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  • 新生和格特隐球菌种、变种、基因型和交配型的分子鉴定

    作者:冯晓博;姚志荣;杨桂梅;凌波;任大明

    目的 评价限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)方法检测α和a交配型位点内GEF1α/a基因片段在鉴定新生和格特隐球菌种、变种、基因型和交配型中的作用.方法 筛选交配型位点内的GEF1α/a基因进行PCR-RFLP分析.根据各基因型和交配型参考株的GEF1α/a基因保守序列设计引物,扩增受试新生和格特隐球菌GEF1α/a基因部分片段.利用DNAMAN和Vector NTI软件进行序列比对、限制性图谱分析、限制性内切酶的筛选和模拟电泳.选择EcoTl4 Ⅰ和Hap Ⅱ限制性内切酶分别对125株新生和格特隐球菌的GEF1α/a基因扩增片段进行RFLP分型.结果 所有受试的82株新生隐球菌和43株格特隐球菌均扩增出1 300 bp大小片段,而罗伦隐球菌、白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、阿萨希毛孢子菌、烟曲霉和黄曲霉参考株均扩增阴性.RFLP分型准确鉴定所有125株新生和格特隐球菌的种、变种、基因型和交配型.结论 针对GEF1α/a基因片段的PCR-RFLP方法特异性高、稳定性好,适用于新生和格特隐球菌种、变种、基因型和交配型的同步和快速鉴定以及进一步的分子流行病学分析.

  • 非移植患者侵袭性真菌病165例病原谱和易感因素分析

    作者:闫晓培;宗峰;赵新云;孙凯;金琳羚;王晶晶;孔辉;解卫平

    目的 了解侵袭性真菌病的病原谱、临床特征和易感因素,提高临床医生对真菌感染的认识,为临床早期诊治提供依据.方法 回顾性分析南京医科大学第一附属医院2006 2012年收治的165例非移植侵袭性真菌病患者的临床资料,按照统一标准重新确定诊断级别并分析其科室分布、临床表现、病原谱及易感因素.结果 165例中,男90例,女75例,年龄14 ~ 90岁,平均(54±15)岁.呼吸科病例52例(31.5%);菌群分布以隐球菌多(91例,54.9%),其次为曲霉(52例,31.4%)和毛霉(10例,5.9%).肺真菌病的临床表现多为咳嗽、咳痰、咯血及发热,影像学表现多样但无特异性,结节或实变影较经典的曲霉球、晕轮征及新月征更为常见.基础疾病前3位依次为糖尿病(26例,15.8%)、慢性阻塞性肺疾病(22例,13.3%)和血液系统恶性肿瘤(17例,10.3%),66.1%(109例)的患者存在1种或多种高危因素(如联合使用抗生素≥7 d、侵入性操作、长期使用糖皮质激素或免疫抑制剂等),合并2种及以上高危因素的患者病死率升高.结论 非移植患者侵袭性真菌病前3位病原体分别为隐球菌、曲霉及毛霉,肺和脑是常见的感染部位;相对于隐球菌感染,曲霉和毛霉感染多存在基础疾病;低蛋白血症和长期使用广谱抗生素是常见的易感因素.

