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血栓弹力图与传统凝血检查监测围关节置换期的凝血状态
背景：骨科关节置换后患者处于高凝状态，容易诱发深静脉血栓得到普遍共识。血栓弹力图作为一种新型的监测凝血状态的检查工具，在骨科的临床应用较少，是否能够通过其监测关节置换围置换期患者的凝血状态，指导临床预防深静脉血栓及用药尚无定论。
目的：探讨血栓弹力图实验与常规凝血功能检查的相关性，评价血栓弹力图在监测骨科关节置换围置换期凝血状态中的应用价值。
方法：回顾性分析2014年11月至2015年8月苏州大学附属第一医院收治的关节置换患者204例，分别收集置换前、置换后血栓弹力图、血凝常规、血小板等数据。将血栓弹力图结果分别与传统的凝血检查，即凝血常规、血小板计数等结果进行相关性分析。
结果与结论：膝关节组活化部分凝血活酶时间与反应时间表现出较好的一致性(φ=0.713，Kappa值=0.647)；凝血酶原时间与反应时间有中等程度的相关性，一致性一般(φ=0.392，Kappa值=0.362)；凝集时间与纤维蛋白原有中等程度的相关性及一致性(φ=0.392，Kappa值=0.488)；凝集块形成速率(α角)与纤维蛋白原有中等程度的相关性及一致性，其余参数相关性及一致性差；而髋关节组除了反应时间与活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间有较弱的相关性和一致性外，其余相关性均差。但是也有部分参数的血栓弹力图与凝血常规凝血趋势一致的比例较高，髋关节组凝集时间与纤维蛋白原结论一致的比例占67.6%，凝集块形成速率(α角)与纤维蛋白原结论一致的比例占78.3%。提示血栓弹力图与常规凝血功能检查有一定相关性和一致性。血栓弹力图参数在数据上的趋向性更一致，血栓弹力图可以作为关节置换围置换期监测凝血状态的一种辅助手段。 -
乌司他丁抑制破骨细胞活化及与基质金属蛋白酶2和9的关系：预防假体骨溶解的潜在价值
背景：推测尿胰蛋白酶抑制剂可能在假体磨屑诱发的机体炎症反应中，对局部组织在缺血缺氧、长期慢性炎症环境下起保护作用，并可抑制破骨细胞的增殖和活化。目的：探讨尿胰蛋白酶抑制剂在核因子κB 受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand，RANKL)诱导RAW264.7细胞分化、增殖及形成成熟破骨细胞中的作用及与基质金属蛋白酶2和9的关系。方法：采用不同浓度尿胰蛋白酶抑制剂(0，500，5000 U/mL乌司他丁)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7后24，48，72 h。实验分为4组：空白组(RAW264.7细胞)、RANKL诱导组(0 U/mL乌司他丁)、500 U/mL乌司他丁组和5000 U/mL乌司他丁组。结果与结论：①M TT法检测结果表明，尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁浓度在0-5000 U/mL对RAW264.7细胞增殖无明显影响(P>0.05)。②抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测结果表明，与RANKL诱导组相比，乌司他丁组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数量均显著减少(P<0.05)，呈时间剂量依赖关系。③免疫组织化学结果显示，与 RANKL 诱导组比较，乌司他丁组的基质金属蛋白酶9染色阳性细胞百分率均显著降低。④W estern blot结果显示，单独RAW264.7细胞仅表达少量基质金属蛋白酶9，加入RANKL 48 h后基质金属蛋白酶9蛋白大量表达，5000 U/mL乌司他丁组培养72 h后,基质金属蛋白酶9蛋白表达显著减少。⑤明胶酶谱分析结果显示，与RANKL诱导组比较，5000 U/mL乌司他丁组基质金属蛋白酶9活性水平均显著降低(P<0.05)。结果表明，尿胰蛋白酶抑制剂对 RANKL 诱导破骨细胞活化具有一定的抑制作用，且可降低基质金属蛋白酶9的表达水平及活性。
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人骨髓间充质干细胞神经元样细胞分化中自噬相关基因Beclin-1的表达
背景：骨髓间充质干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，但是经过长期体外培养后，骨髓间充质干细胞增殖分化能力逐渐丧失，其机制仍不明确。
目的：观察人骨髓间充质干细胞神经元样细胞分化过程中自噬相关基因表达的变化。
