首页 > 文献资料
-
胚胎脊髓移植联合应用bFGF对脊髓损伤后神经再生的影响
目的:探讨胚胎脊髓(fetal spinal cord, FSC)移植联合外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的应用对脊髓损伤后脊髓神经再生的影响.方法:采用大鼠胸段(T8～Tll)脊髓左侧半横切损伤模型.移植供体为同种异体妊娠14 d的孕鼠,将实验动物分为3组:A组为损伤+FSC移植组;B组为损伤+FSC移植+bFGF组;C组为单纯损伤组.术后l～8周每周行综合行为评分(combined behavioral score, CBS)评定大鼠功能,并取术后8周损伤区脊髓组织0.5 cm作嗜银染色及NF200免疫组织化学检查,分别标记轴突和胶质细胞,进行定量分析,观察神经纤维再生情况.结果:胚胎脊髓移植和外源性bFGF可以防止成鼠脊髓损伤后神经元的萎缩,图像分析发现其作用A、B组优于C组,可以较好的恢复神经元形态.CBS评分提示大鼠神经功能的恢复也有同样趋势,统计学分析治疗组与对照组间有显著性差异.免疫组织化学检查,术后8周A、B组NF着色点较C组密集,且没有明显的胶质增生.结论:脊髓损伤后联合应用胚胎脊髓移植和 bFGF可以防止神经元的萎缩,并且对神经纤维再生及功能的恢复有促进作用.
-
新生大鼠脊髓损伤后再生相关基因文库构建及EST筛选
目的:分析新生大鼠损伤后再生时运动皮层神经元基因表达变化以探讨相关的再生机制.方法:新生大鼠脊髓双侧半横断后即刻单侧胚胎脊髓移植,术后3天用抑制性消减杂交技术筛选大鼠双侧运动皮层神经元差异表达基因,构建差减cDNA文库,通过蓝白斑实验和cDNA斑点杂交验证差异表达基因真阳性克隆,测序分析.结果:发现25个全新的EST片段,在GenBank中登陆并获得注册.结论:新生大鼠皮层神经元轴突中断后的再生过程中有基因表达变化,变化的基因可能与神经元再生有关.
-
MK-801并胚胎脊髓移植促进大鼠脊髓损伤后功能恢复的实验研究
目的:研究胚胎脊髓移植同时应用NMDA受体拮抗剂MK-801观察其是否能够促进半切洞脊髓损伤运动功能恢复.方法:将成年大鼠分为三组,A组:单纯脊髓半切洞损伤组.B组:脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植组,C组:脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植+MK-801组.手术后应用联合行为评分(CBS)、感觉诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)检查.结果:三组CBS得分A组＞B组＞C组,SEP和MEP潜峰时A组＞B组＞C组,统计学分析有显著差异性.结论:通过分析CBS、SEP、MEP结果表明胚胎脊髓移植和NMDA受体拮抗剂MK-801能够促进脊髓损伤后功能恢复.
-
MSCs对大鼠脊髓损伤修复的实验研究
目前治疗SCI的策略有两种:一是在损伤急性期通过减轻或消除继发性病理反应,保护残存的轴突和神经元不再遭受二次损伤,包括给予甲基强的松龙、钙通道拮抗剂、纳洛酮等药物,或予局部低温保护、人工高压灌流等;二是在损伤慢性期促进神经组织的再生和修复,包括手术治疗、移植雪旺细胞、基因治疗、高压氧治疗等.近来的研究显示,多种细胞移植方法可用于促进损伤脊髓再生修复,如:雪旺细胞、胚胎脊髓移植、嗅神经胶质细胞移植、胎胚干细胞、神经干细胞移植、活化巨噬细胞移植等,都显示出脊髓损伤部分缺失功能的修复.而MSCs特有的易于获取、体外分离培养可操作性强、免疫原性弱可用于异体移植等优点,在脊髓损伤的治疗及研究中占有重要地位.
