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HPLC测定定心藤中汉防己碱的含量
目的:建立定心藤中汉防己碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.3％三乙醇胺溶液(磷酸调pH 2.0)(45∶55),流速1.0 mL· min-1,检测波长280 nm.结果:定心藤中的汉防己碱含量测定方法在0.0404～0.363 6μg进样量与峰面积的线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率99.02％,RSD 1.67％.结论:所建立的方法准确、灵敏、重复性好,可用于定心藤的质量控制.
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汉防己碱对牛血清白蛋白致大鼠肝纤维化的治疗作用
目的：研究汉防己碱对牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）致大鼠肝纤维化的治疗作用。方法90只SD大鼠随机分为6组，即正常组、模型组、秋水仙碱阳性对照组（0.1 mg/kg）、汉防己碱高剂量组（8 mg/kg）、汉防己碱中剂量组（4 mg/kg）和汉防己碱低剂量组（2 mg/kg），每组15只。造模成功后连续80天灌胃给予大鼠汉防己碱。末次给药后腹主动脉采血并取肝脏活体，检测大鼠血清学指标（ALT、AST、TP、ALB、LN、HA、PC-Ⅲ及Ⅳ-C胶原）并观察其肝脏病理组织学变化情况。结果与模型组相比，汉防己碱高剂量组、中剂量组及秋水仙碱组大鼠相关血清学水平得到显著改善，其中治疗后汉防己碱高剂量组LN、HA、PC-Ⅲ及Ⅳ-C胶原水平分别为（45.36±1.92）ng/ml、（232.54±23.71）ng/ml、（30.69±2.93）ng/ml、（29.20±2.82）ng/ml；汉防己碱中剂量组LN、HA、PC-Ⅲ及Ⅳ-C胶原水平分别为（52.17±2.99）ng/ml、（283.12±23.19）ng/ml、（34.92±2.72）ng/ml及（34.81±2.92）ng/ml，均显著优于模型组。病理学结果显示，与模型组比较，汉防己碱高、中剂量组及秋水仙碱组大鼠的肝细胞水肿、变性和坏死情况均显著减轻。结论汉防己碱具有较好的保护肝细胞和治疗肝纤维化的作用。
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防己与其伪品的鉴别
防己：为防己科植物粉防己的干燥根。 性状：呈不规则圆柱形，半圆柱形或块状，表面淡灰黄色，在弯曲处常有深陷横沟，形成层较明显，大部分有排列较稀疏的放射状纹理，木周边淡灰黄色，质坚实有粘性，气微味苦。 本品鉴别要点：(1)横切面：本品木栓层有时残存，皮层散有石细胞群，常切向排列，韧皮部较宽，形成层成环，木质部占大部分，射线较宽，导管稀少，呈放射状排列，导管旁有木纤维，薄壁细胞充满淀粉粒，并可见细小杆状草酸钙结晶。 (2)薄层：含多种生物碱。主要为粉防己碱去甲基粉防己碱，汉防己碱及防己诺林碱等。 取本品粉末约2g，加0.5ml/lH2SO420ml，加热十分钟，滤过，滤液加氨试液调节pH值至9，移入分液漏斗中，加苯25ml，振摇提取，分取苯液5ml，置瓷蒸发皿中，蒸干，残渣加钼硫酸试液数滴，即显紫色，渐变绿至污绿色，放置色渐加深。 (3)取本品粉末1g，加乙醇15ml，加热回流1小时，放冷滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml，使溶解，作为供试品滴液，另取汉防己碱与防己诺林碱对照品，加氯仿制成每1ml中各含1mg的混合溶液。作为对照品溶液，照薄层色谱法试验。吸取上述两种溶液各5ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿丙酮甲醇(611)，为展开剂展开，取出晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相对应颜色的斑点，即为蓝色斑点。 伪品：为茶茱萸科微花藤属植物的根。 性状：为不规则原片状，切面黄白色，皮部明显，粗糙，形成层明显，有排列致密的放射状纹理，周边棕黄色，质坚实，富粉性或纤维性，无臭，味淡。
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汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳中毒脑损伤的保护作用
目的研究汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳(CO)中毒致脑损伤是否有保护作用.方法小鼠腹腔注射CO 150 ml/kg,间隔3 h 注射1次,连续3次,在每次给予CO前30 min 腹腔注射汉防己碱15 mg/kg 和MK801 2 mg/kg;以CO中毒后小鼠被动回避性学习记忆能力改变、脑组织病理学和Ca2+Mg2+-ATPase活力改变为指标,观察汉防己碱和MK801对CO中毒致小鼠迟发性脑损伤的保护作用.结果给予汉防己碱能明显改善小鼠因CO中毒引起的学习记忆巩固能力障碍,防止海马神经元细胞病理性损伤,阻遏CO中毒引起的小鼠脑组织Ca2+Mg2+-ATPase活力的降低;而MK801对CO中毒后小鼠被动回避性学习记忆能力及脑组织病理学和Ca2+Mg2+-ATPase活力改变均无明显影响.结论汉防己碱对急性CO中毒致小鼠脑损伤有明显的保护作用,而MK801至少在本次研究剂量下无明显的保护作用.
