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从NF-κB和STAT3相互作用研究乐胃饮加味方对SGC-7901人胃癌细胞的影响
目的 研究乐胃饮加味方对SGC-7901人胃癌细胞株核因子-κB (nuclear factor kappa B,NF-κB)和信号传导与转录激活因子(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)相互作用的影响.方法 以SGC-7901人胃癌细胞株为研究对象,构建NF-κB(RelA/p65)-PECFP和STAT3-PEYFP载体,转染至SGC-7901人胃癌细胞,LPS刺激后,应用乐胃饮加味方干预.应用荧光共振能量转移技术和免疫共沉淀技术检测干预后NF-κB和STAT3蛋白在细胞中的交互作用.结果 经LPS刺激后,NF-κB和STAT3的相互作用增强,用乐胃饮加味方干预后,NF-κB和STAT3的相互作用明显减弱.结论 乐胃饮加味方可能通过阻断NF-κB和STAT3蛋白间的交互作用,可用于治疗胃癌前病变,预防胃癌生成.
关键词： 乐胃饮加味方 核因子-κB 信号传导与转录激活因子 相互作用 -
沙巴棕提取物对肺癌细胞增殖抑制及促凋亡的实验研究
目的 观察沙巴棕提取物与人肺癌细胞增殖和凋亡之间的关系,并探索其作用机制.方法 应用MTT比色法、流式细胞仪法观察人类肺癌细胞成活、凋亡情况.应用Western blot法观察PARP、CASP3、P27、CDKN1B、p-STAT3蛋白的表达情况.结果 沙巴棕提取物以剂量依赖性的方式抑制了肺癌细胞的增殖,并通过上调PARP、CASP3、P27等凋亡相关蛋白促进凋亡.沙巴棕提取物降低了p-STAT3水平；STAT3磷酸化的一种选择性抑制剂——AG490,同样通过降低p-STAT3的水平而抑制了肺癌细胞的生长.相比于以上二者任意一种的单独治疗,沙巴棕提取物和AG490的联合治疗显著降低了肿瘤细胞的增殖(P＜0.05).结论 沙巴棕提取物可通过促进凋亡信号和下调p-STAT3蛋白而抑制肺癌细胞增殖.这些观察可能为沙巴棕提取物诱导肿瘤生长抑制的机制研究提供有价值的参考.
关键词： 沙巴棕提取物 肺癌 生长抑制 信号传导与转录激活因子 凋亡 -
RNA干扰沉默STAT3基因对胃癌细胞侵袭力的影响
目的 观察瞬时转染信号传导与转录激活因子3(STAT3)小干扰RNA(siRNA)后对人胃癌细胞SGC7901侵袭力的影响,探讨干扰STAT3后降低胃癌细胞侵袭力的机制.方法 以人胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,培养瞬时转染特异性siRNA的SGC-7901细胞系,通过RT-PCR、免疫细胞化学、Transwell体外侵袭实验等检测该siRNA对SGC-7901细胞STAT3及MMP-9基因表达和对细胞侵袭转移能力的影响.结果 STAT3 siRNA转染SGC7901细胞48 h后,STAT3 mRNA水平下降了73.04%,MMP-9 mRNA水平下降了57.2%;Transwell体外侵袭实验显示,STAT3 siRNA组能显著抑制SGC-7901的侵袭力(P＜0.01).结论 应用siRNA技术能有效抑制SGC-7901STAT3基因的表达,进而可能通过抑制MMP-9基因的表达,降低细胞的侵袭力,为以STAT3为靶向的胃癌基因治疗提供了新的思路和方法.
关键词： 胃癌 RNA干扰 信号传导与转录激活因子 侵袭 -
肺炎支原体对支气管上皮细胞黏蛋白分泌的影响
目的 探讨肺炎支原体对支气管上皮细胞黏蛋白分泌的影响及机制.方法 将人支气管上皮细胞(HBEC)分为接种肺炎支原体的感染组和未接种肺炎支原体的对照组.采用免疫荧光标记法观察2组细胞中黏蛋白5AC(MUC5AC)和黏蛋白5B(MUC5B)的表达情况;荧光定量聚合酶链反应检测2组细胞中MUC5B、MUC5AC、叉头框蛋白A2(FOXA2)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)、信号传导与转录激活因子6(STAT6)、表皮生长因子受体(EGFR) mRNA表达水平;Western blot法检测感染组和对照组细胞中MUC5B、MUC5AC、FOXA2、磷酸化STAT3(p-STAT3)、磷酸化STAT6(p-STAT6)、磷酸化EGFR(p-EGFR)蛋白表达;Western blot法检测分别加入STAT3、STAT6、EG-FR的抑制剂ⅨCpd188、山柰酚、AG1478预处理以后各组细胞中MUC5B、MUC5AC、FOXA2蛋白表达.结果 感染组细胞中MUC5B和MUC5AC荧光信号较对照组明显增强.感染组细胞中MUC5B、MUC5AC mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组(P＜0.05),而FOXA2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组(P＜0.05).感染组细胞中STAT3、STAT6、EGFR mRNA和磷酸化蛋白p-STAT3、p-STAT6、p-EGFR相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05).感染组及IX Cpd188、山柰酚、AG1478预处理组细胞中FOXA2蛋白相对表达量均显著低于对照组(P＜0.05),而ⅨCpd188、山柰酚、AG1478预处理组细胞中FOXA2蛋白相对表达量均显著高于感染组(P＜0.05).感染组及ⅨCpd188、山柰酚、AG1478预处理组细胞中MUC5B蛋白相对表达量高于对照组(P＜0.05);与感染组比较,IX Cpd188、山柰酚、AG1478预处理细胞中MUC5B、MUC5AC蛋白相对表达量均显著降低(P＜0.05).结论 肺炎支原体感染可能通过STAT/EGFR-FOXA2信号通路促进支气管上皮细胞黏蛋白分泌,从而引发呼吸道相关疾病.
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三乙酰白藜芦醇对胰腺癌PANC-1细胞增殖及STAT3、NF-κB的影响
目的:研究三乙酰白藜芦醇(TRES)对胰腺癌Panc-1细胞增殖及STAT3、NF-κB的影响.方法:采用MTT法检测Panc-1细胞增殖活性,克隆形成、细胞划痕实验分别检测Panc-1细胞的分化和迁移侵袭能力,以及Western blot ting法检测STAT3和NF-κB的蛋白表达.结果:MTT实验结果表明TRES可以抑制Panc-1细胞的增殖.与对照组比较,克隆形成和细胞划痕实验显示TRES抑制了Panc-1细胞的分化和迁移侵袭能力(P＜0.05),Western blotting结果显示TRES下调了磷酸化的STAT3和NF-κB蛋白表达,表明TRES抑制了STAT3和NF-κB的活化.结论:TRES可以抑制Panc-1细胞增殖,可能具有抗肿瘤活性.
关键词： 白藜芦醇 三乙酰白藜芦醇 胰腺癌细胞 信号传导与转录激活因子 核转录因子-κB
