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早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性循环细胞检测及其临床意义
目的 探讨早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性细胞检测的临床意义及其预后价值.方法 应用RT-PCR检测50例早期乳腺癌患者、24例良性乳腺病变患者及20名健康体检志愿者外周血有核细胞CK19 mRNA的表达,并根据基因标志物结果随访.结果 早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率40.0%(20/50),与良性乳腺疾病患者[12.5%(3/24)]及健康体检志愿者[5%(1/20)]比较,差异均有统计学意义(P=0.018,P=0.004);外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率与患者年龄、月经状况、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移状况、病理分化、激素受体状况、Her-2、血清CA153、血清CEA水平异常升高无关(P＞0.05);20例外周血有核细胞CK19 mRNA阳性的患者中有11例随访期出现转移复发(P=0.002),中位无瘤生存期明显缩短(P=0.007).结论 CK19 mRNA可以作为循环肿瘤细胞基因标志物.检测CK19 mRNA阳性循环肿瘤细胞,可能作为早期乳腺癌术后判断复发转移的辅助指标.
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肺癌患者外周血CK19mRNA 和CyFRA21-1水平的相关性研究
目的研究肺癌患者外周血细胞角蛋白19(CyFRA21-1)水平和CK19mRNA表达水平的相关性,并评价其对肺癌临床诊断的价值.方法用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定91例肺癌、33例良性肺病患者、50例健康人外周血CK19mRNA的表达水平和血清CyFRA21-1水平.结果肺癌组患者CK19mRNA阳性率和CyFRA21-1水平明显高于良性肺病组(P<0.01)和健康人组(P<0.01).而且临床分期越晚CK19mRNA阳性率和CyFRA21-1水平越高,CK19mRNA对肺癌早期较为敏感.各组织类型间CK19mRNA阳性率无显著差异(P>0.05),而CyFRA21-1对鳞癌敏感性高于其他类型.结论肺癌患者外周血细胞角蛋白19(CyFRA21-1)水平和CK19mRNA表达水平呈正相关性,并对肺癌的早期诊断和病理分型有一定的帮助.
关键词： 肺癌 细胞角蛋白19 循环癌细胞 逆转录多聚酶链反应法 CK19mRNA -
荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血CK19mRNA表达
目的应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中微转移情况.方法用荧光定量RT-PCR方法检测57例肺癌患者外周血CK19mRNA表达.结果 57例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性19例,阳性率33.3%,统计结果显示外周血CK19mRNA的表达与性别、年龄、病理类别无关,在不同分化程度、淋巴结转移状态、临床分期间有显著差异.结论以CK19mRNA为分子标记,用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移具有很高的灵敏度,有助于亚临床转移的早期发现.
关键词： 荧光定量RT-PCR 肺癌 CK19mRNA 微转移 外周血 -
荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血CK19、CK20mRNA表达
目的 应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中微转移情况. 方法 用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达. 结果 103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例,阳性率33.98%;CK20mRNA检测阳性17例,阳性率16.50%,其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性.统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关,与性别、年龄、病理类别无关. 结论 用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性,有助于早期筛选亚临床转移.
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荧光定量RT-PCR检测食管癌外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达
目的应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测食管癌外周血中微转移情况.方法用荧光定量RT-PCR方法检测38例食管癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达. 结果 38例食管癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性14例,阳性率36.84%;CK20mRNA检测阳性6例,阳性率15.79%;两者任一阳性18例,阳性率47.37%.结果显示外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关,与性别、年龄、病理类别无关.结论用荧光定量RT-PCR法联合检测食管癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA有助于筛选亚临床转移和指导临床治疗方案的制定.
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肾癌患者围手术期CK19mRNA和CK20mRNA的定量分析
[目的]探讨肾癌患者围手术期外周血CK19mRNA和CK20mRNA的变化.[方法]采用RT-PCR方法检测141例肾癌患者术前血液样本.分析CK19mRNA和CK20mRNA与临床、病理因素的关系;检测103例肾癌患者术前、术中和术后三个时间点的血液标本,并对三组标本进行比较.[结果]CK19mRNA、CK20mRNA的表达与患者的性别、年龄和肿瘤大小无关(P均>0.05);术后外周血CK19mRNA的拷贝数(5.68+3.08)高于术前(4.97+3.58),差异有统计学意义(P<0.05);肾癌患者外周血CK20mRNA的拷贝数低于CK19mRNA.[结论]检测肾癌患者循环肿瘤细胞CK19mRNA,可反映肿瘤的血源性播散,判断病情.
