首页 > 文献资料
-
环氧合酶2同黑色素瘤抗原-1蛋白在胃癌患者表达的相关性和预后影响分析
目的 检测环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)和黑色素瘤抗原-1(Melanoma-associated antigen l,MAGE-1)蛋白在胃腺癌切除组织中的表达情况及相关性分析,以及对胃腺癌患者5年生存率的预后影响.方法 用免疫组织化学方法对67例胃腺癌切除组织中COX-2和MAGE-1蛋白表达进行统计,利用SPSS 19.0软件进行预后和相关性的x2分析.结果 COX-2表达阳性率为55.2％,MAGE-1表达阳性率为46.3％,分析结果显示COX-2蛋白高表达(阳性)是降低胃癌患者5年生存率的影响因素,MAGE-1高表达(阳性)不是降低胃癌患者5年生存率的影响因素,COX-2表达同MAGE-1表达没有相关性(P=0.156).结论 COX-2蛋白和MACE-1蛋白在胃腺癌组织中均有较高表达,但COX-2高表达明显影响胃腺癌患者的5年生存率,尚不能得出MAGE-1蛋白高表达影响胃腺癌患者的5年生存率的结论.
-
NS-398对肝癌细胞系HepG2环氧合酶-2表达的影响
目的 研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理.方法 分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的改变及凋亡百分比的变化,用Westen blotting检测COX-2蛋白的表达,用放射免疫测定法检测NS-398对HepG2细胞前列腺素E2(PGE2)释放水平.结果 NS-398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,细胞周期分析表明,随着浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,24 h时半数有效剂量(IC50)为300μmo/L.NS-398明显抑制COX-2的活性和表达.随着浓度的增加,其COX-2蛋白表达逐渐降低,100、200、300、400μmol/L NS-398组灰度值分别为1515.1±127.2、1023.5±108.4、691±94.3和493.6±86.6,与对照组1822±157.4相比差异有统计学意义(t值分别为3.736、1.623、1.810、2.587,P<0.01).NS-398可明显抑制HepG细胞PGE2释放水平,其吸光度值(A值)分别为0.70±0.02、0.48±0.02、0.29±0.01和0.18±0.01,与对照组比较0.03±0.01差异有统计学意义.结论 NS-398对肝癌细胞增殖有抑制作用并诱导其凋亡,可能与细胞G1期阻滞以及通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达有关.
-
健脾化瘀汤对内镜下大肠腺瘤切除术后复发的影响
目的：探讨健脾化瘀汤对内镜下大肠腺瘤切除术后复发的影响。方法将60例内镜下大肠腺瘤切除术后患者采用随机数字表法分为2组，每组30例。大肠腺瘤切除术后，观察组服用健脾化瘀汤，对照组不再进行其他治疗。2组均于大肠腺瘤切除术后1年复查肠镜，记录腺瘤数目、大小，以及大肠黏膜环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)、Ki67表达值的变化并进行评分，比较2组试验前后COX-2、Ki67表达阴转情况。结果观察后，观察组腺瘤数目[(0.20±0.48)分比(1.67±1.54)分，t＝4.980]、腺瘤大小[(0.23±0.57)分比(2.73±2.80)分，t＝4.788]评分，COX-2[(1.96±1.27)分比(3.64±1.95)分，t＝3.673]、Ki67[(2.04±1.46)分比(4.50±1.73)分，t＝5.558]表达值评分均低于对照组(P＜0.01)；观察组COX-2、Ki67表达阴转例数分别为21例、22例，高于对照组的12例(P＝0.004)、14例(P＜0.001)。结论健脾化瘀汤可降低大肠腺瘤切除术后的复发率，其作用机制可能与下调COX-2、Ki67表达有关。
-
枳术颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织COX-2和VEGF表达的影响
目的:观察枳术颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠的疗效,并探讨其作用机制.方法:选取已建立CAG模型的大鼠,分为模型组,胃复春(0.86 g·kg-1)组,枳术颗粒高、中、低剂量(20,10,5 g·kg-1)组.用蛋白免疫印迹法(Western blot),免疫组化及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测胃组织中环氧合酶-2(COX-2),血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜腺腔结构不完整,炎细胞浸润黏膜全层,体重增长率降低,COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,枳术颗粒高、中、低剂量组及胃复春组均显著增加CAG大鼠体重增长率(P＜0.01),下调大鼠胃组织COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达(P＜0.01);与胃复春组比较,枳术颗粒高、中、低剂量组均显著增加CAG大鼠体重增长率(P＜0.01),高剂量组可下调大鼠胃组织COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达,但无明显差异.结论:枳术颗粒可加快大鼠体重增长,使CAG大鼠胃黏膜组织得到改善和恢复.其作用机制可能为下调胃黏膜破坏因子COX-2,VEGF的表达,起到预防及治疗作用.
