36±0.85)mg/ml,SI为7.2,SI＞4(有意义);在不同时间给药对病毒的抑制实验中,呼吸道合胞病毒感染喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞后1、2、4、6、8和10h给药均有抑制作用(P＜0.05),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程有明显地抑制作用(P＜0.05),但是对吸附过程没有抑制作用.硫酸卡那霉素对RSV病毒没有直接的灭活作用.结论硫酸卡那霉素在体外实验中对呼吸道合胞病毒穿入细胞及在细胞内复制的过程均有抑制作用.
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HPLC-CAD法测定硫酸卡那霉素及注射液含量及有关物质
目的 建立测定硫酸卡那霉素原料及其注射液中有关物质与卡那霉素含量的高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)方法.方法 采用Waters HSS T3色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.2 mol/L三氟乙酸水溶液为流动相,流速0.3mL/min,柱温30℃,电喷雾检测器的喷雾器温度为35℃.结果 新建方法对卡那霉素与硫酸盐、有关物质分离良好,精密度、重复性、回收率均满足分析要求.卡那霉素浓度与峰面积线性关系良好(R2＞0.99),检出限可达到6.1ng.采用该方法对单硫酸卡那霉素、硫酸卡那霉素以及硫酸卡那霉素注射液进行了测定,检出的有关物质个数及含量均高于现行标准的结果.结论 新建方法灵敏度更高、分离度更好,能检出更多杂质,可以满足硫酸卡那霉素原料及注射液有关物质及含量测定分析要求.
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HPLC法测定人用皮卡狂犬病疫苗和皮卡佐剂中硫酸卡那霉素的含量
目的:建立测定人用皮卡狂犬病疫苗和皮卡佐剂中硫酸卡那霉素含量的HPLC方法.方法:色谱柱为CAPCELL PAKC8 DD(4.6 mm ×250 mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液(0.02 mol·L-1,pH 7.5) -甲醇-乙腈(23:7:40);流速为1.0mL·min-1;柱温为45℃;采用柱前衍生化法,衍生化试剂为2,4,6 -三硝基苯磺酸(TNBS);检测波长为350 nm.结果:在0.01～1.0 mg·mL-1范围内,硫酸卡那霉素的浓度与峰面积呈现良好的线性关系(A =3×106C-3313.9,r=1.000,n=7);在80％,100％,120％3个浓度下的平均回收率(n=3)分别为82.5％( RSD=1.6％),90.3％ (RSD=2.0％),81.6％( RSD=1.8％);方法的低检测限为0.41 μg·mL-1;低定量限为1.39 μg·mL-1;供试品溶液在8h内稳定(RSD=1.1％).结论:本方法准确、快速,通用性良好.
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硫酸卡那霉素及注射液有关物质高温型及低温型蒸发光检测器方法建立及比对
目的:建立硫酸卡那霉素及注射液有关物质高温型及低温型蒸发光检测器方法并进行结果比对.方法:高温型蒸发光检测器方法为采用Waters XSelect(R) HSS T3(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以0.2 mol· L-1三氟醋酸溶液为流动相,流速0.3 mL· min-1,柱温30℃;蒸发光散射检测器漂移管温度1 10℃,载气流量2.5 L·min-1.低温型蒸发光检测器方法为采用Agilent ZORBAX SB-C18(5μm,4.6 mm×250mm)色谱柱,以0.2 mol· L-1三氟醋酸溶液-甲醇(98∶2)为流动相,流速0.3 mL· min-1,柱温30℃;蒸发光散射检测器漂移管温度65℃,喷雾器比率40％,压力0.207 MPa.结果:采用高温型蒸发光检测器,线性范围为0.003～0.12 mg·mL-1(r=0.999 6),检测下限和定量下限分别为0.031 μg和0.062μg;采用低温型蒸发光检测器,线性范围为0.003～0.12 mg· mL-1(r=-0.999 1),检测下限和定量下限分别为0.022μg和0.051μg.2种方法的专属性,流动相比例和色谱柱的耐用性均符合要求.4批硫酸卡那霉素和6批注射液的检测结果比对表明卡那霉素B的检测结果差异不大,其他单个杂质和杂质总量低温型检测器检测结果均高于高温型检测器.结论:本文建立的2种有关物质检测方法均适用于硫酸卡霉素及其注射液的有关物质检查,低温型检测器的大杂质为相对保留时间约为0.85的未知杂质,高温型检测器的大杂质也为主峰前杂质,但与其他杂质峰的未达到基线分离.对杂质的分离能力,低温型检测器更有优势.同时,低温型检测器杂质检出量和检出个数均优于高温型检测器,2种方法的建立为进一步制定合理限度进行有关物质控制以及杂质解析奠定了研究基础.
