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威灵仙镇痛抗炎药效研究
目的:观察中药威灵仙的镇痛抗炎作用.方法:以威灵仙为研究对象,采用小鼠热板法,小鼠扭体法,耳肿胀法,足跖肿胀法及小鼠毛细血管通透性实验等方法.结果:威灵仙能明显延长热板所致的小鼠舔后肢的时间;极显著地减少小鼠扭体反应的次数;对小鼠耳肿胀及大鼠足肿胀均有显著的抑制作用;降低毛细血管的通透性,显著抑制醋酸所致的小鼠腹腔炎症渗出.结论:威灵仙具有镇痛抗炎作用.
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威灵仙与矮地茶茎的药材应用鉴别
目的 辨别威灵仙与矮地茶两种不同药材,减少临床以假乱真及掺为现象.方法 通过对药材基源、性状、显微、功用等特征进行鉴别.结果 矮地茶茎的颜色性状与威灵仙相近,易混淆,二者主要区别为有节、无节,而功能主治、成分等方面都完全不同,临床上应认真区别不可混用,注意掺入现象.
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基于ITS2条形码的中药材威灵仙与其易混伪品的鉴定
目的 对中药材威灵仙及其易混伪品进行分子鉴定,为控制药材质量稳定和指导临床合理用药提供科学依据.方法 以核基因ITS2片段作为DNA条形码,对威灵仙基源植物及其易混品间的种内,种间序列差异进行分析比较,并构建NJ(邻接)树.通过Schultz等建立的ITS2数据库图及其网站预测ITS2二级结构.结果 威灵仙基源植物ITS2序列长度分别为220 bp和230 bp,由所构建的NJ树图可以看出,威灵仙、棉团铁线莲、东北铁线莲聚在一起,支持率达83%;由三种植物的枝长来看,支持了铁线莲属的分布中心在中国云南、四川等西南地区,以中心向四周散布的论点.比较威灵仙及其易混伪品的二级结构发现,威灵仙的正品来源与其它物种在螺旋区茎环的数目、大小、位置以及螺旋臂由中心环伸出时的转角等方面具有较明显区别.结论 ITS2作为DNA条形码序列能够有效的区别威灵仙药材的基源植物与其易混伪品,具有重要的应用价值.
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全国名老中医王莒生教授巧用药物的临床经验
王莒生教授从事中医临床工作30余年，治病广泛，思路开阔，用药风格独特，治疗用药胆大心细，疗效明显。本文介绍王老临床中巧用及活用芍药、竹茹、威灵仙及乌梢蛇四味中药，给临床人员及研究者以启迪和指导。
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威灵仙化学成分分离鉴定
目的:威灵仙作为临床常用的中药,具有祛风除湿、通络止痛、消骨哽的功效,常用于治疗风湿痹痛,为风湿痹痛要药,亦用于治疗诸骨哽咽,同时具有一定的副作用.近年来发现威灵仙提取物对白血病细胞增殖具有抑制作用,该文旨在研究其化学成分,揭示其治疗疾病的物质基础.方法:将威灵仙药材粉碎后,采用乙醇回流提取,得到粗提物,将其分散于水中后,依次使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取;利用D101大孔树脂,硅胶,LH-20羟丙基葡聚糖凝胶,MCI小孔树脂凝胶,RP-18柱色谱对各提取部位进行分离,并通过1H-NMR,13C-NMR,MS等波谱技术鉴定其结构.结果:从威灵仙药材中分离得到9个化合物,分别鉴定为升麻醇(1),升麻醇-3-O-β-D-木糖苷(2),cimigoside(3),木栓酮(4),(+)-3,3’-bisdemethylpinoresinol (5),5-O-feruloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone (6),阿魏酸(7),丁香酸(8),β-谷甾醇(9).结论:化合物1～6均为首次从威灵仙中分到,其中化合物1～3为首次从铁线莲属中分离得到环菠萝蜜型三萜类化合物.分离得到的化合物进一步丰富了威灵仙的化学成分结构类型,为威灵仙的植物分类、质量控制和药理活性研究提供了新的依据.
