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Sprouty-2对胃癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响
目的:研究Sprouty2(SPRY2)基因在胃癌肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭转移的影响.方法:体外培养人胃癌细胞(BGC-823),采用慢病毒介导的shRNA沉默SPRY2基因,并用实时定量PCR与Western blot检测其SPRY2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达,采用细胞划痕实验、Transwell 实验检测SPRY2基因沉默后的胃癌细胞侵袭转移能力变化.结果:在慢病毒介导shRNA沉默SPRY2基因的人胃癌BGC-823细胞中,SPRY2的mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.05),SPRY2沉默后人胃癌细胞E-cadherin的蛋白表达增多(P＜0.05),vimentin的蛋白表达减少(P＜0.05).此外,SPRY2沉默后,胃癌细胞迁移能力和侵袭能力明显减弱(P值均P＜0.05).结论:Sprouty-2基因通过调节E-cadherin与vimentin的表达参与胃癌细胞的上皮-间质转化,进而促进胃癌细胞的迁移与侵袭.
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机械牵拉诱导人RPE细胞IL-8分泌及其对PI3K/AKT通路的影响
目的:视网膜脱离发生机制尚不明确,本文旨在研究机械应力牵拉后视网膜色素上皮细胞上清中IL-8分泌量的变化以及人其对RPE细胞PI3K/AKT通路变化影响.方法:培养人RPE细胞,应用Flex-cell细胞应力加载系统牵拉人RPE细胞不同时间(0h、1h、3h、6h、9h)建立不同牵拉时间的模型.分别标记为对照组、牵拉1h组、牵拉3h组、牵拉6h组、牵拉9h组.随后用ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量的变化.细胞免疫荧光和Western blot方法观察PI3K、PPI3K、T-AKT、P-AKT的表达.结果:随着牵拉时间的延长,ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量逐渐增加[924.79± 5.92 pg/mL、947.73± 5.34 pg/mL、974.53± 5.74 pg/mL、979.57± 1.12 pg/mL、1019.22± 4.25 pg/mL],差异有统计学意义(F=166,p＜0.01),各牵拉组与对照组分别对比,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞中P-AKT蛋白表达增加[0.61±0.02、0.97±0.05、0.99± 0.04、1.21±0.11、1.20± 0.07],差异有统计学意义(F=41.24,p＜0.01),各牵拉组与对照组分别对比,差异有统计学意义(P＜0.05),AKT表达未见明显变化.结论:机械应力牵拉人RPE细胞时,细胞上清中IL-8分泌量逐渐增加同时RPE细胞内PI3K/AKT通路明显激活,并与牵拉时间有关,为探究EMT原因和对防治PVR提供了理论基础.
关键词： 机械应力 视网膜色素上皮细胞 PI3K/Akt通路 上皮-间质转化 -
砷化物致癌作用的分子机制研究进展
砷化物是人类确定的致癌物,但由于其致癌实验动物模型一直未能成功建立,导致其致癌机制研究长期滞后,因此,砷化物所致细胞恶性转化和DNA损伤的体外细胞模型已广泛用于其致癌作用及其机制研究[1].已有研究发现,不同剂量水平砷化物所致细胞增殖和恶性转化及DNA损伤和细胞凋亡呈双向效应,即低剂量水平(＜ 5.0 μmol/L)砷化物主要引起细胞增殖和恶性转化;而在高剂量水平(≥5.0 μmol/L)则主要引起细胞DNA损伤和细胞凋亡,从而提示不同剂量水平砷化物致癌的分子机制可能不同.
