首页 > 文献资料
-
胰岛素抵抗大鼠及恢复状态下PGC-1α和Mfn2表达的变化
目的 观察胰岛素抵抗(IR)及改善后骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达变化及线粒体形态和参数的变化.方法 成年Wistar大鼠随机分为对照组(NC)、高脂组(HF)和高脂罗格列酮干预组(HF+RSG).喂养4周及8周时,清醒状态下用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术评价IR;第8周时,实时定量PCR和Western blot检测骨骼肌PGC-1α和Mfn2的表达;透射电镜观察骨骼肌线粒体的形态;Image-Pro Plus 6分析线粒体的各项参数.结果 高脂喂养4周后HF组与HF+RSG组IR状态形成.继续喂养4周后,HF+RSG组由于服用罗格列酮IR状态改善明显.与NC组相比,HF组的PGC-1α和Mfn2均显著下降(P＜0.05);与HF组相比,HF+RSG组上述两基因的表达均显著升高(P＜0.05);而与NC组相比,HF+RSG组PGC-1α的表达没有明显差异,而Mfn2的表达仍较低.与其余两组相比,HF组线粒体的形态和各项参数也发生了明显的改变(P＜0.05).结论 胰岛素抵抗状态的形成与PGC-1α和Mfn2的表达下降有关,也与线粒体的改变有关.
-
线粒体融合蛋白2与心血管疾病
线粒体融合蛋白2(mitofusin2,Mfn2)不仅是一种不可或缺的调控线粒体形态和功能的动力素(dynamin)相关蛋白,还是一个重要的细胞内信号分子,参与调控细胞增殖、分化、凋亡等生命过程.Mfn2与高血压、冠状动脉腔内成形术后再狭窄、动脉粥样硬化、心肌肥厚、心肌氧化损伤等多种心血管疾病的病理生理过程密切相关,并通过调节物质代谢影响糖尿病和胰岛素抵抗等的发病.此外,Mfn2还可能是心血管疾病的一个重要的分子标志和治疗靶分子.
-
线粒体融合蛋白2的结构与功能研究进展
线粒体融合蛋白2（mitofusin 2，Mfn2）位于线粒体外膜上，是线粒体外膜融合的重要蛋白之一。研究发现，它不仅参与调控线粒体形态结构，还与细胞代谢、增殖、凋亡密切相关。近年来资料提示，Mfn2参与调控内质网应激、自噬、线粒体自噬等方面。由于 Mfn2作用复杂，生理状态下细胞内必定存在精细的调控网络以使其保持在稳定水平。本文概括介绍了 Mfn2结构、功能及其调控机制新进展。
-
慢病毒介导的MFN2高表达对肾癌细胞增殖的影响
目的 探讨线粒体融合蛋白2(MFN2)对肾癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制.方法 将含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染肾癌细胞株ACHN和A498(实验组),对照组为绿色荧光蛋白基因的慢病毒(Lenti-GFP).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测转染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达及Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,流式细胞仪检测转染细胞周期.MTS法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化.结果 对照组与实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.04±0.29和4.11±0.78(P<0.001),A498细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.02±0.24和4.84±1.49(P=0.002).实验组MFN2蛋白表达显著上升,Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平显著降低,细胞周期明显抑制,肾癌细胞活力和增殖能力显著下降.结论 MFN2可能通过抑制肾癌细胞中Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,抑制细胞周期的进展,导致肾癌细胞活力和增殖能力下降.