-
十一味参芪胶囊内服和热敏灸法对结直肠癌术后气血两虚证化疗患者的干预
目的:探讨十一味参芪胶囊内服和热敏灸法对结直肠癌术后(气血两虚证)化疗患者的疗效和对血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2),血管内皮生长因子(VEGF)和环氧合酶2(COX2)水平的影响.方法:将98例结直肠癌手术后患者,依据入院先后顺序随机按数字表法分为试验组和对照组各49例.对照组术后采用CapeOX化疗方案和西医常规护理.试验组在对照组治疗的基础上加用十一味参芪胶囊内服和热敏灸法,并给予饮食和情志护理指导.两组疗程均为12周.进行治疗前后气血两虚证评分;记录化疗所致不良反应;进行治疗前后生活质量评价;检测治疗前后T淋巴细胞亚群和NK细胞水平;检测治疗前后MMP-2,COX2和VEGF水平.结果:试验组实体瘤疗效总有效率为97.8％,高于对照组的82.93％ (P ＜0.05);试验组白细胞减少、血小板减少、胃肠道反应和肝肾功能损害等不良反应发生率均低于对照组(P＜0.05);试验组生活质量量表中恶心呕吐、疼痛和疲劳评分低于对照组(P＜0.01),躯体功能、角色功能、情绪功能、社会功能和认识功能评分均高于对照组(P＜0.01);试验组CD3+,CD4+和NK细胞水高于对照(P＜0.01),CD8+水平均低于对照组(P＜0.01);试验组血清MMP-2,VEGF和COX2水平低于对照组(P＜0.01);治疗后试验组气血两虚证评分低于对照组(P＜0.01).结论:十一味参芪胶囊内服和热敏灸辅助用于结肠癌术后化患者能起到改善症状,降低化疗副作用,提高生活质量和患者免疫功能,防治肿瘤转移,其近期疗效显著.
-
去甲斑蝥素对环氧合酶-2过表达人大肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用
目的:探讨去甲斑蝥素对环氧合酶-2(COX-2)过表达人肠癌移植瘤裸鼠模型的抑制作用.方法:建立COX-2过表达的人肠癌移植瘤裸鼠模型,观察去甲斑蝥素(NCTD)对瘤体生长、裸鼠生存期和COX-2表达的影响.结果:成功建立COX-2过表达的移植瘤裸鼠模型,且HCT-116/COX-2实验组中COX-2蛋白表达显著上调,与对照组比较具有统计学差异(P＜0.05)；HCT-116/COX-2组的瘤体生长速度明显高于HCT-116组及空质粒组, 差异有统计学意义(P＜0.05)；COX-2过表达组生存天数明显少于HCT-116组和空质粒组,差异有统计学差异(P＜0.05):NCTD对COX-2过表达裸鼠瘤体生长有明显的抑制作用,并且呈剂量依赖性；NCTD低剂量组、中剂量组、高剂量组裸鼠平均生存天数分别为(80.6±6.9)、(92.8±16.5)、(93.4±14.5)d,与HCT-116-COX-2(75.7±11.2)d比较均有统计学差异(P＜0.05)；NCTD对COX-2的表达有明显抑制作用,且呈剂量依赖性.结论:COX-2对人结肠癌裸鼠移植瘤的生长有明显的促进作用,且降低了裸鼠的生存期；NCTD能够抑制裸鼠移植瘤的生长,呈现剂量依赖性,并能延长荷瘤裸鼠的生存期,可能通过降低COX-2的表达抑制裸鼠结肠癌的生长.