  • 肺部真菌感染152例病原谱再评价

    作者:曹彬;蔡柏蔷;王辉;周朝阳;王澎;刘鸿瑞;张弘;徐凌;徐凯峰;许文兵;朱元珏;李晓光

    目的 了解肺部真菌感染的病原谱和预后.方法 根据欧洲癌症研究和治疗侵袭性真菌感染协作组(EORTC)、美国变态反应和感染性疾病协会真菌病研究组(MSG)2002年制定的定义以及血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准,将北京协和医院2002年1月至2006年6月诊断的152例肺部真菌感染患者按照统一的定义进行重新分组:确诊组38例,临床诊断组24例,拟诊组35例,定植组55例,重新分析病原谱.结果 38例确诊肺部真菌感染的患者中,肺曲霉菌感染占首位(15/38),其次为肺隐球菌感染(13/38),第三为毛霉菌和其他类型丝状真菌,而真正念珠菌肺炎少见,只有2例.临床诊断组曲霉菌和曲霉菌+念珠菌占第1位,而拟诊组以及定植组以单纯念珠菌占首位.临床诊断组病死率为58.3%,高于拟诊组(25.7%)和定植组(16.4%).拟诊组和定植组"念珠菌肺炎"分别为28例和50例,对这78例"念珠菌肺炎"患者的预后危险因素进行分析后发现,只有急性生理和慢性病评分(APACHEⅡ)与患者的预后有关,而是否抗真菌治疗及使用何种抗真菌药物与预后无关.结论 肺部真菌感染以曲霉菌占第1位,其次为隐球菌和毛霉菌,念珠菌肺炎少见.痰标本念珠菌属培养阳性作为"念珠菌肺炎"的诊断标准值得商榷.

  • 新型隐球菌所致胆道隐球菌病一例

    作者:杨继勇;李景云

    新型隐球菌( Cryptococcus neoformans)为隐球菌属常见的致病菌.通常通过带菌的鸽粪、灰尘、腐烂的水果等从皮肤、呼吸道或消化道侵入人体,引起隐球菌病(cryptococcosis).因该菌嗜好侵犯中枢神经系统,因此以脑部感染为多见.近我院收治了一例由新型隐球菌引起的肉芽肿所致的胆道梗阻病人,现报告如下.

  • 格特隐球菌VGⅡ基因型的快速鉴定和序列分型研究

    作者:冯晓博;凌波;付小花;王磊;任大明;姚志荣

    目的 建立一种核糖体基因内间隔区(IGS)的特异性PCR扩增和序列分析方法,用于快速鉴定格特隐球菌VGⅡ基因型及其亚型.方法 选取新型和格特隐球菌核糖体IGS区中可变度高的1区为靶点,经ClustalX 2多重比对后,设计特异性扩增格特隐球菌VGⅡ基因型的引物用于PCR分析.通过扩增新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌来评价引物的特异性,并对阳性扩增片段(VGⅡ基因型)进行测序和序列分型研究.结果 基于核糖体IGS区的特异PCR引物扩增所有受试格特隐球菌VGⅡ基因型菌株均为阳性,而新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌均为阴性.序列分型显示,在扩增片段的72、79和104 bp处存在3个多态性位点,可用于区分VGⅡ基因型中的不同亚型.结论 该研究建立的特异性PCR扩增方法可快速、准确地鉴定格特隐球菌VGⅡ基因型,对扩增片段的序列分型可初步筛查高致病性的VGⅡa亚型.

  • 真菌感染与白细胞相关因素研究

    作者:黄云平;黄妙儿;陈华;杨雪英

    目的探讨真菌感染与白细胞、发热、死亡率之间的关系,有助于提高对真菌感染的临床诊断和治疗水平.方法将真菌感染患者141例分深部败血症、肺部、胆道,中枢神经、局部生殖泌尿道、肠道和对照组进行白细胞计数和分类,发热、死亡率进行统计分析.结果深部真菌感染念珠菌属和隐球菌属、曲霉菌属占90.8%,曲霉菌属感染引起患者高死亡率可达88.9%;真菌引起的血液系统、胆道、深部感染所致发热率可达100%,而局部生殖泌尿、肠道感染、神经系统则表现不一;深部肺曲霉、青霉菌感染引起患者WBC总数和分类均显著高于正常对照(P<0.01);而念珠菌属酵母样真菌引起的深部和局部感染所致白细胞总数与正常对照人群差异无显著性(P>0.05).结论深部真菌感染组患者发热比率显著高于神经系统、生殖泌尿、肠道局部感染患者;深部酵母菌感染其白细胞总数在正常范围内波动,而侵袭性肺曲霉菌感染患者白细胞显著增高;系统性念珠菌病、新型隐球菌病和侵袭性曲霉菌病是当前三大机会性感染真菌.

