首页 > 文献资料
-
环氧合酶2同黑色素瘤抗原-1蛋白在胃癌患者表达的相关性和预后影响分析
目的 检测环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)和黑色素瘤抗原-1(Melanoma-associated antigen l,MAGE-1)蛋白在胃腺癌切除组织中的表达情况及相关性分析,以及对胃腺癌患者5年生存率的预后影响.方法 用免疫组织化学方法对67例胃腺癌切除组织中COX-2和MAGE-1蛋白表达进行统计,利用SPSS 19.0软件进行预后和相关性的x2分析.结果 COX-2表达阳性率为55.2％,MAGE-1表达阳性率为46.3％,分析结果显示COX-2蛋白高表达(阳性)是降低胃癌患者5年生存率的影响因素,MAGE-1高表达(阳性)不是降低胃癌患者5年生存率的影响因素,COX-2表达同MAGE-1表达没有相关性(P=0.156).结论 COX-2蛋白和MACE-1蛋白在胃腺癌组织中均有较高表达,但COX-2高表达明显影响胃腺癌患者的5年生存率,尚不能得出MAGE-1蛋白高表达影响胃腺癌患者的5年生存率的结论.
-
解剖性肝切除术对肝癌患者的疗效及对MAGE-1、AFP mRNA水平的影响
目的 探讨解剖性肝切除术对肝癌患者外周血黑色素瘤抗原-l(MAGE-l)mRNA、甲胎蛋白(AFP)mRNA的影响及临床疗效.方法 回顾性选取2013年3月至2015年6月治疗的原发性肝细胞癌患者117例,根据患者终选取的手术方式分为观察组(n=69)和对照组(n=48).观察组采用解剖性肝切除术,对照组给予非解剖性肝切除术.观察两组手术情况,术前、术后7 d的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、胆碱酯酶(CHE),以及术前、术后28d外周MAGE-1mRNA和AFP mRNA变化,随访观察患者总体生存时间和无进展生存期.结果 观察组手术时间和切缘有效率明显高于对照组(P＜0.05);观察组术后7 d ALT和AST水平明显低于对照组(P＜0.05);观察组和对照组术后7 dTBIL和CHE比较,差异无统计学意义(P＞0.05);观察组术后28d MAGE-1mRNA和AFP mRNA阳性率明显低于对照组(P＜0.05);观察组中位总体生存时间和中位无进展生存期也明显高于对照组(P＜0.05).结论 解剖性肝切除术有较好的临床效果,可改善肝功能,降低外周血MAGE-1mRNA和AFP mRNA表达,改善患者预后.
-
胆囊良恶性病变组织中CD63和MAGE-1表达及临床病理意义
目的 研究胆囊良恶性病变组织中CD63和黑色素瘤抗原-1(melanoma antigen-1,MAGE-1)表达水平并探讨其临床病理意义.方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎组织常规制作石蜡包埋切片,CD63和MAGE-1染色方法为EnVisionTM免疫组化法.结果 胆囊腺癌CD63表达阳性率明显地低于癌旁组织(X2=15.77,P<0.01)、腺瘤性息肉(x=10.81,P<0.01)和慢性胆囊炎(X2=26.47,P<0.01);胆囊腺癌MAGE-1表达阳性率明显地高于癌旁组织(X2=31.27,P<0.01)、腺瘤性息肉(X2=13.57,P<0.01)和慢性胆囊炎(X2=35.47,P<0.01);腺瘤癌变、肿块大径<2 cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织器官病例CD63表达阳性率明显高于中或低分化腺癌、肿块大径≥2 cm、淋巴结转移及侵犯周围组织器官病例(P<0.05或P<0.01),但MAGE-1表达则相反(P<0.01).结论 CD63和MEGE-1表达水平与胆囊腺癌发生、进展、转移、侵袭能力及预后有密切关系.
-
肝癌患者围手术期外周血黑色素瘤抗原-1mRNA和甲胎蛋白mRNA检测与术后复发的关系
目的探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE-1mRNA和甲胎蛋白(AFP)mRNA表达水平其与术后转移复发的关系.方法通过巢式RT-PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE-1mRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访.同时以22例肝炎后肝硬化、11例肝血管瘤、12例肝转移癌患者和20例健康志愿者外周血标本作为对照组进行了MAGE-1 mRNA和AFP mRNA的对比检测.结果 MAGE-1 mRNA在12例肝转移癌患者外周血中的检出率为33.3%(4/12);肝炎后肝硬化、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出.AFP mRNA在肝炎后肝硬化患者外周血中的检出率为13.6%(3/22),在肝转移癌、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出.45例肝细胞癌患者外周血中,MAGE-1 mRNA/AFP mRNA的检出率分别是术前42.2%(19/45)/ 51.1%(23/45),术后7 d 20%(9/45)/ 24.4%(11/45),术后28 d 15.6%(7/45)/ 22.2%(10/45).统计分析提示,术后28 d肝细胞癌患者外周血检出MAGE-1 mRNA/AFP mRNA预示患者近期复发.并且双标志物联合检测较单标志物检测对预测复发具有更高的敏感性.结论采用巢式RT-PCR的方法联合检测肝细胞癌患者术后28 d外周血中癌特异性的MAGE-1 mRNA和肝细胞特异性的AFP mRNA有助于预测肝细胞癌患者术后的转移复发.