-
姜黄素上调线粒体融合蛋白2抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的实验研究
目的 研究姜黄素抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用与机制.方法 取45只清洁级BALB/c雄性小鼠,随机(随机数字法)分为3组,即假手术组(n=15),脓毒症组(n=15),姜黄素组(n=15),实验重复3次.脓毒症组行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP),术前予等体积生理盐水灌胃1周;姜黄素组行CLP术,术前给予姜黄素200 mg/ (kg-d)灌胃1周;假手术组仅行开腹,不予以结扎、穿孔,术前等体积生理盐水灌胃1周.观察各组小鼠术后24h病死率,并处死存活小鼠,分离脾脏淋巴细胞.采用流式细胞术、TUNEL法检测淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术检测线粒体膜电位水平;Western Blot检测线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)、Bax、Bcl-2蛋白表达.数据采用SPSS 18.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析.结果 小鼠病死率采用x2检验,脓毒症组小鼠术后24h病死率为46.7％,较假手术组0.00％明显升高(x2 =27.391,P＜0.01),姜黄素组病死率较脓毒症组有所降低(40.0％ vs.46.7％,x2=6.429,P=0.01).脾淋巴细胞凋亡率比较采用单因素方差分析,3组比较,P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(17.1±1.67)％,较假手术组(9.43±1.06)％明显增高(P ＜0.001);姜黄素组淋巴细胞凋亡率(12.70±1.25)％较脓毒症组比较明显下降(P=0.012).脾淋巴细胞线粒体膜电位比较采用单因素方差分析,3组比较P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组线粒体膜电位降低率为(45.13±4.14)％,较假手术组(21.63±1.62)％明显升高(P＜0.01),姜黄素组线粒体膜电位降低率为(29.67±2.15)％,较脓毒症组明显降低(P=0.001).蛋白表达情况采用单因素方差分析,3组线粒体Bax蛋白(P＜0.01)、胞浆Bax蛋白(P＜0.01),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组线粒体Bax蛋白表达水平明显上调(P=0.001),而胞浆Bax蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).经姜黄素预处理后线粒体Bax蛋白水平较脓毒症组明显降低(P=0.02),胞浆Bax蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).3组细胞总Mfn2蛋白(P ＜0.001)、Bcl-2蛋白(P=0.001),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组Mfn2蛋白(P=0.015)、Bcl-2蛋白(P=0.01)表达水平明显降低,经姜黄素预处理后Mfn2蛋白(P=0.002)、Bcl-2蛋白(P =0.001)水平明显上调.结论 姜黄素能够上调Mfn2表达,促进线粒体融合进而抑制脓毒症小鼠脾淋巴细胞的凋亡.
-
线粒体融合蛋白与心血管疾病
心血管疾病(CVD)发生是一种多因素综合症候群,在全球范围内,是威胁生命的头号杀手,并且发病率随年龄的增长呈稳定上升趋势.虽然诊断和治疗已经取得了进步,但是CVD的发病率和死亡率仍然很高,部分原因归究于对其病理机制理解不清.心脏的首要功能是为器官供血,这就需要持续而大量的ATP能量供应.因此线粒体在心肌细胞中广泛丰富分布.正常的线粒体功能的维持依赖于其完整性和相互作用,并且受到线粒体融合蛋白和分裂蛋白的调控.该文简要综述了线粒体融合蛋白及其改变,特别是线粒体融合蛋白2异常在CVD发生发展中的作用.了解CVD中线粒体融合蛋白的作用对于增进知识以及发展新的治疗策略具有重要的意义.
-
Mfn2基因SNP位点rs17037564与肥胖型高血压的相关性研究
目的:探讨中国北方汉族人群中Mfn2基因SNP位点rs17037564与肥胖型高血压的相关性.方法:按照相应入选标准及排除标准收集入选对象,收集高血压患者231例,正常对照对象216例.采集基本临床资料,并对以上对象进行Mfn2基因SNP位点rs17037564基因型进行检测.分析rs17037564不同基因型与超重肥胖患病率以及高血压患病率三者之间相关性.结果:rs17037564 GG+AG基因型对象的高血压患病率明显低于rs17037564 AA基因型的对象,差异具有统计学意义(P=0.02).rs17037564不同基因型(GG+AGvs.AA)肥胖型高血压的患病率有明显的差异(P ＜0.001).考虑rs17037564不同基因型对血压的影响后,超重肥胖与高血压患病仍具有显著相关性.(P＜0.001).结论:Mfn2基因SNP位点rs17037564与高血压患病可能存在相关性.rs17037564 GG+ AG基因型相较于AA基因型是高血压发病的保护性因素,且对肥胖相关的高血压也起到一定的保护性作用.