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STAT3通过上调 Twist 基因表达从而诱导肺腺癌细胞上皮-间质转化
目的：探讨信号转导子与转录激活子3（ STAT3）基因在肺腺癌细胞上皮-间质转化（ Epi-thelial-mesenchymal transition ，EMT）过程中的作用。方法应用STAT3-siRNA转染人肺腺癌A549细胞，下调STAT3基因表达。转染后观察细胞形态学变化，通过Western blot检测STAT3和Twist 蛋白的表达变化。同时应用Transwell法和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。并应用免疫组化法验证STAT3和Twist蛋白在肺腺癌组织中表达的相关性。结果 STAT 3-siRNA转染人肺腺癌A549细胞后，STAT3基因表达下降，同时降低Twist的表达，并且降低肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力，在肺腺癌组织中我们也观察到随着分化程度升高，两个蛋白在肺癌组织中的的表达均逐渐降低，并呈正相关。结论 STAT3基因通过调节 Twist的表达，参与EMT过程，从而在肺癌进展中发挥重要作用。
关键词： 肺腺癌 转导子与转录激活子3 Twist 上皮-间质转化 -
结直肠癌病人 Vimentin 表达的临床意义
目的：探讨波形蛋白（ Vimentin）表达与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化方法对189例经病理组织学证实的结直肠癌组织进行Vimentin表达情况检测，分析其与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果 Vimentin阳性表达与淋巴结转移（pN分期，P＝0．038）、TNM分期（P＝0．024）显著相关。生存分析表明，Vimentin阳性表达与结直肠癌不良预后显著相关（P＝0．016）。多因素分析发现，Vimentin表达是结直肠癌患者预后的一个独立因素（P＝0．026）。结论 Vimentin阳性表达与淋巴结转移和TNM分期显著相关，是影响其预后的独立因素。
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HMGA2、Twist在胃腺癌中的表达及其与EMT的关系
目的 探讨胃腺癌中HMGA2、Twist的表达及其与上皮间质转化相关因子E-cadherin和Vimentin的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测80例胃腺癌标本以及20例正常胃组织中HMGA2、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达,分析其与临床病理资料之间的关系.结果 80例胃腺癌组织中,HMGA2、Twist、E-cadherin和Vimentin表达的阳性率分别为65%、68.75%、26.25%和67.5%,HMGA2和Twist的表达呈正相关(P＜0.05),HMGA2与Twist的表达均与淋巴结转移及肿瘤临床分期有统计学意义(P＜0.05),而且HMGA2和Twist的表达均与E-cadherin低表达(P＜0.05)和Vimentin高表达(P＜0.05)存在相关性.结论 HMGA2与Twist在胃腺癌组织中的高表达与EMT的发生密切相关,通过促进胃腺癌组织上皮表型向间质表型转化进而促进侵袭转移.
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似果蝇粒状头样2基因与肿瘤关系的研究进展
似果蝇粒状头样2基因(Grainyhead-like 2,GRHL2)是果蝇粒状头样基因在哺乳动物中的同源基因之一,是哺乳动物所具有的一种似果蝇粒状头样转录因子.在正常机体中,GRHL2参与调控上皮细胞的分化与发育,而对于肿瘤,GRHL2的作用是复杂的,既可抑制肿瘤的发生,也可以促进肿瘤的形成,特别是上皮来源的恶性肿瘤大部分都涉及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程.进一步研究GRHL2与肿瘤的关系,将为肿瘤患者的临床诊治带来新的思路,本文就GRHL2与肿瘤的关系进行综述.
关键词： 似果蝇粒状头样2基因 肿瘤 上皮-间质转化 -
上皮-间质转化在非小细胞肺癌侵袭与转移中作用的研究进展
上皮-间质转化（ Epithelial-mesenchymal transition ，EMT）与恶性肿瘤的侵袭及转移有着密切的关系，是目前研究恶性肿瘤侵袭及转移的热点。有大量研究表明在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌和非小细胞肺癌的侵袭与转移过程中都有上皮-间质转化现象，并阐述上皮-间质转化的信号通路及其蛋白分子。本文对上皮-间质转化在非小细胞肺癌侵袭与转移的研究成果做一综述。
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上皮-间质转化标志物E-cadherin、vimentin在不同病理分期宫颈癌中的表达及意义
目的：探讨E-cadherin、vimentin在不同病理分期宫颈癌中的表达及意义,进而阐述上皮-间质转化在宫颈癌中的作用。方法采用免疫组化方法检测101例宫颈癌组织中E-cadherin、vimentin表达情况,分析两者的表达与病理分期的相关性。结果101例宫颈癌病理分期如下：ⅠA(15例,14.85%),ⅠB(40例,39.60%),ⅡA(27例,26.73%),ⅡB(13例,12.87%),ⅢA(4例,3.96%),ⅢB(2例1.98%)；E-cadherin、vimentin在各组中表达具有差异性,组间比较,差异具有统计学意义,且两者呈负相关。结论 E-cadherin、vimentin在不同病理分期宫颈癌中的表达存在差异性,进而说明上皮-间质转化在宫颈癌的发生、发展过程中起到关键的作用。
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Ac-SDKP在抑制人肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞分化中的作用
