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miR-224在肿瘤中的研究进展
Micro-RNAs（miRNAs）是一类参与转录后基因表达调控的非编码单链 RNA 分子。microRNA-224（miR-224）作为 micro-RNAs 家族的一员，参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、浸润及转移等过程，在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。miR-224在某些肿瘤中高表达，如肝癌、乳腺癌、结直肠癌、宫颈癌等；在某些肿瘤中低表达，如前列腺癌和卵巢癌。近年来研究发现，miR-224的异常表达与肿瘤的临床特征及预后有关。以下将对 miR-224在肿瘤中的作用、与临床预后关系及治疗作一综述。
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miR-224在肿瘤中的研究进展
Micro-RNAs（miRNAs）是一类参与转录后基因表达调控的非编码单链 RNA 分子。microRNA-224（miR-224）作为 micro-RNAs 家族的一员，参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、浸润及转移等过程，在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。miR-224在某些肿瘤中高表达，如肝癌、乳腺癌、结直肠癌、宫颈癌等；在某些肿瘤中低表达，如前列腺癌和卵巢癌。近年来研究发现，miR-224的异常表达与肿瘤的临床特征及预后有关。以下将对 miR-224在肿瘤中的作用、与临床预后关系及治疗作一综述。
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miRNA 在胰腺恶性肿瘤临床诊治中的意义
胰腺癌因其发病率高、恶性程度高、预后差等特点受到了广泛的关注。早期诊断率低、化疗耐药性高和死亡率高是胰腺癌诊治中亟待解决的主要问题。研究表明 miRNA 通过基因转录调控细胞周期影响细胞的增殖、分化、凋亡和转移，对肿瘤形成起到重要作用，同时指出 miRNA的表达水平与人类肿瘤的发生进展、鉴别、肿瘤生存期、药物耐药性及靶向治疗都有着密切关系。因此，研究 miRNA 在胰腺癌发病中的作用机制及临床诊治意义引起了众多研究者极大的兴趣。这篇文章利用现有知识讨论 miRNA 在胰腺癌的发生发展机制、诊断、治疗和预后中的临床意义。
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miR-214对人肝细胞癌增殖能力影响的体外实验研究
目的探讨微小 RNA（miR）-214对肝细胞癌（肝癌）增殖能力的影响及其相关机制。方法应用终浓度50 nmol/L 的 miR-214模拟物 mimics 及其阴性对照 mimics 分别转染 MHCC97L 肝癌细胞建立 M214组、阴性对照组（NC214组），另设未转染对照组（Ctrl 组）。采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测3组肝癌细胞 miR-214含量。采用细胞计数试剂盒（CCK）-8法检测细胞增殖抑制率，平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞术检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法（Western blot）检测 c-myc、Bax、B 细胞淋巴瘤（Bcl）-2蛋白表达。3组比较采用单因素方差分析，两两比较采用 LSD-t 检验。结果 M214组 MHCC97L 细胞 miR-214的含量为 Ctrl 组的（2536±7）倍，差异有统计学意义（LSD-t=58.75，P<0.05）。M214组24、48、72 h 时细胞增殖抑制率分别为（15.33±0.62）%、（24.07±0.75）%和（41.02±0.91）%，与 Ctrl 组比较差异有统计学意义(LSD-t =14.64，19.87，31.86；P<0.05)。M214组细胞平板克隆形成数量（5.3±0.7）个/孔，明显低于 Ctrl 组的（37.1±1.0）个/孔(LSD-t =-12.51，P<0.05)。M214组细胞凋亡率（42.1±3.2）%明显高于 Ctrl 组的（7.0±0.7）%(LSD-t=35.66，P<0.05)。M214组 c-myc、Bcl-2蛋白表达量降低，Bax 蛋白表达量升高。结论miR-214可能通过下调 c-myc 蛋白表达及 Bcl-2/Bax 比值抑制人肝癌细胞的增殖能力。
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急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征相关微 RNA 研究进展
