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丹蒌片抗痰瘀互结型动脉粥样硬化大鼠炎症反应及机制
目的 观察丹蒌片对痰瘀互结型动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠炎症因子以及脂蛋白相关磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)和分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)表达的影响,分析其可能机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、丹蒌低剂量组(低剂量组)、丹蒌高剂量组(高剂量组),每组8只.正常组大鼠喂食基础饲料12周,余4组均采用高糖高脂饮食联合维生素D3腹腔注射复制大鼠痰瘀互结型AS模型.模型组、西药组、低剂量组、高剂量组分别给予生理盐水、阿托伐他汀钙混悬液[1.8 mg/(kg·d)]、丹蒌片低剂量[450 mg/(kg ·d)]、高剂量混悬液[900 mg/(kg·d)]灌胃干预8周.观察大鼠一般情况.灌胃结束后,处死大鼠取血清,检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)、LP-PLA2、sPLA2,HE染色观察大鼠胸主动脉病理学改变,Western blot和荧光定量PCR法分别检测大鼠胸主动脉内LP-PLA2、sPLA2蛋白及mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,胸主动脉可见典型的AS斑块,血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2、sPLA2水平升高(P＜0.05),胸主动脉LP-PLA2、sPLA2蛋白及mRNA表达升高(P＜0.05).干预8周后,3个给药组大鼠均变活跃,胸主动脉HE染色见斑块消退.与模型组比较,3个给药组TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2水平降低(P＜ 0.01,P＜0.05),西药组血清sPLA2水平降低,大鼠胸主动脉LP-PLA2、sPLA2蛋白及mRNA表达降低(P ＜0.01,P＜0.05);低剂量组胸主动脉LP-PLA2蛋白及mRNA表达降低(P＜0.01,P＜0.05);高剂量组胸主动脉LP-PLA2、sPLA2蛋白及mRNA表达降低(P＜0.01,P＜0.05).结论 丹蒌片可能通过抑制LP-PLA2的表达,减少ox-LDL生成,从而发挥其抗炎、抗AS的作用.
关键词： 丹蒌片 动脉粥样硬化 炎症反应 脂蛋白相关磷脂酶A2 分泌型磷脂酶A2 -
眼镜蛇伤患者血清分泌型磷脂酶A2变化及价值探讨
目的 探讨血清分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)与眼镜蛇伤患者病情严重程度的关系及意义.方法 选取2015年1月至2015年12月期间南华大学附属南华医院急诊科按纳入标准和排除标准收治的眼镜蛇咬伤患者52例.按就诊时病情程度分为:轻型组及重危型组.按患肢的肿胀程度分为:轻度肿胀组及中重度肿胀组.按就诊时间差异分为A、B两组:就诊时间<8 h组与就诊时间≥8 h组.健康成人志愿者20人为对照组.对不同分组进行血清sPLA2、C反应蛋白(CRP)、D二聚体(DD)、乳酸(LAC)及外周血白细胞计数(WBC)水平的测定和比较.计量资料采用成组t检验和秩和检验分析.结果 轻型组、重危型组血清sPLA2水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);轻型组及重危型组sPLA2水平比较,差异有统计学意义(P<0.01).轻度肿胀组及中重度肿胀组之间血清sPLA2水平进行比较,差异有统计学意义(P<0.05).眼镜蛇伤后患者就诊时间A组、B组血清sPLA2水平与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).患者sPLA2水平与LAC、DD、WBC水平正相关,其相关系数r分别为0.3142、0.2752、0.6534.结论 血清sPLA2水平越高,则提示患者中毒症状越重,血清sPLA2对眼镜蛇伤病情的评估有一定的临床价值.
