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Beclin1和Atg5在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨自噬相关基因Beclin1和Atg5在不同卵巢组织中的表达情况及其临床意义.方法 免疫组化和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤以及上皮性卵巢癌组织的Beclin1和Atg5的mRNA和蛋白的表达情况,分析3组间的差异.结果 正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤中Beclin1和Atg5的mRNA和蛋白表达明显高于上皮性卵巢癌组织(P＜0.05).结论 Beclin1和Atg5在上皮性卵巢癌组织中的表达下降,上皮性卵巢癌发生、发展可能与自噬相关基因Beclin1和Atg5白噬活性的抑制有关.
关键词： Beclin1 Atg5 卵巢肿瘤 免疫组化 反转录-聚合酶链反应 -
ATG5敲低后抑制人肺癌细胞H1299自噬并增强南蛇藤素诱导的细胞凋亡
目的构建自噬相关基因5(autophagy-related gene 5,ATG5)低表达肺癌细胞株,观察肺癌细胞自噬活性,检测南蛇藤素对肺癌细胞凋亡的影响.方法用ATG5 shRNA技术构建ATG5敲低的人肺癌H1299细胞株作为ATG5敲低组,未敲低ATG5的H1299细胞作为对照组;荧光定量PCR和Western blot检测肺癌细胞中ATG5的表达和自噬标志物微管相关轻链蛋白3(microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3,LC3)及死骨片蛋白1的(sequestosome 1,P62)表达,并转染红色荧光标记的LC3质粒观察LC3斑点聚集情况;经南蛇藤素刺激后,以流式细胞术检测细胞凋亡,后使用Western blot检测cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax等蛋白的表达. 结果慢病毒感染组ATG5较对照组mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);ATG5敲低后LC3-Ⅱ水平下降,P62水平上升,并且转染后RFP-LC3斑点聚集减少(P<0.05).相比对照组,南蛇藤素明显促进ATG5敲低细胞凋亡(P<0.01);ATG5敲低组中促凋亡分子Bax、cleaved caspase-3表达比对照组明显增加(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.05). 结论ATG5敲低抑制肺癌细胞自噬后,南蛇藤素能够明显增强人肺癌细胞的凋亡,提示抑制肺癌细胞自噬可能为针对性处理肺癌细胞耐药提供新的思路.
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自噬相关基因5下调抑制血管紧张素Ⅱ介导的巨噬细胞凋亡
目的 探讨自噬相关基因5(autophagy-related gene5,Atg5)在血管紧张素Ⅱ(angiotension Ⅱ,AngⅡ)诱导高血压心脏损伤中对巨噬细胞凋亡的影响.方法 40只雄性C57BL/6小鼠及10只Atg5+/-分为对照组,AngⅡ灌泵1d组,Ang Ⅱ灌泵3d组,AngⅡ灌泵7d组和Atg5+/-灌泵组,每组10只.给予乙酸溶液(对照组)及AngⅡ(1500ng/kg*min)微量泵灌注.TUNEL染色观察心脏中细胞凋亡,免疫荧光共染明确凋亡细胞类型;qPCR检测Atg5+/小鼠心脏中Atg5表达;TUNEL染色观察心脏中细胞凋亡,QuantiGenePlex (QGP)检测凋亡因子表达;体外AngⅡ刺激WT和Atg5+/-骨髓巨噬细胞,免疫荧光共染,检测巨噬细胞凋亡.结果 WT小鼠心脏于AngⅡ灌注1-7d后,TUNEL染色阳性细胞数显著增加,荧光共染显示凋亡细胞为巨噬细胞;Atg5+/-小鼠心脏中Atg5表达量较WT小鼠心脏降低53％;AngⅡ灌注7d后,与WT鼠相比,Atg5+/-小鼠心脏TUNEL染色阳性细胞数降低,促凋亡因子Caspase3、Caspase8、Caspase12表达降低.体外AngⅡ刺激下,Atg5+/-骨髓巨噬细胞较WT骨髓巨噬细胞凋亡减少.结论在AngⅡ致高血压心脏损伤中,Atg5下调可导致心脏中巨噬细胞凋亡下降.
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ATG5和ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓中的表达
目的 检测ATG5、ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓组织中的表达,探讨细胞自噬在口腔扁平苔藓恶变中的作用.方法 采用免疫组织化学方法,检测ATG5、ATG7在正常口腔黏膜、糜烂型口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中的表达.结果 ATG5、ATG7在三种不同组织中均呈阳性表达,在糜烂型口腔扁平苔藓组织中表达量升高,在口腔鳞状细胞癌组织中表达下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 糜烂型口腔扁平苔藓组织中存在细胞自噬的异常.