-
胚胎脊髓移植结合神经生长因子对损伤脊髓老年大鼠的修复作用
目的：分析胚胎脊髓移植（ FSC）结合神经生长因子修复损伤脊髓的老年大鼠模型。方法将28只体重250～300 g的健康 Wistar大鼠用于制作脊髓损伤模型，其中和双下肢瘫痪标准相符的24只分为单纯脊髓损伤组（ A组）、脊髓损伤结合外源性神经生长因子组（ B组）、脊髓损伤结合FSC组（ C组）、脊髓损伤结合FSC兼用神经生长因子组（ D组）4组，每组6只。将10μl移植物注入B、C、D组体内。结果 B、C、D组移植手术后2、4、6、8 w的联合行为评分（CBS）、神经元面积均显著低于或高于A组（P＜0.05），D组移植手术后2、4、6、8 w 的CBS、神经元面积显著低于或高于B、C组（ P＜0.05）。结论 FSC结合神经生长因子能够有效修复老年大鼠的损伤脊髓功能。
-
胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴索病理的影响
目的研究胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴索病理的影响.方法将成年大鼠40只均分为四组,A组:单纯脊髓挫伤和半切洞组;B组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植组;C组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+损伤区上下神经根吻合组;D组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+带蒂大网膜移植组.移植后6周,应用行为学检查,观察大鼠功能恢复情况,用光、电镜检查计算轴索和观察轴索病理变化,采用计算机图像分析技术,进行定量分析.结果脊髓损伤后6周A组轴索丢失严重,各组轴索都有不同程度的减少,其减少程度顺序是A组＞B组＞C组＞D组.D组与其它三组比较有显著差异性.残留的轴索数目与神经功能的改善相平行.结论大鼠胚胎脊髓和大网膜移植后对损伤的大鼠脊髓轴索有保护作用并能促进大鼠后肢神经功能的恢复.
-
胚胎脊髓移植联合应用MK-801促进大鼠脊髓损伤后功能恢复
目的研究胚胎脊髓移植并应用N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801能否促进半切洞脊髓损伤后功能恢复.方法将成年大鼠分为3组,A组:单纯脊髓半切洞损伤组;B组:脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植组;C组:脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植+MK-801组.手术后应用联合行为评分(CBS)、感觉诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)检查.结果 3组CBS得分A组>B组>C组, SEP和MEP潜峰时A组>B组>C组,统计学分析差异有显著性 (P<0.05).结论胚胎脊髓移植联合应用NMDA受体拮抗剂MK-801能够促进脊髓损伤后功能恢复.
-
N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓凋亡的影响
[目的]探讨大鼠脊髓损伤后N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后对大鼠脊髓细胞凋亡的影响.[方法]将动物分为大鼠脊髓半切洞损伤后,分为应用胚胎脊髓和MK-801治疗组(A组),大鼠脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组(B组),单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组(C组).手术后1、3、7、14 d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TUNEL),以及Bcl-2蛋白免疫反应表达的测定(免疫组化法).采用计算机图像分析技术,进行定量分析.[结果]A、B、C三组中均发现凋亡细胞及BCL-2蛋白免疫反应阳性细胞,图像分析发现,细胞凋亡率为:C＞B＞A,Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为:A＞B＞C.[结论]大鼠脊髓损伤后应用NMDA受体拮抗剂MK-801和胚胎脊髓移植能抑制脊髓损伤后细胞凋亡.
-
胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用
[目的]研究胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用.[方法]将成年大鼠分为四组,A组:单纯脊髓挫伤和半切洞组;B组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植组;C组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+损伤区上下神经根吻合组;D组:脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+带蒂大网膜移植组.移植后6周,应用行为学检查,观察大鼠功能恢复情况,用光、电镜检查计算轴突和观察轴突病理变化,采用计算机图像分析技术,进行定量分析.[结果]作者发现脊髓损伤后6周A组轴突丢失严重,各组轴突都有不同程度的减少,其减少程度顺序是A组＞B组＞C组＞D组.D组与其它三组比较有显著差异性.残留的轴突数目与神经功能的改善相平行.[结论]大鼠胚胎脊髓和大网膜移植后能增强损伤脊髓轴突再生并能促进大鼠后肢神经功能的恢复.