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儿童腺病毒肺炎患者sPLA2、TNF-α、CCSP的变化及临床意义
目的 探讨儿童腺病毒肺炎患者分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、克拉拉细胞分泌蛋白(CCSP)的变化及临床意义.方法 根据住院患儿腺病毒肺炎的严重程度将研究对象分为两组,一组为40例6个月至2岁腺病毒-普通肺炎组;一组为45例年龄6个月至2岁腺病毒-重症肺炎组;此外设立40例在儿童保健门诊行健康体检的儿童作为健康对照组.采用ELISA方法分别检测腺病毒-普通肺炎组、腺病毒-重症肺炎组和健康对照组中患儿的血清sPLA2、TNF-α、CCSP水平,并进行比较.结果 ①腺病毒-普通肺炎组sPLA2水平为137.25 (135.00～1 47.80) IU/mL,腺病毒-重症肺炎组为138.00(135.00～1 41.00) IU/mL,分别与正常对照组97.30(96.20～98.30) IU/mL比较有显著差异(P＜0.05);TNF-α、CCSP水平也有显著差异(P＜0.05).②腺病毒-普通肺炎组与腺病毒-重症肺炎组比较,sPLA2、CCSP水平无明显差异(P＞0.05),而TNF-α有显著差异(P＜0.05).结论 sPLA2水平在儿童腺病毒肺炎的发病过程中起着重要作用,TNF-α、CCSP水平与sPLA2的表达密切相关.
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重症急性胰腺炎肠道屏障损伤时sPLA2的表达及清胰汤的影响
目的:探讨分泌型磷脂酶A2(secreted phospholipase A2,sPLA2)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肠道屏障损伤时的表达及作用,观察清胰汤对其表达及病情转归的影响.方法:40只SD大鼠随机分为:假手术组、SAP组、清胰汤组和地塞米松组,采用胆胰管逆行注射1.5％去氧胆酸钠制备SAP大鼠模型,造模后24 h取胰、肠组织及静脉血.观察胰和肠组织病理改变,ELISA法测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,化学法检测血清二胺氧化酶(diamineoxidase,DAO)含量,全自动生化分析仪检测血清淀粉酶(amylase,AMY)含量,RT-PCR法检测肠组织sPLA2 mRNA的表达,Western blot法检测肠组织sPLA2蛋白的表达.结果:与假手术组比较,SAP组血清淀粉酶、TNF-α和二胺氧化酶(7208.8 U/L±264.6 U/L vs 1358.8 U/L±458.2 U/L、180.53 ng/L±20.1ng/L vs 59.67 ng/L±14.3 ng/L、37.889 U/L±5.86U/L vs 10.374 U/L±2.44 U/L)含量明显升高、肠组织中sPLA2 mRNA和蛋白含量均明显增高,胰、肠组织病理损伤明显.与SAP组相比,清胰汤组、地塞米松组的血清淀粉酶、TNF-α和二胺氧化酶(AMY:4047.6 U/L±600.9 U/L,4914.4 U/L±200 U/L vs 7208.8U/L±264.6 U/L,均P＜0.05; DAO:22.430 U/L±2.13 U/L,24.272 U/L±3.36 U/L vs 37.889U/L±5.86 U/L,均P＜0.05; TNF-α:122.35 ng/L±15.2 ng/L,136.99 ng/L±23.4 ng/L vs 180.53ng/L±20.1 ng/L,均P＜0.05)含量显著降低、肠组织中sPLA2 mRNA和蛋白均不同程度降低,胰、肠病理损伤较轻.结论:SAP时过度表达的sPLA2在肠道屏障损伤中起重要作用;清胰汤能减轻胰和肠组织的病理损害,对抗sPLA2在肠组织中的过度表达.
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冠心病患者分泌型磷脂酶A2的变化及其与白细胞介素8、溶血磷脂酸的关系
目的 了解冠心病患者分泌型磷脂酶A2(sPLA2)的变化,并通过测定IL-8、LPA等相关细胞因子,对sPLA2的作用机制进行初步探讨.方法 冠状动脉造影确诊的262例患者,其中急性冠脉综合征(ACS)110例,稳定性冠心病(SCHD)63例,正常患者89例,分别测定sPLA2、白细胞介素8(IL-8)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和溶血磷脂酸(LPA)水平,并进行对比分析.结果 冠心病患者sPLA2[(68±17)U/ml]、IL-8[(182±80)pg/ml]以及LPA[(2.85±0.36)μmol/L]均明显高于对照组[sPLA2:(55±12)U/ml,IL-8:(119±33)pg/ml,LPA:(2.34±0.36)μmol/L,均P＜0.01],其中ACS组的sPLA2[(71±18)U/ml]、IL-8[(195±78)pg/ml]也明显高于SCHD组[sPLA2:(63±12)U/ml],IL-8:[(159±79)pg/ml,均P＜0.01];sPLA2与IL-8(r=0.203,P=0.007)、LPA(r=0.658,P＜0.01)、hs-CRP(r=0.231,P=0.005)均呈正相关;sPLA2≥63.75 U/ml时,患冠心病的相对危险度为6.248(P＜0.01).结论 冠心病患者sPLA2明显升高,它可能与IL-8共同参与冠心病的炎症发展过程,并与下游相关产物LPA进一步加速其进展.提示sPLA2升高是冠心病的独立危险因素之一.
