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CHO细胞无血清培养研究
用含血清的常规培养基和无血清培养基(CHO-S-SFMⅡ)1:1(V/V)悬浮细胞,接种量为3×105/T/ml,在37℃,8%CO2培养箱中培养,使细胞密度达5×105个/ml,然后用等体积的CHOSFMⅡ将细胞稀释到3×105个/ml,继续培养,重复上述操作,直到血清浓度降为0.1%后,用完全无血清培养基培养至3×106个/ml,再以3×105个/ml接种,传50代,细胞增生活跃,状态良好,用MTT比色法测定重组人促红细胞生成素(rHuEPO)表达水平与常规含血清培养基相比,表达量未见明显差异.
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大剂量重组人促红细胞生成素治疗慢性肾衰竭贫血的效果及机制
目的:研究和探讨大剂量重组人促红细胞生成素用于慢性肾衰竭(CRF)贫血的临床治疗效果及治疗机制。方法:选取本院2012年3月-2014年3月收治的慢性肾衰竭贫血患者58例,所有患者均予以1.2万IU rHuEPO皮下注射,每周1次,共治疗8周。患者每日服用维铁缓释片1粒,并常规运用维生素B12和叶酸。检测患者的骨髓象、血象、SI、SF及铁粒幼细胞计数。结果:58例患者中显效28例,有效26例,无效4例,总有效率为93.1%。用药2周后患者的Ret、RBC、Hb、Hct开始升高,用药8周后血象红系各指标较用药前有显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。患者骨髓红系增生较治疗前而言活跃显著,且早幼红、中幼红、晚幼红和E值较用药前有显著升高,其中晚幼红增生显著,故G/E值较用药前显著降低,经治疗8周后患者SI、SF及铁粒幼细胞值均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:大剂量重组人促红细胞生成素可有效用于慢性肾衰竭贫血患者的临床治疗,通过刺激骨髓造血的机理恢复机体的正常造血功能,在慢性肾衰竭贫血患者的临床治疗上具有广泛的发展前景。
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慢性肾衰竭血透患者促红细胞生成素初始诱导治疗期相关性高血压发生情况调查分析
研究表明,维持性血透患者低浓度的血红蛋白(Hb)与患者再人院的发生率具有一定的相关性.Hb每下降1 g/L,患者因心血管并发症等疾病再人院的相对危险性就增加5%[1].自从1985年重组促红细胞生成素(rHuEPO)用于临床以来,肾性贫血的治疗取得了突破性进展,极大地改善了肾衰竭患者的状况,甚至被誉为贫血治疗上的"里程碑"[2].
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促红细胞生成素抵抗原因及治疗研究进展
贫血不仅降低慢性肾脏病(CKD)患者的生活质量,并且增加心血管疾病发生和死亡的风险.虽然重组人促红细胞生素(rHuEPO)已广泛应用于肾性贫血10余年,但药物的敏感性和剂量个体差异很大,约90%~95%的患者应用后,血红蛋白(Hb)水平明显升高,然而约5%~10%的患者应用后不能达到目标值,存在明显的rHuEPO抵抗[1].临床上了解EPO抵抗的原因及治疗对策,对rHuEPO的正确使用及节省治疗费用具有重要意义.近年研究报道促红细胞生成素依赖内皮蛋白对促红细胞生成素抵抗的治疗有较大的应用价值,本文就促红细胞生成素抵抗的原因及促红细胞生成素依赖内皮蛋白的可能治疗作用作一综述.