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胸腔镜辅助小切口手术治疗肺癌对患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的影响
目的 胸腔镜辅助小切口手术治疗肺癌对患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的影响.方法 90例肺癌患者分为两组,对照组45例,观察组45例,对照组采用开胸手术,观察组采用胸腔镜辅助小切口治疗,采用RT-PCR测定患者手术前后血CK19mRNA和LunxmRNA的表达.结果 手术后两组患者血清CK19mRNA和LunxmRNA阳性例数均明显减少(t=19.682、12.784、7.824、7.085,均P＜0.01),且观察组减少更显著(t=1.900、1.438,均P＜0.05).结论 胸腔镜辅助小切口手术可以明显降低肺癌患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的表达,减少患者微转移.
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非小细胞肺癌患者外周血CK19mRNA、CYFRA21-1、CA125、CA153联合检测的实验研究
肺癌是人类常见的恶性肿瘤之一,随着工业化的发展,我国肺癌的发生率有逐年上升的趋势,5年存活率≤10%,城市多于农村.即使工期非小细胞肺癌(NSCLC)的外科手术的5年生存率仅为50%～60%,而其中30%的患者在术后发生转移和复发[1].
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肺癌外周血CK19 mRNA表达的临床意义
目的:应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction.RT-PCR)检测肺癌外周血中的表达情况,并探讨其表达的临床意义.方法:用荧光定量RT-PCR方法检测67例肺癌患者外周血CK19 mRNA表达.结果:66例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例,阳性率53.0%,统计结果显示外周血CK19mRNA的表达与性别、年龄、病理类别、临床分期无关,在不同分化程度、淋巴结转移状态间有显著差异.结论:CK19mRNA可作为RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床治疗.
关键词： 荧光定量RT-PCR 肺癌 CK19mRNA 微转移 -
乳腺癌患者CK19mRNA表达的意义及辅助化疗对骨髓微转移的影响
目的 探讨乳腺癌患者外周血、淋巴结和骨髓的微转移情况,以及辅助化疗对骨髓微转移的影响.方法 采用RT-PCR技术同时检测可手术的69例乳腺癌患者的外周血、淋巴结和骨髓中CK19mRNA的表达,并观察辅助化疗对骨髓微转移的影响.结果 骨髓微转移24例(34.8%),外周血CK19mRNA阳性11例(15.9%).淋巴结微转移阳性40例(58.0%),其中淋巴结病理学检查阳性的35例中,32例(91.4%)淋巴结微转移阳性,在淋巴结病理学检查阴性的34例中,8例(23.5%)淋巴结微转移阳性.淋巴结微转移阳性的40例中,18例(45.0%)骨髓微转移阳性.24例骨髓微转移阳性的患者在接受6个周期的CAF方案辅助化疗后,有7例骨髓微转移转阴(29.2%).结论 CK19mRNA的表达可作为评价乳腺癌微转移的指标.外周血微转移的检测,其敏感性和特异性较骨髓差;骨髓微转移的检测可作为评价辅助化疗敏感性的指标之一.
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肺癌患者外周血CK19mRNA、CEA、NSE、TPA联合检测的意义
背景及目的:细胞角蛋白作为检测循环癌细胞的指标,越来越得到人们的重视.CK19mRNA作为微转移检测的基因标记有较高的应用价值,但其特异性及敏感度都不够理想.本实验旨在评价外周血CK19mRNA与肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇酶(NSE)和组织多肽抗原(TPA)水平的联合测定对肺癌临床诊断的价值.方法:用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR)检测外周血有核细胞CK19mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光法(TRF)测定91例肺癌、33例良性肺病患者和50例健康人的血清CEA、NSE和TPA水平,数据统计用t检验和χ2检验分析.结果:肺癌组外周血CK19mRNA和血清CEA、NSE、TPA的阳性检出率(分别为495%、659%、670%、835%)明显高于良性肺病组(分别为242%、90%、152%、90%)和健康对照组(分别为100%、40%、80%、60%)(P<001).在不同的组织类型中CK19mRNA阳性检出率无统计学差异.随着临床分期逐步升高,Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期CK19mRNA的阳性检出率分别为44.4%、48.4%、54.2%呈上升趋势,但无显著性差异(P>0.05).在Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期血清CEA水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为35/278、51/355、85/583,血清NSE水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为125/333、153/419、247/583,血清TPA水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为11/444、18/581、36/667,都呈上升趋势,但也无显著性差异(P>0.05).联检结果显示四项或三项联检比二项联检或单项检测的准确性更高.另外,TPA检测的阳性率以鳞癌高(767%);CEA检测的阳性率以腺癌高(833%),NSE检测的阳性率以小细胞癌高(792%).结论:外周血CK19mRNA和CEA、NSE、TPA联合检测可提高肺癌检出率,并能为治疗提供有力的诊断依据.