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新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠组织分泌型磷脂酶A2含量变化及意义
目的 通过观察罹患坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)的新生SD大鼠肠组织中分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)含量变化,探讨分泌型磷脂酶A2在坏死性小肠结肠炎发病中的作用.方法 将20只新生SD大鼠随机分成NEC模型组(n=10)和对照组(n=10).对NEC模型组新生SD大鼠自出生48 h后给予鼠乳代用品人工喂养,并对其进行100%氮气缺氧90 s和4℃冷刺激10 min处理,每天2次,连续处理3 d,建立新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎模型.在后一次缺氧、冷刺激处理后24 h,将其空腹断头处死,同时处死对照组SD大鼠.对两组新生SD大鼠均留取回盲部近端肠管组织标本,分别进行肠组织损伤评分和肠组织分泌型磷脂酶A2含量检测.当标本组织学评分≥2分时,诊断为坏死性小肠结肠炎.采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肠组织中分泌型磷脂酶A2含量(单位为:pg/mg prot).应用Kruskal-Wallis H检验等方法对两组大鼠肠组织中分泌型磷脂酶A2含量进行统计学分析(α=0.05).结果 NEC模型组新生SD大鼠相继出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少,生长减慢等症状;对照组新生SD大鼠进食及排便正常,无腹泻及腹胀症状,活动度良好,皮下脂肪丰满.NEC模型组和对照组肠组织损伤病理学评分(±s)分别为:3.300±0.850和0.450±0.400;肠组织分泌型磷脂酶A2含量(pg/mg prot)分别为1.752±0.483和0.669 ±0.180.两组间肠组织损伤评分和肠组织中分泌型磷脂酶A2含量比较,差异均有显著意义(P＜0.05);肠组织分泌型磷脂酶A2含量与相应平均损伤程度,均呈显著正相关关系(rsPLA2=0.834,P=0.000).NEC模型组新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎发生率为100%(10/10),对照组无一例发生坏死性小肠结肠炎.结论 肠组织分泌型磷脂酶A2是导致坏死性小肠结肠炎发生的关键介质,持续过度表达分泌型磷脂酶A2介导,可致黏膜损伤和肠屏障功能障碍,从而引发坏死性小肠结肠炎.