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自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性
目的 研究自噬与人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性之间的关系.方法 采用慢病毒介导的RNA干扰技术建立稳定沉默自噬相关基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2细胞系,实验分为未转染的CNE-2细胞组(对照组)、转染NC-shRNA的CNE-2细胞组(NC组)及转染ATG5-shRNA的CNE-2细胞组(ATG5组),应用CCK-8法、流式细胞术及克隆形成实验检测细胞增殖、凋亡及放射敏感性的变化.结果 CCK-8实验结果显示,与对照组和NC组相比,各剂量点ATG5组的细胞存活率均显著降低(F =3.755、46.086、8.609、44.160,P＜0.05),绘制细胞生存曲线可见下调ATG5的表达后可以增加CNE-2细胞的放射敏感性;流式细胞术结果显示,经6 GyX射线照射后,ATG5组细胞的凋亡率较NC组及对照组明显升高(F =394.876,P＜0.05);克隆形成实验结果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性.结论 降低鼻咽癌CNE-2细胞的自噬活性可以增强其放射敏感性.
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自噬相关蛋白Atg5和LC3在婴幼儿血管瘤中的表达
目的研究自噬相关蛋白在婴幼儿血管瘤中的表达,初探自噬在婴幼儿血管瘤发生发展中的作用.方法根据患儿临床表现判断其瘤体处于增殖期还是消退期;将石蜡包埋的婴幼儿血管瘤(IH)标本经HE染色后,于光学显微镜下观察不同时期IH内血管内皮细胞的增生程度、形态;切片经TUNEL法染色后,根据标记凋亡细胞计数比较不同时期IH凋亡率差异;免疫组化染色观察不同时期IH中Atg5的表达水平差异;免疫荧光标记法分析不同时期IH中LC3-Ⅱ的表达水平变化.结果Tunel凋亡检测显示,消退期IH细胞凋亡率明显高于增殖期IH(P＜0.01);免疫组化结果显示,增殖期IH中Atg5的表达水平高于消退期IH(P＜0.01);免疫荧光显示增殖期IH中的LC3-Ⅱ阳性细胞多于消退期IH.结论消退期IH凋亡细胞比增殖期明显增多;增殖期自噬活性较强,消退期自噬下调;自噬的下调有可能促进增殖期IH向消退期转化.
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ATG5基因多态性与早产儿脑瘫等神经发育相关疾病的关联性研究
目的 本研究以病例及对照组作为研究对象,通过对我国汉族人群早产儿中ATG5基因的多态性进行分析,探讨ATG5基因多态性与早产儿脑瘫等神经发育相关疾病间的相关性.方法 对比分析2014年1月-2016年12月该院100例脑瘫早产儿(脑瘫组)以及100例非脑瘫早产儿(对照组)的一般信息.选取ATG5基因中rs573775、rs510432、rs6568431、rs2299863以及rs3804338这5个多态性位点,通过Massarray分型技术方法为脑瘫组以及对照组基因型进行分类.基因数据结果分析通过SHEsis在线软件来实现.结果 在脑瘫早产儿患者组以及非脑瘫早产儿对照组之间,ATG5基因rs6568431多态性位点的等位基因型频率以及基因型频率差异有统计学意义(P＜0.05);在脑瘫伴HIE早产儿患者组与脑瘫非HIE早产儿以及对照组之间,ATG5基因rs6568431多态性位点的等位基因型频率以及基因型频率差异有统计学意义(P＜0.05);在脑瘫伴窒息早产儿组以及脑瘫不伴窒息早产儿对照组之间,ATG5基因rs6568431多态性位点的等位基因型频率以及基因型频率均差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ATG5基因中rs6568431多态性位点与早产儿脑瘫、HIE及窒息具有显著相关性.
