首页 > 文献资料
-
生地黄、山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响
目的:观察生地黄,山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响.方法:200 mmol·L-1的葡萄糖与牛血清白蛋白组成反应系统,37℃温孵,分别加入生地黄,山茱萸及其配伍水提液,含药血清,测早期糖化蛋白(果糖胺)及晚期糖基化产物(AGEs),计算抑制率(inhibitory rate,IR),及半数抑制率(IC50).结果:山茱萸,生地黄,山茱萸,生地黄配伍分煎及合煎的早期糖化产物(果糖胺)IC50分别为0.104,0.159,0.146,0.077 g·L-1；晚期糖基化产物(AGEs) IC50分别为0.175,0.221,0.143,0.076 g·L-1.提示生地黄,山茱萸水提液对早期和晚期糖化产物均有一定抑制作用.此外生地黄,山茱萸含药血清对早期糖化蛋白IC50分别为:37.9％,49.1％,52.8％,31.6％；对晚期糖基化产物IC50分别为:78.5％,92.3％,82.9％,73.2％.表明生地黄-山茱萸含药血清对果糖胺与AGEs也都具有一定的抑制作用,且生地黄-山茱萸合煎组抑制果糖胺和AGEs的IC50优于其他组.结论:生地黄山茱萸配伍对抑制果糖胺和AGEs具有协同作用.
-
牡丹皮对AGEs诱导的系膜细胞增殖及基底膜增厚的影响
目的:探讨牡丹皮对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的系膜细胞增生及基底膜增厚的影响.方法:建立AGEs诱导的肾小球系膜细胞(MC)损伤模型,设置空白组[牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),200 mg·L-1],模型组(AGEs,200 mg·L-1),氨基胍(aminoguanidine,AG)阳性组(10 mmol· L-1),牡丹皮高、中、低剂量组(2×10-4,1×10-4,0.5×10-4g·mL-1).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察牡丹皮对损伤的MC的增殖影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ胶原蛋白(type Ⅳ collagen secretion,ColⅣ)的含量;采用Western blotting观察FN的表达;Real-time PCR检测ColⅣ的mRNA表达水平.结果:牡丹皮能抑制AGEs刺激的MC增殖以及FN和ColⅣ分泌;Western blotting表明牡丹皮下调MC分泌的FN表达;Real-time PCR结果说明牡丹皮对AGEs刺激下的MC分泌ColⅣ的mRNA表达有下调作用.结论:牡丹皮对AGEs培养条件下的MC具有一定的保护作用,牡丹皮能明显抑制基质中ColⅣ及FN的合成与分泌,抑制基底膜增厚,为糖尿病肾病的治疗提供实验依据.
-
自噬在晚期糖基化产物(AGEs)诱导血管平滑肌细胞增殖与迁移中的作用
目的 研究自噬在晚期糖基化产物(AGEs)诱导的平滑肌细胞增殖和迁移中的具体作用.方法 用AGEs处理血管平滑肌细胞后,Western blot法观察自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和SQSTM1/p62的表达变化;MTT实验检测细胞增殖水平;细胞小室实验测定细胞迁移的能力.结果 AGEs刺激血管平滑肌细胞后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达增加,SQSTM1/p62表达减少.与对照组相比,AGEs(100μg/ml)处理组显著增强血管平滑肌细胞的增殖和迁移能力.但是,使用自噬抑制剂3-MA预处理血管平滑肌细胞可减弱这种现象.结论 本研究证实AGEs诱导的自噬可增强AGEs诱导的血管平滑肌细胞的增殖和迁移能力.
-
罗格列酮对OLETF鼠皮肤组织及其晚期糖基化产物的影响
目的:探讨罗格列酮对OLETF鼠皮肤组织及其晚期糖基化产物(AGEs)的影响和机制.方法:OLETF雄性大鼠20只,30周时共有成模的2型糖尿病(T2DM)OLETF大鼠12只,随机分为罗格列酮组和模型组(每组6只),对照组为LETO鼠(8只).各组均于给药12周后同时采集背部皮肤组织,HE染色观察皮肤的组织学变化及测量表皮和真皮的厚度,Masson三色染色观察胶原纤维的变化,免疫组织化学染色观察AGEs的蓄积程度及变化.结果:模型组大鼠表皮组织变薄,表皮细胞欠清晰,部分表皮缺乏复层排列；真皮层亦变薄,胶原纤维纤细、排列紊乱,部分胶原可见肿胀、变性.罗格列酮组大鼠皮肤表皮层较清晰,复层排列接近对照组,真皮胶原丰富,表皮与真皮厚度明显增加,与对照组无明显差异.模型组大鼠皮肤组织AGEs明显蓄积在真皮基质和细胞中,阳性表达明显高于罗格列酮组和对照组.结论:2型糖尿病在皮肤未受损伤时已发生组织学变化,AGEs可能是导致这种变化的机制之一,而罗格列酮可有效减轻这种损害的发生.
