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IgG亚型与部分血液系统疾病的相关性
IgG是主要的免疫球蛋白,在体内发挥重要的免疫学效应.人类IgG可分为4种,分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4.由于IgG亚型的结构不同,其功能各异.IgG各亚型的缺陷、增多或比例失调在自身免疫性疾病、感染性疾病、恶性肿瘤等疾病中是免疫反应的指征,且IgG1、IgG2、IgG3、IgG4在疾病发展过程中也发挥了不同的作用.IgG亚型的分析对于疾病的病因、发病机制及预后研究有益.本文就IgG各亚型在血栓性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、血友病、淋巴瘤、白血病中的特点作一综述.
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RSV CTL表位与G蛋白片段的融合表达对G蛋白片段诱导的免疫应答的调节作用
目的:观察呼吸道合胞病毒(RSV)的CTL表位F/M2与G蛋白抗原活性片段G1融合表达后,对G1诱导的免疫应答的调节作用.方法:将重组表达质粒pET-DsbA-G1和pET-DsbA-G1F/M2分别转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白DsbA-G1和DsbA-G1F/M2,亲和层析纯化.取上述蛋白,腹腔注射免疫BALB/c小鼠,定期采集血清和脾细胞,用MTT法测定CTL杀伤活性,ELISA测定IgG及其亚类IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验检测血清中和抗体.结果:经表达和纯化获得了纯度达90%以上的融合蛋白;DsbA-G1F/M2诱导了显著的RSV特异性CTL杀伤活性,而无CTL表位的DsbA-G1则不能诱导产生CTL反应;DsbA-G1F/M2和DsbA-G1均刺激产生了强烈的IgG抗体应答,但DsbA-G1所产生的IgG亚类仅为IgG1,而DsbA-G1F/M2同时诱导了高滴度的IgG1和IgG2a,显著下调了IgG1与IgG2a的比例;二者均诱导了高滴度的中和抗体,但与DsbA-G1相比,DsbA-G1F/M2所诱导的中和抗体滴度有所减弱.结论:CTL表位F/M2与G蛋白片段G1的融合表达产物DsbA-G1 F/M2,能够同时诱导细胞免疫和体液免疫应答,CTL的激活下调了IgG1与IgG2a的比例,使得免疫应答更平衡,有利于改善该候选疫苗的安全性.
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新风胶囊治疗大鼠骨关节炎
目的 主要观察新风胶囊(黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣)对骨关节炎大鼠外周血免疫球蛋白IgG1、IgG2α及细胞因子IL-4、TNF-α,软骨、胸腺、脾脏自噬基因(Atg5、Atg7、Atg12)的表达的影响.方法 大鼠随机设正常对照组和模型对照组(均予生理盐水)、氨基葡萄糖对照组,以及新风胶囊组,每组10只.除正常对照组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法制成骨关节炎大鼠模型,造模后第14天给药30 d.以光镜对大鼠软骨进行Man-kin标准评分;采用ELISA法检测血清细胞因子IgG1、IgG2α、IL-4,和TNF-α;采用RT-PCR对骨关节炎大鼠软骨、胸腺、脾脏中的自噬相关基因Atg5、Atg7和Atg12进行检测.结果 给药后,与正常组比较,模型组体质量明显下降,Mankin评分明显升高,血清IgG1、IgG2α、TNF-α升高,IL-4降低,在胸腺、脾脏、软骨等各组织中,Atg存在不同程度的降低(P＜0.05或P＜0.01);与氨基葡萄糖组比较,新风胶囊组体质量明显升高,Mankin评分明显降低,IL-4及Atg5、Atg7、Atg12升高(P＜0.01或P＜0.05).结论 新风胶囊可以抑制炎症反应,调节大鼠整体自噬水平,达到治疗骨关节炎.
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湖南地区成人血清IgG亚类水平调查及影响因素分析
目的 调查湖南地区成年人血清IgG亚类的浓度水平,探讨年龄、性别及生活方式等因素的影响.方法 用免疫散射比浊法测定170例体检者血清中IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和IgG浓度.结果 血清IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和IgG浓度分别为(7.53±0.14)g/L、3.99(3.13,5.02) g/L、0.49(0.30,0.70) g/L、0.53 (0.26,0.93) g/L、12.2(10.5,14.1) g/L;血清IgG1/IgG、IgG2/IgG、IgG3/IgG和IgG4/IgG分别为(61.3±0.69)％、33.38(27.8,38.8)％、3.97(2.5,5.3)％和4.44(2.1,7.3)％.女性血清IgG3浓度及IgG3/IgG比值高于男性(P =0.005,0.014);不同性别间IgG1、IgG2、IgG4及IgG1/IgG、IgG2/IgG、IgG4/IgG的差异无统计学意义.31 ～40岁组血清IgG3浓度显著高于41～50岁组(P=0.03),而年龄对血清IgG1、IgG2和IgG4浓度的影响无统计学意义.重度吸烟组血清IgG1的浓度比不吸烟组低,差异有统计学意义(P =0.023).重度吸烟组IgG4/IgG高于不吸烟组(P =0.018).中/重度饮酒组血IgG1、IgG3浓度和IgG3/IgG比值比不饮酒组低(P=0.05,0.004,0.015).代谢综合征低风险组血清IgG3和IgG3/IgG高于高风险组(P =0.034,0.038).结论 性别和年龄对于血清IgG3浓度的影响有显著意义.重度吸烟可能导致IgG1的浓度降低和IgG4/IgG比值的上升.血清IgG1、IgG3和IgG3/IgG的降低与饮酒存在一定的关系.