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线粒体融合蛋白2低表达诱导绒毛滋养层细胞自噬的发生
目的 观察线粒体融合蛋白2 (Mfn2) siRNA转染人绒毛滋养细胞后自噬的发生情况.方法 构建Mfn2 siRNA真核表达载体,电穿孔法将Mfn2 siRNA稳定转染人绒毛滋养层细胞并进行培养,获得Mfn2表达抑制的滋养层细胞.设立实验组(转染Mfn2 siRNA序列)、阴性转染组(转染Cy3 siRNA序列)、空白对照组(未转染序列).采用Western Blot检测3组细胞转染后Mfn2及自噬相关基因Beclin1和Atg5的表达水平;采用免疫荧光化学染色检测LC3Ⅱ在3组绒毛滋养层细胞中的表达率.结果 相对比阴性转染组和空白对照组,实验组Mfn2蛋白水平显著降低,Beclin1和Atg5蛋白表达水平增加;免疫荧光化学染色显示,LC3Ⅱ荧光光点表达率增加.结论 Mfn2低表达诱导Beclin1和Atg5的表达增加,进而诱导绒毛滋养层细胞自噬小体出现和自噬的发生,提示Mfn2可能通过调控绒毛滋养层细胞自噬参与胚胎发育.
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新风胶囊治疗大鼠骨关节炎
目的 主要观察新风胶囊(黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣)对骨关节炎大鼠外周血免疫球蛋白IgG1、IgG2α及细胞因子IL-4、TNF-α,软骨、胸腺、脾脏自噬基因(Atg5、Atg7、Atg12)的表达的影响.方法 大鼠随机设正常对照组和模型对照组(均予生理盐水)、氨基葡萄糖对照组,以及新风胶囊组,每组10只.除正常对照组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法制成骨关节炎大鼠模型,造模后第14天给药30 d.以光镜对大鼠软骨进行Man-kin标准评分;采用ELISA法检测血清细胞因子IgG1、IgG2α、IL-4,和TNF-α;采用RT-PCR对骨关节炎大鼠软骨、胸腺、脾脏中的自噬相关基因Atg5、Atg7和Atg12进行检测.结果 给药后,与正常组比较,模型组体质量明显下降,Mankin评分明显升高,血清IgG1、IgG2α、TNF-α升高,IL-4降低,在胸腺、脾脏、软骨等各组织中,Atg存在不同程度的降低(P＜0.05或P＜0.01);与氨基葡萄糖组比较,新风胶囊组体质量明显升高,Mankin评分明显降低,IL-4及Atg5、Atg7、Atg12升高(P＜0.01或P＜0.05).结论 新风胶囊可以抑制炎症反应,调节大鼠整体自噬水平,达到治疗骨关节炎.
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弥漫大B细胞淋巴瘤自噬相关基因表达的初步研究
目的:研究自噬相关基因在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达水平及其临床意义.方法:采用实时定量聚合酶链反应法,检测40例弥漫大B细胞淋巴瘤肿瘤组织和20例淋巴结反应性增生组织中自噬相关基因ATG3、ATG5和ATG7的表达水平,分析上述3个基因在弥漫大B细胞淋巴瘤组织及对照组织中的表达差异;同时,在有完整临床资料的30例患者中,结合临床信息,分析不同表达水平与淋巴瘤分期及患者预后等方面的相关性.结果:与反应性增生的淋巴结组织相比,弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的ATG5基因表达水平显著降低(ATG3 P=0.9046;ATG5P=0.0336;ATG7 P=0.4376).与ATG5基因高表达患者相比,ATG5基因低表达患者中国际预后指数评分为中-高危分期者较多见(P=0.046).结论:弥漫大B细胞淋巴瘤患者淋巴瘤肿瘤组织存在自噬减少的现象,这可能是影响疾病进展的重要因素及治疗的潜在靶点之一.
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自噬相关基因ATG5沉默增加鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射敏感性
目的 通过构建自噬相关基因ATG5沉默的人鼻咽癌低分化鳞癌细胞(CNE-2细胞)裸鼠移植瘤模型,研究自噬与鼻咽癌放射敏感性的关系.方法 选取24只裸鼠,随机分入对照组、NC组和ATG5组,每组8只.对照组裸鼠接种CNE-2细胞,NC组裸鼠接种转染阴性对照载体的CNE-2细胞,ATG5组裸鼠接种稳定沉默ATG5基因的CNE-2细胞.每组各取4只裸鼠给予10 Gy射线照射,观察各组裸鼠移植瘤的生长情况,并应用Western印迹法检测自噬相关蛋白ATG5和LC3Ⅱ的表达.结果 自噬相关基因ATG5沉默的人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型构建成功,成瘤率为100％.ATG5组的LC3Ⅱ、ATG5蛋白相对表达量显著低于对照组和NC组(P值均＜0.05),ATG5+ 10 Gy组也均显著低于对照+10 Gy组和NC+ 10 Gy组(P值均＜0.05).结论 自噬相关基因ATG5沉默可以增加鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性,推断自噬与鼻咽癌放射敏感性呈负相关.