  • 无荚膜隐球菌CAP64对小胶质细胞凋亡的影响

    作者:杨阳;廖万清;徐红;张玲珍;赵瑾;陈孙孝;温海

    目的观察无荚膜隐球菌CAP64对鼠小胶质细胞凋亡的影响.方法无荚膜隐球菌CAP64与小胶质N9细胞株共孵育,用流式细胞仪检测5个不同时段N9细胞的凋亡指数.结果 2、4、8、16、24h N9细胞平均凋亡指数分别为9.33%、12.93%、15.37%、16.30%、20.5%,与空白组、灭活组凋亡指数比较,差异均有显著性(P<0.05).结论无荚膜隐球菌CAP64可以诱导小胶质细胞凋亡.

  • 隐球菌脑膜炎治疗新进展

    作者:杨春;邹启圆

    隐球菌脑膜炎(隐脑)是隐球菌属中某些种类或变种侵犯中枢神经系统引起的一种深部真菌感染,其病情重,治疗困难,病死率高.近年来隐脑的发病率呈明显上升趋势,突出表现在艾滋病(AIDS)人群中,据统计,美国约有5%~10%的AIDS患者发生隐脑;我国以散发、非AIDS人群为主,但也有AIDS并发隐脑的报告.本文对治疗该病的临床用药现状和研究进展进行综述.

  • 抗真菌药

    作者:金有豫

    其他抗真菌药灰黄霉素Gri seofulvin[抗真菌谱和抗菌作用]灰黄霉素主要对毛发癣菌、小孢子菌、表皮癣菌等浅部真菌有较强的抗菌作用,MIC《1μg/ml.对念珠菌属、隐球菌属、组织胞浆菌属、孢子丝菌属、芽生菌属、球孢子菌属等无作用.

  • 肾透明细胞癌伴肾上腺隐球菌感染1例

    作者:蔡辉;王耘;杨非衡;徐红兰;马郁琳

    患者,男,58岁.因全身乏力1个月,加重1周,伴有面色变黑,一过性意识障碍1天入院.行B超、腹部增强CT、MRI检查示左肾占位、双肾上腺占位性病变.查血中皮质醇水平低下,而促肾上腺皮质激素(ACTH)明显升高.行左肾癌根治术+左肾上腺切除术.术中发现左肾中肿物1个,大小为3.6 cm×3.2 cm,边缘光滑,突出于肾轮廓.左肾上腺区触及肿物1个,大小为3 cm×5 cm.

  • 在实践中重新审视真菌血清学诊断试验

    作者:余进

    侵袭性真菌感染血清学检测方法应用数年,不断发展.鉴于实践应用中对其认识日渐加深,本文对应用价值较高的曲霉半乳甘露聚糖检测和隐球菌荚膜多糖抗原检测两种方法进行述、析、评.

  • 原发性肺隐球菌病一例报告

    作者:方晓熠;黄科峰;吴晓刚

    1病例资料
      男,65岁。因咳嗽、胸痛半个月,低热1周入院。患者半个月前无明显诱因出现咳嗽,干咳少痰,夜间明显,近1周出现低热,体温37.4~37.8℃。无痰中带血,无消瘦、乏力、盗汗,无喘息发作。无饲养鸽、猫、狗等宠物史,有高血压病史、冠心病史20年,糖尿病史4年。查体仅见右肺呼吸音减低。查血白细胞10.2×109/L,中性粒细胞0.764,超敏C反应蛋白67.98 mg/L,红细胞沉降率正常;癌抗原(CA)12557.3 kU/L,甲胎蛋白、癌胚抗原、CA153、CA199均正常;结核抗体阳性。胸部CT检查示:平扫见右肺多发结节状、斑片状高密度灶影,部分病灶周围见晕征及空气支气管征;动态增强扫描见右肺病灶于肺动脉期轻度强化,主动脉期明显强化(图1)。入院诊断肺炎,予左氧氟沙星、氨溴索静脉滴注5 d,疗效不佳。反复行痰真菌、结核杆菌培养均阴性。支气管镜刷检示:较多柱状上皮细胞,其间少许细胞轻度异型;支气管分泌物涂片找抗酸杆菌阴性。 CT引导下行经皮肺穿刺活检病理检查示新型隐球菌性炎性肉芽肿。确诊原发性肺隐球菌病( pulmonary cryptococcosis, PC),予氟康唑抗真菌治疗,20 d后复查肺部CT示右肺病灶明显缩小。

