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荧光偏振免疫法在血酒精浓度检测的应用
目的建立一种荧光免疫学检测方法,实现实验室快速准确的血酒精浓度检测的定量分析.方法应用荧光偏振免疫分析技术,对临床356例急性酒精中毒的患者血清和12例酗酒交通事故死亡者心包血,进行血清酒精浓度定量检测.结果方法具有较好的重复性,n=20,批内CV=2.36%;n=22,批间CV=5.1%;特异性较好,12例交通事故死亡者,(48内)的心包血均可进行无干扰定量分析.12例死亡者心包血酒精浓度检测结果,低值为53.0mg/dl,高值为239.62mg/dl,均值147.14mg/dl.结论荧光偏振免疫法能为临床急性酒精中毒的诊断、鉴别诊断和治疗过程中的动态观察提供实验室快速可靠的检测数据,同时,还可为酗酒交能事故的法律责任判断,提供实验室科学客观的参考依据.
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首发精神分裂症患者血浆同型半胱氨酸水平的研究
目的 观测首发精神分裂症患者血浆同型半胱氨酸水平,并探讨其与精神病理症状的关系.方法 采用荧光偏振免疫法(FPIA)检测100例首发精神分裂症患者(患者组)和100例健康正常人(对照组)的血浆Hcy水平并比较,并结合阳性和阴性症状量表(PANSS)总分及各因子分进行相关分析.结果 患者组血浆Hcy水平(16.24±7.67μmol/L)高于对照组(10.41±4.51μmol*L),其高同型半胱氨酸血症(HHcy>15μmol/L)的发生率明显高于对照组(x2=13.2,P<0.05).Hcy水平与PANSS总分及阴性症状总分呈正相关(r=0.48/0.45,P<0.05).结论 首发精神分裂症患者的血浆Hcy水平升高,高Hcy水平与精神病理症状(特别是阴性症状)有关.
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荧光偏振免疫法检测血浆同型半胱氨酸水平的临床评价
目的对荧光偏振免疫法(FPIA)检测血浆同型半胱氨酸(HCY)进行方法学评价，并初步探讨其临床应用价值。方法系统研究了FPIA法测定HCY的精密度、灵敏度、稀释线性、校准曲线的稳定性及干扰因素，并分析了其与高效液相色谱法(HPLC)检测结果的相关性。同时应用FPIA法测定了北京地区77名正常人及61例冠心病患者血浆HCY水平。结果 FPIA法检测HCY具有较高的精密度(总CV为1.93%～3.60%)，分析灵敏度为0.21 μmol/L，校准曲线至少可稳定3周，稀释标本回收率为92.28%～102.41%，黄疸、脂血和溶血现象基本不影响测定结果。FPIA法(X)与HPLC法(Y)具有良好相关性(Y=0.977X+0.690，r=0.992)。冠心病患者血浆HCY［(16.83±6.70) μmol/L］明显高于正常人［(9.67±3.00) μmol/L］(P<0.05)。结论FPIA法操作简单、结果准确可靠、自动化程度高，且检测速度快，具有较高的精密度，非常适合普通实验室应用。
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高效液相色谱法和荧光偏振免疫法检测血清万古霉素浓度的比较
目的：比较高效液相色谱（HPLC）和荧光偏振免疫（FPIA）测定血清万古霉素浓度方法的相关性。方法30例患者的血清分别用HPLC和FPIA测定万古霉素浓度，对结果进行相关性分析。结果 HPLC测得万古霉素浓度为（30.04±14.02）μg/ml，FPIA测得值为（29.67±13.96）μg/ml，两种方法差值均值为（0.37±1.46）μg/ml，两种方法的线性相关系数r＝0.9905。结论两种方法测定血清万古霉素药物浓度结果一致。
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难治性肾病综合征环孢素A血药浓度监测结果分析
目的:对济南军区总医院3年期间住院难治性肾病综合征患者全血中环孢素A (CsA)浓度的监测结果加以分析,以便探讨其临床有效性和安全性,为更好地开展CsA浓度 监测提供参考.方法:采用荧光偏振免疫法测定92例肾病综合征患者的224次环孢素谷浓度,分析CsA血药浓度与临床疗效及合并用药之间的关系.结果: 92例难治性肾病综合征患者监测CsA浓度共224例次,平均血药浓度为(134.78±65.26)ng·mL-1((x)±s),达有效浓度(100~150 ng·mL-1)152例次(67.86%),低于100 ng·mL-1有60例次(26.79%),高于150 ng·mL-1有12例次(5.36%).结论:CsA血药浓度受多种因素的影响,对肾病综合征患者进行 CsA浓度监测具有重要的临床意义.