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生血合剂联合rHuEPO治疗肾性贫血的临床观察
目的:观察生血合剂联合rHuEPO治疗血液透析患者肾性贫血的疗效.方法:采用生血合剂(主要由熟地、何首乌、黄芪、当归、鸡血藤、川芎、丹参等制成颗粒剂)配合rHuEPO治疗血液透析患者肾性贫血30例,并设立对照组30例,观测两组患者治疗前后的血常规(Hb,Hct)、肾功能(Scr、BUN)、血清白蛋白、中医临床证候等.结果:治疗组与对照组相比:Hct、白蛋白较治疗前明显升高,P<0.01.Hb差异具有统计学意义(P<0.05).治疗组与治疗前相比:Hb、Hct、白蛋白差异具有统计学意义(P<0.01);Scr、BUN差异有统计学意义(P<0.05).结论:生血合剂联合rHuEPO优于单纯使用rHuEPO治疗血液透析患者的肾性贫血,临床实施切实可行.
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rHuEPO治疗产后贫血的临床观察
目的:为观察rHuEPO对产后贫血的治疗效果.方法:对产后贫血患者首次皮下注射rHuEPO4000U7d后再注射rHuEPO400U.同时治疗组和对照组均予口服硫酸亚铁900mg.结果:rHuEPO组与对照组相比血红蛋白、红细胞数均有明显回升(P<0.001).结论:rHuEPO治疗产后贫血是安全、有效的方法.
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大剂量重组人促红细胞生成素联合蔗糖铁治疗尿毒症血液透析患者贫血的疗效观察
重组人促红细胞生成素(rHuEPO)及铁剂目前已被广泛应用于治疗慢性肾功能不全、尿毒症患者的肾性贫血.河南省鹤煤集团公司总医院将大剂量rHuEPO联合蔗糖铁应用于行血液透析的尿毒症患者的贫血治疗,取得了满意效果,现报道如下.
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rHuEPO 对肾间质纤维化过程中炎症因子的影响及其可能作用机制
目的:临床治疗虽可延缓肾间质纤维化进展,却无法逆转肾功能丧失。探讨重组人促红细胞生成素( recombi-nant human erythropoietin , rHuEPO)对肾间质纤维化过程中炎症因子的影响及其可能作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞随机分为7组:空白对照组、rHuEPO对照组(20 U/mL rHuEPO)、清蛋白刺激组(5 mg/mL清蛋白)、5 U/mL rHuEPO干预组(5 mg/mL清蛋白+5 U/mL rHuEPO)、10 U/mL rHuEPO干预组(5 mg/mL清蛋白+10 U/mL rHuEPO)、20 U/mL rHuEPO干预组(5 mg/mL清蛋白+20 U/mL rHuEPO)、Rho激酶抑制组(10μmol/L Y27632+5 mg/mL清蛋白),各组均作用24 h。观察各组细胞形态的变化;RT-PCR检测各组细胞RhoA、ROCK1 mRNA及白细胞介素-6因子( interleukin-6, IL-6) mRNA含量水平;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子( tumor necrosis factor , TNF-α)、IL-6蛋白的含量表达。结果空白对照组、rHuEPO干预组显示鹅卵石或者铺路石样形态,清蛋白刺激组表现出细长梭状改变,呈现纤维细胞样外观。5、10、20 U/mL rHuEPO干预组细胞向鹅卵石样复转,Rho激酶抑制组细胞形态呈椭圆形、细胞间隙稍增大;与空白对照组比较,清蛋白刺激组RhoA、ROCK1 mRNA及IL-6 mRNA显著升高(P<0.05),而5、10、20 U/mL rHuEPO干预组逐渐下调(P<0.05),且与rHuEPO浓度负相关;与清蛋白刺激组比较,Rho激酶抑制组ROCK1 mRNA、IL-6 mRNA表达下调(P<0.05),但RhoA mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。 