[目的]探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过抑制热休克蛋白27(HSP27)的表达,而抑制转化生长因子1(TGF-β1)诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的分化以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达. [方法]用5ng/mL的TGF-β1诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞株.A549 72h,并分为对照组、TGF-β1诱导组和10-8 mol/L Ac-SDKP干预组.采用倒置相差显微镜观察A549细胞上皮-间质转化中细胞形态变化;免疫细胞化学法检测角蛋白(CK8)、波形蛋白的定位;Western blot法检测E-钙黏蛋白(E-cad)、CK8、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及HSP27以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达. [结果]在TGF-β1的诱导下,A549细胞向肌成纤维细胞的形态转变,伴随着上皮标志物CK8、E-cad降低,分别是对照组的40％和50％,而间质细胞标志物波形蛋白、α-SMA表达增强,同时伴随HSP27及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增强,分别是对照组的1.9倍、1.8倍、1.9倍以及2.2倍、2.5倍(P＜0.05).给予Ac-SDKP干预后,CK8、E-cad表达上调,分别是TGF-β1的诱导组的2.6倍、2.0倍;而波形蛋白、α-SMA、HSP27及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达明显降低,分别是TGF-β1的诱导组的68％、66％、74％以及66％、44％(P＜0.05). [结论]Ac-SDKP能够通过对HSP27表达的调节,而抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化及胶原蛋白的合成.
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N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对人肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞转化的调节作用
目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的ROCK/SRF/α-SMA信号转导通路活化的调节,阻抑肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化,即上皮-间质转化(EMT),进而发挥其抗(矽)肺纤维化的作用.方法:培养人A549肺泡Ⅱ型上皮细胞株,免疫细胞化学显色检测角蛋白、波形蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；免疫印迹检测E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白及Rho相关卷曲蛋白激酶(ROCK)、血清反应因子(SRF)、α-SMA及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达；Real-Time PCR检测ROCK、SRF、α-SMA的表达情况.结果:在TGF-β1的诱导下,上皮细胞向肌成纤维细胞的形态改变,伴随着上皮标志物角蛋白、E-cad降低,而间质细胞标志物波形蛋白增高,α-SMA表达并增多.与对照组相比,TGF-β1诱导刺激组ROCK、SRF、α-SMA蛋白和基因表达水平上调,Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达上调.给予ROCK阻滞剂Y-27632、Ac-SDKP干预后,ROCK、SRF、α-SMA及Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达显著降低.结论:Ac-SDKP通过阻断TGF-β1介导的ROCK/SRF/α-SMA信号转导通路,阻抑肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化及胶原的合成,进而发挥其抗(矽)肺纤维化的作用.
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表皮生长因子受体在甲状腺乳头状癌中的表达及其与上皮-间质转化的关系
目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在甲状腺乳头状癌中的表达及其与上皮间质转化的关系.方法:采用免疫组织化学EnVision法检测EGFR、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)在44例甲状腺乳头状癌组织、癌旁组织中的表达,并分析其与甲状腺乳头状癌临床病理参数的关系及EGFR与E-cadherin和vimentin的相关性.结果:44例甲状腺乳头状癌中,EGFR、E-cadherin和vimentin阳性表达率分别为68.2％(30/44)、79.5％(35/44)和63.6 ％(28/44),与癌旁组织[6.8 ％(3/44)、4.5 ％(2/44)和9.1％(4/44)]比较,差异有统计学意义(x2 =35.35,P=0.00;x2=50.78,P=0.00;x2=28.59,P=.00).甲状腺乳头状癌组织中EGFR表达与E-cadherin呈负相关(r =-0.306,P=0.043),与vimentin呈正相关(r=0.595,P=0.000).在伴淋巴结转移患者中和不伴淋巴结转移患者中EGFR、E-cadherin和vimentin表达差异均有统计学意义(x2分别为7.79、5.81及4.32,P均＜0.05).结论:甲状腺乳头状癌中EGFR表达升高伴随E-cadherin下调和vimentin上调,它们的变化可能与上皮-间质转化相关,并可能在甲状腺乳头状癌的淋巴结转移中起重要作用.