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肝部分切除术对利多卡因药代动力学的影响
目的研究肝脏部分切除对利多卡因在体内药代动力学的影响.方法以肝部分切除术为试验组,以上腹部手术为对照组.硬膜外利多卡因首剂量4mg·kg-1给药后,以2 mg·h·kg-1恒速滴注,于给药后不同时间取静脉血,用荧光偏振免疫法测定利多卡因血浆浓度,计算其药代动力学参数.结果利多卡因试验组和对照组在体内的消除过程均呈一室模型,其主要药代动力学参数t1/2分别为(147.03±67.05),(157.16±33.19)min;C120分别为(2.90±0.57),(2.71±0.38)μg·mL-1;Vd分另别为(1.60±0.40),(1.65±0.26)L;AUC分别为(844.32±295.82),(896.09±240.77)μg·min·mL-1.结论肝脏部分切除术对麻醉剂量利多卡因的体内药代动力学无明显影响.
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我国肾移植患者环孢菌素常规监测的群体药代动力学
目的:考察肾移植患者口服环孢菌素A(Cyclosporine A,CsA)常规监测的群体药代动力学特征,为临床调整个体用药提供新途径.方法:回顾性收集我院745例门诊肾移植病人的1468个全血稳态谷浓度样本,用NONMEM程序分析其群体药物动力学模型,估算米-曼氏模型参数Km和Vm,Km,Vm的个体间变异,以及个体自身变异采用指数模型.定量地考察日剂量、术后时间、体重、环孢菌素A剂型和合并用药等固定效应对药物动力学参数的影响.结果:环孢菌素A的监测值为稳态谷浓度时,其药代动力学能用米-曼氏模型较好地拟合,用建模组数据获得的群体参数在验证组中有较理想的拟合优度.终群体药代动力学参数为:群体标准值Vm为601mg@L-1,Km为2120mg@L-1.Vm的结构模型参数:术后时间和体重用指数模型,系数分别为-0.210和0.1 39;性别和剂型用乘法模型,男性较女性的校正系数为1.078,胶囊剂较水剂的校正系数为0.927.Km的结构模型参数:剂量和术后时间用指数模型,系数分别为-1.67和-0.651;合并应用雷公藤多甙片、保肾片用乘法模型,系数分别为1.170、1.1 30.每日剂量预测值与观察值的平均绝对百分误差为7.72±6.60%.结论:剂量和术后时间对米-曼模型的参数拟合有非常明显的影响.本文估算的参数误差在相对较小的范围内,模型拟合情况较好,可以为临床上制定合理的用药方案服务.
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比较HPLC和FPIA法测定人血清中卡马西平的血药浓度
目的比较治疗药物监测中高效液相色谱法(HPLC)和荧光偏振免疫法(FPIA)测定血清中卡马西平(CBZ)的浓度.方法收集上海华山医院和北京天坛医院服用CBZ的癫痫患者608例的稳态谷浓度血样,分别用HPLC法和FPIA法进行测定,用回归法和图解法考察2种测定方法的相关程度以及环氧化卡马西平(CBZE)的交叉反应率.结果CBZE能干扰CBZ的测定,CBZ测定值FPIA较HPLC法高4.58%(95%置信区间:-5.7%～17.6%).CBZE的交叉反应率随CBZE浓度增加而减小.结论在CBZ治疗药物监测中,对不同测定方法测定差异,应予以关注并作相应调整.