方法：利用表皮生长因子诱导人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞，观察其形态变化及生长情况。免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白表达，采用Western blot检测诱导前后人骨髓间充质干细胞自噬相关基因Beclin-1表达的变化。
结果与结论：经诱导后，人骨髓间充质干细胞呈典型神经元样细胞分化，神经元特异性烯醇化酶阳性率为78.7%，胶质纤维酸性蛋白阳性率为8.1%。诱导0.5 h后处理组细胞中Beclin-1的表达水平有所增加，但1 h后开始逐渐降低。说明体外可以诱导人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞，自噬相关基因表达活性在诱导分化早期呈高表达，分化过程中逐渐降低。 -
高黏度骨水泥在修复骨质疏松性胸腰椎骨折中的应用
背景：椎体成形和椎体后凸成形目前已被广泛应用于骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折治疗中，但存在骨水泥渗漏问题，尤其是对于椎体后壁破裂患者更易发生骨水泥渗漏。目的：观察采用高黏度骨水泥及其椎体成形修复骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的疗效。方法：回顾分析采用高黏度骨水泥及其椎体成形修复的20例骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折患者的临床资料，治疗后采用目测类比评分评估腰背部疼痛，ODI评分评估腰背部功能，SF-36健康调查评分表评估生活质量， Frankel评分评估神经功能，影像学观察骨水泥渗漏、肺栓塞、邻近椎体骨折等并发症发生情况，X射线评估伤椎椎体前缘高度恢复。结果与结论：随访12-18个月，患者伤椎椎体前缘高度、腰背部疼痛及功能、生活质量均较治疗前明显改善(P<0.05)，神经症状与治疗前相同；复查X射线及CT见骨水泥弥散良好，发生2例骨水泥渗漏，但无任何临床症状；无骨水泥毒性或过敏反应、肺栓塞、感染、神经损伤或新发骨折等并发症发生。说明高黏度骨水泥应用于骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折可以明显缓胸腰背部疼痛，改善腰背部功能及生活质量，降低骨水泥渗漏风险。
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乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡的干预作用
背景：前期研究发现，乌司他丁对RANKL诱导RAW264.7细胞活化为成熟破骨细胞具有一定的抑制作用，并可降低基质金属蛋白酶9的表达，但其对聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥促成骨细胞凋亡效应是否有干预作用尚不清楚。
目的：探讨乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡及Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA表达的影响。
方法：取第六七代生长状态良好的MC3T3-E1鼠前成骨细胞，分4组培养，骨水泥组加入1 g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液；高、低剂量乌司他丁组在加入1g/L 的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液后，再分别加入5000，500 U/mL的乌司他丁；设置单独培养的细胞为空白对照。MTT法检测细胞增殖活性，茜素红染色检测细胞矿化程度，流式细胞仪检测细胞凋亡率，半定量RT-PCR检测细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA的表达。
结果与结论：与空白对照组比较，骨水泥抑制了MC3T3-E1细胞增殖活性(P<0.05)，促进了细胞凋亡(P<0.05)，在加入不同浓度乌司他丁后，细胞增殖活性逐渐增强(P<0.05)，凋亡率降低(P<0.05)，且呈剂量时间依赖关系；骨水泥降低了细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素表达(P <0.05)，升高了基质金属蛋白酶2表达(P <0.05)，在加入5000 U/mL乌司他丁后，细胞基质金属蛋白酶2表达降低，Ⅰ型胶原、骨钙素表达升高(P<0.05)。骨水泥组无矿化结节，其他组均有矿化结节形成。结果表明乌司他丁对骨水泥诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡具有一定的抑制作用，可促进成骨细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素的生成，并降低基质金属蛋白酶2的表达水平。 -