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上皮-间质转化在克罗恩病肠道纤维化中的作用
克罗恩病肠道纤维化是透壁性的,其可侵蚀整个壁层组织.尽管在临床上克罗恩病的发展与纤维化形成之间的关系已得到证实,但对形成纤维化的机制仍在探索之中.近有研究表明,上皮-间质转化(EMT)是克罗恩病肠道纤维化形成的一个重要途径.此文旨在对EMT在克罗恩病肠道纤维化中作用的研究作一综述.
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上皮-间质转化在心脏发育和损伤中的作用
上皮-间质转化(EMT)即上皮细胞经历多重生物化学改变以获得间充质细胞表型的过程.EMT在心脏生成及发育过程具有重要作用,心内膜EMT参与了心脏瓣膜形成和心脏腔室的分隔,而心外膜细胞经历EMT可发育成多种心系细胞.然而,这种被认为只在胚胎发育中存在的机制在成体心脏损伤过程中可以被激活,可促进心肌纤维化,使心肌收缩功能下降.该文对EMT在心脏发育和病理过程中的作用及其分子调控机制的研究进展予以综述.
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STAT3加重TGF-β1诱导的肝癌细胞上皮-间质转化的发生
目的 探讨IL-6/JAK/STAT3和Smad3/TGF-β1信号通路在肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)发生过程中的作用.方法 分别予 TGF-β1、IL-6、AG490刺激人肝癌细胞株(HepG2、Bel7402、M HCC97H、HCCLM3)后,qPCR检测Snail、STAT3的mRNA表达水平,蛋白质免疫检测p-STAT3/STAT3、p-Smad3/Smad3、TGF-β1以及EMT相关分子标志物Snail、E-Cadherin、Vimentin的蛋白表达水平.结果 TGF-β1可以诱导 HepG2细胞 EM T 的发生,下调 E-Cadherin的表达,上调Vimentin、Snai的表达.IL-6在肝癌细胞中通过刺激STAT3,激活Smad3/TGF-β1通路,进而上调EMT 相关分子标志物Snail、Vimentin的表达.AG490(一种JAK2的特异性抑制剂)抑制p-STAT3/STAT3、p-Smad3及EMT相关分子标志物Snail的表达.结论 STAT3在 TGF-β1诱导的肝癌细胞 EMT 发生过程中作为一个正向调控因子,IL6/JAK/STAT3和Snail/Smad3/TGF-β1信号通路协同促进肝癌细胞EMT的发生.
关键词： 肝细胞癌 上皮-间质转化 信号转导和转录活化蛋白3 转化生长因子-β1 -
MicroRNA-21在胃癌细胞中促进上皮-间质转化的研究
目的 探讨MicroRNA-21在胃癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制.方法 利用Lipofectamine 2000脂质体将miR-21 mimics、miR-21 inhibitor转染入AGS细胞中;Real-time聚合酶链反应(RT-PCR)法测定AGS细胞内miR-21的表达;采用划痕法、Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting方法柃测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达的表达变化.结果 AGS细胞转染miR-21 mimics后,细胞的迁移和侵袭能力均高于对照组(P＜0.05),Western blot结果显示E-Cadherin、PTEN表达下降,Vimentin表达升高;AGS细胞转染miR-21 inhibitor后,细胞的迁移和侵袭能力均低于对照组(P＜0.05);E-Cadherin、PTEN表达升高,Vimentin表达降低.结论 miR-21可以诱导AGS胃癌细胞迁移和侵袭.E-cadherin和PTEN表达下调和上调Vimentin可能是miR-21作用的分子机制.miR-21在胃癌肿瘤转移中可能起着重要作用,可能成为胃癌治疗的一个潜在靶点.
