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β-咔啉类生物碱抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭的机制研究
该研究主要探索β-咔啉类生物碱抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭的机制与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因表达的相关性.采用CCK-8法测定不同浓度条件下β-咔啉类生物碱对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率;并通过Transwell小室测定β-咔啉类生物碱对SGC-7901细胞迁移与侵袭能力的影响;qRT-PCR及Western blot技术检测FAK基因mRNA及蛋白的表达差异.然后将si-FAK-1051重组质粒转染到SGC-7901细胞中,再次采用qRT-PCR及Western blot技术鉴定FAK基因沉默效果,后采用同样的方法检测FAK基因沉默对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响.随着β-咔啉类生物碱浓度增加,人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐升高,IC50=13.364 mg·L-1;阳性对照组(5-FU,5 mg·L-1)和β-咔啉类生物碱组中Transwell小室内SGC-7901细胞均可见显著减少(P＜0.01),且β-咔啉类生物碱组SGC-7901细胞数目较阳性对照组明显降低(P＜0.01);阳性对照组、β-咔啉类生物碱实验组FAK基因mRNA及蛋白表达水平较空白对照组显著降低(P＜0.05).si-FAK-1051转染入胃癌SGC-7901细胞后,FAK基因的mRNA及蛋白表达被明显下调(P＜0.05),细胞增殖和细胞迁移能力也显著降低(P＜0.05).β-咔啉类生物碱较5-FU具有更有效的抑制胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭能力,而该机制可能与β-咔啉类生物碱抑制FAK基因mRNA及蛋白表达水平有关.
关键词： β-咔啉类生物碱 胃癌SGC-7901细胞 黏着斑激酶 -
吴茱萸碱作用mTOR信号通路引起胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究
吴茱萸碱(evodiamine)是中药吴茱萸主要的具有抗肿瘤活性的生物碱之一,研究初步探讨吴茱萸碱作用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制,为其抗肿瘤机制的探索及胃癌临床治疗奠定基础.采用M TT法观察吴茱萸碱单独作用对SGC-7901细胞及对人外周血单个核细胞(PBMCs)的细胞毒效应.Real-time PCR,Western blot分别检验吴茱萸碱单独或联合胱天蛋白酶抑制剂(z-VAD-fmk)作用后,mTOR,p70S6K和4EBP1基因表达以及mTOR和p-mTOR蛋白表达.结果表明,吴茱萸碱抑制SGC-7901细胞增殖存在时间剂量依赖性,且对人PBMCs无细胞毒作用.吴茱萸碱及联合z-VAD-fmk分别作用后,细胞变圆,漂浮于培养基中;与对照组比较,2种处理方法均能抑制mTOR,p70S6K和4EBP1基因表达,存在显著性差异,且与吴茱萸碱单独作用比较,联合z-VAD-fmk作用对基因表达抑制率加强;Western blot结果显示吴茱萸碱可以抑制mTOR和p-mTOR蛋白的表达无论是否有z-VAD-fmk的参与,且z-VAD-fmk阻断胱天蛋白酶作用后,抑制率增强.综上说明吴茱萸碱可能通过mTOR信号通路促进胃癌SGC-7901细胞凋亡.