亚油酸与红细胞急性损伤:人工关节置换后隐性失血的发病机制
背景:隐性失血常见于人工关节置换后,所造成的术后贫血严重影响患者康复,关于隐性失血的原因说法有很多,但机制尚不明确.目的:研究亚油酸对大鼠血液中红细胞的影响,探讨人工关节置换后隐性失血的发病机制.方法:将50只SD大鼠随机分为5组,对照组(n=10)尾静脉注射乙醇溶液;实验组分为4个组(n=10),分别尾静脉注射15,30,60,90 mmol/L的亚油酸溶液,构建体内高亚油酸水平大鼠模型.分别在给药前及给药后24,48,72 h从眼眶静脉采集血液样本检测红细胞计数、血红蛋白质量浓度、谷胱甘肽过氧化物酶活力、总超氧化物歧化酶活力及过氧化氢浓度变化.结果与结论:实验组在给药浓度为60 mmol/L时大鼠红细胞及血红蛋白明显降低,出现显著的隐性失血.在给药后24 h,实验组与对照组相比血红蛋白质量浓度和红细胞计数都降低,且各实验组比对照组变化更显著(P＜0.05);谷胱甘肽过氧化物酶活力、总超氧化物歧化酶活力、过氧化氢浓度均明显降低,实验组与对照组之间变化差异有显著性意义(P＜0.05).给药后48 h,对照组与实验组血液中血红蛋白质量浓度及红细胞计数相对稳定,而谷胱甘肽过氧化物酶活力、总超氧化物歧化酶活力、过氧化氢浓度都明显持续下降,且实验组变化更显著(P＜0.05).说明血液中亚油酸水平的升高可造成血液中红细胞的急性损伤,通过氧化应激反应,导致隐性失血.
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白细胞介素10与沙门菌接合性质粒介导细菌生物膜的形成
背景：既往研究发现接合性质粒pRST98可促进其宿主菌生物膜的形成，携带pRST98的菌株感染细胞和实验动物后，可促进白细胞介素10的分泌和表达。
目的：体外研究不同质量浓度白细胞介素10与接合性质粒pRST98对鼠伤寒沙门菌生物膜形成的相互影响。
方法：体外建立鼠伤寒沙门菌标准株χ3306、突变株χ3337及接合株χ3337/pRST983组生物膜模型，3组分别加入0(空白对照)，1，10，100μg/L白细胞介素10，通过结晶紫染色半定量法、共聚焦激光扫描显微镜分析和扫描电镜观察，比较不同质量浓度白细胞介素10对携带和不携带接合性质粒 pRST98的鼠伤寒沙门菌生物膜形成的影响。
结果与结论：①3组组内比较：与空白对照组比较，1，10μg/L白细胞介素10均能促进鼠伤寒沙门菌的聚集，提高生物膜形成能力，且10μg/L质量浓度效果更明显；100μg/L白细胞介素10抑制鼠伤寒沙门菌生物膜的形成。②3组组间比较：在同一白细胞介素10质量浓度下，接合株χ3337/pRST98组 A570高于标准株χ3306组、突变株χ3337组。结果说明1，10μg/L白细胞介素10可促进生物膜的形成，且在携带接合性质粒pRST98的情况下促进作用更明显。 -
右美托咪啶可减轻骨科止血带所致缺血再灌注诱发的氧化应激和炎性损伤
背景:多项研究表明右美托咪啶可抵抗止血带诱发的缺血-再灌注机体损伤.目的:观察右美托咪啶对骨科止血带所致缺血再灌注诱发的氧化应激和炎性损伤的影响.方法:76例拟行骨科下肢手术的患者随机均分为2组:右美托咪啶组静脉在10 min内给予右美托咪啶,负荷剂量1μg/kg,后改为维持剂量0.5μg/(kg?h)至手术结束,对照组给予等速度、等容量的生理盐水.分别测定并比较上止血带前、松止血带后10,60,120 min各时间点患者血清的丙二醇、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及白细胞介素8的水平.结果与结论:①止血带处理后,与上止血带前相比,松止血带后各时间点2组患者血清丙二醇、乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素8水平显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶含量显著降低(P<0.05);②与对照组相比,右美托咪啶组患者在松止血带后各时间点的血清丙二醇、乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素8水平显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶含量显著升高(P<0.05);③结果说明,右美托咪啶对骨科止血带引起的肢体缺血再灌注诱发的氧化应激和炎性损伤具有一定的保护作用,提示可能是通过上调超氧化物歧化酶水平,减少丙二醇、乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子 α、白细胞介素6和白细胞介素8分泌实现的.