微 RNA（miRNA）是一组高度保守的长度约22个核苷酸的非编码 RNA，通过靶定相应的互补序列导致 mRNA 的沉默或者抑制翻译以调节基因和蛋白的表达。急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征（ALI ／ARDS）的发病机制错综复杂，涉及失控性炎症反应、细胞凋亡及肺泡液体清除异常等多个层面，而且各个层面相互影响形成复杂的细胞网络和细胞因子网络，其通过不同的信号转导通路调控机体炎症反应。ALI 发病过程中 miRNA 表达异常，miRNA 可通过与靶 mRNA 部分结合在转录和转录后水平调节靶基因表达，参与 ALI 的整个发病过程。本文总结了国内外 ALI 发病过程中相关miRNA 的研究进展，旨在寻找和验证 miRNA 在 ALI 炎症激活和信号转导途径中的作用，为 ALI 的诊疗提供新靶点。
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微小RNA-16调控卵巢上皮性癌细胞增殖、侵袭及凋亡的体外研究
目的 探讨微小RNA-16(miR-16)调控卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞增殖、侵袭及凋亡的作用及机制.方法 脂质体介导miR-16成熟体模拟物及相应的阴性对照片段转染人卵巢癌细胞SKOV-3,分别作为转染组、阴性对照组.实时荧光定量PCR技术检测各组细胞中miR-16的表达,蛋白印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、凋亡抑制蛋白bcl-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝法、5-乙炔基-2’脱氧尿苷(EdU)标记法测定细胞的增殖能力,transwell穿膜小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力,流式细胞仪检测血清饥饿及低氧条件下细胞的凋亡情况.结果(1)转染组、阴性对照组SKOV-3细胞中miR-16的表达量分别为125.93±15.30、0.78±0.16,转染组明显高于阴性对照组,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)转染组、阴性对照组SKOV-3细胞中VEGF蛋白的相对表达量为0.58±0.05、1.22±0.03,MMP-2蛋白的相对表达量为0.63±0.03、1.16±0.03,bcl-2蛋白的相对表达量为0.52±0.03、1.19±0.05,转染组各蛋白的相对表达量均明显低于阴性对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(3)转染后第4天,转染组、阴性对照组细胞的增殖抑制率分别为(37.2±6.2)％、(3.6±3.2)％,两组比较,差异有统计学意义(P=0.001).(4)转染组、阴性对照组细胞的增殖率分别为(12.3±0.8)％、(23.4±1.8)％,转染组明显低于阴性对照组,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(5)转染组穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(6±3)个,明显少于阴性对照组的(40±9)个,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(6)血清饥饿及低氧条件培养24 h后,转染组细胞的早期凋亡率[(16.9±2.1)％]、晚期凋亡率[(13.4±3.3)％]均明显高于阴性对照组[分别为(10.3±1.7)％、(3.2±1.8)％],分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);培养48 h后,转染组细胞总凋亡率明显高于阴性对照组(P＜0.01).结论 miR-16可能通过下调卵巢癌细胞中VEGF、MMP-2及bcl-2蛋白的表达,抑制细胞的增殖、侵袭能力,增强其对凋亡刺激的敏感性.
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miR－146b 在沿海居民甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义
目的：探讨 miR－146b 在沿海居民甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义。方法收集2012年1月1日至2015年1月1日手术切除的丹东沿海甲状腺乳头状癌患者组织及癌旁正常甲状腺组织存档蜡块50例，采用实时定量 PCR 检测甲状腺乳头状癌组织与周围正常组织中 miR－146b 的表达，并分析甲状腺乳头状癌组织中 miR－146b 相对表达量与临床病理特征的关系，采用 kaplan－Meier 法进行生存分析。结果沿海居民甲状腺乳头状癌组织中 miR－146b 相对表达量的中位数及全距为1．545（0．442，2．881）高于癌旁组织为1．078（0．312，2．665）（ Z ＝－2．999， P ＜0．01）。 miR－146b 高表达是肿瘤直径≥1 cm、包膜侵犯、淋巴结转移、TNM 分期Ⅲ＋Ⅳ的危险因素（ P ＜0．05）；而性别、年龄、病灶数与 miR－146b 表达水平无关（ P ＞0．05）。不同 miR－146b 相对表达水平的甲状腺乳头状癌患者的生存率差异无统计学意义（ P ＝0．971）。结论miRNA－146b 在沿海居民甲状腺乳头状癌组织中高表达，与甲状腺乳头状癌的发生发展及侵袭转移密切相关。