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细辛、威灵仙联合应用止痛疗效观察
目的:观察细辛、威灵仙联合配伍治疗几种疼痛的疗效.方法:3种疼痛病证共229例:胃热阴虚型牙痛77例,基本方为玉女煎；风寒凝聚型三叉神经痛76例,基本方为川芎茶调散；风寒湿痹型风湿痛76例,基本药为黄芪、当归、独活、羌活、苍术、薏苡仁、防己.每种疼痛病证都按就诊顺序分别分成4组,每组19例左右:对照组用基本方稍加减；细辛组即基本方加细辛；威灵仙组即基本方加威灵仙；细辛-威灵仙组即基本方加细辛、威灵仙.疗程为两周,分别观察其止痛情况.结果:每组有效率＞84.2％,细辛-威灵仙组有效率＞94.44％ (P =0.000).结论:细辛-威灵仙组疗效佳,说明细辛-威灵仙联合配伍加入应证方药,治疗顽痛疗效明显,为临床用药提供经验.
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牛蒡子、威灵仙提取工艺优选
目的:探讨牛蒡子、威灵仙提取的优化条件.方法:以牛蒡子苷、齐墩果酸含量为指标,确定乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间为影响因素,并以L9(34)正交试验表安排试验.结果:牛蒡子、威灵仙优工艺为用10倍量60%乙醇提取2次,每次1.5 h.结论:优选的提取条件效率高,可增加药材的利用率.
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威灵仙挥发油的超临界萃取工艺优化及GC-MS分析
目的:优选超临界CO2萃取威灵仙挥发油的工艺,并对挥发油成分进行GC-MS分析.方法:以挥发油提取率为指标,通过单因素试验和正交试验考察提取时间、原料粒度、萃取压力和温度对威灵仙挥发油的超临界CO2萃取工艺的影响,并通过GC-MS对威灵仙挥发油中化学成分进行分析.结果:各因素对挥发油得率的影响顺序为萃取压力＞萃取时间＞萃取温度；佳萃取工艺为压力20 MPa,时间1.5h,温度45℃；挥发油得率0.44％.GC-MS分析确认了156种化学成分,占挥发油总含量的85.03％,相对含量＞1％的成分占挥发油总含量的51.78％.结论:超临界CO2萃取法用于提取威灵仙挥发油具有时间短、收率高等优点,较传统的水蒸气蒸馏法提取效率高,优化的工艺稳定可靠,通过GC-MS发现威灵仙挥发油中活性成分原白头翁素.
关键词： 威灵仙 挥发油 超临界CO2萃取工艺 正交试验设计 GC-MS -
威灵仙一种新伪品的生药学和分子生药学鉴别
目的:运用生药学和分子生药学研究思路和方法,对市场上一种威灵仙新伪品进行鉴别,为保障威灵仙药材的安全使用提供实验依据.方法:对威灵仙及其伪品进行性状、显微等生药学研究,描述威灵仙及其伪品的生药学鉴别特征.对威灵仙及其伪品的分子生药学研究,通过试剂盒提取样品的DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增及双向测序获得其内转录间隔区(ITS)序列,根据美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库中已收录的ITS序列进行相似度分析及DNA条形码溯源.结果:威灵仙及伪品的生药学鉴别特征主要有外皮颜色以及有无茎节等;横切面显微特征区别主要为有无髓.分子生药学研究表明,该伪品的基原植物为紫金牛科紫金牛Ardisia japonica.结论:该威灵仙伪品为綮金牛的茎及根茎,该伪品与威灵仙在成分、功能主治方面差别较大,在临床应用上应严格区分.
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多指标正交优选加压酒制威灵仙炮制工艺
目的:探讨酒制威灵仙的炮制工艺.方法:采用正交设计并使用模糊概率法进行多指标综合评价,用以筛选佳炮制工艺.结果:筛选出佳炮制工艺为威灵仙切短段(10-15mm)、闷润30min、每100克药材使用30mL 56％的白酒、0.070MPa高压蒸制30min,验证平均模糊概率值为0.87(RSD=3.90％).结论:酒制威灵仙的炮制工艺稳定可靠,为更好地控制酒制威灵仙的质量提供了科学依据.
