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乙型肝炎病毒表面抗原基因变异研究现状
乙型肝炎(乙肝)是全球性重大公共卫生问题之一.据估计,全世界现有乙肝病毒(HBV)携带者3.5亿,其中我国约占1.2亿.乙肝血源疫苗和基因工程疫苗阻断HBV感染的效果已得到广泛认同,但随着乙肝疫苗的普遍推广,对可逃逸HBV中和抗体的表面抗原基因(S基因)变异株感染逐步有所认识.美国、新加坡、日本、英国及世界其他地区大量研究报告显示:联合应用乙肝高效免疫球蛋白和乙肝疫苗母要阻断失败者,DNA直接测序法检测,表面抗原氨基酸置换率约为10%~40%[1~3].据调查,我国单纯乙肝疫苗免疫后携带者表面抗原氨基酸置换率为31%,比未免疫携带者高6倍[4].大量实验研究结果均显示:HBV表面抗原基因变异株同野毒株一样,有致病力和传播能力,虽现有乙肝疫苗对变异株感染的预防效果有待进一步观察,但现有免疫诊断试剂对变异株常出现漏检.乙肝疫苗明显具有免疫选择基因变异株的作用,长期推广乙肝疫苗后,HBV基因变异株有可能在免疫后人群中流行而成为新的公共卫生问题.
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西门子完成对拜耳医药保健集团诊断部收购新业务部门"西门子医疗系统集团诊断部"在美成立
西门子医疗系统集团对拜耳医药保健集团诊断部的收购顺利完成.2007年1月1日,拜耳医药保健集团诊断部与西门子公司于2006年7月收购的DPC(美国诊断试剂公司)被合并为一个独立的业务部门.作为新成立的业务部门,"西门子医疗系统集团诊断部"是西门子(美国)医疗系统集团公司的全资子公司,在全球拥有8,000多名员工.西门子医疗系统集团诊断部的总部位于纽约泰瑞城和加州洛杉矶,在全球免疫诊断试剂市场高居第二位.
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磁性微粒子在放射免疫诊断试剂中的应用
自从1975年Hersh等首先报告了在地高辛RIA中用磁性微粒子作为分离剂以来, 人们对磁性微粒子的制备方法进行了系统的研究, 并取得了显著的成果[1].特别是纳米技术的出现, 更加促进了磁性微粒子的应用.这种磁性微粒子很小, 加至反应液中呈悬浮状态, 待反应平衡后, 放至磁板上可迅速分离, 是目前RIA很有发展前景的方法.本文作了一些研究, 现将其结果报道如下:
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结核中心结核分支杆菌Ag85A蛋白的克隆、表达及其血清学诊断价值的研究
10多年来国内、外学者一直从结核分支杆菌培养滤液中提纯蛋白质抗原进行多方面的研究,由于该方法制备蛋白抗原较烦琐、费时,因此,近年来许多研究者应用大肠杆菌来表达结核分支杆菌基因,简便地获得了大量结核分支杆菌单一的蛋白抗原.Ag85复合物是结核分支杆菌主要的分泌性蛋白,在结核分支杆菌H37Rv株中占分泌蛋白总量的30%,可从早期培养物中分离,是一种热不稳定的蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦分析可分为Ag85A、Ag85B和Ag85C三个组分[1].因此本研究通过基因工程技术构建结核分支杆菌Ag85A表达株,获得重组Ag85A(rAg85A)蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值,为研制更有效的结核病免疫诊断试剂和新型的结核病疫苗奠定了基础.
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纳米生物材料——聚酰胺-胺树状大分子
PAMAM树状大分子是近年来出现的一类新型纳米级的合成高分子,它们高度枝化的结构和独特的单分散特性为这类化合物带来一系列不同寻常的性质和行为,如分子表面极高的官能团密度,分子的球状外形和分子内部大量的无效腔,使PAMAM树状大分子引起了高分子化学、有机化学、超分子化学、医学、药学等领域研究者极大的兴趣.当前,树状大分子的研究主要包括药物及基因载体、免疫诊断试剂、抗病毒试剂、超分子构筑单元、纳米级催化剂、化学反应器等.
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血站体外免疫诊断试剂集中招标采购的尝试
高质量的体外免疫诊断试剂是提高实验检出率、准确性,保证输血安全的关键.因此,对试剂生产厂家的质量保证能力以及所提供的试剂进行质量评估十分必要.为获得高质量的试剂和满意的价格,我站于2002年12月份对检验科所用体外免疫诊断试剂进行了集中招标采购,取得了预期效果.现将体会简介如下,供参考.