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食管鳞状细胞癌患者血浆 miR -200c 和 miR -155的表达水平及其临床意义
目的：探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）患者血浆 miR -200c 和 miR -155的表达水平及二者的临床意义。方法选取2012年9月-2013年5月在郑州大学第一附属医院确诊为 ESCC 的患者33例（ESCC 组）和同期在本院行体检健康者30例（对照组）。采用实时定量反转录聚合酶链反应（qRT - PCR）测定两组受检者血浆 miR -200c、miR -155水平，分析二者诊断 ESCC 的价值，并探讨二者与 ESCC 患者各临床病理指标间的关系。结果（1）ESCC组患者血浆 miR -200c、miR -155水平均高于对照组〔（13.87±2.27）与（2.43±3.04），（8.09±1.97）与（1.77±2.74）；P <0.05〕。（2）受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，血浆 miR -200c 和 miR -155诊断 ESCC 的 ROC曲线下面积（ AUC）分别为0.853〔95% CI（0.774，0.931），灵敏度为79%，特异度为88%〕和0.771〔95% CI （0.674，0.867），灵敏度为69%，特异度为81%〕。（3）ESCC 患者血浆 miR -200c 水平与病理分期及是否转移有关（P <0.05）；而与性别、年龄、分化程度、是否手术无关（P >0.05）。ESCC 患者血浆 miR -155水平与各临床病理指标均无关（P >0.05）。结论 ESCC 患者血浆 miR -200c、miR -155较健康者表达水平升高，可作为诊断 ESCC 潜在的生物标志物；血浆 miR -200c 水平与 ESCC 病理进程相关。
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microRNA 调控肝星状细胞生物学行为在肝纤维化形成中的作用
肝纤维化是对多种损害因素引起的慢性肝损伤所进行的修复反应。肝星状细胞（HSC）激活、增殖是肝纤维化发生、发展的关键环节。近年研究发现，微小 RNA（miRNA）参与调控 HSC 激活、增殖等相关信号通路。本文就 miRNA 调控 HSC 生物学行为在肝纤维化中的作用作一综述。
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肠道菌群在肠道稳态和炎症性肠病中的研究进展
炎症性肠病（IBD）包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD），是一类慢性非特异性肠道炎症性疾病，具有不可治愈性和易复发性。近年来肠道菌群在 IBD 发病中的作用日益成为研究热点。本文就肠道菌群在肠道稳态和 IBD 中的研究进展作一综述。
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MicroRNA 在炎症性肠病中的调控机制和临床应用
炎症性肠病（IBD）是一类慢性非特异性肠道炎性疾病，发病机制尚未明确。MicroRNA（miRNA）是一类内源性非编码 RNA，在转录后水平调节目的基因表达。研究发现，miRNA 参与对肠黏膜屏障和黏膜免疫系统的调控，miRNA 表达异常与 IBD 的发生相关。本文就 miRNA 在 IBD 中的调控机制和临床应用作一综述。
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微RNA-101调控人胃癌细胞系增殖、迁移、侵袭的体内外研究
目的了解 miRNA‐101在胃癌组织和细胞中的表达水平，以及对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭力和皮下移植瘤的影响。方法采用实时定量 PCR 分析28份胃癌组织与人胃癌细胞系BGC‐823、SGC‐7901、MKN‐45、AGS ，以及人胃黏膜上皮细胞系 GES‐1中 miRNA‐101的表达水平。构建 miRNA‐101重组腺病毒表达载体。应用 M TT 法检测 miRNA‐101对胃癌细胞增殖能力的影响。应用 Millipore Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力。使用 BALB／c 裸鼠建立胃癌皮下移植瘤模型，并比较肿瘤体积。统计学分析采用 t 检验。结果胃癌组织中 miRNA‐101的表达量为0．661±0．396，低于所对应的癌旁组织中的1．128±0．697，差异有统计学意义（t ＝10．091，P ＜0．01）。胃正常上皮细胞GES‐1中的miRNA‐101表达量高于胃癌细胞系 BGC‐823、SGC‐7901、MKN‐45和 AGS 。 miRNA‐101对MKN‐45细胞的增殖能力呈现明显的抑制作用，对胃癌细胞 BGC‐823、SGC‐7901、MKN‐45、AGS 的迁移和侵袭均有抑制作用。选取 MKN‐45细胞系建立裸鼠皮下移植瘤模型后5周，miRNA‐101重组腺病毒（Ad‐miRNA‐101）组肿瘤体积为（333．56±46．71） mm3，小于空腺病毒‐增强绿色荧光蛋白（Ad‐EGFP）组的（806．41±51．83） mm3，差异有统计学意义（t ＝21．431，P ＜0．01）。结论在胃组织和细胞中， miRNA‐101是一个抑制性 miRNA ，其表达水平下调参与了胃癌的发生和发展，有可能成为胃癌生物靶向治疗的新靶点。