-
桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎大鼠炎性因子及COX-2信号通路表达的影响
目的:探讨桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎(AA)大鼠炎性因子及环氧合酶-2(COX-2)通路表达的影响,并分析作用机制.方法:大鼠随机分为正常组、模型组、布洛芬组、桂芍知母汤组、桂芍知母加活血组(A)、桂芍知母加藤类组(B).弗氏完全佐剂造模7d后给药3周,观察大鼠关节炎指数(AI)、足肿胀度(ER),ELISA法检测足跖软组织干扰素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)水平,免疫组化观察细胞核因子κB(NF-κB)、COX-2和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果:桂芍知母汤及加味均能显著降低INF-γ,升高IL-4水平,显著减少关节滑膜NF-加p65、COX-2、VEGF的蛋白表达(P＜0.01).结论:桂芍知母汤及活血、藤类加味方对AA大鼠足跖软组织及踝关节的肿胀和炎性有较好的缓解作用,其作用机制与调整炎性因子平衡,抑制COX-2通路蛋白表达有关.
-
非酒精性脂肪肝模型大鼠环氧合酶2的表达及背俞穴穴位埋线的干预作用研究
目的:探讨背俞穴穴位埋线干预对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠环氧合酶2(COX-2)表达的影响.方法:雄性Wistar实验大鼠随机分为造模组和正常组,造模组饲以高脂饮食8周构建NAFLD大鼠模型,造模成功后将造模组随机分为NAFLD模型组和埋线组.后者选取大鼠双侧肝俞、膈俞、胆俞穴进行穴位埋线,16周后处死所有动物,观察肝组织病理学变化情况;检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量;免疫组化法检测肝组织中COX-2的表达.结果:与模型组比较,埋线组肝组织脂肪性变得到不同程度的减轻;肝COX-2表达显著下调;血清ALT及AST显著降低(P＜0.05).结论:背俞穴穴位埋线可抑制NAFLD肝COX-2表达的上调,从而减轻肝脏炎性损伤,该作用可能是其治疗NAFLD的作用机制之一.
-
消痰通腑方对结肠癌SW480细胞磷脂酶A2、环氧合酶2表达及细胞生物学行为的影响
目的 观察消痰通腑方对结肠癌SW480细胞增殖、迁移的影响,探讨其分子作用机制.方法 采用不同浓度消痰通腑方作用结肠癌SW480细胞,CCK8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移能力,RT-qPCR检测磷脂酶A2(PLA2)和环氧合酶2(COX-2) mRNA表达,Western blot检测PLA2和COX2蛋白表达,RNA干扰技术沉默SW480细胞株中PLA2基因表达.结果 消痰通腑方低、高剂量组较对照组结肠癌SW480细胞增殖能力明显减弱(P＜0.05),克隆形成率及迁移能力明显下降(P＜0.05,P＜ 0.01),PLA2、COX-2 mRNA和蛋白表达均明显下调(P＜0.05),并呈浓度依赖性;与质粒对照组和对照组比较,PLA2 shRNA干扰组细胞PLA2和COX2蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论 消痰通腑方可抑制结肠癌SW480细胞增殖和迁移,其机制可能与PLA2及COX-2的表达下调有关.