关键词： 吴茱萸碱 mTOR信号途径 胃癌SGC-7901细胞 细胞凋亡 -
淫羊藿苷对SGC-7901细胞内CaSR及Survivin、Runx3基因表达的影响
目的：观察淫羊藿苷（ICA）联合钙敏感受体（CaSR）活性改变对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响，及其细胞内CaSR及Survivin、Runx3基因表达的影响。方法 MTT法与Hoechst染色法测定细胞的增殖与凋亡情况。Western blot和RT-PCR技术检测CaSR、Survivin及Runx3蛋白和mRNA的表达情况。结果 ICA联合Calindol（CaSR激动剂）抑制SGC-7901细胞增殖，细胞生长抑制率与对照组相比,差异具有统计学意义（P＜0.05），呈时间依赖性；并诱导细胞凋亡。ICA联合Calindol促进SGC-7901细胞内CaSR和Runx3蛋白和mRNA表达上调，Survivin蛋白和mRNA表达下调。结论 ICA联合Calindol能够抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导凋亡，其作用与下调Survivin和上调Runx3的表达有关。
关键词： 淫羊藿苷 胃癌SGC-7901细胞 CaSR RUNX3 survivin -
姜黄素与顺铂联合应用对胃癌SGC-7901的体外抑制作用
目的 观察姜黄素、顺铂对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用,并探究其机制.方法 体外培养胃癌SGC-7901细胞,姜黄素、顺铂分别单独应用及联合应用后,采用MTr法检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测T-Akt、p-Akt、p53 mRNA表达水平的变化;Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平变化.结果 MTT结果显示,姜黄素、顺铂均可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性(P＜0.05),且联合组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单药组(P ＜0.01);RT-PCR检测显示,与单独给药组相比,联合用药在显著上调T-Akt和p53 mRNA表达的同时,降低p-Akt mRNA的表达(P＜0.01).Western blot结果显示,单独给药、联合用药均能降低SGC-7901细胞中Bcl-2蛋白的表达.结论 姜黄素与顺铂均能通过诱导细胞凋亡,抑制胃癌SGC-7901细胞生长,联合用药抑制SGC-7901细胞的增殖可能是通过抑制p-Akt基因、Bcl-2蛋白表达,同时上调T-Akt和p53基因的表达来实现的.
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大豆甙元联合TRAIL诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制研究
目的:研究大豆甙元(Daidzein,Da)联合TRAIL对SGC-7901细胞的影响.方法:采用不同浓度的Da和TRAIL单独及联合作用于SGC-7901细胞,通过MTT细胞和流式细胞术检测增殖、凋亡和周期的变化情况,透射电镜观察对细胞内部形态和微结构的影响,利用Western blot检测对相关凋亡基因Bcl-2 、survivin、caspase-3的表达变化.结果:Da联合TRAIL处理人胃癌SGC-7901细胞后,生长有明显的抑制作用,并且具有一定的剂量依赖性;细胞周期阻滞于S期;细胞内部出现典型凋亡形态学改变;Bcl-2和survivin蛋白表达下调,caspase-3蛋白被上调.结论:Da联合TRAIL通过细胞周期S期阻滞,及下调Bcl-2、survivin蛋白及增强caspase3蛋白表达而诱导胃癌细胞凋亡.
关键词： 大豆甙元(Da) TRAIL 胃癌SGC-7901细胞 细胞凋亡 -
白藜芦醇通过Pi3K/AKT通路抑制胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移
目的:验证白藜芦醇是否可以抑制胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移及其信号通路.方法:用不同浓度白藜芦醇干预SGC-7901细胞,再用LY-294002和IGF-1分别用来抑制和激活Pi3K/AKT通路.MTT法测细胞增殖,划痕试验和Transwell试验测细胞迁移,Western blot检测细胞迁移相关蛋白(MMP-2、MMP-9)、细胞迁移相关蛋白(P21、P27)、以及AKT、p-AKT的表达情况;结果:相比于对照组,白藜芦醇组胃癌细胞增殖和迁移减弱(P=0.001),p-AKT表达减少(P＜0.001);LY-294002可以抑制p-AKT的表达(P=0.004),和白藜芦醇一样可以抑制胃癌细胞的增殖和迁移;IGF-1可以显著增加p-AKT的表达(P＜0.001),可以逆转白藜芦醇对胃癌细胞增殖和迁移的抑制作用.结论:白藜芦醇通过抑制Pi3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖和迁移.