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比较RP-HPLC法与荧光偏振免疫法测定苯巴比妥、卡马西平、苯妥英钠在癫痫患者的血药浓度
目的 建立同时测定人血清苯巴比妥、卡马西平、苯妥英钠(抗癫痫药)浓度的RP-HPLC法,并与荧光偏振免疫法测定方法比较.方法 以乙酸乙酯-二氯甲烷(4:1)为提取溶剂、氯硝西泮为内标,固定相为Diamonsil C18柱(250mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(35:65),紫外检测波长285 nm,流量1.0 mL·min-1;收集患者服药后稳态谷浓度样本,分别用2种方法测定,考察2种方法的相关性.结果 3种药物均具有良好的线性范围,日内、日间RSD均小于8%;苯妥英钠、苯巴比妥2种方法的测定值无统计学差异(P>0.05);而卡马西平2种测定方法比较有统计学差异(P<0.01),卡马西平RP-HPLC法测定值较低.结论 RP-HPLC法适用于治疗药物浓度监测.
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荧光偏振免疫法测定血中依替米星的浓度
目的:探索应用荧光偏振免疫法测定依替米星血药浓度的实验方法,考察该方法测定依替米星的可行性.方法:使用庆大霉素荧光偏振免疫试剂盒,用TDx对依替米星进行测定.结果:本方法能够检测依替米星的血药浓度,回归曲线为Y=0.439X+0.1772,r=0.9981,在0.5～20μg·mL-1,浓度范围内线性关系良好.日内、日间标准偏差均小于10%,低、中、高不同浓度的加样回收率分别为(93.12～9,74)%,(102.41～2.73)%,(89.50～1.45)%.结论:本方法灵敏度高,操作简便,检测时间短,可以用于临床快速检测依替米星的血药浓度.
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7种治疗药物1580例次监测结果分析
目的:了解患者体内血药浓度,以便调整用药方案,实行个体化给药.方法:7种药物以荧光偏振免疫法进行检测.结果:7种药物进行1580例次监测,达有效血药浓度的1035例次,占总数65.51%;未达有效血药浓度的382例次,占总数24.18%;达中毒血药浓度的163例次,占总数10.31%.结论:监测结果显示,临床不合理用药占相当大比例,提示临床加强治疗药物监测重要性和必要性的认识,实行个体化给药,保证患者用药安全、有效,发挥药物的佳效应.
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HPLC-MS/MS和FPIA法测定全血中环孢素浓度的比较方法学
目的 建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血中环孢素(CsA),并与荧光偏振免疫法(FPIA)进行比较.方法 液质联用法:Waters Ouattro Premier串联质谱检测器,采用Symmetry C_(18)色谱柱(2.1 innl × 150 mill,5 μm),以含有10 mmol·L~(-1)乙酸铵-0.1%甲酸溶液0.1%甲酸甲醇溶液为10:90,流速0.25 mL·min~(-1),采用多反应监测进行定量,血样处理:采用乙腈沉淀蛋白,分析时间为5 min.并收集162人份临床使用CsA的重症肌无力患者的血样分别用HPLC.MS/MS及FPIA法测定并进行评价.结果 HPLC-MS/MS:CsA在人血中50～1 000 μg·L~(-1)内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RsD%)均小于10%.2种方法测定患者血样,HPLC-MS/MS结果大多数低于FPIA法.结论 2种测定方法的相关性较差,串联质谱法方法用于监测CsA血药浓度特异性好,灵敏度高,经济,可适性强.与FPIA法相比,对CsA的母药有高度的选择性,并能够提高分析的灵敏度.