关键词： 消痰通腑方 磷脂酶A2 环氧合酶2 结肠癌SW480细胞 -
疣状胃炎中医证型与胃黏膜低氧诱导因子-1α及其下游因子表达关系的探讨
目的 探讨疣状胃炎(verrucous gastritis,VG)不同中医证型患者胃黏膜组织中低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor- 1α,HIF-1α)及其下游因子血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的变化及其临床意义.方法 94例VG患者根据中医辨证分为肝胃不和组(28例)、脾胃湿热组(17例)、瘀阻胃络组(20例)和脾胃虚寒组(29例)；另选慢性轻度非活动型浅表性胃炎伴Hp感染阴性者30例作为对照组.14C同位素标记尿素呼气试验检测患者Hp感染情况,免疫组化EnVision二步法检测胃黏膜组织HIF-1α、VEGF和COX-2表达情况.结果 VG患者Hp感染阳性率为37.23％ (35/94)；脾胃湿热组(76.47％)Hp感染阳性率明显高于肝胃不和组(32.14％)、脾胃虚寒组(31.03％)和瘀阻胃络组(20.00％)(P＜0.01).不同证型组VG患者胃黏膜HIF-1α和COX-2表达均较对照组明显升高(P＜0.01,P＜0.05),其中瘀阻胃络组HIF-1α表达高,脾胃湿热组COX-2表达高.脾胃湿热组和脾胃虚寒组VEGF表达较对照组和肝胃不和组均明显升高(P ＜0.01,P＜0.05).结论 不同中医证型VG患者病灶部位黏膜HIF-1α、VEGF和COX-2表达及Hp感染均有一定变化,HIF-1α在瘀阻胃络证中表达强,VEGF、COX-2的表达及Hp感染在脾胃湿热证高,具有证型特异性.
-
仁术健胃颗粒对胃癌前病变患者胃黏膜癌胚抗原、环氧合酶2的影响
目的 探讨仁术健脾颗粒治疗胃癌前病变(PLGC)的疗效和作用机理.方法 将58例慢性萎缩性胃炎伴肠化和(或)异型增生患者随机分为治疗组与对照组各29例,治疗组给予仁术健胃颗粒,对照组给予胃复春片治疗.观察两组患者治疗前后胃黏膜癌胚抗原(CEA)、环氧合酶2(COX-2)的阳性细胞数.结果 两组患者胃黏膜CEA、COX-2的阳性细胞积分均较治疗前明显降低(P＜0.05),但治疗后两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 仁术健胃颗粒能显著改善PLGC患者胃黏膜CEA、COX-2的水平.
-
大肠癌核因子-κB和环氧合酶2的表达及其与肿瘤血管形成的关系
目的 探讨核因子-κB(NF-κB)和环氧合酶2(Cox-2)在大肠癌中的表达及其与微血管密度(MVD)之间的关系. 方法 应用免疫组化SP法检测72例大肠癌组织NF-κB、Cox-2和MYD的阳性表达. 结果 大肠癌组织的NF-κB和Cox-2的阳性表达率明显高于正常结肠黏膜.大肠癌组织NF-κB的阳性表达和肿瘤淋巴结转移、肝转移以及Dukcs分期密切相关.Cox-2的阳性表达和大肠癌的局部浸润深度、淋巴结和肝转移以及Dukes分期均具有显著相关性.NF-κB阳性表达的大肠癌组织中Cox-2的阳性表达率明显高于NF-κB表达阴性者.NF-κB阳性表达组或Cox-2阳性表达组大肠癌MVD数量显著高于NF-κB阴性表达组或Cox-2阴性表达组. 结论 NF-κB和Cox-2参与了大肠癌的发生、浸润和转移.它们在大肠癌的血管形成中起重要作用.
-
二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞增殖的抑制
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)对人胰腺癌细胞株Patu8988和SW1990生长的作用.方法 采用MTF法检测DHA作用后Patu8988和SW1990细胞的增殖,流式细胞术检测DHA作用后Patu8988和SW1990细胞的凋亡、细胞周期和肿瘤相关蛋白环氧合酶2(COX-2)的表达量.结果 DHA作用人胰腺癌细胞株24、48、72 h后,细胞的增殖受到明显抑制(P＜0.01),同时DHA能诱导细胞凋亡,随着作用时间延长和作用剂量增加,效果越明显.50μg/ml DHA作用24 h后,胰腺癌细胞的COX-2表达量下降(P＜0.05).结论 DHA能有效地抑制胰腺癌细胞增殖,同时诱导细胞凋亡,可能与COX-2在胰腺癌细胞中的表达下凋有关.