关键词： 胃癌SGC-7901细胞 白藜芦醇 PI3K/AKT 增殖 迁移 -
新型希夫碱钌配合物的抗肿瘤作用研究
目的：探讨新型希夫碱钌配合物对胃癌SGC－7901细胞生长增殖和细胞凋亡的影响。方法将胃癌SGC－7901细胞根据不同浓度的新型希夫碱钌配合物处理分为10、30、50μmol／L组，另设DMSO空白组。 MTT法检测新型希夫碱钌配合物对胃癌细胞增殖的影响，流式细胞术检测各组细胞凋亡及细胞周期变化。结果 MTT结果显示SGC－7901细胞生长抑制率随新型希夫碱钌配合物浓度的增加而增加，各剂量组在24、48、72 h 的抑制率均显著高于空白组（ P＜0．05）。流式细胞术结果显示浓度为10、30、50μmol／L的新型希夫碱钌配合物组的细胞凋亡率分别为（17．64±1．21）％、（26．47±0．61）％、（55．63±1．49）％，均显著高于空白组（P＜0．05）。随着新型希夫碱钌配合物浓度升高，G1期细胞所占的百分比逐渐增加。结论新型希夫碱钌配合物能够抑制胃癌SGC－7901细胞的增殖，促进细胞凋亡，并使细胞停滞在G1期。
关键词： 新型希夫碱钌配合物 胃癌SGC-7901细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 -
冬凌草甲素体外抑制人胃癌SGC-7901细胞炎性因子的研究
目的 通过观察冬凌草甲素对胃癌Sgc-7901细胞体外培养的增殖、凋亡的影响及作用前后细胞炎性因子的变化程度,探讨其抗肿瘤的分子机制.方法 将胃癌Sgc-7901细胞系进行无菌培养,通过CCK-8法筛选冬凌草甲素作用24h后抑制Sgc-7901细胞增殖的佳浓度;RT-PCR法检测冬凌草甲素对Sgc-7901细胞表达MMP-2和MMP-9水平的影响;Western Blot法检测冬凌草甲素作用对Sgc-7901细胞表达IL-1β和IL-33水平的情况;通过免疫细胞荧光法检测冬凌草甲素作用后Sgc-7901细胞因子IL-33表达的情况.结果 CCK-8法检测结果显示:冬凌草甲素能抑制Sgc-7901细胞增殖,并且这种影响呈剂量-效应关系,其24h半数生长抑制剂量(IC50)为66.88μm;RT-PCR实验结果显示,冬凌草甲素能下调Sgc-7901细胞MMP-2和MMP-9的表达;Western Blot和免疫细胞荧光法检测结果显示,冬凌草甲素能下调Sgc-7901细胞中IL-1β和IL-33的表达.结论 冬凌草甲素通过体外诱导细胞凋亡来抑制胃癌Sgc-7901细胞的增殖;同时,也可通过下调细胞中IL-1β、IL-33等炎性因子的分泌,从而达到抗肿瘤的作用,为临床治疗胃癌提供新的理论依据.
关键词： 冬凌草甲素 胃癌SGC-7901细胞 炎性因子 抗肿瘤 -
SDZ对人胃癌SGC-7901细胞的影响
[目的]观察SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的影响.[方法]培养人胃癌SGC-7901细胞.加入不同浓度的SDZ,作用24h、48h、72h,用MTT法计算细胞生长抑制率,描绘细胞生长曲线,荧光染色和电镜检测并观察细胞凋亡情况.[结果]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制率随作用浓度和作用时间的增加而增大.1000μg/ml、200μg/ml、401μg/ml、8μg/ml、1.6tμg/ml SDZ对人胃癌SGC-79叭细胞作用24h,细胞抑制率分别为38%、35%、33%、29%、20%.[结论]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞有生长抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,与细胞生长抑制率呈正相关,能引起细胞凋亡.
关键词： SDZ 中药 胃癌SGC-7901细胞 MTT法 细胞凋亡 -
硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系
目的 硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系.方法 Brdu ELISA法测细胞增殖活性;Boyden小室培养测细胞的迁移率;Western blot测细胞uPA、NF-κB的蛋白水平;细胞免疫化学测NF-κB细胞表达及细胞定位.结果 (1)与对照组(无血清培养基组)相比,10% FCS组细胞增殖活性与迁移率明显增高(P<0.05);与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移,硼替佐米浓度为(4 μg·L-1),人胃癌SGC-7901细胞增殖活性与迁移率均明显降低(P<0.05);与PDTC组(10 μmol·L-1)相比,两者无明显差别;(2)与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB蛋白表达,硼替佐米浓度为(4 μg·L-1)时uPA、NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05);与NF-κB特异性抑制剂PDTC组相比,两组uPA、NF-κB表达均无明显差别;硼替佐米浓度为(4 μg·L-1)能明显降低NF-κB核蛋白含量,与PDTC组相比,两者无显著差异(P>0.05);(4)细胞免疫化学结果示:硼替佐米(4 μg·L-1)抑制10%FCS诱导人胃癌SGC-7901细胞NF-κB核移位.结论① 硼替佐米抑制血清诱导胃癌SGC-7901细胞增殖迁移及uPA、NF-κB蛋白表达,② 硼替佐米降低胃癌SGC-7901细胞侵袭力可能与其抑制NF-κB活性,降低UPA水平有关.