-
线粒体融合蛋白2改善高脂诱导的骨骼肌细胞胰岛素抵抗机制的研究
目的 探讨线粒体融合蛋白2 (Mfn2)是否通过减轻氧化应激改善大鼠骨骼肌细胞IR.方法 建立高脂诱导骨骼肌细胞IR模型(PA组),以Mfn2基因重组腺病毒转染细胞(PMfn2组),观察细胞内葡萄糖摄取率、超氧化物歧化酶总活力(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、活性氧簇(ROS)及MDA的改变. 结果 (1)与正常对照(NC)组相比,高脂(PA)组葡萄糖摄取率降低(P＜0.01),T-SOD及CAT活性降低,ROS、MDA含量增加(P＜0.05);(2)与PA组相比,Mfn2基因重组腺病毒转染(PMfn2)组T-SOD及CAT活力均增加(P＜0.05);ROS水平、MDA含量降低(P＜0.05);GSH-Px活力无明显改变. 结论 上调高脂干预后骨骼肌细胞的Mfn2水平可减轻细胞氧化应激,改善IR.
-
MFN2 mRNA和蛋白在膀胱癌组织中的表达及与临床特征的关系
目的 探讨膀胱癌组织中线粒体融合蛋白2(MFN2)基因和蛋白的表达及其与临床特征的关系.方法 选取80例膀胱癌患者的术后膀胱癌组织标本为膀胱癌组,选取40例行手术切除的外伤患者的正常膀胱组织标本为对照组.采用免疫组织化学法检测两组标本中MFN2蛋白的表达情况;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测两组标本中MFN2 mRNA的表达水平;分析MFN2蛋白表达与膀胱癌患者临床特征的关系.结果 膀胱癌组织中MFN2蛋白的阳性表达率、MFN2 mRNA的相对表达量均明显高于正常膀胱组织(P<0.01).中低分化、T3期膀胱癌患者的膀胱癌组织中MFN2蛋白的阳性表达率分别高于高分化、T2期膀胱癌患者(P<0.05);不同年龄、性别、淋巴结转移膀胱癌患者的膀胱癌组织中MFN2蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 膀胱癌组织中MFN2基因和蛋白的表达均明显上调,且MFN2蛋白的表达与膀胱癌患者的临床特征有关.
关键词： 膀胱癌 线粒体融合蛋白2 临床特征 逆转录聚合酶链式反应 免疫组织化学法 -
线粒体融合蛋白2对前列腺癌细胞增殖的影响
目的 观察线粒体融合蛋白2(MFN2)对前列腺癌细胞生长的影响及其分子作用机制.方法 以含有绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体(Lenti-GFP)作为对照,用含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染前列腺癌细胞株DU-145和LNCaP.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测感染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测感染后细胞中Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达水平.结果 Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞中MFN2 mRNA表达量分别为2.79±0.91、3.87±1.06,高于Lenti-GFP组的1.02±0.27和1.13±0.59,差异均有统计学意义(t=3.726,P=0.010;t=5.209,P=0.002).与Lenti-GFP组相比,Lenti-MFN2组MFN2蛋白表达上调.Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞形成的集落数分别为(147.42±32.91)个、(130.26±62.47)个,低于Lenti-GFP组的(255.46±50.91)个、(238.10±49.77)个,差异均有统计学意义(t=3.565,P=0.012;t=2.700,P=0.036).Lenti-MFN2组细胞周期被阻滞在G0/G1期,Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达降低.结论 MFN2可抑制前列腺癌细胞的增殖能力,其机制可能是通过抑制Ras-Raf1-Erk1/2信号通路蛋白的活化.
-
线粒体融合蛋白2在心血管疾病方面的研究现状
线粒体融合蛋白2(Mfn2)是广泛分布于线粒体外膜、线粒体与内质网结合膜,负责参与调控线粒体形态和功能的多重功能蛋白.同时,Mfn2作为一个重要的细胞内信号分子,参与细胞的代谢、增殖、凋亡等过程,其介导的一系列生物学功能也与高血压、急性缺血/再灌损伤、扩张性心肌病等多种心血管疾病的发生机制和发展过程密切相关.本文将对Mfn2在心血管疾病方面的一些研究现状做一简单综述.
-
中国人腓骨肌萎缩症线粒体融合蛋白2基因突变分析
目的 分析线粒体融合蛋白2(MFN2)基因在中国人腓骨肌萎缩症的突变情况,建立快速、有效和经济的基因诊断方法 .方法 应用变性高效液相色谱(DHPLC)结合DNA直接测序的方法 ,对9个常染色体显性遗传的CMT2先证者和26个散发CMT2病例共35例患者进行MFN2基因编码区17个外显子及其侧翼区的突变检测.结果 在35例腓骨肌萎缩症患者中共检测到3种MFN2基因序列变异:c.281G→A,c.395G→A和c.408A→T,其中c.395G→A(C132T)为首次报道的致病突变,c.281G→A(R94Q)为已知致病热点突变,c.408A→T(V136V)为单核苷酸多态.DHPLC突变检测的敏感性和特异性为100%.结论 首次在国内应用DHPLC结合DNA直接测序对MFN2基因进行突变检测,发现2个致病突变和1个单核苷酸多态.DHPLC结合DNA直接测序法可准确有效地用于大规模MFN2基因突变筛查.