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分泌型磷脂酶A2、溶血磷脂酸与多发性硬化相关性研究及临床意义
目的：观察多发性硬化（MS）患者血及脑脊液中分泌型磷脂酶A2（sPLA2）和溶血磷脂酸（LPA）水平的变化及相关性。方法选取21例急性期MS患者（急性期MS组），20例缓解期MS患者（缓解期MS组），21例非炎性、血管性神经系统疾病患者（对照组），测定三组血sPLA2、血浆LPA及脑脊液sPLA2、LPA水平，并进行比较。结果急性期MS组血及脑脊液sPLA2、LPA水平均显著高于缓解期MS组和对照组（P＜0.01）。急性期MS组经治疗后血及脑脊液sPLA2、LPA水平显著低于治疗前（P＜0.01）。急性期MS组治疗前后血sPLA2与LPA水平存在相关性（r＝0.962，P＝0.000；r＝0.848，P＝0.000）；急性期MS组治疗前后脑脊液sPLA2与LPA水平存在相关性（r＝0.968，P＝0.000；r＝0.850，P＝0.000）。结论血及脑脊液sPLA2、LPA水平可作为评估MS患者疾病活动性的炎性标志物。
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国产靶向洗脱支架火鹰植入对不稳定型心绞痛炎症因子的影响
目的 探究国产靶向洗脱支架火鹰植入对不稳定型心绞痛炎症因子的影响.方法 采集2014年5月至2016年5月在河北省胸科医院行冠状动脉介入(PCI)治疗的88例不稳定型心绞痛患者的一般资料,根据植入支架类型不同分为2组.研究组44例,植入国产靶向洗脱支架;对照组44例,植入Excel药物洗脱支架.比较两组患者术前、术后炎症因子[血清分泌型磷脂酶A2(sPLA2)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)]变化情况.结果 对照组和研究组的性别、年龄、BMI、药物使用情况以及高血压史、糖尿病史、吸烟史、血脂、支架植入情况等一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05);术后两组患者的hs-CRP水平[(12.05±0.63)mg/L、(12.10±0.60)mg/L]及sPLA2水平[(27.33±7.15)μg/L、(26.37±5.72)μg/L]与术前hs-CRP水平[(4.97±0.64)mg/L、(5.04±0.61)mg/L]及sPLA2水平[(15.41 ±5.56)μg/L、(14.98±4.706)μg/L]相比均有明显改善,但术前、术后组间hs-CRP、sPLA2比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 国产靶向洗脱支架火鹰和Excel药物洗脱支架植入均会导致不稳定型心绞痛患者血清hs-CRP、sPLA2水平在短时间内升高,两者对炎症因子水平的影响差异不明显.
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人免疫球蛋白联合更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎的临床研究
目的 探讨静注人免疫球蛋白(pH 4)联合注射用更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎的临床疗效.方法 选择2014年6月—2016年12月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院收治的腺病毒肺炎患儿90例,所有患儿按随机数字表法随机分为对照组和治疗组,每组各45例.对照组静脉滴注注射用更昔洛韦,5 mg/kg,滴注时间>1 h,2次/d.治疗组在对照组基础上静脉滴注静注人免疫球蛋白(pH 4),400 mg/kg,1次/d.两组患儿均连续治疗14 d.观察两组的临床疗效,比较两组的临床症状、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、克拉拉细胞分泌蛋白(CCSP)和白细胞介素-1(IL-1)水平情况.结果 治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为71.11%、95.56%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,治疗组退热时间、咳嗽停止时间、咽痛消失时间、肺部湿啰音消失时间和住院时间均明显短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组血清TNF-α、sPLA2、CCSP和IL-1水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 静注人免疫球蛋白(pH 4)联合注射用更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎具有较好的临床疗效,可改善临床症状,降低TNF-α、sPLA2、CCSP和IL-1水平,具有一定临床推广应用价值.
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不同潮气量机械通气对大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白及分泌型磷脂酶A2的影响
目的 通过观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(CC16)及分泌型磷脂酶A2(sPLA2)的表达,探讨CC16和sPLA2在呼吸机所致肺损伤(VILI)发生中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量及中性粒细胞计数,采用免疫组织化学染色法检测肺组织Clara细胞计数和CC16蛋白表达,采用逆转录聚合酶链反应法检测肺组织sPLA2 mRNA的表达.结果 大潮气量组大鼠BALF总蛋白含量、中性粒细胞的计数和肺组织sPLA2 mRNA表达水平均明显高于对照组和小潮气量组(P值均＜0.01),而肺组织Clara细胞计数和CC16蛋白表达水平则明显低于对照组和小潮气量组(P值均＜0.01)；小潮气量组各项指标与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大潮气量机械通气通过诱导肺组织sPLA2 mRNA高表达,使Clara细胞合成及分泌CC16减少,导致肺组织炎症反应扩大,可能是VILI发生的重要因素之一.