  • 中枢神经系统感染160例临床分析

    作者:奚敏;胡微微;朱明芬;潘庆春;臧国庆

    目的 探讨各类中枢神经系统感染的临床特点及治疗方法.方法 对我院收治的中枢神经系统感染160例的临床资料进行回顾性分析.结果 本组诊断为病毒性脑炎(病脑)80例,化脓性脑膜炎(化脑)37例,结核性脑膜炎(结脑)35例,隐球菌性脑膜炎(隐脑)8例.全部予甘露醇、甘油果糖脱水降颅压及对症治疗,其中148例治疗有效,复查脑脊液示化脑、病脑患者脑脊液均恢复正常;结脑患者脑脊液明显好转,糖基本恢复正常;隐脑患者脑脊液3次墨汁涂片检查(-),糖、氯化物基本正常,脑脊液真菌培养(-),乳胶凝集试验效价明显下降(1∶8~1∶320).148例病情好转出院,其中10例遗留颅神经损害和脑积水;12例死亡,病死率7.5%.结论 中枢神经系统感染需结合临床表现、脑脊液检查和治疗效果综合进行诊断,对疑似中枢神经系统感染但不能确诊者,可予诊断性治疗,以免延误佳治疗时机.

  • 2004-2013年广西地区肺真菌病病原学和高危因素及临床特征回顾性分析

    作者:蒋玲玉;秦志强;段世焕;冯广弘;陈桂荣;韦彩周;冯宗莲

    目的 分析广西地区肺真菌病的病原学、高危因素及临床特征,以期提高肺真菌病的临床诊治水平.方法 回顾性收集2004-2013年在广西壮族自治区人民医院住院的89例肺真菌病患者的临床资料,设计肺真菌病调查表,收集患者一般资料、病原学、基础疾病、高危因素、临床特征及预后等资料.结果 89例肺真菌病患者致病菌构成中,以曲霉[37例(41.6%)]和隐球菌[32例(36.0%)]常见,其他包括假丝酵母菌[6例(6.7%)]、诺卡菌[5例(5.6%)]、马尔尼菲青霉菌[5例(5.6%)]、毛霉[3例(3.4%)]和肺孢子菌[1例(1.1%)].56例(62.9%)患者存在基础疾病,以肺部疾病41例(46.1%)为主;11例(12.4%)患者存在高危因素.临床症状主要表现为咳嗽[62例(69.7%)]、咳痰[59例(66.3%)]、发热[14例(15.7%)]、咯血[13例(14.6%)]、胸痛[9例(10.1%)]、呼吸困难[9例(10.1%)].肺部体征包括湿啰音30例(33.7%)、干啰音19例(21.4%)和哮鸣音6例(6.7%).结论 肺曲霉病和肺隐球菌病是常见的肺真菌病;多数患者具有基础疾病或高危因素,其中以肺部疾病为主;临床表现为常见呼吸道症状,未见明显特异性.

  • 1例误诊为肺癌的罕见肺隐球菌感染病人的护理

    作者:张智

    原发性隐球菌肺炎是由新型隐球菌感染引起的一种亚急性或慢性肺部真菌病.新型隐球菌属酵母菌,主要侵犯中枢神经系统、皮肤和肺,单独侵犯肺部者称为原发性肺部隐球菌肺炎,约占新型隐球菌感染的20%[1].