-
血必净干预下百草枯中毒大鼠肺组织线粒体融合蛋白2及超微结构变化的研究
目的 探讨百草枯(PQ)中毒致肺纤维化的发生机制以及血必净在PQ中毒时的治疗作用.方法 72只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、PQ中毒组和血必净干预组3组,每组24只.一次性灌胃50 mg/kg PQ染毒致肺纤维化,对照组灌胃1 mL蒸馏水;血必净组在染毒后30 min腹腔注射血必净注射液4 mL/kg,12h1次;PQ组和对照组则腹腔注射等量生理盐水;给药周期均为14 d.各组于染毒后1、3、7、14d末次干预后30 min各处死6只大鼠,取肺组织,通过苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色,光镜下观察肺组织病理学及肺纤维化改变;透射电镜下观察肺组织超微结构变化;采用碱水解法测定羟脯氨酸(HYP)含量;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达.结果 ①HE染色:PQ组3d时炎症反应重;7d时肺泡腔内渗出液逐渐机化,由肥大的成纤维细胞分泌纤细的胶原纤维,肺泡腔内可见到纤维化;14d时成纤维细胞大量增生,肺泡结构破坏并萎陷,胶原沉积,肺纤维化初步形成.血必净组各时间点肺组织病理变化较PQ组轻.②Masson染色:14d时血必净组肺泡炎、肺纤维化程度较PQ组减轻.③电镜下观察:PQ组14d时肺组织线粒体相对少,多数发生变性、肿胀和破坏;可见基膜卷折,肺泡塌陷,间质内胶原纤维增多,纤维化明显,且均较血必净组严重.④HYP含量(μg/g):PQ组、血必净组3d时肺组织HYP含量即明显高于对照组(743.3±50.2、718.1±34.0比665.8±6.6,均P＜0.05),随后逐渐升高;但血必净组7d、14d时HYP含量明显低于PQ组(790.5±23.8比876.7±42.0、812.9±72.3比931.3±33.0,均P＜0.05).⑤Mfn2表达:对照组Mfn2表达量相对较低;PQ组Mfn2表达量随时间延长呈应激性逐渐升高,但升高幅度较小;血必净组1d时Mfn2表达(A值)即明显高于PQ组(0.731±0.035比0.618±0.029,P＜0.05),并持续高表达,7d时达峰值(0.732±0.037比0.669±0.034,P＜0.05),而14 d时明显低于PQ组(0.708±0.034比0.765±0.041,P＜0.05).结论 血必净可减轻PQ中毒引起的肺部炎症反应及肺纤维化程度,其作用机制可能为血必净调节并增加了肺组织中Mfn2的表达.
-
香烟烟雾提取物刺激下人支气管上皮细胞内质网应激对线粒体融合功能的影响
目的 探讨在香烟烟雾提取物(cigarette smoking extract,CSE)作用下人支气管上皮细胞(NHBE)中内质网应激对线粒体融合功能的影响.方法 体外培养NHBE,用CCK8法检测CSE不同浓度及不同时间干预对细胞存活率的影响,确定CSE干预的佳浓度及时间.实验分为4组:对照组,内质网应激抑制剂(4-PBA)组,CSE干预组,4-PBA+ CSE组,并分别给予相应浓度CSE及4-PBA干预.qPCR及Western blot法检测内质网应激特异性蛋白CHOP及线粒体融合蛋白2(MFN2)的表达.结果 细胞的生存率随CSE干预浓度及时间的增加而下降,CSE佳干预浓度为5％,时间为12 h.与正常对照组比较,CSE干预组CHOP表达增加,MFN2表达下降,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为4.17,0.67;蛋白水平上均？差分别为3.38,1.26;P值均＜0.05];4-PBA+ CSE组与CSE干预组比较,CHOP表达下降,MFN2表达增加,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为2.47,0.41;蛋白水平上均值差分别为1.90,0.85,P值均＜0.05].结论 CSE作用下NHBE发生内质网应激,内质网应激通过减少MFN2影响线粒体融合.