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自噬相关基因ATG5在肿瘤发生发展及治疗中的作用
自噬是细胞质大分子或细胞器在溶酶体中降解以维持细胞平衡的过程,在肿瘤的生物学中起着重要作用.自噬相关基因5(autophagy-related gene 5,ATG5)是自噬体形成关键调控者之一,近年来,许多研究报道A TG5在多种肿瘤中的表达不尽相同,对肿瘤的影响也并不一致.文章就ATG5在肿瘤发生发展及治疗和预后中的作用作一综述.
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Atg5与P504S在82例前列腺癌中的表达研究
[目的]探讨Atg5与P504S在前列腺癌中的表达情况.[方法]收集前列腺癌(PCa)、良性前列腺增生症(BPH)及前列腺上皮内瘤(PIN)的组织标本共127例,其中PCa组织标本82例,BPH组织标本25例,PIN组织标本20例.采用免疫组化法检测Atg5与P504S在不同病变组织中的表达情况.[结果]Atg5与P504S在PCa组织中的阳性率均显著高于BPH及PIN组织,差异具有统计学意义(P＜0.05).P504S的阳性表达程度与病理分级、临床分期以及肿瘤转移有关,而与患者年龄无关.Atg5的表达与年龄、病理分级、临床分期以及肿瘤转移均无显著相关性(P＞0.05).Atg5与P504S在PCa组织中的表达呈正相关(P＜0.05).[结论] Atg5与P504S的异常表达与前列腺癌密切相关,且P504S与前列腺癌进展呈正相关,在前列腺癌诊断中具有较高的临床价值.
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龟鹿二仙胶含药血清干预大鼠T细胞化疗后自噬的初步研究
[目的]初步研究龟鹿二仙胶含药血清干预大鼠T细胞化疗后自噬的机制.[方法]将大鼠T细胞分为空白对照组、顺铂组、中药血清组、顺铂+中药血清组,干预12h、24h后使用RT-PCR、Western Blot技术检测各组细胞ATG5、ClassⅢ PI3K、ClassⅠ PI3K、mTOR mRNA及蛋白的表达情况.[结果]干预12h后,RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,顺铂组ATG5、ClassⅢPI3K、ClassⅠ PI3K、mTOR mRNA表达上升,差异有统计学意义(P＜0.01).中药血清组ATG5、ClassⅢ PI3K、mTOR mRNA表达下调,差异有统计学意义(P＜0.01).与顺铂组比较,顺铂+中药血清组ATG5、ClassⅢPI3K、Class Ⅰ PI3K、mTOR mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P＜0.01).Western Blot结果显示,顺铂组mTOR蛋白表达较空白对照组上升(P＜0.05),其余组别各蛋白变化不明显(P＞0.05).干预24h后,RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,顺铂组ATG5、ClassⅢ PI3K、ClassⅠ PI3K、mTORmRNA表达上升,差异有统计学意义(P＜0.01);中药血清组ATG5 mRNA表达下降,差异有统计学意义(P＜0.01),ClassⅢPI3K、mTOR mRNA表达上升,差异有统计学意义(P＜0.05);与顺铂组比较,顺铂+中药血清组ATG5、ClassⅢPI3K、ClassⅠ PI3K、mTOR mRNA表达下降,差异有统计学意义(P＜0.01).Western Blot结果显示,顺铂+中药血清组ATG5、ClassⅢPI3K蛋白表达较顺铂组下降(P＜0.05),ClassⅠ PI3K、mTOR蛋白变化不明显(P＞0.05).[结论]龟鹿二仙胶含药血清对大鼠T细胞化疗后自噬蛋白ATG5、ClassⅢPI3K、ClassⅠ PI3K、mTOR的表达具有一定的调节作用.