关键词： 环孢素 高效液相色谱法-质谱联用 荧光偏振免疫法 治疗药物监测 -
大剂量甲氨喋呤在急性白血病患儿体内的群体药动学
目的考察大剂量甲氨喋呤(HDMTX)在儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)的群体药动学(PPK)特征.方法18例患儿随机接受3种HDMTX方案共43例次,1 g·m-2静滴36 h,3和5 g·m-2静滴24 h分别为14,16和13例次.用荧光偏振免疫法(FPLA)测定MTX血浆浓度,用NONMEM软件进行模型拟合和群体药动学参数的计算.结果PPK模型为:中央室的清除率(CL1)=6.50×100.016 0×(Age-10)(L·h-1·m-2),室间清除率(CL2)=0.169(L·h-1·m-2),中央室的表观分布容积(V1)=16.2×100.002 36×(Age-10)(L·m-2),周边室的表观分布容积(V2)=1.96×100.0130×(145-Height)+0.082 7×(Age-10)(L·m-2).CL1,CL2,V1,V2的群体标准值(个体间RSD)分别为6.50 L·h-1·m-2(16.2%),0.169 L·h-1·m-2(极小),16.2 L·m-2(极小),1.96 L·m-2(21.1%).大多数患者的拟合值与观测值接近,拟合较好.结论患者的年龄、身高对PPK参数有影响,本试验估算的参数误差在相对较小的范围内,模型拟合情况较好,可以为临床制定个体化用药方案服务.
关键词： 急性淋巴细胞性白血病 甲氨喋呤 荧光偏振免疫法 群体药动学 -
HPLC测定人血清苯巴比妥、卡马西平、苯妥英钠浓度及其与FPIA法测定结果的比较
目的 建立能同时测定人血清苯巴比妥(PB)、卡马西平(CBZ)、苯妥英钠(PT)3种药物浓度的高效液相色谱(HPLC),并与常规荧光偏振免疫法(FPIA)测定结果进行相关性分析.方法 以乙酸乙酯-二氯甲烷(4:1)为提取溶剂,固定相Diamonsil C 18柱(4.6mm×250mm,μm),流动相为乙腈-水(40:60),紫外检测波长285nm,流速1.0mL·min -1.收集癫痫患者服药后稳态谷浓度血样,分别用HPLC和FPIA法测定,考察2种方法的相关程度.结果 PB,CBZ,PT的标准曲线范围分别为1.0～45.0,0.1～15.0,1.0～25.0mg·L -1,低检测浓度分别为0.5,0.05,0.5mg·L -1,提取回收率分别为80.2%,78.2%,86.2%,日内和日间RSD均小于9%.PB、PT 2种方法的测定值无统计学差异(P>0.05),但CBZ测定值FPIA法高于HPLC(P<0.01).结论 HPLC操作简单、灵敏、准确,适用于治疗药物监测;PB和P7 2种测定方法有良好的相关性,CBZ不同测定方法,结果存在差异.
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NONMEM法估算3种抗癫痫药对丙戊酸相对清除率的影响
目的用NONMEM法定量考察卡马西平、苯妥英、苯巴比妥对门诊癫痫患者丙戊酸(VPA)的清除率的影响.方法 162例门诊癫痫患者口服丙戊酸达稳态,得到谷浓度数据196点,用FPIA法进行检测.采用NONMEM法估算其相对清除率CL,并定量考察体重、合并用药、丙戊酸钠剂量对清除率的影响.结果按口服一房室开放模型得到体重、丙戊酸钠日剂量、合并用药等因素与清除率CL(L*h-1)之间的拟合模型为:CL=0.004 82 WT+0.110 TAMT+0.394 CBZS+0.108 PHT+0.082 2 PB+0.058 3.其中WT为患者的体重(kg);TAMT的值当VPA剂量大于1.3 g*d-1时为1,否则为0;CBZS的值为卡马西平按体表面积折算的日剂量(g*m-2*d-1);PHT的值当合用苯妥英钠按体表面积折算的日剂量(mg*m-2*d-1)＞150时为1,否则为0;PB的值当合用苯巴比妥按体表面积折算的日剂量(mg*m-2*d-1)＞40时为1,否则为0.结论①使用丙戊酸钠剂量＞1.3 g*m-2*d-1或合并使用卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥均可使VPA的清除率增加;②儿童CL/WT较成人高,提示VPA在儿童体内更易清除.