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3种免疫诊断试剂对戊型肝炎病毒检出率的比较
作者比较了3种诊断试剂对戊型肝炎病毒(HEV)检出率的影响,现将结果报告如下.1材料与方法从本院住院病人中,用E1(华美生物工程公司)、 E2(东南大学医学院基因工程疫苗研究所)2种试剂各抽查了396例手术前的病人;用E1、 E3(美国Everlong Inc公司)复检E2测出的阳性标本,用E2、E3复检E1测出的阳性标本;另外用3种试剂同时检测肝炎患者血清61例.
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我国几种日本血吸虫病免疫诊断试剂的综合测评
目的了解我国血吸虫病防治工作中使用的免疫诊断试剂的综合质量,为第三次全国血吸虫病流行病学抽样调查查病工具的筛选提供参考.方法聘请血吸虫病免疫诊断及相关专家组成专家评估组,确定综合测评指标.采用单盲法, 由各日本血吸虫病免疫诊断试剂的生产单位对254份血清统一进行测试.计算各试剂盒的敏感性、特异性、Youden指数,收集其他测评指标的相关信息并进行分析.结果参评的8个研究所(公司)的9种试剂盒总体上质量较好,大部分试剂盒的敏感性或特异性在90%以上,其中Youden指数在0.9以上的试剂盒有3个,但并殖吸虫病的交叉反应普遍存在,乙型肝炎的交叉反应在0~30%之间.由于操作以及结果判断失误等其他原因,个别试剂盒的测试结果不够理想.结论参加测评的绝大部分试剂盒的敏感性和特异性都达到了现场应用标准.
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我校教工HBsAg、ALT指标检测结果分析
为了解我校教工乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带情况及HBsAg阳性与谷丙转氨酶(ALT)增高的关系,以便及时提供预防保健依据.现将我校2001年6月,教工体检中有关HBsAg和ALT检测结果,进行整理分析,现报告如下.1 资料和方法1.1 一般资料我校在编教工总人数2107人,参加本次检查的实际人数1586人,其中男性897人,女性689人.1.2 方法应用上海科华生物技术有限公司生产的HBV免疫诊断试剂,严格按照操作规程执行,采用ELISA法,测定HBsAg.采用贝克曼公司生产的自动生化分析仪测定ALT,ALT≥40单位为异常.
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双抗原夹心法与间接法检测抗-HIV(1+2)的比较
抗-HIV(1+2)检测已列入采供血机构筛查的常规项目中,但随着全球HIV感染率的逐渐升高,对HIV抗体检测的准确性急需加强.因此,对体外免疫诊断试剂的质量要求也逐步提高,本站应用新创公司双抗原夹心法诊断试剂检测抗-HIV(1+2),敏感性与特异性较其他间接法有大幅度提高,现将有关数据报告如下.
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弓形虫SAG2/GST融合蛋白在E.coli中的表达条件的研究与纯化
提高弓形虫SAG2/GST融合蛋白在在E.coli中的表达水平并纯化.对诱导温度、诱导物浓度与诱导时间等条件与目的蛋白在细菌裂解上清中的表达量的关系进行了研究.在表达条件优化后,大量制备目的蛋白利用GlutathioneSepharose 4B亲和层析进行初步纯化.纯化产物进一步切胶回收纯化.SAG2/GST融合蛋白在37℃,以0.2mMIPTG诱导4小时后在细菌裂解上清中的表达量高.SAG2/GST融合蛋白在亲和层析后得到初步纯化并在切胶回收后得到电泳纯的SAG2/GST融合蛋白.获得了SAG2/GST融合蛋白在E.coli的佳表达条件.得到了两种纯度的SAG2/GST融合蛋白.为进一步研制弓形虫重组抗原疫苗、弓形虫免疫诊断试剂及单克隆抗体提供了基础.
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4662例孕妇乙肝病毒感染情况调查
1997年1月至2000年6月我们对4662例孕妇的乙肝病毒感染情况进行了调查,现报告如下.1对象及方法1.1对象1997年1月至2000年6月来我院进行产前检查的20~36岁孕妇.1.2方法采用酶联免疫法,应用上海荣盛生物技术有限公司生产的乙型肝炎免疫诊断试剂,严格按照说明书操作规程操作.
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不同厂家抗-HCV诊断试剂盒检测结果的比较
目前,实验室检测抗-HCV的常用方法是ELISA法.因此,抗 -HCV诊断试剂盒的质量将直接影响到检测结果的准确性.卫生部于1994年规定对献血者血样检验的免疫诊断试剂实行批批检定的办法.这对保证免疫诊断试剂的质量有积极意义.尽管这样,免疫诊断试剂仍可能会由于运输或贮存不当等因素而影响其质量.为此,笔者对3个厂家的抗-HCV诊断试剂盒进行了检测比较,结果报告如下.