-
慢性肾衰竭患者血清果糖胺水平测定的临床研究
晚期糖基化产物(AGE)作为新的尿毒症毒素[1]日益受到人们的重视,而早期糖化产物果糖胺(FA)是形成晚期不可逆产物的前体之一,为此我们研究了果糖胺在慢性肾衰竭患者血清中的水平变化并初步探讨其临床意义.
-
苦参素对晚期糖基化产物诱导的心力衰竭的治疗作用及其机制
目的 探讨凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal regulating kinase1,ASK1)-硫氧还原蛋白(thioredoxin,Trx)复合体介导的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)激酶(MKKs)/p38 MAPK信号通路是否参与苦参素对晚期糖基化产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的大鼠心力衰竭的改善作用.方法 50只SD大鼠分为对照组(Ctrl)、AGEs暴露组(AGEs)、低剂量苦参素治疗组(AGEs+ L-Mat)、中剂量苦参素治疗组(AGEs+ M-Mat)以及高剂量苦参素治疗组(AGEs+ H-Mat).Ctrl组接受生理盐水连续腹腔注射20d;AGEs组接受剂量为1 mg/d的AGEs连续腹腔注射20d;AGEs+ L-Mat组、AGEs+ M-Mat组及AGEs+ H-Mat组接受剂量为1 mg/d的AGES及剂量为50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)以及200 mg/(kg·d)的苦参素溶液连续腹腔注射20d.心脏血流动力学检测获得大鼠心功能参数;TUNEL法评估心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法测定心肌组织MKKs/p38 MAPK凋亡通路激活情况;免疫共沉淀法评估ASK1-Trx复合体解离水平.结果 与Ctrl组相比,AGEs组左室收缩压力(LVSP)、左室内压大增加速率(+LVdP/dtmax)以及左室内压大衰减速率(-LVdP/dtmax)显著降低(P＜0.05),左室舒张末压力显著升高(P＜0.05).与Ctrl组相比,AGEs组心肌细胞凋亡显著增多(P＜0.05),心脏组织MKK3、MKK6、p38 MAPK蛋白磷酸化水平以及活化的caspase3蛋白水平显著上调(P＜0.05),ASK1-Trx复合体解离水平显著升高(P＜0.05).与AGEs组相比,AGEs+ L-Mat组、AGEs+ M-Mat组以及AGEs+ H-Mat组LVSP、+ LVdP/dtmax及-LVdP/dtmax水平显著升高(P＜0.05),LVEDP水平显著降低(P＜0.05),心脏组织MKK3、MKK6、p38 MAPK蛋白磷酸化水平以及活化的caspase3蛋白水平显著下调(P＜0.05),ASK1-Trx复合体解离水平显著降低(P＜0.05).随着苦参素浓度的升高,LVSP、+LVdP/dtmax及-LVdP/dtmax水平逐渐升高,LVEDP水平逐渐降低,心脏组织MKK3、MKK6、p38 MAPK蛋白磷酸化水平及活化的caspase3蛋白水平以及ASK1-Trx复合体解离水平逐渐降低,且具有显著的浓度依赖性(P＜0.05).结论 AGEs促进ASK1-Trx复合体解离,激活其下游MKKs/p38 MAPK信号通路,诱导心肌细胞凋亡从而诱发心力衰竭.苦参素抑制ASK1-Trx复合体解离,减少AGEs诱导的心肌细胞凋亡,减轻心力衰竭.
关键词： 苦参素 ASK1-Trx复合体 晚期糖基化产物 心力衰竭 细胞凋亡 -
自噬在糖尿病性心肌病中作用
糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)被定义为无冠状动脉疾病、高血压或其他潜在病因的糖尿病患者存在的心室舒缩功能障碍.尽管其病理生理广泛地被研究后仍未完全清楚.糖尿病患者体内的糖、脂代谢紊乱,氧化应激增强,胰岛素抵抗及晚期糖基化产物的糖毒性等损害了心肌正常的功能.自噬在维持细胞的自身稳态中具有重要意义.在糖尿病患者能量代谢及内分泌发生严重紊乱的基础上又引发氧化应激和晚期糖基化产物增多时,自噬的增强对糖尿病性心肌病心功能在一定程度上具有保护作用.该文就自噬在糖尿病性心肌病中的作用及其影响因素进行了综述.
