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微囊化雪旺细胞移植研究进展
微囊技术为组织/细胞移植开辟了新途径,它有效地避免了移植后的免疫排斥反应,并解决了移植物来源稀少的问题.微囊具有良好的免疫隔离作用,体现在对免疫活性细胞及部分细胞因子的阻挡作用,使移植物能存活下来并发挥其功能.雪旺细胞的分离纯化技术已日渐成熟,目前对微囊化雪旺细胞的研究取得了一定的进展,使异种雪旺细胞的移植在治疗神经损伤方面成为可能,并具有广阔的应用前景.
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碱性成纤维细胞生长因子透巩膜转运至视网膜的实验研究
根据雪旺细胞可分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),而bFGF能延缓视网膜光感受器细胞凋亡的论述,我们对兔白体雪旺细胞移植到巩膜深层的生长情况进行了观察,发现移植后雪旺细胞在巩膜深层可进行分裂增生并存活60 d以上,但对于巩膜深层的雪旺细胞分泌的bFGF能否进入视网膜内尚无确切证据,因此用同位素示踪法对此进行实验观察.
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神经干细胞移植与脊髓损伤修复
众所周知,脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是临床治疗的世界性难题.以往,许多学者曾尝试周围神经移植、胚胎脊髓移植、雪旺细胞移植、大网膜移植及应用神经营养因子治疗脊髓损伤.这些研究虽有很大进展,但都未达到目的.近年,国内外把研究焦点集中到了具有自我复制能力和多向分化潜能的神经干细胞(neural stem cells, NSCs)上,已取得了一些突破.笔者就脊髓损伤修复和NSCs移植及应用前景作一简介.
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移植修复脊髓损伤的研究现状及进展
脊髓是神经发挥作用的中介通路.脊髓损伤及其继发的病理生理效应可直接导致神经功能的丧失,造成组织器官功能的障碍,因而具有相当高的致残率和死亡率.到目前为止,虽然修复人类损伤脊髓仍然是一个非常棘手的难题,但动物实验中已取得的一些令人鼓舞的进展为损伤脊髓的修复带来了新的希望.近年来,在脊髓损伤的实验研究中,周围神经移植、雪旺细胞移植、嗅鞘细胞(OECs)移植、胚胎组织细胞移植、神经干细胞移植以及与基因治疗相接合的联合移植等已成为研究的热点.笔者就上述几种移植治疗研究的现状及其进展综述如下.
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pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞移植对脊髓损伤 c-fos、bcl-2基因表达的影响
创伤性脑损伤的分子生物学研究机制已深入到基因水平,但在分子水平上对脊髓损伤(SCI)的探讨尚少。笔者旨在检测pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞(SC)移植对SCI后早期局部脊髓组织神经细胞中c-fos基因及bcl-2基因表达的影响,并初步探讨其意义。 一、材料与方法 健康SD大鼠80只,体重250~300g,雌雄不拘(由华西医科大学动物中心提供)。随机分为4组,pSVPoMcat微基因(在华西医科大学基础医学院重组DNA研究室构建)修饰的SC组为A组,SC组为B组,损伤组为C组,正常对照组为D组。用质量浓度为5 g/L的戊巴比妥钠麻醉动物后,采用笔者等[1,2]的方法,制备T8平面成鼠半横断损伤模型后将pSVPoMcat微基因修饰的SC、SC及明胶海绵分别移植入A、B、C组。移植术后8 h(SCI继发损害的高峰在伤后6~8 h)[3],迅速取伤段脊髓,D组取相对应(T8)脊髓。将上述标本随机分为甲、乙两组,每组分别含A、B、C、D各10只。用酸性异硫氨氰酸胍-酚-氯方法提取上述脊髓组织中的RNA。然后用地高辛标记探针进行斑点杂交,标记及检测试剂盒为Bohringer Manheim公司产品,c-fos探针和bcl-2探针分别购于北京华美公司及美国Sigma公司。