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伴血IgG1升高的间质性肾炎
中年男性患者,临床表现为肾脏、胰腺和血液系统损伤,肾脏表现为少量蛋白尿和肾功能减退,肾活检组织学为间质性肾炎,间质大量浆细胞和嗜酸性粒细胞浸润,实验室检查发现血IgG1升高,结合临床.考虑伴血IgG1升高的间质性肾炎.
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苗药防感香囊对小鼠呼吸道TLR2/4、SIgA、IgG1的影响
目的 探讨苗药防感香囊(苗药香囊)对小鼠呼吸道免疫功能影响的分子机制.方法 小鼠吸入香囊4周后,定量PCR和免疫印迹法检测小鼠肺组织TLR2、TLR4基因和蛋白表达,ELISA法测肺泡灌洗液SIgA和IgG1含量.结果 持续吸入香囊组小鼠肺泡灌洗液中SIgA、IgG1含量较高,肺组织TLR2/4基因及蛋白表达水平较空白对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05),且与玉屏风散阳性对照组相当(P＞0.05).结论 持续吸入香囊能上调小鼠呼吸道SIgA、IgG1、TLR2/4表达,增强呼吸道抵抗力.
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支气管哮喘患者血清IgG1表达及临床意义
目的:观察IgG1在不同严重程度支气管哮喘患者外周血清中的表达水平,并探讨其与B细胞分化水平及肺功能之间的相关性.方法:观察健康志愿者、哮喘患者及其治疗后外周血清中IgG1水平变化;比较不同严重程度哮喘患者血清中IgG1水平;统计学分析IgG1与B细胞分化及肺功能指标(FEV1/FVC、FEV1/Pre)之间的相关性.结果:哮喘患血清中IgG1水平显著高于正常对照组(P＜0.01),治疗后哮喘患者IgG1水平显著下降(P＜0.05);轻度、中度及重度哮喘患者IgG1水平有显著差异;IgG1水平与外周血淋巴细胞中B细胞分化水平存在正相关,与肺功能指标FEV1/FVC、FEV1/Pre均存在负相关.结论:IgG1在哮喘中分泌增加,治疗后下降,可能参与了哮喘B细胞的细胞免疫功能,并可能反映患者气流受限程度及疾病严重程度.
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不同品系小鼠感染华支睾吸虫后IgG及亚类的动态观察
目的 观察不同品系小鼠感染华支睾吸虫后,血清中特异性抗体IgG、IgG1/IgG2a的动态变化.方法 NaOH消化法粪检虫卵,ELISA法测定不同品系小鼠感染后4、8和12w血清中抗体IgG、IgG1/IgG2a的动态变化.结果 三个品系小鼠血清IgG均于感染后第4～8w升高,约在第10w达到高峰,此后开始下降并维持至观察结束的第12w;IgG1/IgG2a比值感染后逐渐增高,并持续至第12w.结论 华支睾吸虫感染的免疫应答发生了由Th1免疫应答向Th2免疫应答转变的趋势.
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HSPs对呼吸道合胞病毒重组蛋白抗原免疫应答的调节作用
目的 考察热休克蛋白HSP70对呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白抗原G1F/M2免疫应答的调节作用.方法 构建并表达了Javelin-G1 F/M2重组蛋白,在G1F/M2的N端引入Javelin序列,通过该序列可以实现重组蛋白与HSP70蛋白高亲和力结合.以HSP70:Javelin-G1F/M2复合物等免疫Balb/c小鼠,用乳酸脱氧酶释放法测定CTL活性,ELISA法测定IgG及其亚型IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验测定血清中和抗体.结果 经表达和纯化获得了纯度达90％以上的融合蛋白；皮下免疫HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可诱导高滴度的IgG抗体和强的CTL应答,其抗体滴度和CTL应答强度均优于Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫.HSP70:Javelin-G1F/M2复合物在诱导中和抗体方面与Javelin-G1 F/M2加铝佐剂腹腔免疫基本相当.HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可以诱导更强的IgG2a应答,IgG的亚型IgG 1/IgG2a的比值明显低于Javelin-G1 F/M2加铝佐剂腹腔免疫组和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫组.结论 HSP70可能通过增强CTL应答进一步纠正Th2型优势应答,使得Th1/Th2应答更加平衡.
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FITC标记的抗Brdu单克隆抗体的研制
利用溴化脱氧尿嘧啶(Brdu)作为胸苷类似物可掺入到新合成的DNA中的特点,通过检测Brdu标记的细胞便能定性、定量地反映细胞的增殖状态[1].我们已筛选出分泌特异性抗Brdu单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株[2].为制备荧光素标记的抗BrdumAb用于流式细胞术定量检测增殖细胞,参考有关文献,用亲和层析纯化小鼠IgG亚类的方法,从腹水中纯化了抗BrdumAb,并用FITC荧光素进行标记.经初步用于体外检测Brdu标记细胞的数量,取得较好的结果.