-
茶多酚抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及相关机制研究
目的:研究晚期糖基化产物(AGEs)对大鼠血管平滑肌细胞A7R5增殖的影响及相关机制.方法:用AGEs处理A7R5细胞,相同条件BSA处理为对照组,Western blotting检测RAGE蛋白表达的变化,MTT比色法测定细胞活性.结果:AGEs处理A7R5细胞后,AGEs受体RAGE及细胞增殖水平均明显升高,但与EGCG共孵育能显著抑制AGEs诱导的RAGE表达增加及细胞增殖水平.结论:EGCG能够抑制AGEs诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖水平,这可能与EGCG抑制AGEs受体RAGE的表达相关.
-
加味当归四逆汤治疗糖尿病足临床研究
目的 观察加味当归四逆汤治疗0级糖尿病足(DF)的临床疗效及其对血清糖基化终末产物(AGEs)水平的影响.方法 将72例0级糖尿病足患者随机分为治疗组及对照组,每组36例.治疗组予加味当归四逆汤口服,对照组予西洛他唑口服.14 d为1个疗程,两组均连续治疗3个疗程.观察两组治疗前后临床症状、踝肱指数(ABI)、腓总神经传导速度、下肢动脉超声多普勒血流动力学指标、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、纤维蛋白原(FIB)、血清AGEs水平变化.结果 治疗组总有效率为88.9%,对照组为63.9%,两组治疗差异有统计学意义(P<0.05);治疗组ABI、下肢动脉超声多普勒血流动力学指标、腓总神经运动传导速度和感觉传导速度改善均优于对照组(P<0.05,P<0.01);治疗后两组血清AGEs均明显下降,治疗组低于对照组(P<0.01).结论 加味当归四逆汤能改善0级DF患者临床症状,并能改善糖尿病足动脉供血.
-
食品体系中晚期糖基化终产物的研究进展
晚期糖基化终产物(AGEs)在食品体系中广泛存在,进入人体后在体内累积并影响健康,国内研究专注于其致病机理以及临床检测,而对食品进物体系中的晚期糖基化终产物研究甚少.本文结合多年文献研究,从AGEs的形成机理、常见食品中AGEs的含有量、检测方法以及AGEs抑制剂这几个方面对目前的研究进展做一全面概述,为进一步准确检测AGEs并抑制其产生提供理论依据.
-
知母多酚对血管内皮的保护作用
目的:探讨知母多酚(TPAA)对血管内皮的保护作用.方法:观察知母多酚对大鼠离体胸主动脉舒张功能的影响和对体外糖基化修饰蛋白生成的抑制作用.结果和结论:知母多酚可以一定程度地预防棕榈酸对血管内皮的破坏作用,抑制体外糖基化蛋白的生成.
-
加味五味消毒饮提取物对糖尿病大鼠牙周组织的保护作用
目的:观察加味五味消毒饮提取物(modified wuweixiaoduyin extracts,MWE)对糖尿病(diabetic mellitus,DM)大鼠牙周组织的保护作用并探讨其初步机制.方法:以栓线法结合注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,50 mg/kg)法制备糖尿病性牙周炎动物模型.实验分5组,正常对照组、模型组、氨基胍(Aminoguanidine,AG)阳性组(100 mg/kg)、MWE治疗小剂量组(20 g生药/kg)和大剂量组(40 g生药/kg),每组动物数10只.灌胃给药治疗6周后处死大鼠,测定空腹血糖值和糖化血红蛋白(GHb)水平,ELISA法测定血清晚期糖基化终产物(AGEs)浓度,牙周探针测量牙周袋深度,X光牙片机检查大鼠左上颌牙槽骨组织变化,免疫组化法检测牙龈组织AGEs受体(receptor for AGEs,RAGE)蛋白表达.结果:治疗6周后,MWE几乎没有降血糖作用,但与模型组相比,治疗组牙周袋深度下降,GHb和AGEs水平降低(P＜0.01),骨小粱排列紊乱状况和牙槽骨水平吸收有所改善,RAGE蛋白表达水平也有下降.结论:MWE对糖尿病大鼠牙周组织具有保护作用,其机制可能与干扰AGEs-RAGE信号通路有关.