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UPLC法测定淫羊藿-威灵仙药对4种化学成分含量
目的:建立补肾止痛药对淫羊藿-威灵仙中淫羊藿苷、朝藿定C、宝藿苷-Ⅰ、齐墩果酸4种成分的UPLC含量测定方法,研究配伍提取对此4种成分提取含量的影响.方法:采用UPLC梯度洗脱技术.色谱柱:ACQUITYUPLC(R) BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;柱温:30℃;流速0.3mL/min.淫羊藿苷、朝藿定C、宝藿苷-Ⅰ以270nm为检测波长,齐墩果酸检测波长为205nm.结果:淫羊藿-威灵仙药对中淫羊藿苷、齐墩果酸等4成分均呈良好线性关系(r≥0.999);平均加样回收率(n=6)为99.28％-100.87％(RSD＜3％,n=6).淫羊藿、威灵仙配伍提取,淫羊藿苷、齐墩果酸含量有少量增加,而朝藿定C和宝藿苷-Ⅰ含量无明显变化.配伍提取后用SPSS 16.0统计软件数据分析:淫羊藿苷P＜0.05,齐墩果酸P＜0.01.结论:该方法简便快捷、结果准确可靠,可用于淫羊藿-威灵仙药对及其制剂的质量控制,并为淫羊藿-威灵仙的临床配伍应用及其进一步研究提供了科学依据和支持.
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中药止痛作用与中医证型相关性的实验研究
目的:研究中药止痛作用与中医证型的相关性.方法:将大鼠随机分成风湿痹痛证实验组与瘀血痛证实验组,再分别将2个实验组随机分为正常对照组、模型组、桂枝组、三七组、威灵仙组、甘草组和冰片组,采用酶联免疫(ELISA)法检测各组大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(1L-8)、前列腺素E2(PGE2)的水平.结果:在风湿痹痛证实验中,与模型组比较,威灵仙组大鼠Ⅱ-2、PGE2水平明显降低(P＜0.01);在瘀血痛证实验中,与模型组比较,三七组大鼠IL-2、IL-8、PGE2水平明显降低(P＜0.01).结论:中药的止痛作用与中医证型具有一定相关性.
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威灵仙多糖的抗氧化活性研究
目的:研究威灵仙多糖(CCP)的抗氧化活性.方法:①体外测定 CCP 清除 Feton 体系产生的羟基自由基(·OH)、邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2-·)的活性;②CCP对 H2O2诱导的小鼠红细胞自氧化溶血的影响;③CCP对小鼠 CCI4 急性肝损伤的影响.结果:威灵仙多糖具有清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的作用,降低 H2O2 诱导的红细胞氧化溶血率,可显著提高肝损伤小鼠血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,降低丙二醛(MDA)含量及肝脏指数.结论:威灵仙多糖在体内外均具有显著的抗氧化作用,其抗氧化作用与清除氧自由基有关.
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骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎大鼠关节软骨Wnt/β-catenin信号通路的影响
目的:通过骨灵膏(GLG)及其拆方制剂对骨关节炎关节软骨组织Wnt/β-catenin信号通路作用的研究,探讨GLG及其拆方制剂对骨关节炎的作用机制.方法:选用60只雌性SD大鼠随机分为骨灵膏组、骨膏(GUG)组、灵膏(LG)组、塞来昔布组、模型组及正常组6组,每组10只,除正常组外其余各组采用冷固法(寒冷刺激结合石膏固定的方法)6周建立骨关节炎模型,造模成功后除正常组和模型组分别给予0.9％氯化钠溶液灌胃外,其余组分别给予GLG、GUG、LG及塞来昔布灌胃,给药10周后,取大鼠膝关节软骨组织,采用免疫组化检测软骨组织Wnt-2、β-catenin的含量,采用Western Blot法检测LRP-5的表达,通过RT-PCR检测软骨细胞BMP-2、MMP-13、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达.结果:GLG可以减轻OA软骨组织浅表至钙化层各层的病理损伤;GLG及其拆方制剂可以明显下调Wnt2、β-eatenin的阳性表达,其中GLG与GUG、LG比较β-catenin阳性率明显下降(P＜0.01).Western Blot结果显示GLG组LRP-5蛋白表达较其他组显著降低;FQ-RT-PCR实验结果表明在骨灵膏组BMP-2mRNA的表达较GUG组明显增加(P＜0.01),而与LG组比较明显降低(P＜0.01),与正常组比较无差异(P＜0.05);GLG及其拆方制剂组BMP-2、MMP-13、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达较模型组显著降低(P＜0.01),GLG较GUG、LG及塞来昔布比较MMP-13、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达明显降低(P＜0.01).结论:GLG可能通过平衡调节OA中BMP-2 mRNA的表达,下调Wnt/β-catenin信号通路依赖的LRP-5跨膜蛋白的含量,阻止Wnt/β-catenin信号通路的过度抑制和异常激活,进而下调MMP-13、Caspase-9、Caspase-3 mRNA的表达起到减轻其对软骨ECM的降解及软骨细胞的异常凋亡作用,阻止了OA关节软骨进行性退变,GLG的上述作用优于其拆方制剂GUG和LG及塞来昔布.