关键词： 癌 肝细胞 黑色素瘤抗原-1 甲胎蛋白 巢式逆转录聚合酶链反应 -
黑色素瘤抗原-1诱导特异性抗肝癌免疫应答
目的:探讨黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)对特异性抗肝癌免疫应答反应的影响.方法:分别用转染pcDNA3.1-MAGE-1(重组子)、pcDNA3.1(空质粒)以及未行转染的人肝癌细胞SMMC-7721冻融抗原致敏树突状细胞(DC),诱导T淋巴细胞增殖分化为细胞毒性T淋巴细胞(CTL).乳酸脱氢酶释放法检测CTL对SMMC-7721细胞的杀伤活性.48只C57BL小鼠随机分为重组子组、空质粒组和PBS组,每组16只.用pcDNA3.1-MAGE-1预先免疫重组子组小鼠,1次/10 d,第3次免疫后第5天ELISA法检测各组8只小鼠脾细胞培养液中IFN-γ和IL-2的含量,第6天各组8只小鼠接种鼠源性肝癌细胞H22,观察其生存时间.结果:未转染、空质粒和重组子组诱导的CTL对靶细胞的杀伤率以及各组小鼠股四头肌MAGE-1 mRNA表达的比较差异有统计学意义(F=139.601和538.650,P﹤0.001),重组子组高于未转染和空质粒组.PBS组和空质粒组小鼠脾细胞培养液中IFN-γ和IL-2的含量为0,重组子组小鼠脾细胞培养液中IFN-γ含量为(372.33±10.08) ng/L,IL-2含量为(108.67±12.81) ng/L.3组小鼠荷瘤生存时间比较差异有统计学意义(F=31.837,P＜0.001),重组子组小鼠生存时间明显延长.结论:MAGE-1可诱导特异性抗肿瘤免疫应答,从而显著延长荷瘤小鼠的生存时间.
-
肺部良恶性病变组织中CD63和MAGE-1表达及临床病理意义
目的 研究肺部良恶性病变组织中CD63和黑色素瘤抗原-1(melanoma andgen-1,MAGE-1)的表达并探讨其临床病理意义.方法 将112例肺癌和25例肺部良性病变手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,采用免疫组织化学EnVisionTM二步法测定CD63和MAGE-1的表达.分析CD63和MAGE-1表达与临床分期、分化程度、有无淋巴结转移间的关系.结果 肺癌组织中CD63表达阳性率明显低于肺良性病变组织(X2=14.84,P＜0.005);而MAGE-1在肺癌组织中表达阳性率明显高于肺部良性痛变组织(X2=24.71,P＜0.005);中高分化、Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移的肺癌组织CD63表达阳性率明显高于低分化和未分化、Ⅲ～Ⅳ期及有淋巴结转移者(P＜0.01～0.05),而MAGE-1表达阳性率则相反(P＜0.05);肺癌组织中CD63和MAGE-1的表达呈高度负相关(P＜0.005).结论 CD63和MAGE-1可能是反映肺癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标志物.
-
人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备
目的获得MAGE-1蛋白,制备其多克隆抗体.方法采用RT-PCR方法从人肝细胞癌HepG2中克隆MAGE-1基因,构建其原核表达质粒,并进行原核表达与蛋白分离纯化.免疫动物,制备MAGE-1的抗血清.经固化GST蛋白的Sepharose 4B交叉吸收后,采用琼脂双扩实验和ELISA方法检测其效价和特异性.结果所得MAGE-1 cDNA序列与GeneBank中公布的一致.构建了MAGE-1 194-309aa片段的原核表达质粒pGEX-MAGE-1,经诱导及分离纯化,得到一M,约42000的融合蛋白.免疫动物,分离血清,经交叉吸收后,琼脂双扩及ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与MAGE-1蛋白特异性结合.结论本研究成功地获得MAGE-1蛋白,制备的抗MAGE-1多克隆抗体,经交叉吸收后能够特异性地与MAGE-1蛋白结合,为研究MAGE-l在肿瘤诊断和免疫治疗中的应用提供了实验条件.
-
共表达MAGE-1与EGFP基因的小鼠黑色素瘤细胞系的建立
目的:构建黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)基因的真核表达载体,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中进行表达.方法:采用分子生物学的手段,构建了MAGE-1与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因共表达的质粒pIRES2-EGFP-MAGE-1,通过脂质体以共表达质粒转染B16细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用免疫组化染色法检测细胞中MAGE-1的表达.结果:成功地构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-MAGE-1.以其转染B16细胞后,经荧光显微镜及免疫组化染色法检测,可见细胞内有EGFP及MAGE-1的表达.结论:成功地建立了可共表达MAGE-1与EGFP基因的B16细胞,为MAGE-1在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了研究基础.
-
针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究
目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用.方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉 (RNAi)质粒载体.利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果. 结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致.稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用. 结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达.