关键词： 记忆障碍 Ca2+Mg2+-ATPase 一氧化碳中毒 汉防己碱 MK801 -
风湿镇痛凝胶体外透皮实验
目的:优选氮酮加入比例.方法:以风湿镇痛凝胶中汉防己碱为指标,采用Franz小池扩散法.结果:氮酮的加入具有明显促透作用,不同比例氮酮对促透效果也有影响.结论:本凝胶加入4%的氮酮促透作用好.
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汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型治疗作用的研究
目的 探讨汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型的治疗作用.方法 新西兰兔18只,随机分为空白组、模型组及给药组,每组6只.利用复方卡波姆溶液进行慢性高眼压造模,给药组家兔给予汉防己碱滴眼液(浓度0.1g·L-1)滴眼,模型组及空白组则给予等量生理盐水滴眼.治疗7d后处死各组家兔,取视网膜,分为2份,并分别用Thy-1染色及制备匀浆.利用光镜观测Thy-1染色并对其视网膜神经节细胞(RGCs)进行计数;检测匀浆液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量.结果 空白组,给药组与模型组RGCs计数分别为每高倍视野(21.2±1.7),(20.1±2.5)及(15.2±2.3)个,空白组与给药组分别与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);模型组中内丛状层变薄,外核层细胞排列紊乱、数目减少且间隙扩大;给药组及空白组家兔视网膜各层组织层次分明、结构清晰且细胞排列整齐.给药组及空白组家兔视网膜匀浆液中SOD,MDA及GSH-PX水平均明显优于模型组.结论 汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型具有较好的治疗作用.
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姜黄素－汉防己碱共递送抗病毒复方脂质体的构建
目的：制备寡聚透明质酸衍生物 oHA 修饰的姜黄素－汉防己碱中药抗病毒脂质体，并对其进行体外释放和稳定性研究。方法用薄膜分散法制备了寡聚透明质酸衍生物修饰的姜黄素－汉防己碱脂质体，以粒径和包封率作为两个重要的参考指标，使用粒度仪测定了粒径，使用紫外分光光度法测定包封率。结果用 Box －Be-hnken 效应面优化法确定了佳磷脂胆固醇比为2．5∶1，佳姜黄素－汉防己碱比例为2．8∶1，寡聚透明质酸衍生物的用量为1．80％，通过佳处方制备的脂质体的粒径是201．06 nm，包封率是70．94％。结论制备的脂质体具有良好的稳定性，均匀的粒径分布，证明了脂质体具有良好的体外释放活性，良好的稳定性，为进一步研究抗病毒联合机制奠定基础。
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汉防已碱对实验性葡萄膜炎的抑制作用
[目的] 探讨汉防已碱(Tet)对内毒素诱导葡萄膜炎的预防和治疗作用.[方法] 将200 μg伤寒杆菌内毒素(LPS)注射于20只SD大鼠足底部,诱导出葡萄膜炎(EIU)模型,其中12只大鼠于LPS注射前半小时开始给于汉防已碱40 mg灌服,共4次,每隔4 h一次.另外8只未给予灌服作为对照.于LPS注射后6 h、12 h、24 h用裂隙灯显微观察其临床改变,并于LPS注射后24 h处死大鼠,观察各大鼠眼部组织学改变.[结果] LPS注射后均诱发出双眼相似的葡萄膜炎,炎症的严重程度在未处理组临床积分为7.65±0.67,Tet组临床积分为3.27±1.02,P<0.01,有显著差异.组织学检查,在Tet处理组大鼠,睫状体、脉络膜、视网膜及玻璃体腔炎症细胞浸润均比未处理组明显减轻.[结论] Tet对内毒素诱发的葡萄膜炎有一定的抑制治疗作用.
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中草药单体抗肝纤维化作用的研究进展
肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的修复反应,特征性表现为肝内细胞外基质过度合成、沉积,是慢性肝病发展为肝硬化的中间过程.由于肝纤维化早期是可逆的,而肝硬化是不可逆的,抑制或逆转肝纤维化是治疗慢性肝病的重要手段之一.中医药治疗肝纤维化历史悠久.近年来,国内外学者对多种草药及其提取物的有效成分进行了广泛的研究,该文对中草药单体抗肝纤维化作用的进展作一综述.