-
大鼠胚胎脊髓组织移植时联合应用神经生长因子及尼莫地平对受损脊髓功能恢复的影响
尼莫地平(ND)是一种二氢吡啶类钙通道拮抗剂,可有效防止钙内流,改善脊髓继发性损伤.神经生长因子(NGF)可促进神经纤维生长,增强移植物存活、生长、分化的能力.我们在进行胚胎脊髓移植的同时给予NGF及ND,以促进受损脊髓结构和功能的恢复.报告如下.
-
胚胎脊髓移植和损伤区上下神经根吻合对损伤大鼠脊髓神经元的影响
近年来实验方法治疗脊髓损伤取得了许多进展，如实验性胚胎脊髓移植、周围神经移植、神经细胞移植、大网膜移植、神经营养因子的应用等治疗脊髓损伤取得了较好的效果，但实验结果仍然不能令人满意[1,2]。我们拟采用胚胎脊髓移植和损伤区上下神经根吻合的方法，观察手术后对防止成鼠脊髓轴突损伤引起的神经元萎缩的作用。
-
新生大鼠脊髓损伤修复差异表达基因的筛选
目的探讨新生大鼠半横切后再生时运动皮层神经元基因表达变化及其机制.方法新生大鼠脊髓单侧横断后即刻局部接受胚胎脊髓移植,术后3 d用抑制性消减杂交技术筛选大鼠双侧运动皮层神经元差异表达基因,构建差减cDNA文库,通过蓝白斑实验和RNA斑点杂交验证差异表达基因真阳性克隆,测序分析.结果在Genbank中检索出11个上调表达的基因分别与11个不同的蛋白基因有明显同源性,7个下调表达的基因分别与7个不同的蛋白基因有明显同源性.结论新生大鼠运动皮层神经元轴突中断后的再生过程中有基因表达变化,变化基因可能与神经元再生及轴突延长有关.
-
胚胎脊髓细胞悬液在大鼠损伤脊髓中的突触发育过程
目的观察分析胚胎脊髓细胞悬液在损伤脊髓移植区中的突触发育过程. 方法对42只Wistar成年大鼠以改良Allen法(10 g×5 cm)打击脊髓,3天后将孕14天(E14)5只胚胎脊髓细胞悬液(FSCS)20 μl植入损伤空腔,移植后2、4、6、8、10和12周,以组织学、免疫组织化学观察移植物成活、分化及其与宿主之间关系. 结果移植区成神经细胞先展示了胞质突起,随之出现了低电子密度的突触前后膜,突触前、后膜电子密度逐渐增高形成良好的致密突起.突触小泡数量和种类逐渐增多,突触小泡有圆形清亮小泡、椭圆形小泡、颗粒状小泡和扁平小泡-f型.突触的连接方式由单个的胞体-树突突触,出现多个的胞体-树突和树突-树突突触.同时,移植成神经细胞、成少突胶质细胞及成星形细胞的细胞器日渐完善,细胞功能活跃.血脑屏障也随之出现.移植区可见神经微丝(NF)、组织胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性纤维. 结论胚胎脊髓细胞悬液在成年大鼠损伤脊髓内可发育为成熟的突触,显示了FSCS 与宿主脊髓重建突触方式的信息交换的潜在可行性.
-
神经干细胞移植与脊髓损伤修复
众所周知,脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是临床治疗的世界性难题.以往,许多学者曾尝试周围神经移植、胚胎脊髓移植、雪旺细胞移植、大网膜移植及应用神经营养因子治疗脊髓损伤.这些研究虽有很大进展,但都未达到目的.近年,国内外把研究焦点集中到了具有自我复制能力和多向分化潜能的神经干细胞(neural stem cells, NSCs)上,已取得了一些突破.笔者就脊髓损伤修复和NSCs移植及应用前景作一简介.