关键词： 龟鹿二仙胶 T细胞 Atg5 ClassⅢ PI3K ClassⅠ PI3K mTOR 自噬 化疗 -
自噬相关基因Atg5与PTEN在前列腺腺癌中表达的相关性
目的：探讨自噬相关基因5(autophagy gene 5, Atg5)与PTEN在前列腺腺癌( prostate cancer, PCa)中表达的关系,并分析二者表达的相关性。方法采用免疫组化SP法检测Atg5、PTEN在69例PCa及30例良性前列腺增生( be-nign prostatic hyperplasia, BPH)组织中的表达。结果(1) Atg5在BPH及PCa组织中的阳性率分别为6．67%(2/30)、88．41%(61/69),BPH组织中Atg5的阳性率明显低于PCa组织(P<0．01)。 Atg5的表达与PCa Gleason评分分级无显著相关性( P>0．05)。 PTEN在BPH及PCa组织中的阳性率分别为90．00%(27/30)、36．23%(25/69), BPH 组织中PTEN的阳性率明显高于PCa组织( P<0．01)。(2) Atg5与PTEN在PCa中的表达呈负相关(χ2=7．9376,P=0．0048<0．01,r=-0．3863)。结论 Atg5与PTEN的异常表达可能与PCa的发生密切相关,二者在肿瘤的恶性进程中扮演重要角色。
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miR-181a及其靶基因Atg5在胃癌中的表达及临床意义
目的 研究miR-181a及其靶基因Atg5在人胃癌细胞株和胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系.方法 体外培养人胃癌细胞株(MGC-803、SGC-7901、BGC-823)和正常胃黏膜细胞株(GSE-1),收集30例胃癌血清和手术切除的癌组织及癌旁正常组织,并以30名正常人血清标本为对照,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清、细胞株、组织中miR-181a及细胞株、组织中Atg5 mRNA的表达情况.结果 胃癌细胞株、组织、血液中miR-181a的表达较正常细胞、癌旁正常组织及正常人血清明显升高(P＜ 0.05);Atg5 mRNA相对表达量在胃癌细胞株和胃癌组织中均分别低于正常胃黏膜细胞株和癌旁正常组织(P＜0.05).在胃癌组织和癌旁正常组织中,miR-181a与Atg5 mRNA表达呈负相关.结论 miR-181a在胃癌细胞株、胃癌组织和血清中显著高表达,提示其有望成为潜在的胃癌标志物.Atg5在胃癌中低表达并与miR-181a表达呈负相关,提示其可能是miR-181a在胃癌中的潜在作用靶基因.
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自噬基因Atg3和Atg5在儿童急性白血病骨髓单个核细胞中的表达及临床意义
目的 通过检测儿童急性白血病(AL)骨髓单个核细胞(BMMNCs)中的自噬相关基因Atg3和Atg5的表达,探讨细胞自噬在儿童AL发病机制中的意义.方法 选取郑州大学第一附属医院儿科血液病区确诊AL患儿骨髓标本74例,分为初治组37例,缓解组28例,难治复发组9例;对照组选取非肿瘤性疾病患儿骨髓标本28例.淋巴细胞分离液分离出BMMNC,采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色后荧光显微镜、流式细胞仪检测细胞自噬,反转录(RT)-PCR检测自噬基因Atg3 mRNA和Atg5 mRNA的表达.结果 荧光显微镜下观察到初治组、难治复发组细胞自噬现象较多见,经流式细胞术检测,初治组、难治复发组的自噬率分别为(17.07±2.31)％、(15.37±1.59)％,明显高于对照组的(2.71±1.57)％,差异均有统计学意义(t=28.29、20.96,P均＜0.01);缓解组自噬率为(3.48±1.94)％,与对照组相比差异无统计学意义(t=1.634,P＞0.05);难治复发组高于缓解组(t =16.61,P＜0.05).Atg3 mRNA和Atg5 mRNA在初治组和难治复发组的表达均高于对照组,难治复发组亦均高于缓解组,差异均有统计学意义(F=67.592、106.160,P均＜0.008);缓解组与对照组间比较差异无统计学意义(P ＞0.008).结论 初治组和难治复发组BMMNC的自噬活性增强,自噬相关基因Atg3 mRNA、Atg5 mRNA的表达均上调,揭示Atg3、Atg5基因激活诱导的自噬活性增强可能与儿童AL的发生、发展和耐药机制有关.
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自噬相关基因5(Atg5)标签单核苷酸多态性与帕金森病的相关性研究
目的 探讨中国粤西地区汉族人群自噬相关基因5 (autophagy-related gene 5,Atg5)标签单核苷酸多态性(Tag SNP)rs17587319C/G多态性与帕金森病(PD)的关系.方法 采用病例-对照研究,应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测80例PD患者(病例组)和87例健康对照者(对照组)的Atg5基因Tag SNP rs17587319C/G多态.结果 病例组CC基因型为78.7%,对照组为58.6%,差异有统计学意义(P=0.005,OR=2.62,95%CI:1.32～5.19);C等位基因频率在病例组和对照组分别为89.4%和 74.7%,差异有统计学意义(P=0.001,OR=2.85,95%CI:1.55～5.23);对照组中发现8例Atg5基因Tag SNP rs17587319C/G的GG纯合子,而在病例组中未发现.结论 Atg5基因Tag SNP rs17587319C/G的C等位基因与CC基因型可能是PD的危险因素.