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MiR-146a 在长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞光老化中作用机制的研究
目的：探讨长波紫外线（UVA）诱导人皮肤成纤维细胞（HSF）光老化中 miR-146a 的表达情况，以及上调 miR-146a 表达对其靶基因 Smad4及细胞光老化的影响。方法以10 J/cm2 UVA 照射 HSF （UVA 照射组），分别在0、3、7、14 d 提取 RNA，实时定量 PCR 检测 miR-146a 的表达量。通过慢病毒转染上调 miR-146a 的表达（miR-146a 过表达组），在7 d、14 d 后用荧光显微镜观察转染效率，并通过实时定量 PCR 验证细胞内miR-146a 表达量。空白对照组为正常培养的 HSF（不做任何处理），miR-146a 过表达组为慢病毒转染 HSF 后，再用 UVA 照射。MTT 法检测空白对照组、UVA 照射组、miR-146a 过表达组、miR-146a 过表达组细胞增殖吸光度（A 值），实时定量 PCR 检测各组细胞内老化相关基因 p53、p16和 p21 mRNA 的表达，Western 印迹法检测各组细胞内 Smad4蛋白表达。采用重复测量的方差分析、析因设计的方差分析进行统计学分析。结果重复测量的方差分析显示，随培养时间的延长，UVA 照射组和空白对照组 miR-146a 的表达量均逐渐下降（F =213.840， P <0.01）；UVA 照射组表达量低于空白对照组（F =52.55，P <0.01），且照射时间越长，下调越明显。慢病毒转染HSF 后，细胞内均有较高的荧光表达，miR-146a 过表达组在第7天（10.31±0.17）与第14天时（9.65±0.19）的miR-146a 表达量差异无统计学意义（P >0.05），但较空白对照组（分别为8.33±0.13和7.86±0.11）显著增高，组间差异有统计学意义（F =42.49，P <0.01）。析因设计的方差分析显示，UVA 照射对细胞增殖活性有抑制作用（P <0.01），UVA 照射组、UVA + miR-146a 组细胞增殖均分别低于空白对照组、miR-146a 过表达组（P <0.01）；慢病毒转染上调 miR-146a 的表达对细胞增殖活性也有影响（P <0.01），但 miR-146a 过表达组与空白对照组差异无统计学意义（P >0.05），UVA + miR-146a 组显著高于 UVA 照射组（P <0.01）。实时定量 PCR 和 Western 印迹法结果显示，UVA 照射可上调 p21、p53、p16 mRNA 的表达（均 P <0.01），同时对细胞内 Smad4蛋白表达有促进作用（P <0.01）；UVA 照射组、UVA + miR-146a 组 p21、p53、p16 mRNA 和 Smad4蛋白表达均分别高于空白对照组、miR-146a 过表达组（均 P <0.01），而 miR-146a 过表达组与空白对照组相比差异均无统计学意义（均 P >0.05）， UVA + miR-146a 组均显著低于 UVA 照射组（均 P <0.01）。结论在 UVA 诱导光老化的 HSF 中，miR-146a 的表达受到抑制，上调其表达能够抑制 Smad4的表达，促进光老化细胞增殖，起到抗细胞光老化的作用。
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miRNA-146a 对寻常性银屑病患者外周血CD4+T 细胞的调控研究
目的：研究 miRNA-146a 对寻常性银屑病患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞的调控，探讨 miRNA-146a在寻常性银屑病发病中的作用。方法收集寻常性银屑病患者和健康对照各30例。采用实时定量 PCR 检测外周血 CD4+ T 淋巴细胞 miRNA-146a 表达水平，ELISA 检测血浆干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-4表达水平。免疫磁珠法分选外周血 CD4+ T 淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a 组和 miRNA-146a 抑制物组，分别转染阴性对照 miRNA、miRNA-146a 模拟物和 miRNA-146a 抑制物后进行细胞培养，流式细胞仪检测 Th1和Th2细胞数量，蛋白免疫印迹法和实时定量 PCR 分别检测 IFN-γ受体α（IFN-γRα）、T 细胞表达 T 盒（T-bet）、GATA-3蛋白和 mRNA 的表达，ELISA 检测细胞培养液上清液 IFN-γ、IL-4水平。结果寻常性银屑病患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞 miRNA-146a[（243.81±94.32）%]与血浆 IFN-γ水平[（27.69±7.64）ng/L]较健康对照组[分别为（105.74±22.93）%和（9.75±2.81）ng/L]升高，差异均有统计学意义（t 值分别为6.653和4.237，均 P ＜0.01），且miRNA-146a 的表达与血清 IFN-γ呈正相关（r =0.837，P ＜0.01）。