-
美洛昔康对结肠癌细胞VEGF和angiopoietin-2表达的影响
目的:研究COX-2选择性抑制剂美洛昔康(meloxicam)对结肠癌细胞HT-29生长及血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-2(angiopooietin-2,Ang-2)表达的影响.方法:分别用100,200,400,800μmol/L美洛昔康对细胞进行干预后,采用CCK-8活细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,ELISA测定细胞培养上清液中VEGF,Ang-2的蛋白含量,实时荧光定量PCR检测细胞COX-2,VEGF,Ang-2 mRNA含量.结果:美洛昔康作用不同时间后,对HT-29细胞具有细胞毒作用,细胞增殖活性随浓度增加、时间延长逐渐降低(P值:0.000→0.029;0.000→0.043),呈现量-效、时-效关系.并且美洛昔康呈浓度依赖性改变细胞周期分布,G0/G1期细胞比例增加(P值:0.000→0.015).上清液中VEGF和Ang-2蛋白含量明显降低,存在时间和浓度依赖性(P值:0.000→0.018;0.000→0.028).细胞COX-2,VEGF和Ang-2 mRNA表达亦明显降低(P值:0.000→0.025),也存在浓度依赖性.结论:美洛昔康能够在蛋白、核酸水平上抑制结肠癌细胞分泌VEGF和Ang-2,从而抑制肿瘤血管生成.
-
pGL3-Basic-COX-2-promoter:报告基因重组质粒的构建及其功能鉴定
目的:构建COX-2基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒 pGL3-Basic-COX-2-promoter,并进行功能鉴定.方法:根据已知人的COX-2基因启动子序列设计两端引物,扩增人基因组DNA中的COX-2启动子.载体质粒pGL3-Basic和COX-2启动子分别用限制性内切酶HindⅢ和Bgl Ⅱ 双酶切,将COX-2基因启动子插入到pGL3-Basic报告载体中.构建的pGL3-Basie-COX-2-promoter重组质粒和内参质粒pRL-SV40瞬时共转染胃癌MKN45细胞,加入100倍细胞数量的Hpylori共培养不同时间后,检测双荧光素酶的活性.结果:成功构建COX-2基因启动子重组质粒pGL3-Basie-COX-2-promoter,质粒测序及酶切结果完全正确.瞬时转染实验显示,COX-2启动子在MKN45细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后40 h的双报告基因活性是转染后8 h的3.5倍(P＜0.01);加入Hpylori共培养后,同时间点的荧光素酶活性明显升高(P＜0.05或0.01),转染后40 h的活性是转染后8h的5倍(P＜0.01).结论:pGL3-Basic-COX-2-promoter在胃癌MKN45细胞中能被转录激活,加入Hpylon刺激后COX-2活性显著增强,pGL3-Basic-COX-2-promoter可以用来鉴定和检测细胞中,COX-2的水平.