关键词： Atg5 标签单核苷酸多态性(Tag SNP) 帕金森病 -
rno-miR-30b-5p调控Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达在实验性自身免疫性葡萄膜炎中的作用
目的 探讨rno-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化.方法 双荧光素酶检测rno-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控作用.Lewis大鼠随机分为正常对照组和EAU组,每组各6只,EAU组诱导EAU模型,两组大鼠每天用Genesis-D眼底相机观察眼底情况.免疫后12 d,取眼球观察睫状体、视网膜的病理学表现;分离大鼠的脾脏和淋巴结,实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测rno-miR-30b-5p、Atg5、Atg12和Becn1 mRNA的表达情况;ELISA方法检测Atg5、Atg12和Becn1蛋白的表达水平.结果 双荧光素酶检测结果证实Atg5、Atg12和Becn1为rno-miR-30b-5p调控的靶基因.免疫后12d,EAU组大鼠眼底血管严重肿胀,病理学检测可见睫状体、视网膜内大量炎性细胞浸润.Q-PCR检测结果示,与正常对照组相比,免疫后12 d EAU组大鼠脾脏和淋巴结中rno-miR-30b-5p mRNA水平分别为0.46±0.01和0.29±0.17,均呈下调表达(均为P＜0.01);Atg5、Atg12和Becn1 mRNA水平均呈上调表达,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).ELISA检测结果示,EAU组大鼠脾脏和淋巴结中Atg5、Atg12和Becn1蛋白表达水平均明显高于正常对照组大鼠(均为P＜0.05).结论 rno-miR-30b-5p可调控Atg5、Atg12和Becn1的表达.在EAU大鼠脾脏和淋巴结中,rno-miR-30b-5p的下调表达使Atg5、Atg12和Becn1基因和蛋白的表达水平均明显升高,从而影响葡萄膜炎的发展进程.
关键词： rno-miR-30b-5p Atg5 Atg12 BECN1 葡萄膜炎 -
上皮性卵巢癌组织中 ATG5、Beclin1与P53的表达及相关性研究
目的：检测自噬相关基因 ATG5、Beclin1与凋亡相关基因 P53在上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织的表达情况，探讨其与卵巢癌发生、发展的相关性及意义。方法应用免疫组化 SP 法和 RT －PCR 技术检测25例正常卵巢、25例良性卵巢肿瘤及34例上皮性卵巢癌组织中 ATG5、Beclin1、P53蛋白及 mRNA 的表达，并结合临床病理因素进行分析。结果①ATG5、Beclin1的表达主要在细胞质内，P53主要表达在胞核内。ATG5、Beclin1在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织及卵巢癌组织中的表达阳性率两两比较，差异均有统计学意义（P ＜0．05）。P53在卵巢癌组织中的表达阳性率与良性卵巢组织、正常卵巢组织相比，差异有统计学意义（P ＜0．01），而良性卵巢组织与正常卵巢组织表达阳性率比较，差异无统计学意义（P ＞0．05）。不同临床分期、病理分期的卵巢癌组织中 ATG5、Beclin1及 P53的表达比较，差异均有统计学意义（P ＜0．05）。Spearman 相关性分析显示，上皮性卵巢癌组织中 ATG5与 Beclin1蛋白表达呈正相关， ATG5与 P53、Beclin1与 P53蛋白表达均呈负相关（P ＜0．05）。②经 RT －PCR 检测，上皮性卵巢癌组织中 ATG5、Beclin1的表达低于良性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织，良性卵巢组织低于正常卵巢组织，差异均具有统计学意义（P ＜0．05）。上皮性卵巢癌组织中 P53的表达高于良性卵巢组织及正常组织（P ＜0．05），但良性卵巢组织与正常卵巢组织相比，差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论上皮性卵巢癌的发病、进展可能与自噬相关基因 Beclin1和 ATG5自噬活性的抑制有关；自噬相关基因 ATG5、Beclin1与凋亡相关基因 P53在上皮性卵巢癌的发生发展中起拮抗作用，对其联合检测有利于了解和判断上皮性卵巢癌的进展程度、预后情况及指导治疗。