关键词： 硼替佐米 胃癌SGC-7901细胞 Western blot uPA NF-κB 细胞迁移 细胞增殖 -
新藤黄酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制 和诱导凋亡作用的研究
目的 观察不同浓度新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法 倒置光学显微镜下观察不同浓度GNA处理SGC-7901细胞24 h后细胞形态的变化;采用MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0μmol/L)GNA处理24 h后人胃癌SGC-7901细胞活力的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白p53和Caspase-9的表达水平.结果 MTT检测结果表明,GNA对人胃癌SGC-7901细胞的生长和增殖有抑制作用,并随着GNA浓度的增加细胞活力明显下降.流式细胞仪检测结果提示,GNA诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,随着GNA浓度增加,凋亡率逐渐增加.Western blot表明p53和Caspase-9蛋白表达水平呈浓度依赖性升高.结论 GNA能诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡.
关键词： 新藤黄酸 胃癌SGC-7901细胞 细胞增殖 凋亡 -
RNAi沉默CD14基因对人胃癌细胞生物学行为的影响
目的 以胃癌SGC-7901细胞为研究对象,在细胞水平观察沉默CD14基因对胃癌细胞增殖、凋亡、周期及下游靶因子TNF-α、IL-8的影响,探讨CD14基因在胃癌中的发病地位.方法 重组CD14shRNA慢病毒为载体转染胃癌SGC-7901细胞.实验分3组,正常组、慢病毒阴性对照组(NCshRNA)、CD14沉默组(CD14shRNA).采用荧光显微镜观察转染效率,确定佳转染时间;Western blotting检测CD14蛋白的沉默效率;MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,Real-time PCR技术检测TNF-α、IL-8表达.结果 成功转染慢病毒CD14shRNA的SGC-7901人胃腺癌细胞可表达绿色荧光蛋白,测得在病毒MOI=10时,转染72 h后,慢病毒的转染效率佳.转染后24 h,正常组细胞增殖率为218.18％,阴性对照组为216.27％,CD14shRNA组为211.63％,各组间相比,差异无统计学意义(P＞0.05);转染后48 h、72 h,正常组细胞增殖率为427.49％、479.22％,阴性对照组为417.84％、473.37％,CD14shRNA组为345.54％、362.64％,经比较,CD14沉默后细胞增殖率下降(P＜0.05).CD14shRNA组细胞早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率均高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05).CD14shRNA组细胞G1期42.57％、S期38.65％、G2期13.22％,正常组细胞G1期35.91％、S期52.60％、G2期11.49％,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting结果显示,在转染胃癌细胞后,CD14shRNA慢病毒载体组细胞CD14蛋白表达相对于正常组及阴性对照组明显减少(P＜0.05);Real-time PCR结果显示,CD14shRNA转染胃癌细胞后,TNF-α、IL-8 mRNA表达较正常组、阴性对照组明显下降.结论 CD14基因沉默后,胃癌细胞增殖能力减弱,细胞周期阻滞在S期,细胞合成减少,凋亡率增加,TNF-α、IL-8表达下降,这说明CD14基因在胃癌细胞增殖、发展过程中占据重要地位.
关键词： CD14 RNA干扰 胃癌SGC-7901细胞 TNF-α IL-8 -
术属植物水提物对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用研究
目的 探讨术属植物水提物对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响.方法 通过体外无菌传代培养人胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法研究并比较了术属植物对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用,倒置显微镜下对其细胞形态变化进行观察;Hoechest33342染色法观察胃癌细胞SGC-7901细胞核形态的变化.结果 道地产区茅苍术的抑制作用强,其次为北苍术、南苍术、白术、罗田苍术、关苍术、朝鲜苍术,且抑制率具有时-效、量-效关系,鄂西苍术没有对其产生抑制作用;荧光显微镜下观察发现除鄂西苍术外,其他术属植物水提物均可诱导肿瘤细胞凋亡,致使胃癌细胞的细胞数目减少,细胞核发生变化,其中道地产区茅山苍术水提物处理的胃癌细胞SGC-7901的凋亡现象为显著.结论 除鄂西苍术外,其它术属植物水体物对胃癌细胞SGC-7901增殖均具有一定抑制作用,其中道地产区江苏茅山苍术抑制作用强.