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粉防己碱抗纤维化机理研究进展
粉防己碱 ( Tetrandrine,TET) 异名汉防己碱、汉防己甲素 , 是从防己科植物粉防己 ( Stephania Tetrandra S. Moore) 的干燥根中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱 [1], 作用广泛 . 近来 , 其抗纤维化作用在临床上开始受到重视 , 已在肝、肺疾病治疗中得到应用 , 并由此推广到对体表创伤后瘢痕的防治 . 随着细胞分离、培养技术的发展及分子生物学的应用 , 使得从基因分子水平阐述 TET抗纤维化作用机制成为可能 .
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汉防己碱对大鼠皮层神经元钙通道的阻滞作用
在急性分离的大鼠大脑皮层神经元上,用膜片钳单通道记录技术研究汉防己碱(Tet)对电压依赖性钙通道的影响.结果表明,Tet 7.5μ mol/L、15μ mol/L和30μmol/L可浓度依赖性抑制大鼠皮层神经元膜L-和N-型电压依赖性钙通道,使其开放时间缩短,关闭时间延长,开放概率降低,从而降低钙内流,其对L-型钙通道的作用与钙通道阻滞剂Verapamil相似但较弱.Tet的多种药理作用可能与其阻滞钙通道有关.
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汉防己碱对白血病K562细胞生长的促进耐药作用
目的 考察汉防己碱(Tet)对白血病K562细胞生长的影响.方法 采用体外细胞培养,即在37℃、5％CO2、饱和湿度的培养箱中培养,培养液为含10％热灭活NBS的完全RPMI1640细胞培养基.待K562细胞与药物作用48 h后,收集并处理细胞,结合MTT和Western blot法研究Tet对K562细胞生长的作用特点.结果 Tet在0.33～1.00 μg/ml仅使K562及K562/ADM细胞的存活率降低至75％ ～ 80％,低浓度Tet(0.33 μg/ml)使阿霉素(ADM)和顺铂(cDDP)对K562细胞生长的IC50增加(P＜0.01),1.0 μg/ml Tet则降低IC50,使ADM对K562/ADM细胞的IC50增加,cDDP的IC50无明显变化.0.33μg/ml Tet有提升2种细胞的P-gp和MRP1表达的作用(P＜0.05).Tet各浓度对LRP表达无明显影响.结论 Tet对K562及K562/ADM细胞生长抑制作用具浓度依耐性,低浓度具加速耐药的作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关.
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汉防己碱对肝癌Hep3b细胞生长的双向作用
目的 考察汉防已碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响.方法 采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33 ～ 1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点.结果 Tet在0.33～1.0 μg/ml时呈浓度依赖性降低Hep3b细胞存活率；0.5和1.0 μg/ml显著提高5-Fu对Hep3b细胞的IC50,但降低5-Fu对Hep3b/5-Fu细胞的IC50；0.33 μg/ml的Tet明显增加cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50,而0.5和1.0μg/ml显著降低cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50(P＜0.01).1.0 μg/ml的Tet作用48 h后使Hep3b细胞中的P-gp和MRP1表达明显上调(P＜0.05).Tet单用对Hep3b细胞生长有一定抑制作用,高浓度Tet逆转Hep3b/5-Fu细胞对5-Fu耐药和增强cDDP对Hep3b/5-Fu细胞生长的抑制作用,但低浓度分别促进Hep3b细胞和Hep3b/5-FU细胞对5-Fu和cDDP耐药.结论 Tet对Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长呈浓度相关的双向作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关.
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汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳中毒的保护作用研究
目的:为了研究汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳中毒是否有保护作用.方法:小鼠腹腔注射CO 150ml/kg,间隔3～4h 1次,连续3次,汉防己碱(Tet)15mg/kg和MK8 01 2mg/kg在每次给予CO前30分钟腹腔注射;以CO中毒后小鼠被动回避性学习记忆能力改变 ,脑组织病理学和Ca2+-Mg2+-APTase活性改变为指标观察汉防己碱和MK801对一氧化碳中毒(CO)致小鼠脑损伤保护作用.结果:汉防己碱预防性给予能明显改善小鼠CO中毒引起的学习记忆巩固能力的损害,能防止海马神经元细胞病理性损伤;并能阻遏CO中毒引起的小鼠脑组织Ca2+-Mg2 +-APTase活性的病理性降低,而MK801对CO中毒后小鼠被动回避性学习记忆能力改变,脑组织病理学和Ca2+-Mg2+-APTase活性病理性改变均无明显影响.结论:结果表明,汉防己碱对包性一氧化碳中毒致小鼠脑损伤有明显的保护作用,而MK801 至少在该剂量下无明显的保护作用.