关键词： 机械通气 急性肺损伤 Clara细胞分泌蛋白 分泌型磷脂酶A2 -
灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤时分泌型磷脂酶A2的影响
目的 探讨灯盏花素在脑损伤时对脑细胞凋亡及分泌型磷脂酶A2(sPLA2)及其相关介质的影响.方法 将雄性Wistar大鼠18只分为模型组(IR组)、灯盏花素组及假手术组各6只.用线栓法制成大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型,用TUNEL法检测脑细胞凋亡,用免疫组织化学法检测sPLA2在脑细胞中的表达,用[3H]标记大肠杆菌膜为底物的液闪方法和ELISA法分别检测血清中sPLA2活性和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)水平.结果 缺血0.5h再灌注24h,IR组海马与皮质凋亡细胞数均多于假手术组和灯盏花素组(P＜0.01).缺血0.5h再灌注12h,IR组海马sPLA2阳性细胞数及皮质sPLA2细胞数多于假手术组和灯盏花素组,差异有统计学意义(P＜0.01).缺血0.5h再灌注12h,IR组TNF-α、sPLA2及PGE2水平均高于假手术组和灯盏花素组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 灯盏花素对MCA-IR脑损伤有良好的保护作用,其机理在于抑制sPLA2的激活、表达及其相关介质的水平.
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灯盏花素对大鼠肝纤维化分泌型磷脂酶A2和细胞因子的影响
目的 探讨灯盏花素通过抑制分泌性磷脂酶A2(sPLA2)及其相关细胞因子对肝纤维化的影响.方法 将健康雄性Wistar大鼠18只随机分为3组:灯盏花素组、CCl4模型组及对照组各6只.PBS灌胃作为对照组;5%CCl4橄榄油按5ml/kg灌胃,每3天1次共15次,作为CCl4模型组;每次CCl4灌胃同时腹腔注射灯盏花素5mg/kg,作为灯盏花素组.于预定时间处死大鼠,对大鼠肝脏分别进行HE染色、电镜观测、sPLA2免疫组化,并且检测大鼠血清sPLA2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、血清Ⅲ型前胶元(PCⅢ)和透明质酸(HA)水平.结果 灯盏花素组胶原纤维、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HA及PCⅢ水平高于CCl4模型组,CCl4模型组高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).灯盏花素组第2周、第4周、第6周时PGE2、TNF-α及sPLA2水平低于CCl4模型组,CCl4模型组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).灯盏花素组sPLA2阳性细胞数为(10.2±3.5)个/mm2少于CCl4模型组的(37.2±7.3)个/mm2,CCl4模型组多于对照组的(1.3±0.8)个/mm2,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 灯盏花素具有抗肝纤维化作用,其作用机制与抑制sPLA2、TNF-α、PGE2水平相关.
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未足月胎膜早破患者外周血中分泌型磷脂酶A2的表达与羊膜腔感染的相关性
目的：研究外周血中分泌型磷脂酶A2（sPLA2）在未足月胎膜早破及羊膜腔感染中的作用及其意义。方法采用实时荧光定量PCR技术检测30例未足月胎膜早破患者（实验组）分娩发动前后、30例未发生胎膜早破的未足月正常妊娠患者（正常对照组）及30例足月胎膜早破患者（足月对照组）分娩发动后外周血中sPLA2 mRNA的表达水平。未足月胎膜早破患者结束妊娠后取胎膜行病理学检查，以确定有无组织学绒毛膜羊膜炎。结果未分娩发动时sPLA2 mRNA的表达水平实验组为1.079±0.746，正常对照组为0.651±0.481，实验组与同孕周正常对照组相比sPLA2 mRNA的表达水平升高，差异有统计学意义（P=0.011）。分娩发动时外周血中sPLA2 mRNA的表达水平实验组为2.439±0.086，足月对照组为2.575±0.036，实验组与足月对照组相比sPLA2 mRNA的表达水平无统计学差异（P=0.787）。实验组中分娩发动时sPLA2的含量与是否患绒毛膜羊膜炎有关（P=0.008）。结论 sPLA2升高可能参与未足月胎膜早破的发病，并与羊膜腔的感染有关。