关键词： 术属植物 水提物 胃癌SGC-7901细胞 MTT法 Hoechst 33342 -
稳定沉默CD14胃癌SGC-7901细胞系变化及清热化湿类方药干预研究
目的 构建稳定沉默CD14胃癌SGC-7901细胞系,从细胞增殖、周期、凋亡等变化,观察清热化湿类方药防治胃癌协同作用的研究.方法 将胃癌SGC-7901细胞分为正常组、对照组、治疗组,除正常组外,对照组CD14shRNA转染后,予正常大鼠血清处理24h,治疗组CD14shRNA转染后,予不同剂量清热化湿方含药血清处理24h,应用MTT/CCK-8法检测细胞增殖及抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V法检测细胞凋亡.结果 各组加药前,细胞增殖比较,无显著性差异,具有可比性;加药第1天,治疗组有抑制细胞增殖效应,与正常组比较,有统计学意义(P＜0.05);对照组无抑制细胞增殖效应,无统计学意义(P＞0.05).加药第2天、第3天,清热化湿类方药仍有抑制SGC-7901细胞增殖的效应,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).治疗组细胞G1期50.09％,S期38.17％,G2期11.73％;对照组细胞G1期30.14％,S期50.68％,G2期13.18％,经比较,治疗组细胞S期较对照组下降(P＜0.05).治疗组早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显增高,与对照组比较,有统计学意义(P＜0.05).结论 清热化湿类方药协同抑制胃癌细胞增殖,减少癌细胞合成,促进胃癌细胞凋亡的正效用.
关键词： CD14RNAi 胃癌SGC-7901细胞 清热化湿类方药 -
丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA损伤和增殖的影响
目的 探讨丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA损伤和增殖的影响.方法 选用不同浓度丝裂霉素处理体外培养的胃癌细胞SGC-7901,利用免疫荧光和Western blot技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白水平变化；使用MTT法检测SGC-7901细胞的增殖情况.结果 丝裂霉素的作用浓度和作用时间存在交互效应,除400 μg/ml外,平均γH2AX焦点数和焦点细胞率呈逐渐增加趋势(P＜0.05)；400μg/ml时,6h组平均γH2AX焦点数和焦点细胞率低于4h组,差异有统计学意义(P＜0.05).随丝裂霉素作用时间延长,γH2AX蛋白水平呈先升后降趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).MTT结果显示,丝裂霉素对SGC-7901细胞的增殖有明显抑制作用(P＜0.05).结论 γH2AX可敏感反应丝裂霉素对胃癌细胞DNA的损伤,丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖抑制明显.
关键词： 丝裂霉素 胃癌SGC-7901细胞 γH2AX DNA双链断裂 增殖 -
应用γH2AX评估丝裂霉素致胃癌细胞DNA损伤
目的 通过检测γH2AX,评估丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA的损伤；同时,观察丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖的影响.方法 体外培养胃癌细胞株SGC-7901细胞,选用丝裂霉素处理,利用免疫荧光和Western-Blotting技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白水平变化;采用MTT法检测SGC-7901细胞的增殖情况.结果 与对照组相比,实验组在每个时间点的γH2AX细胞百分数和平均焦点数都呈增加趋势,200μg/mL组和400μg/mL组的增加尤为明显,与对照组的差异有显著性(P＜0.01).用400μg/mL的丝裂霉素孵育SGC-7901细胞,γH2AX蛋白的水平变化呈先升后降趋势,差异有显著性(P＜0.05).MTT结果显示,丝裂霉素对SGC-7901细胞的增殖抑制明显(P＜0.05).结论 γH2AX可敏感反应丝裂霉素对胃癌细胞DNA的损伤,潜在的临床应用价值极高;丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖抑制明显.