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低强度脉冲超声介导威灵仙干预兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原和转化生长因子β1的表达
背景：研究显示威灵仙可促进软骨细胞增殖，维持和促进软骨细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原；低强度脉冲超声能有效促进软骨细胞增殖、提高细胞膜的通透性，促进药物或基因的传递，从而提高药物的生物学效应。
目的：观察低强度脉冲超声介导威灵仙对体外培养的兔膝关节软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及转化生长因子β1表达的影响，探讨低强度脉冲超声介导威灵仙在软骨损伤修复中的作用及机制。
方法：体外分离培养兔膝关节软骨细胞，取处于对数生长期的2代细胞，随机分为4组：对照组，低强度脉冲超声组，威灵仙组，威灵仙+低强度脉冲超声组，干预3 d后分别采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况，细胞化学染色法分析Ⅱ型胶原分泌情况及Western blot检测转化生长因子β1的表达情况。
结果与结论：干预培养3 d后，与对照组比较，其他3组细胞数量均显著增加(P <0.05)，威灵仙+低强度脉冲超声组细胞数量多；威灵仙+低强度脉冲超声组软骨细胞Ⅱ型胶原表达面积、吸光度值均显著大于对照组(P <0.05)，且其差值大于低强度脉冲超声组、威灵仙组与对照组差值之和；威灵仙+低强度脉冲超声组转化生长因子β1表达水平显著，其相对灰度值显著高于其他各组(P <0.05)。结果提示低强度脉冲超声、威灵仙均可促进体外培养兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原、转化生长因子β1的分泌，二者联用具有一定的协同作用。 -
I型神经纤维瘤病萎缩区椎体终板软骨细胞体外分离培养及表型鉴定
背景：以往主要是针对肋软骨、关节软骨、鼻中隔软骨、耳软骨等透明软骨进行研究，而对人椎体终板软骨的体外培养尚不多见。目的：探讨Ⅰ型神经纤维瘤病伴萎缩性脊柱侧凸患者萎缩区椎体终板软骨细胞体外分离培养的可行性，并对其生物学特性进行观察。方法：对术中取得的7例Ⅰ型神经纤维瘤病伴萎缩性脊柱侧凸患者顶椎区椎体终板软骨采用两步酶消化结合组织块法进行体外分离培养。细胞传代后倒置相差显微镜下观察细胞形态；Ⅱ型胶原免疫组化染色对软骨细胞进行鉴定；MTT比色法测定细胞增殖情况，描绘第2代软骨细胞的生长曲线。结果与结论：软骨组织培养2周后周围开始有软骨细胞爬出，再经1周左右可以传代。随着传代次数的增加，软骨细胞逐渐由多角形、圆形、三角形和不规则形变为梭形，折光性下降。Ⅱ型胶原免疫组化染色可见细胞核周围被染成棕褐色。MTT比色法检测显示，第2代终板软骨细胞的生长曲线近似倒“S”形，在第4-7天进入快速增殖期，细胞呈对数生长；到第8-13天达平台期，细胞增殖停止；从第14天开始出现生长抑制。结果显示采用两步酶消化结合组织块法能够培养出纯度高，活性好的终板软骨细胞。第2代终板软骨细胞在第4-7天活力好，增殖力旺盛，可以作为研究Ⅰ型神经纤维瘤病伴萎缩性脊柱侧凸发病机制的观察点。