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新诊断2型糖尿病患者血浆脂蛋白相关性磷脂酶A2及分泌型磷脂酶A2水平与动脉粥样硬化的相关研究
___目的_观察新诊断2型糖尿病患者血浆脂蛋白相关性磷脂酶A2(LP-PLA2)及分泌型磷脂酶A2(sPLA2)水平,并探讨其临床意义。方法所有受试者均无糖尿病病史,在中山大学孙逸仙纪念医院接受口服葡萄糖耐量试验,分为新诊断2型糖尿病组及血糖正常对照组,分别进行人体测量及血糖、胰岛素、血脂谱、LP-PLA2及sPLA2水平检测。结果共纳入90例新诊断2型糖尿病患者及相匹配的58例血糖正常对照者,2型糖尿病组血浆 LP-PLA2水平及 sPLA2水平都显著高于对照组[102.98(76.34,134.31) ng/ml对50.89(23.71,90.40) ng/ml,219.33(130.03,337.330) ng/ml对78.55(75.15,87.02) ng/ml,均P<0.01],伴动脉粥样硬化病变者升高更显著[133.43(111.54,145.17)ng/ml对99.11(63.02,130.85) ng/ml,235.73(180.48,416.46)ng/ml对182.97(9.08,280.79) ng/ml,均P<0.05]。相关及回归分析显示血浆LP-PLA2及sPLA2水平均与稳态模型评估的胰岛素抵抗指数呈独立正相关。结论新诊断2型糖尿病患者尤其是伴有动脉粥样硬化者血浆LP-PLA2及sPLA2水平显著升高,并与胰岛素抵抗密切相关。
关键词： _ 糖尿病 2型 新诊断 脂蛋白相关性磷脂酶A2 分泌型磷脂酶A2 -
分泌型磷脂酶A2在人皮肤黑素瘤细胞和组织中的表达和分布
目的:比较分泌型磷脂酶A2(sPLA2)在人恶性黑素瘤A375细胞、黑素瘤组织与健康人皮肤细胞、组织中的表达和分布.方法:分别采用ELISA法和Western Blot法检测细胞上清液和细胞内sPLA2的表达,免疫组化法考察人皮肤组织中sPLA2的表达和分布.结果:恶性黑素瘤A375细胞上清液的sPLA2浓度为(177.27±13.57) pg/mL,明显高于人表皮HaCaT细胞的(21.42±5.05) pg/mL(P＜0.05)和真皮成纤维细胞的(2.75±1.23) pg/mL(P＜0.05);其细胞内sPLA2/GAPDH的灰度比值为7.03±1.31,亦明显高于HaCaT细胞的1.45±0.37(P＜0.05)和成纤维细胞的0.31±0.11(P＜0.05);黑素瘤组织中呈现大量sPLA2阳性细胞和颗粒,而健康人表皮和真皮组织中则未见该阳性细胞和颗粒.结论:sPLA2在人恶性黑素瘤A375细胞和黑素瘤组织中较健康皮肤细胞和组织均有较高表达和分布,提示sPLA2有可能成为皮肤黑素瘤靶向给药的新靶点.
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血液透析治疗中透析器和透析液对急性期蛋白及细胞因子的影响
目的:评估血液透析(HD)过程细胞因子白细胞介素6(IL-6)和一些急性期蛋白[c反应蛋白(CRP)和分泌型磷脂酶A2(sPLA2)]的水平,分析HD诱导的急性期反应与透析膜类型或透析液的关系. 方法:10例患者行标准HD治疗,在透析开始、透析结束及透析后24h留取血液样本,分别检测IL-6,CRP和sPLA2水平,所有患者分别使用改良型纤维素膜透析器(FB)和聚砜膜透析器(PS),另外5例患者为增强HD治疗,即纤维素膜透析器加上一组透析液滤器(FBf). 结果:FB组和FBf组在透析结束时IL-6水平显著高于透析开始时(P＜0.05),在透析后24h IL-6降至基础水平,相反,PS组透析的患者IL-6水平无明显波动.在透析结束时FB组和FBf组IL-6水平显著高于PS组患者(P＜0.05);FB和FBf组透析后24h时平均CRP水平显著高于透析后水平(P＜0.05).两组患者在透析后24h sPLA,水平较透析结束时显著增高(P＜0.05).透析结束时IL-6水平与透析后24h CRP(r=0.67,P＜0.01)水平和sPLA2(r=0.52,P＜0.05)水平显著正相关.但是使用PS膜透析患者,CRP以及sPLA2水平均无显著性变化. 结论:与PS膜相比,FB和FBf膜透析治疗结束时血清IL-6水平显著升高,与开始透析后24h后血清CRP和sPLA2水平的升高显著正相关.因此,诱导HD急性期反应的原因中,透析膜的生物学特性较透析液细菌学标准(正常范围内)意义更大.