-
丹参酮ⅡA调节COX-2对人结肠癌HCT-116细胞VEGF表达的影响
目的:研究中药丹参有效活性成分丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用及其调控COX-2对HCT-116细胞VEGF表达的影响.方法:利用MTT法检测不同浓度的TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用,将pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒和pRLTK内参质粒共转染HCT-116细胞,分为空白组、对照组和Tan Ⅱ A组.药物作用48 h后,双荧光素酶测定法检测COX-2启动子转录活性.将含COX-2 CDS序列的pIRESI-COX-2重组质粒转染HCT-116细胞,分为空白组、对照组和TanⅡA组,ELISA法检测细胞培养液中VEGF 的表达.结果:Tan ⅡA对人结肠癌HCT-116细胞有明显的增殖抑制作用,24、48、72 h的IC50值分别为40.3 μmol/L±5.22 μmol/L,12.9 μmol/L±3.24μmol/L,8.5 μmol/L±1.47μmol/L,24 h的大无毒剂量为10μmol/L.转染pGL3-BasicCOX-2-promoter重组质粒48 h后,COX-2启动子活性明显上调(对照组vs空白组,P<0.01),而不同浓度的TanⅡA可明显抑制COX-2启动子活性.转染pIRESI-COX-2重组质粒后,细胞培养液VEGF浓度升高(对照组vs空白组,P<0.05),而10μmol/L TanⅡA处理后,VEGF的表达显著下调(Tan ⅡA vs对照组,P<0.05).结论:Tan Ⅱ A能明显抑制人结直肠癌细胞增殖,并通过调控人结肠癌细胞COX-2表达抑制结直肠癌细胞VEGF的表达.
-
白藜芦醇下调小鼠非乙醇性脂肪性肝炎环氧合酶2的表达
目的:研究白藜芦醇对饮食诱导的非乙醇性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏COX-2表达的影响.方法: 小鼠30只随机分为正常对照组(NC组,n=10)、高脂喂养组(HF组,n=10)和高脂喂养白藜芦醇治疗组(HR组,n=10).NC组给予标准基础饲料,HF组和HR组给予高脂饲料喂养.HR组小鼠高脂喂养8 wk后,每日给予400 mg/kg白藜芦醇灌胃治疗.HR组和HF组均继续高脂饲料喂养16 wk.实验结束后处死小鼠并取肝脏组织,分别用RT-PCR法及免疫印迹法检测肝脏COX-2 mRNA和蛋白的表达.结果:HF组小鼠出现明显的脂肪性肝炎,HR组小鼠的脂肪性肝炎明显减轻.NC组小鼠肝组织无COX-2 mRNA和蛋白的表达,HF组小鼠肝组织有高水平的COX-2 mRNA和蛋白的表达,分别为1.48%±0.23%和27.9%±4.6%,HR组COX-2 mRNA和蛋白的表达水平较HF组明显降低,分别为0.76%±0.18%和11.2%±3.5%,两组间差异有统计学意义(P<0.01),但未降至正常.结论:COX-2在NASH中发挥着重要作用,白藜芦醇至少部分是通过下调肝脏COX-2的表达达到改善NASH的作用.
-
糖基化终末产物上调大鼠心脏微血管内皮细胞NF-κB和COX-2表达
目的 研究糖基化终末产物(AGEs)对大鼠心脏微血管内皮细胞因子κB(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达的影响,探讨AGEs与糖尿病血管病变间的关系. 方法 体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞至亚融和状态时,以不同浓度糖基化白蛋白BSA-AGEs与之作用不同时间后,检测内皮细胞NF-κB及COX-2蛋白的表达. 结果 25、50、100、200mg/L BSA-AGEs作用后,NF-κB和COX-2蛋白表达呈剂量依赖性增多,100mg/L AGEs作用6、12、24、48h,NF-κB和COX-2蛋白表达呈时间依赖性增多. 结论 BSA- AGEs可促进体外培养微血管内皮细胞NF-κB和COX-2的表达,其作用可能与NF-κB的活化有关.