-
褪黑素及其受体激动剂对Mfn2介导的T2DM大鼠肝糖代谢基因的调节作用
目的 研究褪黑素及其受体激动剂Neu-p11对线粒体融合蛋白2(Mfn2)介导2型糖尿病(T2DM)大鼠肝糖代谢关键基因的调节作用.方法 采用长期高脂肪饲养加小剂量链脲佐菌素诱导雌性大鼠T2DM动物模型,分为模型组、褪黑素组和Neu-p11低、高剂量组,同时增加正常大鼠为正常对照组,灌胃给药4周.测定大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),并进行腹腔葡萄糖耐量试验.采用RT-PCR方法测定肝脏Mfn2及葡萄糖激酶(GK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡糖糖-6-磷酸酶(G-6-P)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)的Mrna表达量.观察肝脏组织病理形态变化.结果 4组T2DM大鼠不同时间点FBG水平显著高于正常对照组,INS和HOMA-IR水平高于正常对照组,ISI水平低于正常对照组,PEPCK、G-6-P、GK、GSK-3β和Mfn2mRNA表达水平与正常对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).给药4周后,Neu-p11低剂量组FBG、INS和HOMA-IR水平低于模型组(P＜0.05).褪黑素组和Neu-p11低、高剂量组Mfn2 Mrna表达水平以及Neu-p11低剂量组GK Mrna表达水平均高于模型组(P ＜0.05,P＜0.01).褪黑素组和Neu-p11低、高剂量组G-6-P Mrna表达水平以及Neu-p11低、高剂量组PEPCK Mrna表达水平均低于模型组(P ＜0.05,P＜0.01).褪黑素组和Neu-p11低、高剂量组明显改善了T2DM大鼠肝脏的组织形态,Neu-p11低剂量组改善效果显著.结论 Neu-p11可改善由Mfn2介导的T2DM大鼠的胰岛素抵抗、糖代谢异常及肝糖代谢酶Mrna异常表达,达到保护肝脏,治疗糖尿病的作用.
-
七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤及对线粒体融合蛋白2表达和PI3K-Akt通路的影响
目的 探讨七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用以及其对线粒体融合蛋白2(Mfn-2)的表达和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)通路的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为5组:S组、MIRI组、SP组、SP+W组、W组,每组6只.麻醉固定大鼠暴露心脏,除外S组,其余4组均结扎左前降支30min,复灌120min,SP组在复灌前10min吸入2.3%七氟醚15 min,SP+W组在吸入前股静脉注射稀释的渥曼青霉素1 mL,W组则只在复灌前静注渥曼青霉素.结束后检测指标:ELISA法测cTn-I,蛋白免疫印迹法检测总Akt、P-Akt、Mfn-2的表达,电镜下观察心肌细胞形态学变化.结果 各组总Akt接近,差异无统计学意义(P>0.05).与S组相比较,其他各组cTn-I含量、P-Akt表达上调,差异有统计学意义;与SP组比较,MIRI组、SP+W组、W组cTn-I表达上调,P-Akt表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);MIRI组、SP+W组、W组组间cTn-I、P-Akt表达接近,差异无统计学意义.与S组相比较,其他各组Mfn-2表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);SP组与SP+W组Mfn-2表达差异无统计学意义(P>0.05),MIRI组与W组Mfn-2表达差异无统计学意义(P>0.05);与SP组、SP+W组比较,MIRI组与W组Mfn-2表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).电镜下显示S组无受损迹象,SP组明显较MIRI组、SP+W组、W组损伤减轻.结论 七氟醚后处理通过下调Mfn-2表达进而激活PI3K-Akt通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.