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中药离子直流电导入治疗急慢性咽喉炎
治疗方法:将山豆根、威灵仙各50g,煎煮30分钟,过滤,取5 cm×3 cm和4 cm×3 cm垫子浸泡2分钟,温度控制在45～50℃,分别置于天容和廉泉穴区,双侧天容可轮换使用,然后接点送电疗机,选择直流电,电流量以整个咽喉部麻木感及紧缩感和舒适感为宜.每日1次,每次25分钟.5～10次为一疗程.
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试论威灵仙功用
威灵仙作为临床常用药物,可单用可入方,可内服可外用且功多效广,故通过查阅历代本草文献及古医方书籍等资料,并结合名医用药经验及现代药理研究进展等资料,探索威灵仙中药功效理论.初步界定威灵仙功用为祛风除湿、通络止痛、温中散寒、解毒抗癌、泻下通便、利胆排石、利湿退黄、涤痰化饮、止咳平喘、破血逐瘀、利水消肿、行气降逆,从而为指导临床用药及研发新药提供理论依据.
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威灵仙不同剂量对大鼠肾功能及组织形态学的影响
目的观察美国FDA两个通告附录药物威灵仙水煎剂不同剂量对大鼠肾功能及组织形态学的影响,确定威灵仙的细胞毒性作用.方法威灵仙水煎剂低、中、高3个剂量给大鼠灌胃,每日1次,共3个月,其间观察各项肾功指标及肾组织形态学改变.结果威灵仙高、中剂量组组织形态学可见肾小管及肾间质损伤,而低剂量组未见明显异常.低、中、高3个剂量组不同时间BUN、Cr及尿蛋白、尿潜血与对照组相比无统计学意义.结论大剂量威灵仙水煎剂对大鼠肾组织结构有一定影响.
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威灵仙商品药材品种调查研究
目的对甘肃、四川、云南、贵州及黑龙江省威灵仙商品药材主流品种进行调查研究.方法通过对中药材市场收集到的样品进行性状鉴别及显微鉴别,参照文献及与自采样品对照进行品种鉴定.结果与结论目前市售威灵仙商品药材主要品种有2000版<中国药典>收载的毛茛科铁线莲属植物威灵仙Clematis chinese 0sbeck、棉团铁线莲C.hexapetala Pal1.及东北铁线莲C.manshurica Rupr.,湖南及浙江地方标准收载的同属植物山木通C.finetiana Levl.et Vant.,还有<中国药典>及各地方标准都无收载的同属植物柱果铁线莲C.uncinata Champ、锥花铁线莲C.paniculata Thunb、毛蕊铁线莲C.1asiandra Maxim.及菊科旋复花属植物显脉旋复花Inula nervosa Wall.也作为商品威灵仙在云南及四川市场上流通.
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土茯苓、威灵仙治疗慢性前列腺炎
土茯苓,甘淡平,归肝、胃经,有解毒、除湿、利关节之功效.尤擅解湿热之毒.慢性前列腺炎(CP)为男科常见病,多发病,也是难治病,出现有尿频、尿急、尿痛,排尿时尿道不适,排尿后和便后尿道口常有白色分泌物流出,伴有阳痿早泄等症状.在临床上常用土茯苓、威灵仙为主加减治疗各种证型的慢性前列腺炎,疗效肯定.
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不同品种威灵仙药材的质量调查
对不同品种威灵仙药材进行质量调查.优化《中国药典》2010年版威灵仙含量测定项下方法,并测定威灵仙样品中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量.所测30批样品中仅有3批威灵仙Clematis chinensis药材中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量符合《中国药典》2010年版规定的标准；东北铁线莲C.manshurica药材中齐墩果酸质量分数大于0.30％,但常春藤皂苷元含量极微；棉团铁线莲C.hexapetala中未检测到常春藤皂苷元和齐墩果酸.