-
慢性阻塞性肺疾病患者环氧合酶2和基质金属蛋白酶2的表达及其与气流阻塞的关系
目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰中环氧合酶2(COX-2)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达及其与气流阻塞的关系.方法 COPD组55例(COPD稳定期患者,其中0级12例、Ⅰ级10例、ⅡA级12例、ⅡB级11例和Ⅲ级10例)和正常对照组10名行痰诱导,对痰悬液进行细胞分类计数,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测诱导痰上清液中前列腺素E2(PGE2)和MMP-2浓度,Western blot法测定诱导痰细胞中COX-2蛋白表达.结果 (1)COPD组诱导痰中细胞总数、肺泡巨噬细胞(AM)数和中性粒细胞(Neu)数较正常对照组显著增高(P<0.05或P<0.01).AM、Neu与第一秒用力呼气容积占预计值%(FEV1占预计值%)、一秒率(FEV1/FVC)分别呈负相关(r=-0.280、P<0.05,r=-0.345、P<0.01;r=-0.677,r=-0.773,P均<0.01).(2)Western blot显示COPD组患者诱导痰细胞中COX-2蛋白表达(57±8)显著高于正常对照组(83±10,P<0.05).(3)COPD各组诱导痰PGE2浓度[分别为(111±17)、(117±23)、(118±29)、(153±24)、(194±28)ng/L]显著高于正常对照组[(81±18)ng/L,P均＜0.01],且与FEV1占预计值%、FEV1/FVC呈负相关(r=-0.748,r=-0.750,P均＜0.01),与MMP-2浓度呈正相关(r=0.775,P<0.01).COPD各组诱导痰MMP-2浓度[(4.0±0.9)、(4.5±1.5)、(7.7±3.1)、(11.9±3.5)、(18.5±5.0)μg/L]显著高于正常对照组[(0.7±0.4)μg/L,P均＜0.01],且与FEV1占预计值%、FEV1/FVC呈负相关(r=-0.801,r=-0.816,P均＜0.01).结论 AM、Neu可能参与COPD患者气流阻塞的形成.COX-2、MMP-2在COPD稳定期的气道重塑中可能具有重要作用,且COX-2及其代谢产物可能通过诱导MMP-2表达参与气道重塑.
-
过氧化氢上调白细胞介素1β诱导人肺上皮细胞表达环氧合酶2
目的探讨过氧化氢(H2O2)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导人肺上皮细胞(HPEC)环氧合酶2(COX-2)表达的影响.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定IL-1β、H2O2或二者联合干预后HPEC COX-2 mRNA表达量及前列腺素E2(PGE2)释放量的变化, 以不加任何试剂的细胞为对照组.结果 (1)COX-2 mRNA表达量:1、5、10 mg/L 的IL-1β处理组COX-2 mRNA表达量分别为(143.1±7.2)%、(179.9±9.0)%、(190.0±9.5)%,对照组为(32.9±1.7)%,1、5、10 mg/L 的IL-1β处理组与对照组比较差异有显著性(P均<0.05); (2)培养基上清液PGE2浓度:5、10 mg/L 的IL-1β处理组培养基上清液PGE2浓度分别为 (20.86±5.23)×10-6 g/L、(31.16±2.64)×10-6 g/L,对照组为(10.49±0.36)×10-6 g/L, 5、10 mg/L 的IL-1β处理组与对照组比较差异有显著性(P<0.05);(3) COX-2 mRNA表达量: 0.10、0.25、0.50 mmol/L 的H2O2和IL-1β共处理组COX-2 mRNA表达量分别为 (149.2±7.5)%、(189.6±9.5)%、(239.1±12.0)%, IL-1β单独处理组为(66.1±3.7)%, 对照组为(41.6±2.1)%, 0.10、0.25、0.50 mmol/L 的H2O2和IL-1β共处理组与IL-1β单独处理组比较,差异有显著性 (P<0.05); (4)培养基上清液PGE2浓度:0.10、0.25、0.50 mmol/L的H2O2和IL-1β共处理组,培养基上清液PGE2浓度分别为 (27.01±5.16)×10-6 g/L、(32.79±3.01)×10-6 g/L、(41.13±3.41)×10-6 g/L,对照组为(10.49±0.36)×10-6 g/L,0.10、0.25、0.50 mmol/L的H2O2和IL-1β共处理组与对照组比较差异有显著性(P<0.05).0.25、0.50 mmol/L的 H2O2和IL-1β共处理组PGE2浓度均与IL-1β单独处理组[(20.86±5.23)×10-6 g/L]比较差异有显著性 (P<0.05). 结论过氧化氢上调IL-1β对HPEC COX-2的诱导表达,其调节机制可能发生在转录水平.