关键词： 丝裂霉素 胃癌SGC-7901细胞 γH2AX DNA双链断裂 增殖抑制 -
阿魏酸乙酯对胃癌 SGC －7901细胞增殖及凋亡的影响
目的：探讨阿魏酸乙酯（EF）对胃癌 SGC －7901细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC －7901细胞，采用不同浓度的 EF 作用 SGC －7901细胞，设置5个复孔，作用24、36、48 h，MTT 法检测细胞的增殖情况；用0和40μg／mL EF 分别作用 SGC －7901细胞24 h，DAPI 染色法观察 SGC －7901细胞形态学变化；另外，采用不同浓度的 EF 作用 SGC －7901细胞24、36和48 h，Annexin V －FITC／PI 法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果40、80、120、160和200μg／mL 浓度的 EF 分别作用 SGC －7901细胞24、36及48 h，其对 SGC －7901细胞的 IC50分别为158.86、142.48和128.07μg／mL；40μg／mL 的 EF 作用 SGC －7901细胞12 h，经 DAPI 染色，SGC －7901细胞的细胞核固缩，出现凋亡小体；经 Annexin V －FITC／PI 法检测，EF 对 SGC －7901细胞的凋亡有明显的诱导作用，并且随着 EF 作用浓度和时间的增加，凋亡率增加。结论EF 能有效抑制 SGC －7901细胞增殖，并能诱导 SGC －7901细胞凋亡，两种作用均呈浓度和时间依赖性。
关键词： 阿魏酸乙酯 胃癌SGC-7901细胞 细胞增殖 细胞凋亡 -
蒿甲醚体外诱导胃癌细胞株SGC-7901凋亡的实验研究(摘要)
目的 探讨中药蒿甲醚体外诱导胃腺癌SGC-7901细胞株凋亡及其机制.方法 用改良四甲基偶氮哗盐(简称改良MTT)法测定不同浓度和时间蒿甲醚对SGC-7901细胞的生长抑制作用;从细胞水平直接观察蒿甲醚对体外培养的胃腺癌SGC-7901细胞诱导凋亡的形态学改变:在倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜和透射电镜下观察蒿甲醚诱导胃腺癌SGC-7901细胞发生凋亡的形态学改变;应用流式细胞术进行DNA倍体检测和TUNEL检测,分析蒿甲醚对SCC-7901细胞增殖和细胞周期的影响以及早期凋亡的情况.
关键词： 蒿甲醚 胃癌SGC-7901细胞 细胞凋亡 -
β-咔啉类生物碱对SGC-7901细胞迁移、细胞侵袭和相关通路基因的影响
目的 探索β-咔啉类生物碱对SGC-7901细胞迁移、细胞侵袭,和PI3 K/AKT及MAPK/ERK通路基因mRNA,以及蛋白水平的抑制作用.方法 通过CCK-8法测定不同浓度条件下β-咔啉类生物碱对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制率;通过Transwell小室测定β-咔啉类生物碱对SGC-7901细胞迁移、侵袭能力的影响;利用qRT-PCR、Westem blotting技术检测相关基因mRNA及蛋白的表达差异.结果 随着β-咔啉类生物碱浓度增加,人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐升高,IC50=13.364μg/mL;阳性对照组(5-FU,5μg/mL)、β-咔啉类生物碱组中Transwell小室内SGC-7901细胞均可见显著减少(P＜0.01),且β-咔啉类生物碱组SGC-7901细胞数目较阳性对照组明显降低(P＜0.01);阳性对照组、β-咔啉类生物碱实验组GRB2 、PI3Kp85a、FAK基因mRNA表达水平较空白对照组显著降低(P＜0.05),而STAT3、ERK1、ERK2基因mRNA表达水平无统计学差异(P＞ 0.05);β-咔啉类生物碱组PI3Kp85a、p-ERK1/2、AKT蛋白表达水平显著低于空白对照组1与阳性对照组(P＜0.05).结论 较5-FU,β-咔啉类生物碱具有更有效的抑制胃癌SGC-7901细胞迁移1与侵袭能力,而该机制可能与β-咔啉类生物碱抑制PI3Kp85a、p-ERK1/2、AKT蛋白表达水平有关.