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荧光偏振免疫法测定健康人血浆同型半胱氨酸水平
目的寻找快速、准确、精密测定血浆同型半胱氨酸(HCY)浓度的方法;研究国内健康人体内HCY水平,及性别、年龄等因素对其影响.方法用荧光偏振免疫法(FPIA)测定HCY血浆浓度.结果 FPIA法低、中、高质控日内RSD分别为0.61%,1.12%和1.52%,日间RSD分别为2.06%,2.54%和3 .75%;回收率在(95.70±1.46)%～(99.90±1.11)%范围内.健康男、女性HCY水平分别为(8. 76±2.81) μmol*L-1和(7.14±2.24) μmol*L-1(P=0.038).年龄≤40 岁组与年龄＞40岁组,HCY水平分别为(7.27±1.98)和(9.25±3.24) μmol*L-1(P ＝0.016).结论 FPIA法测定HCY水平准确可靠,方便易行;HCY水平与性别、年龄有关,男性明显高于女性,随着年龄的增长,HCY水平升高.
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癫痫患者丙戊酸钠血药浓度监测及个体化给药
目的:分析丙戊酸钠治疗癫痫患者的血药浓度监测结果,指导临床合理用药.方法:采用荧光偏振免疫法对198例癫痫患者进行丙戊酸钠血药浓度监测.结果:达到有效血药浓度(50～100μg·mL-1)113例次(57.07%),低于有效血药浓度64例次(32.32%),高于有效血药浓度21例(10.61%).结论:丙戊酸钠在体内血药浓度个体差异大,建议临床使用时需个体化给药.
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含庆大霉素羟基磷灰石涂层假体的体外药物释放试验的药物浓度监测
目的:探讨含庆大霉素羟基磷灰石涂层假体的体外药物释放试验的药物浓度监测.方法:用仿生溶液法制备出含庆大霉素羟基磷灰石涂层假体,在生理盐水体外释放实验中检测其释放的庆大霉素的浓度和持续时间.采用荧光偏振免疫分析法测定假体庆大霉素体外释放的药物浓度.结果:在庆大霉素体外释放药物浓度监测中,按释放的不同时间点进行测定,共分别测得药物浓度值为:1h为3.58 μg·mL-1,24 h为5.36μg·mL-1,48 h为5.45μg·mL-1,72 h为5.14μg·mL-1,120 h为5.13μg·mL-1,192 h为4.64μg·mL-1,216 h为0.44μg·mL-1,240 h为0.31μg·mL-1.结果显示,体外庆大霉素释放速度快,1h内就已经达到了金葡菌的低抑菌浓度(MIC为0.25 μg·mL-1),且持续释放到第10天时,药物浓度仍高于MIC.体外庆大霉素释放药物浓度可持续达药物浓度时间约8 d.结论:开展抗生素药物浓度监测分析,可为临床提高合理用药水平及降低关节置换术后的感染提供可靠的依据,确保临床用药安全、合理、有效.
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卡马西平治疗58例癫痫患者的血药浓度监测
癫痫是由多种病因引起的慢性脑部疾患,以脑部神经元过度放电所致的突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常为特征.卡马两平(carbamazepine,CBZ)是一种广谱抗癫痫药,患者需长期服用以预防和控制癫痫发作.
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104例药物过量病人血苯二氮(艹卓)类药物浓度测定
目的:对疑苯二氮(艹卓)类药物(BZDs)过量患者测定其血BZDs浓度,确定药物过量与BZDs浓度的关系.方法:对急诊疑BZDs药物过量病人104例,采用荧光偏振免疫法测定血BZDs浓度.结果:104例药物过量病人血BZDs药物呈阳性,浓度高低不一.浓度低于1000ng/ml的病人其预后明显好于浓度超过1000ng/ml的病人.结论:采用该法测定BZDs药物血药浓度对临床及时诊断和治疗有一定参考价值,但要注意测定结果并不能代表临床病情的轻重.
关键词： 地西泮 苯二氮(艹卓)类药物 药物过量 荧光偏振免疫法