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PIAS1调控炎症微环境诱导的胃癌上皮-间质转化的实验研究
背景：作为炎症网络调控的重要介质，STAT活化抑制蛋白1（ PIAS1）在胃癌组织中低表达，并与疾病进展相关，但具体机制还有待研究。目的：探讨PIAS1对炎症微环境下胃癌上皮-间质转化（ EMT）的影响。方法：构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-null并转染胃癌细胞株SGC-7901，以RT-PCR法和蛋白质印迹法分别验证PIAS1 mRNA和蛋白表达。随后将SGC-7901细胞分为IL-6治疗组、Ad5/F35-PIAS1﹢IL-6治疗组、Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组，以MTT法测定细胞增殖率，细胞划痕实验和Transwell侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法测定E-cadherin、Snail、Twist、Vimentin、P-p38MAPK 蛋白表达。结果：转染 Ad5/F35-PIAS1可明显上调 SGC-7901细胞中PIAS1 mRNA和蛋白表达。与IL-6治疗组和Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组相比，Ad5/F35-PIAS1﹢IL-6治疗组细胞增殖率、细胞迁移和侵袭能力均显著下降（ P﹤0.01），Snail、Twist、Vimentin、P-p38MAPK蛋白表达显著降低（P﹤0.01），E-cadherin蛋白表达显著增高（P﹤0.01）。而IL-6治疗组和Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组上述指标相比差异均无统计学意义（ P﹥0.05）。结论：PIAS1可抑制胃癌细胞在炎症微环境下发生的EMT，进而可能在抑制肿瘤侵袭与转移的过程中发挥重要作用。
关键词： 胃肿瘤 上皮-间质转化 炎症微环境 活化STAT的蛋白抑制物 白细胞介素6 -
核转录因子CDX2抑制胃癌细胞迁移、侵袭与逆转上皮-间质转化有关
背景:尾型同源盒转录因子2(CDX2)是一种肠上皮细胞特异性核转录因子,正常胃黏膜组织不表达CDX2,而肠化生、异型增生和胃癌组织中存在CDX2异位表达.近年研究发现CDX2在胃癌中起抑癌基因作用.上皮-间质转化(EMT)与恶性肿瘤的侵袭、转移密切相关.目的:探讨CDX2对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响与EMT的关系.方法:分别将CDX2过表达质粒和干扰质粒转染入低表达和高表达CDX2的人胃癌细胞株MKN-45和AGS中,以划痕试验检测各组细胞迁移能力,Transwell小室细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法检测EMT标记物表达.结果:过表达CDX2能显著抑制MKN-45细胞的迁移、侵袭能力,并上调上皮标记物E-cadherin表达,下调间质标记物vimentin表达(P＜0.05);而沉默CDX2表达能显著增强AGS细胞的迁移、侵袭能力,下调E-cadherin表达,上调vimentin表达(P＜0.05).结论:CDX2表达水平改变可影响胃癌细胞的迁移、侵袭能力,并参与EMT的调控,其对胃癌细胞迁移、侵袭的抑制作用可能与逆转EMT有关,具体分子机制有待深入研究.
关键词： 胃肿瘤 尾型同源盒转录因子2 上皮-间质转化 细胞迁移 肿瘤侵润 -
Syndecan-1对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Syndecan-1是表达于上皮细胞表面的一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,在多种肿瘤细胞中的表达下降,与肿瘤的多种生物学行为密切相关,但其在细胞水平上对结直肠癌发展的作用目前尚无深入的研究.目的:评估Syndecan-1对人结肠癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨可能的分子机制.方法:分别将Syndecan-1高表达质粒和Syndecan-1 siRNA转染人结肠癌细胞株SW620和SW480,分别以转染空载质粒或无关序列作为阴性对照.采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮细胞间质转化主要分子标记物E-cadherin的蛋白表达.结果:与阴性对照组相比,转染Syndecan-1高表达质粒的SW620细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,同时E-cadherin表达升高;转染Syndecan-1 siRNA的SW480细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显升高,同时E-cadherin表达降低.结论:Syndecan-1能抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与上皮细胞间质转化有关.
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microRNA 调控肝星状细胞生物学行为在肝纤维化形成中的作用
肝纤维化是对多种损害因素引起的慢性肝损伤所进行的修复反应。肝星状细胞（HSC）激活、增殖是肝纤维化发生、发展的关键环节。近年研究发现，微小 RNA（miRNA）参与调控 HSC 激活、增殖等相关信号通路。本文就 miRNA 调控 HSC 生物学行为在肝纤维化中的作用作一综述。