-
七氟醚后处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注时线粒体融合蛋白2表达及细胞凋亡的影响
目的：探讨七氟醚后处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注时线粒体融合蛋白2(Mfn2)表达及细胞凋亡的影响。方法健康成年雄性 SD大鼠,体重220 g~280 g,采用随机数字表法,将其分为假手术组(S组)、缺血/再灌注组(I/R组)、七氟醚后处理组(Sev组)。采用 Langendorff离体心脏灌流系统建立心肌缺血/再灌注损伤模型。KH液平衡灌注30 min 后,S 组继续灌注 KH液150 min；I/R组停灌30 min,复灌120 min；Sev组停灌30 min 后灌注含3%七氟醚饱和的 KH液5 min,再用 KH液冲洗10 min,继续灌注KH液,总灌注时间为120 min。于再灌注结束时取心肌组织,采用免疫组化法测定 Mfn2蛋白表达,TUNEL法测定心肌细胞凋亡,计算心肌细胞凋亡指数(AI)。电镜下观察心肌细胞及线粒体的超微结构。结果与S组比较,I/R 组和 Sev 组Mfn2蛋白表达下调,AI增加(P<0.05)；与 I/R组比较,Sev组 Mfn2蛋白表达上调,AI降低(P<0.05)。电镜结果显示 I/R组心肌细胞线粒体出现较重损伤,线粒体膜断裂,嵴不规则或消失。Sev 组心肌细胞线粒体损伤较轻,线粒体形态完整。结论七氟醚后处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与上调心肌组织 Mfn2表达,保护线粒体形态完整,减少心肌细胞凋亡有关。
-
线粒体融合蛋白2在骨骼肌线粒体稳态中的调节作用
线粒体稳态在维持细胞和机体正常功能状态中发挥重要作用,而线粒体功能障碍参与多种肌病(包括进行性肌营养不良、先天性肌病等)的发生机制,但具体机制仍未被完全阐明.线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2,Mfn2)主要位于线粒体外膜以及线粒体与内质网的连接处,能够介导线粒体外膜的融合.Mfn2在调节线粒体形态、结构和功能及调控细胞整体生命活动中均起到重要作用.研究发现,Mfn2参与细胞氧化应激过程、钙离子信号通路、能量代谢、线粒体自噬等多种调节线粒体结构和功能的生物学活动,帮助机体维持各种生理状态下线粒体的动态平衡,而其表达的异常也导致多种病理状态的改变.该文对Mfn2的基本结构特征及其在维持骨骼肌组织内线粒体稳态方面的作用进行综述.
-
线粒体融合蛋白2对小鼠受精卵发育影响的研究
目的:观察线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)对昆明小鼠受精卵发育的影响,探讨其在早期胚胎发育中的重要作用.方法:采用荧光定量PCR对昆明小鼠Mfn2基因反义序列进行沉默有效性的筛选,将所筛选的序列转染入小鼠2细胞受精卵中,观察并统计囊胚形成速率及质量.结果:成功筛选得到有效Mfn2基因反义序列,Mfn2基因沉默后囊胚形成速度减慢,且正常囊胚形成率明显减低.结论:Mfn2基因沉默组中的囊胚形成速率和数量明显降低,提示Mfr2参与小鼠受精卵的发育,推测Mfn2的正常表达对小鼠植入前胚胎发育具有重要作用.
-
KLF4通过上调Mfn2表达减轻棕榈酸致L6骨骼肌细胞的胰岛素抵抗
目的：探讨Krüppel样因子（KLF）4通过调控线粒体融合蛋白（Mfn）2的表达对大鼠 L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗的影响。方法采用棕榈酸诱导法建立大鼠L6骨骼肌细胞的胰岛素抵抗模型，随机分为对照组和转染组。对照组转染腺病毒空载体（ Ad），转染组转染 KLF4腺病毒表达载体（Ad－KLF4）和（或）靶向Mfn2的小干扰RNA（Ad－Mfn2－siRNA）。采用Real－time PCR和Western印迹检测两组KLF4、Mfn2、胰岛素受体（IR）和葡萄糖转运蛋白（GLUT）4的表达水平，采用葡萄糖氧化酶法检测两组培养液中的葡萄糖浓度。结果与对照组比较，棕榈酸诱导组对葡萄糖的摄取量显著降低，KLF4、Mfn2、IR、GLUT4表达显著下调。 KLF4过表达可显著提高细胞对胰岛素的敏感性，并上调Mfn2、IR、GLUT4表达。利用 siR－NA沉默Mfn2基因可明显阻断KLF4的作用。结论 KLF4可改善骨骼肌细胞的胰岛素抵抗，其机制可能与上调Mfn2表达有关。
关键词： Krüppel样因子4 线粒体融合蛋白2 骨骼肌细胞 胰岛素抵抗