ELISA结果显示:清蛋白刺激组上清液TNF-α、IL-6蛋白[(1347.54±41.52) ng/L、(884.62±0.73) pg/L]表达较空白对照组[(452.32±33.23) ng/L,(95.12±0.32) pg/L]显著增高(P<0.05),5、10、20 U/mL rHuEPO干预组、Rho激酶抑制组TNF-α表达[(1003.32±3.42)、(821.32±21.32)、(590.15±7.68)、(488.13±65.03)ng/L)]较清蛋白刺激组[(1347.54±41.52) ng/L]下降(P <0.05)、IL-6蛋白表达[(656.68±0.55)、(422.35±0.22)、(217.32±0.35)、(309.49±0.21)pg/L]亦较清蛋白刺激组[(884.62±0.73)pg/L]下降(P<0.05),5、10、20 U/mL rHuEPO干预组组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 rHuEPO可能通过减少炎症因子的产生来抑制清蛋白诱导的HK-2细胞转分化过程,其作用机制部分涉及RhoA/ROCK信号通路。
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重组人促红细胞生成素皮下注射护理研究进展
慢性肾衰竭(CRF)患者均有严重贫血[1].促红细胞生成素(EPO)是一种能刺激红细胞增殖分化及成熟的糖蛋白造血因子,治疗肾性贫血已被世人公认,疗效肯定,是尿毒症患者首选的纠正贫血的药物[2].重组人促红细胞生成素(rhUEPO)在我国临床应用已经10余年,rhUEPO治疗肾性贫血静脉给药和皮下注射给药同样有效,但皮下注射的药物效应动力学表现优于静脉注射,并可延长有效药物浓度在体内的维持时间,节省治疗费用[3].在临床应用中,注射部位皮下出血和疼痛是常见的不良反应.近年来,为减少出血、疼痛,国内外学者对rhUEPO皮下注射的部位及方法进行了研究.现综述如下.
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CHr在监测重组人促红细胞生成素治疗肾性贫血疗效的临床应用
目的:分析单个网织红细胞血红蛋白含量(CHr)在监测重组人促红细胞生成素(rHuEPO)治疗肾性贫血患者疗效的临床应用.方法:收集29例肾性贫血患者使用rHuEPO治疗前及治疗后7天及治疗后14天三个不同时段的EDTA抗凝血,使用ADVIA2120血细胞分析分别检测各样本的HGB及CHr,分析CHr及HGB的相关性及CHr及HGB的变化百分比.结果:肾性贫血患者在使用rHuEPO治疗前后相比较,HGB及CHr的变化差异均有显著统计学意义(P<0.01).在使用rHuEPO治疗后,CHr水平的升高较HGB水平显著.结论:在使用rHuEPO治疗肾性贫血时,相对于HGB,CHr能更早的反映机体内血红蛋白合成状况.
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血液透析患者肾性贫血的生命质量和药物经济学评价
本文选择目前临床使用较多的2种重组红细胞生成素(rHuEPO),商品名分别为益比奥和利血宝,观察其对维持性血液透析合并肾性贫血患者的疗效、安全性、生命质量评价及药物小成本分析. 资料与方法 一、对象与分组 选择2005年4月至2010年4月我院维持性血液透析合并肾性贫血且资料完整的患者82例.
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促红素促进慢性肾功能不全患者sTWEAK 蛋白表达
目的 观察rHuEPO对血浆sTWEAK蛋白等表达的影响.方法 健康对照组25例,实验组CKD 2~5期患者105例,用rHuEPO治疗4周.比较两组血浆sTWEAK 蛋白水平.结果 CKD2~5期患者sTWEAK 蛋白较治疗前均增高(P<0.05);血浆t-PA和sICAM水平无变化.结论 rHuEPO 治疗CKD 2~5期患者,能提高血管内皮细胞损伤标志物sTWEAK蛋白水平,改善内皮细胞功能.
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重组人促红细胞生成素治疗癌性贫血28例临床分析
促红细胞生成素(EPO)主要是一种糖蛋白激素,系调控红细胞产生的重要造血因子,其通过与骨髓内的红细胞原体细胞表面上的受体结合而诱使红细胞原体细胞增殖及分化成熟红细胞.为评价重组人促红细胞生成素(rHuEPO)治疗癌性贫血的疗效,本文对我院2004年9月~2005年9月住院肿瘤患者治疗前后的临床资料进行回顾性分析,现报道如下.