关键词： 肺肿瘤 逆转录多聚酶链反应法 CK19mRNA 肿瘤标记物 -
CK19mRNA检测在鉴别诊断良恶性胸腹水的价值
胸腹水的良恶性鉴别诊断一直是困扰临床的难题.不同病因导致的胸腹水的治疗与预后截然不同;目前诊断恶性肿瘤的金标准组织病理诊断对体液来源的标本诊断准确性不高.因此寻找理想肿瘤标记物是目前研究的主要课题.胸腹水是因为恶性肿瘤浸润引起者,恶性肿瘤细胞几乎总是流入胸腹水中[1].利用RT-PCR方法进行肿瘤细胞的检测,被认为是目前判断常规临床病理学方法所不能检出的恶性肿瘤转移的有效方法[2].我们采用该方法检测胸腹水中的癌细胞CK19mRNA的表达,旨在寻找一种更灵敏、准确的检测手段.
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链式激活的免疫细胞治疗恶性积液的疗效观察
目的 探讨链式激活的免疫细胞(Capri)治疗恶性积液的效果.方法 分别观察试验组、化疗组患者恶性积液治疗的有效性和总生存期,应用流式细胞术和RT-PCR法检测2组患者治疗前后不同时间的T淋巴细胞亚群及CK19mRNA的变化.以健康体检者为对照组.结果 试验组积液的控制情况和生活质量明显优于化疗组(x2=7.810,P＜0.05;x2=5.185,P＜0.05).2组患者治疗前CD3+、CD4+、NK细胞含量明显低于对照组(P＜0.05),治疗后试验组明显升高,与化疗组同期相比差异有统计学意义(P＜0.05),与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).2组患者治疗前CD8+含量明显高于对照组(P＜0.05).治疗后明显下降,与治疗前相比差异有统计学意义(P＜0.05),与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),试验组与化疗组同期相比差异无统计学意义(P＞0.05).2组治疗前CK19mRNA基因表达均显著增强,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后试验组表达显著降低,与治疗前相比差异有统计学意义(P＜0.05),与化疗组同期相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 恶性积液患者可以应用Capri细胞治疗,Capri细胞通过改善患者的免疫功能,增加患者NK细胞的数量,提高患者抗肿瘤的能力,有利于恶性积液患者的治疗及预后.
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CK19 mRNA在早期宫颈癌淋巴结微转移中的研究
[目的]通过检测早期宫颈癌前哨淋巴结(SLN)中CK19 mRNA(cytokeratin 19)的表达,探讨CK19 mRNA对宫颈癌淋巴结微转移检测的临床意义.[方法]①选择2007年12月～2008月12月昆明医学院第三附属医院(云南省肿瘤医院)妇科肿瘤临床研究中心早期宫颈癌初治患者30例.所有患者均行子宫广泛切除术和双盆腔淋巴结清扫术.②采用放射性核素联合亚甲蓝的方法识别SLN,逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测SIN中CK19 mRNA的表达,与常规病理组织学方法比较,分析CK19 mRNA对早期宫颈癌淋巴结徽转移检测的临床意义.[结果]①30例宫颈癌患者共检出SLN标本55枚,其中常规病理组织学方法检测SLN阳性率为14.5%(8/55).经RT-PCR法检测SLNCK19 mRNA阳性率为32.7%(18/55).经常规病理组织学方法证实无癌转移的47枚淋巴结中,10枚CK19 mRNA表达阳性,阳性率为21.3%(10/47).二者之间比较差异有统计学意义.②CK19 mRNA表达与病理类型有相关性(P＜0.05).[结论]与传统的病理组织学比较,采用RT-PCR技术检测淋巴结中CK19 mRNA袭达能显著提高微转移的检出率.
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肺癌患者外周血CK19mRNA与微转移的实验研究
目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CK19mRNA的表达情况,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义.方法:选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT-PCR方法检测外周血CK19mRNA,相对定量分析结果.结果:肺癌组与健康对照组CK19mRNA阳性表达率分别为72.5%(29/40)、14.0%(7/50),差异显著(P＜0.05);相对表达量分别为1.69±0.44、0.28±0.12,有显著差异(P＜0.05).阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性;相对表达量在中央型、T3+T4、Ⅲ期+Ⅳ期及低分化患者数值较高,但不具有统计学意义,鳞癌患者高于腺癌,且有显著差异(P＜0.05).结论:CK19mRNA作为Real-time RT-PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标记物,具有一定临床应用价值,但特异性仍需提高,应进一步扩大样本进行研究及随访.相对定量分析是一种值得推荐、准确简便的荧光实时相对定量方法.
关键词： 实时荧光定量RT-PCR 非小细胞肺癌 CK19mRNA 外周血 微转移 -
早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义
目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关；推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.