-
梓醇对AGEs刺激肾系膜细胞介导巨噬细胞极化的影响
目的 探讨梓醇对晚期糖基化终末产物(AGEs)刺激肾系膜细胞介导巨噬细胞极化的影响.方法 将巨噬细胞(RAW264.7)置于Transwell上层小室,肾系膜细胞(MMCs)于下层孔板进行体外共培养,设置模型组、0-BSA对照组、梓醇组(0.1、1.0、10.0 μmol·L-1),另设氨基胍组(1.0 μmol·L-1)作为阳性对照.加入各药物预孵下层系膜细胞1 h后,用AGEs(100 mg·L-1)刺激,继续孵育23 h,采用ELISA法检测系膜细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的分泌水平;Western blot法检测巨噬细胞 M1 型标记蛋白iNOS、CD16/32、TNF-α、COX-2和M2 型标记蛋白CD206、Arg-1的表达水平;流式细胞仪检测巨噬细胞iNOS与CD206蛋白表达百分率.结果 AGEs可提高系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),上调巨噬细胞iNOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05, P<0.01),下调CD206和Arg-1蛋白表达;而梓醇(0.1、1.0、10.0 μmol·L-1)预孵能降低系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),下调iNOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05, P<0.01),上调CD206和Arg-1蛋白表达(P<0.05),并呈浓度依赖性.结论 梓醇可通过调控AGEs刺激系膜细胞分泌MCP-1的水平,抑制巨噬细胞的M1型极化,并促进其向 M2 型极化,减轻炎症反应,缓解糖尿病肾损伤.
-
糖尿病血管并发症的糖基化机制研究进展
从信号传导、受体以及细胞外蛋白等方面综述糖基化反应在糖尿病血管并发症中的作用,为糖尿病血管并发症的防治提供依据.
-
熊果酸对蛋白质体外非酶糖基化反应的影响
目的 研究熊果酸(ursolic acid,UA)对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响.方法 采用L16(45)正交设计,以牛血清白蛋白(BSA)浓度,d-葡萄糖浓度和孵育时间3因素4水平正交试验,筛选出体外蛋白质非酶糖基化的佳反应条件.并以此条件用荧光分光光度法观察UA对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)形成的影响.同时,采用NBT法测定UA在体外对AGEs中间产物果糖胺(Amadori产物之一)形成的影响.结果 正交试验结果显示,5 g/LBSA,50 mM d-葡萄糖及40 d的孵育时间是蛋白质非酶糖基化反应的佳条件,荧光分光光度法结果表明,UA(10、20、40μM)对AGEs的形成有明显的抑制作用((P<0.05 or 0.01 vs模型组),且呈剂量依赖性.但UA在体外不能抑制果糖胺的形成.结论 UA可通过干扰早期糖基化产物-Amadori产物的深度糖基化来抑制AGEs形成,这可能是UA减轻糖尿病血管损伤的重要机制之一.
关键词： 蛋白质非酶糖基化反应 熊果酸 晚期糖基化产物 正交设计 -
转录因子Sp1和核因子кB调节小鼠足细胞单核细胞趋化蛋白1基因的转录
以往的研究发现羰甲基赖氨酸(CML)修饰的白蛋白可以通过足细胞上晚期糖基化产物受体(RAGE)激活足细胞.阻断足细胞中活性氧(ROS)及p21Ras和抑制ERK1/2,对CML诱导足细胞表达单核细胞趋化蛋白(MCP)1基因的作用不同,提示可能有不同的信号途径诱导MCP-1基因表达.本研究通过检测小鼠足细胞MCP-1基因上游启动子近端和远端调节区的核因子кB(NF-кB)结合位点、AP-1结合位点和GC丰富区的作用,试图了解这些转录调节因子的上游信号途径.
-
类黄酮体外抗糖尿病活性及相关性质的研究
目的 研究类黄酮的α-葡萄糖苷酶、晚期糖基化产物(AGEs)的抑制活性,并探讨抑制活性与其性质间的相关性.方法 采用紫外分光光度法和荧光法分别测定类黄酮对酶、AGEs的抑制率并计算出IC50值,推出抑制活性必需基团及数目,用HPLC法测得蛋白结合率,计算Pearson相关性.结果 酶抑制活性必需基团为B环邻二酚羟基和C环α,β-不饱和酮基,AGEs抑制活性必需基团为B环邻二酚羟基;两者抑制率与必需基团数的r分别为0.820、0.767.人血清白蛋白(HSA)、糖化人血清白蛋白(G-HSA)的结合率分别与AGEs抑制率(r=0.759)和XlogP(r=0.905)高度相关.结论 α-葡萄糖苷酶和AGEs的抑制率与必需基团数高度相关,AGEs的抑制活性还与HSA的结合率高度相关,G-HSA的结合率与酯水分配系数高度相关.