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成熟瘢痕组织与正常皮肤脱细胞真皮基质的生物学性能比较
背景：临床上大面积瘢痕患者需要进行多次手术切除瘢痕，这种切除的瘢痕组织是否可再利用成为研究的重点。
目的：比较成熟瘢痕组织与正常皮肤脱细胞真皮基质的组织结构、生物力学性能及生物相容性等指标。方法：①取人成熟瘢痕组织和瘢痕周围正常皮肤，分别制备脱细胞真皮基质，进行组织学及扫描电镜观察，利用万能拉力试验机进行生物力学实验；②将成熟瘢痕组织脱细胞真皮基质与正常皮肤脱细胞真皮基质分别与成纤维细胞共培养10 d，绘制细胞生长曲线；③将成熟瘢痕组织脱细胞真皮基质与正常皮肤脱细胞真皮基质分别置入SD大鼠背部皮下，置入后4，8，12周进行组织学观察。
结果与结论：①两组脱细胞真皮基质内无任何细胞成分，可见许多空隙，成熟瘢痕组织脱细胞真皮基质胶原纤维较正常皮肤松散，排列稍显紊乱；成熟瘢痕组织脱细胞真皮基质的生物力学性能与正常皮肤脱细胞真皮基质相近，有足够的弹性和强度；②两种脱细胞真皮基质上的细胞生长状态无明显差异，生长曲线基本一致；③置入4周时，成熟瘢痕组织脱细胞真皮基质组可观察到较多炎细胞浸润，正常皮肤脱细胞真皮基质组仅见少量炎症细胞浸润，随时间的延长，炎性反应逐渐消失，两组胶原纤维排列规整，植入物内均有小血管长入；④结果表明，瘢痕组织脱细胞真皮基质的组织结构、生物力学性能及生物相容性均十分接近人体正常皮肤。 -
疮灵液载入胶原促进慢性创面的愈合
背景：前期研究表明，疮灵液具有较好的抗炎作用，可抑制血小板聚集及血栓形成，促进伤口愈合。目的：观察将疮灵液载入胶原后对慢性创面愈合的影响。方法：在40只大鼠背部制作慢性创面模型，造模后3 d随机均分为4组，对照组以载0.2 mL生理盐水纱布外敷创面，疮灵液组以载0.2 mL疮灵液纱布外敷创面，胶原组以胶原海绵覆盖创面，疮灵液载入胶原组以载0.2 mL疮灵液胶原覆盖创面。造模时及造模后第3，7，15天测定创面面积，创面分泌物中白细胞总数、白细胞介素6与肿瘤坏死因子α水平，创面肉芽中羟脯氨酸、基质金属蛋白酶1，2，9的水平。结果与结论：疮灵液载入胶原组、疮灵液组造模后第3，7，15天肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶1，2，9水平均低于对照组、胶原组(P <0.01，P <0.05)，造模后第3，7，15天白细胞总数显著低于对照组、胶原组(P <0.01，P <0.05)，前两组间各指标比较差异无显著性意义；疮灵液载入胶原组造模后第3，7，15天羟脯氨酸水平高于其余3组(P <0.05)；疮灵液载入胶原组造模后15 d创面面积显著低于其余3组(P <0.01)；造模后15 d，4组间白细胞介素6水平比较差异无显著性意义。表明疮灵液载入胶原能显著抑制慢性创面炎症细胞增殖与浸润，抑制创面炎症因子与基质金属蛋白酶分泌，促进慢性创面愈合。