  • 抗菌药物临床应用指导原则

    作者:中华人民共和国卫生部;国家中医药管理局;中国人民解放军总后勤部卫生部

    (接上期)深部真菌病根据病原菌的致病力可分为致病性真菌和条件致病性真菌.致病性真菌本身具有致病性,包括组织浆胞菌、粗球孢子菌、巴西副球孢子菌、皮炎芽生菌、暗色真菌、足分枝菌和孢子丝菌等,此类真菌所致感染多呈地区流行.条件致病性真菌有念珠菌属、隐球菌属、曲霉属、毛霉属、放线菌属、奴卡菌属等,此类真菌致病性低,通常不感染正常人,但正常人大量接触后或免疫功能低下者易感染.

  • 原发性肺部隐球菌肺炎临床诊治

    作者:钟小宁

    1 概况原发性肺部隐球菌肺炎是由新型隐球菌感染引起的一种亚急性或慢性肺部真菌病,新型隐球菌属酵母菌,广泛存在于土壤和鸽粪以及寄生于人呼吸道内,其入侵机体的途径以呼吸道常见.该菌主要侵犯中枢神经系统、皮肤和肺,单独侵犯肺部者称为原发性肺部隐球菌肺炎,约占新型隐球菌感染的20%.

  • 新型隐球菌脑膜炎的诊断与治疗(附3例报告)

    作者:吴惠兰;李海波;郭虎

    隐球菌脑膜炎是由隐球菌属中新型隐球菌侵犯中枢神经系统引起的一种深部真菌病,约占隐球菌感染的80%.本病预后严重,死亡率高,在儿童(特别是婴幼儿)的死亡率较成人更高,既使经过正规治疗,目前其死亡率仍高达25%~30%.现将本院1990年以来收治的3例儿童隐球菌脑膜炎患者诊治情况总结如下.

  • 6例隐球菌性脑膜炎的临床观察和护理对策

    作者:赵宏文;郭毅

    隐球菌性脑膜炎主要是由隐球菌属中的新生隐球菌及其变种侵犯脑膜或大脑实质引起的中枢神经真菌感染.其临床表现不典型,病程较长,疗效缓慢,病死率高,因此给护理工作带来较大难度.我科2001~2003年共收治6例隐球菌性脑膜炎患者,现报道如下.

  • 深圳地区新生隐球菌和格特隐球菌的临床分子流行病学

    作者:梁训宏;吴劲松;冯晓博;卢月梅;吴伟元;吴文苑

    目的 通过对深圳地区新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株进行分子流行病学调查,分析其种、变种、基因型和交配型的构成.方法 受试菌株为从临床标本中分离的55株隐球菌,利用刀豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝培养法区分新生隐球菌和格特隐球菌;利用M13的PCR指纹分型法鉴定基因型;利用变种和交配型特异性引物扩增分型法,区分新生隐球菌格鲁比变种、新生变种和格特隐球菌,同时鉴定α交配型和a交配型;利用GEF1-限制性片段长度多态性分析法同步鉴定和验证受试株的基因型和交配型;对VGⅡ基因型菌株进行IGS1序列类型的分析.结果 55株临床株中,52株为新生隐球菌,均为格鲁比变种、VN Ⅰ基因型和a交配型;3株为格特隐球菌,包括1株VG Ⅰ基因型、α交配型和2株VGⅡ基因型、a交配型.2株VGⅡ基因型菌株的IGS1序列类型为Ⅱ型.结论 深圳地区隐球菌致病菌株中绝大多数仍为新生隐球菌格鲁比变种、VN Ⅰ基因型和α交配型.存在少数格特隐球菌菌株,其中包括导致国外高发病率的VGⅡ基因型,后者的IGS1序列类型与VGⅡb基因亚型一致.

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