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施万细胞长期植入中枢神经系统后存活及迁移的实验研究
目的 观察施万细胞长期移植入中枢神经系统后是否存活.方法 取大鼠施万细胞体外培养,一部分经5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植至电针损伤的大鼠中脑网状结构,另一部分经Hoechst 33342标记后置于PLGA支架内再移植至大鼠全横断脊髓损伤处,分别于移植后的8个月和11个月处死动物,行BrdU免疫组织化学染色及荧光显微镜观察.结果 施万细胞移植入脑内8个月后仍可见较多BrdU阳性细胞,褐色椭圆形,并向大脑皮层迁移;移植于脊髓11个月后荧光显微镜下可见许多Hoechst33342阳性细胞,发蓝色荧光,形态不规则,在PLGA支架内及其头、尾端脊髓实质内都可见到.结论 施万细胞移植入中枢神经系统后可长期存活,并向远端迁移.
关键词： 施万细胞 中枢神经系统 5'-溴脱氧尿嘧啶 Hoechst 33342 大鼠 -
简便快速检测细胞培养中支原体污染
支原体是细胞培养中常见污染.支原体检测的方法很多,我们采用的Hoechst33342DNA荧光染色法为体外细胞培养的实验研究提供了一种快速、简便检测支原体的方法.
关键词： 支原体 检测 Hoechst 33342 -
边缘细胞的研究进展
边缘细胞(side population cells)是一类可以特异性地将Hoechst33342染料快速泵出细胞外的细胞,广泛分布于多种正常组织、肿瘤组织和细胞系中,被作为一种通用的干细胞表型标记.近年来对边缘细胞的研究和应用都取得了很大的进展,该文就边缘细胞的生物学特征、分子机制、分选方法和应用等方面的研究进展作如下综述.
关键词： 边缘细胞 Hoechst 33342 ATP结合盒转运体 多药耐药性 干细胞 -
术属植物水提物对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用研究
目的 探讨术属植物水提物对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响.方法 通过体外无菌传代培养人胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法研究并比较了术属植物对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用,倒置显微镜下对其细胞形态变化进行观察;Hoechest33342染色法观察胃癌细胞SGC-7901细胞核形态的变化.结果 道地产区茅苍术的抑制作用强,其次为北苍术、南苍术、白术、罗田苍术、关苍术、朝鲜苍术,且抑制率具有时-效、量-效关系,鄂西苍术没有对其产生抑制作用;荧光显微镜下观察发现除鄂西苍术外,其他术属植物水提物均可诱导肿瘤细胞凋亡,致使胃癌细胞的细胞数目减少,细胞核发生变化,其中道地产区茅山苍术水提物处理的胃癌细胞SGC-7901的凋亡现象为显著.结论 除鄂西苍术外,其它术属植物水体物对胃癌细胞SGC-7901增殖均具有一定抑制作用,其中道地产区江苏茅山苍术抑制作用强.
关键词： 术属植物 水提物 胃癌SGC-7901细胞 MTT法 Hoechst 33342 -
Hoechst 33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较
目的 探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响.方法 静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行核标记.荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平.结果 Hoechst 33342染料标记5 min后即可见细胞核被标记上,随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变;而与之明显不同的是,DAPI染料标记5 min时,只有几个细胞核被标记上,但随着时间的延长被标记的核数目越来越多.Hoechst 33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化,而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少,DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比.这些结果提示,DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存,干扰了实验结果.结论 检测细胞内活性氧时,应使用Hoechst 33342核标记染料而不能用DAPI.
关键词： 活性氧 血管平滑肌细胞 Hoechst 33342 DAPI -
侧群细胞及其在肿瘤干细胞研究中的进展
肿瘤干细胞研究已成为国内外研究热点.肿瘤干细胞学说认为肿瘤组织中存在一小部分具有自我更新及多向分化潜能的细胞,在肿瘤耐药和复发中起着关键的作用,这一部分细胞被称为肿瘤干细胞.目前肿瘤干细胞的分离、富集方法主要有:侧群细胞分选技术、细胞表面特异性分子标记筛选技术、肿瘤微球培养技术、细胞滞留标记技术、ALDEFLUOR分析技术等.侧群细胞是一小群能够将核酸染料Hoechst 33342排出,经过流式细胞检测呈Hoechst 33342低染的细胞.侧群细胞中富含肿瘤干细胞,其分选技术已作为简单有效的富集肿瘤干细胞的方法应用在肿瘤干细胞研究中.
关键词： 肿瘤干细胞 侧群细胞 Hoechst 33342 -
355nm和407nm激光激发Hoechst33342检测细胞凋亡的比较研究
目的 比较使用流式细胞仪355 nm和407 nm激光器激发Hochest33342检测细胞凋亡.方法 通过ATO药物诱导急性早幼粒白血病细胞(NB4)及血清饥饿法诱导人肺癌细胞(NC1-H292)细胞凋亡,取24、48 h时间点收集细胞,进行Hoechst33342-碘化丙啶(PI)双染,分别在配置有两种激光器的流式细胞仪上检测细胞凋亡.结果 细胞经处理后24 h,355 nm激光器检测NB4细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(28.20±4.80)％；NCl-H292细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(22.47±2.78)％.407 nm激光器检测NB4细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(25.10±6.19)％.NCl-H292细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:20.47±1.46％.处理后48 h,355 nm激光器检测NB4细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(33.60±3.75)％.NCl-H292细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(26.77±1.16)％.407 nm激光器检测NB4细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(29.47±2.33)％.NCl-H292细胞凋亡率Hoechst33342+/PI-:(31.47±3.05)％.两种细胞处理后比处理前凋亡率明显升高,但355 nm激光器与407 nm激光器检测的凋亡结果差异不明显(P＞0.05).结论 407 nm激光器激发Hoechst33342可检测细胞凋亡.
关键词： 355 nm激光 407 nm激光 流式细胞仪 凋亡 Hoechst 33342