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江西常见蛇血清中抗蛇毒sPLA2蛋白的筛选与纯化
为研究特异性解蛇毒和抗炎症蛋白质药物,对6种江西常见蛇种血清sPLA2抑制蛋白进行筛选和分离纯化.利用实验室前期纯化的五步蛇毒sPLA2作为靶酶,以琼脂糖平板法和pH动态监测法联合筛选江西常见蛇种血清sPLA2抑制剂.基于初筛结果和资源量,确定以华游蛇血清为原料,分离纯化sPLA2抑制剂.分离过程包括Source 30Q、超滤、Uno Q柱精纯化等3个步骤,目的组分经SDS-PAGE分离,显示含有2个亚基,相对分子质量为25.4 ku和21.2 ku.结合文献初步推测该蛋白可能为Υ-PLI.
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冠心病患者sPLA2与hs-CRP联合测定及其临床意义
目的 探讨血清分泌型磷脂酶A2(sPLA2)联合高敏C反应蛋白(hs-CRP)测定对冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者远期心血管事件的临床预测意义.方法 经冠状动脉造影证实的172例冠心病患者.分别在入院时测定其sPLA2、hs-CRP,并按不同测定水平分组,通过2年随访.观察sPLA2、hs-CRP对远期心血管事件的预测意义.结果 2年后共发生心血管事件49例.高sPLA2组(≥66.48u/m1)的心血管事件发生率为38.46%.调整了高血压、糖尿病、吸烟、冠脉3支病变等传统危险因素后.Cox风险回归提示高sPLA2是预测远期事件的独立危险因素之一.相对危险度(RR)2.76;2年后高hs-CRP组(≥0.03g/L)的心血管事件发生率为39.24%,其RR为2.55;而两者同时升高的患者(sPLA2≥66.48u/ml合并hs-CRP≥0.03g/L)远期心血管事件发生率为52.08%,RR为3.34;在低LDL-C冠心病患者中,高sPLA2、高hs-CRP及高sPLA2+高hs-CRP组患者2年后发生心血管事件的RR分别为2.66、2.77、3.73.结论 sPLA2是冠心病发生远期心血管事件的独立危险因素之一,联合hs-CRP测定能提高对冠心痛,特别是LDL-C患者心血管事件的临床预测意义.
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分泌型磷脂酶A2与冠心病的关系
目的 探讨分泌型磷脂酶A2(sPLA2)与冠心病的关系.方法 选取心内科住院患者262例,正常者89例(对照组),稳定型心绞痛患者63例(SAP组),急性冠脉综合征患者110例(ACS组).经桡动脉途径行冠状动脉造影计算各组研究对象的冠状动脉病变积分(CAS),并采用ELISA法检测其血清sPLA2,比较分析组间差异以及sPLA2与CAS、冠心病相关因素等的关系.结果 ACS组sPLA2均显著高于SAP组及对照组(均P<0.01),而且SAP组sPLA2也显著高于对照组(P<0.01). sPLA2与HDL-C呈负相关(P<0.01),与CAS呈正相关(P<0.01),但sPLA2与年龄、BMI、LDL-C无明显相关性(P>0.05). Cox回归分析结果示,sPLA2是冠心病的独立危险因素(P<0.01),但高血压、糖尿病、吸烟等未显示出其独立危险因素的作用(P>0.05).结论 sPLA2可以作为冠状动脉粥样斑块不稳定的一个预测指标.其水平升高提示病情较重、预后不良.
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眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2的研究进展
眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2(sPLA2)作为眼镜蛇毒中的一个重要成分,有着广泛的生物学活性,近年来的研究热点正日益从眼镜蛇粗毒转向毒素中的某个单体,如sPLA2的研究.该文简要综述了眼镜蛇毒sPLA2的结构特征、分离纯化以及分子生物学特性,着重论述了sPLA2多样的药理毒理作用,并对其作用机制和发展前景进行了探讨.