体外 CD4+ T 淋巴细胞培养结果显示，与对照组比较，miRNA-146a 组 Th1数量、T-bet 蛋白和 mRNA 表达、培养上清液 IFN-γ水平均显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，差异均有统计学意义（均 P ＜0.01）；但是，与对照组比较，miRNA-146a 组和 miRNA-146a 抑制物组Th2细胞数量、GATA-3蛋白、GATA-3 mRNA 表达以及上清液中 IL-4水平差异无统计学意义（均 P ＞0.05）。结论 miRNA-146a 可能通过影响 Th1细胞的分化和功能参与对寻常性银屑病患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞的调控，在银屑病发病过程中发挥一定的作用。
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急性脑梗死阿司匹林抵抗患者血小板 miR-19a表达变化及临床意义
目的：探讨急性脑梗死阿司匹林抵抗患者血小板 miR-19a 表达变化及临床意义。方法选取急性脑梗死患者137例，收集临床资料，利用实时荧光定量 PCR 技术检测血小板中 miR-19a 表达，利用血小板聚集实验判别阿司匹林抵抗（AR）和非AR，利用 Kaplan －Meier 法对 AR 和非 AR 无终点事件生存时间进行比较。结果137例急性脑梗死患者中，38例（27．7％）发生 AR，99例（72．3％）为非 AR；AR 患者血小板中 miR-19a 相对表达量为（1．42±0．15），显著高于非 AR 患者血小板中miR-19a相对表达量（1．16±0．14），差异有统计学意义（t ＝8．833，P ＜0．001）；多因素 Logistic 回归分析显示，miR-19a 相对表达量上升和合并2型糖尿病是影响 AR 发生的独立危险因素（OR ＝5．13和1．48，P ＜0．05）；AR 患者中9例（23．7％）发生终点事件，而非 AR 患者中仅有7例（7．1％）发生终点事件，差异有统计学意义（χ2＝7．348，P ＝0．007），Kaplan －Meier 生存分析显示，AR 患者无终点事件中位时间146．8d，非 AR 患者无终点事件中位时间169．6d，差异有统计学意义（χ2＝7．531，P ＝0．006）。结论AR 患者血小板中 miR-19a 表达上调，是影响 AR 发生的独立危险因素，并可能影响患者预后。
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表柔比星对膀胱癌细胞中 miR-21表达的影响
目的：表柔比星是膀胱灌注辅助治疗膀胱癌的常用药物，该研究主要通过研究表柔比星对膀胱癌细胞中 miR-21表达的影响，从而探讨表柔比星治疗膀胱癌的作用机制。方法该研究通过向膀胱肿瘤细胞中加入不同浓度表柔比星培养细胞后，检测细胞中 miR-21表达量的变化情况。结果随着表柔比星浓度的增加，膀胱癌细胞5637中的 miR-21的表达水平下降。观察组不同浓度与对照组比较差异有统计学意义（P ＜0．05），随着表柔比星浓度的增加，人膀胱癌5637细胞中的 miRNA-21的表达水平下降，即呈剂量依赖趋势。结论表柔比星能够抑制膀胱癌细胞中 miR-21的表达，并呈浓度依赖趋势。
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MicroRNAs与心血管疾病的相关性研究
MicroRNAs （miRNAs）是一类高度保守的内源性非编码单链小分子 RNA，通过降解 mRNA或抑制蛋白质翻译而调控基因的表达。已有大量研究证明miRNA在心血管疾病病因、进展、诊断及治疗方面具有重要作用，现对miRNAs与心血管疾病相关性的研究进展作一综述。
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微小 RNA 在二甲双胍抗肿瘤机制中的作用
近年来的流行病学研究提示二甲双胍具有抗肿瘤作用。然而，二甲双胍的抗肿瘤机制尚不明确。微小 RNA（miRNA）可通过调节细胞的分化和增殖发挥抗肿瘤或致肿瘤生成作用。一些体外研究显示二甲双胍可调节多种与肿瘤密切相关的 miRNA 的表达，miRNA 可能参与二甲双胍的抗肿瘤作用。
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微小 RNA：胆管癌中新的调节分子与生物标志物
微小 RNA（miRNA）与胆管癌（CCA）的发生发展、浸润、转移和预后密切相关。CCA 细胞中异常表达的 miRNA 在调控细胞遗传变异、细胞周期、浸润转移能力及其凋亡过程中起重要作用，有望作为 CCA 早期诊断、预后判断的生物学标志物及治疗靶点。
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微小 RNA 与食管鳞状细胞癌
微小 RNA（miRNA）可通过细胞信号转导、上皮间质转化、血管生成等调控机制影响食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移。特定的血清 miRNA 可作为食管鳞状细胞癌诊断、预后的新型肿瘤标志物。近来研究表明 miRNA 可提高食管鳞状细胞癌放疗敏感性甚至逆转多药耐药，具有极大的临床价值。
