首页 > 文献资料
-
可溶性腺苷酸环化酶介导精子获能及其信号转导通路
研究证明,精子中存在一种可溶性腺苷酸环化酶(sAC),在获能中起重要作用.精子获能过程中存在着Ca2+、cAMP及sAC的调节系统.本文综述sAC的来源、结构及其作用机制,旨在探讨sAC在精子获能过程中的作用及其信号转导通路.
-
感染与精子膜WGA受体的相关性
精子膜WGA受体与受精、获能和胚胎发育密切相关,其含量的下降可影响男性生育能力.解脲脲原体感染是导致男性不育的因素之一.研究发现解脲脲原子核体感染引起的精子变化与将WGA加入精子悬液后精子的形态改变及凝集十分相似.
-
人精子甘露糖受体表达与顶体反应的关系
目的研究人精子的甘露糖受体(MR)表达与顶体反应的关系,以探讨体外获能培养精子的MR表达是否为人精子获能的标志.方法将上游法收获的活精子在获能培养基BWW中进行体外获能培养后,加入小鼠透明带溶解液(mZPS)诱导人精子顶体反应,精子悬液用异硫氰酸荧光素标记的甘露糖基化牛血清白蛋白(FITC-DMA)为探针标记MR,用豌豆凝集素(PSA)法检测顶体反应.结果体外获能培养人精子的MR表达率与mZPS诱导的顶体反应率无相关性.结论体外获能培养精子的MR表达可能不是人精子获能的标志.
-
不同功能状态精子表面复型的透射电镜观察
目的建立实用的实验程序,观察不同功能状态下的精子表面超微结构特点. 方法用BWW上游法分离活动的人精子:BWW体外获能、诱导顶体反应和低渗膨胀试验处理后,将精子贴附于阳离子膜玻片上,叔丁醇冷却干燥后真空铂-碳喷镀复型.复型膜经3%氢氟酸剥脱,次氯酸钠腐蚀,透射电镜观察. 结果人精子表面复型图像清晰,立体感强,细节较丰富、清晰,获能精子顶体区呈网络状,顶体反应时可见顶体区大量互相吻合的小泡,经低渗处理的精子顶体区出现类似获能和顶体反应的现象. 结论表面复型-透射电镜技术可用于观察精子的不同生理状态引起的表面形貌变化,方法简便,可重复性好,具有良好的应用价值.
-
精子获能中HCO-3介导的信号转导途径
获能是哺乳动物精子受精前必须经历的一个生理过程.获能涉及精子膜性质的改变、Ca2+通道活化、胞内cAMP增加,以及蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)等.实验证明,HCO-3在该过程中起重要作用.本文旨在介绍HCO-3介导的cAMP信号转导途径.
-
关键词：
-
氰戊菊酯对小鼠精子顶体反应影响及作用机理
目的观察氰戊菊酯对小鼠精子顶体反应的影响并探讨其作用机理.方法采用顶体反应诱导试验结合细胞染毒,以考马斯亮蓝染色法判定精子顶体反应.结果孕酮或A23187诱导的小鼠精子顶体反应,可被2 mmol·L-1 EDTA和1.8 mmol·L-1 Mn2+相应地完全抑制;50 μmol·L-1氰戊菊酯则有明显抑制作用.实验还发现氰戊菊酯在精子获能前或后加入,对孕酮诱发顶体反应的抑制率不同,获能前抑制率低,二者存在显著性差异.结论氰戊菊酯对小鼠精子顶体反应有抑制作用,对小鼠精子获能可能有一定的促进作用.
-
牛精子体外获能后的超微结构变化
用肝素-咖啡因作获能剂对牛冷冻/解冻精子进行体外获能处理,体外培养1h,在透射电镜下观察精子获能后的超微结构变化.结果表明:(1)牛精子顶体内膜和外膜均为双层膜结构;(2)精子获能后顶体囊泡化的形成有多种形式:质膜与顶体外膜融合,双层顶体外膜自身融合,顶体外膜内陷或外突打褶,双层顶体内膜自身融合,顶体内膜外突打褶形成囊泡;而且在同一精子的顶体反应中可同时出现多种囊泡化形式;(3)精子获能后,头部无顶体覆盖的核后区核膜膨胀,并与膨胀的质膜融在一起;(4)精子获能后,尾部质膜膨胀,且主段质膜比中段质膜膨胀明显,这可能与超激活运动有关.
-
精子膜离子通道与精子获能
哺乳动物CH精子的成熟获能及精卵结合反应是个复杂的过程.睾丸中产生的精子从其形态结构和染色质的角度已基本成熟,但是还不具备运动、精卵识别及结合的能力[1].
-
精子受精功能
精子在与卵细胞受精融合之前,须经历一系列的生理和生化改变,包括成熟、获能、顶体反应、膨化、融合等一系列过程.近的研究观察到一些精子改变的细微表现,并探讨其影响因素.
-
卵子成熟的基础和临床应用研究
卵母细胞成熟的过程被称为卵母细胞获能(oocyte capacitation),这一获能过程包括核恢复减数分裂至第二次减数分裂中期(MⅡ)静止和经历一系列复杂生理生化变化的细胞质的成熟.在临床上,比较理想的卵子成熟障碍的病理模型就是多囊卵巢综合征.它表现为卵巢皮质内多个小卵泡的发育停滞在不成熟的阶段,并伴有一系列高雄激素血症和胰岛素抵抗的病理生理学变化.
-
前列腺的外科解剖
1前列腺的形态结构前列腺是男性重要的生殖器官之一,主要分泌前列腺液,其中包括柠檬酸、酸性磷酸酶、精液蛋白酶等,前列腺液占精液的80%,同精液的液化、精子的获能有关.成年男性前列腺重约20g,为一纤维肌肉腺体器官,其重量的30%为肌肉组织,其他为腺上皮成分.其腺体成分主要位于前列腺的后方和外侧,其前部主要为纤维肌肉组织.
-
宫颈粘液对人精子甘露糖受体表达的影响
目的:研究人宫颈粘液是否影响人精子甘露糖受体的表达.方法:正常人精子穿透宫颈粘液2 h后,用金霉素(CTC)荧光染色法鉴定其获能及顶体状态,并用异硫氰酸荧光素标记的甘露糖化牛血清白蛋白(FITC-DMA)检测精子甘露糖受体的表达.对照组分别用获能培养基BWW培养0、2、6 h后用相同方法检测.结果:人精子穿透宫颈粘液后"获能"型精子百分率较穿透前增高,而"顶体反应"型精子百分率及甘露糖受体的标记阳性率与穿透前无差别.结论:宫颈粘液促进精子获能,但不诱导顶体反应,且不影响其甘露糖受体的表达.
-
木黄酮通过非依赖的酪氨酸蛋白激酶抑制来影响牛精子的顶体反应和透明带结合
目的:研究植物雌激素木黄酮是否对冻存的牛精子的基本功能产生影响.方法:通过计算机辅助运动分析系统对木黄酮运动的影响进行评估;用半卵泡试验法检测精子结合透明带的能力;用孕酮和ZP3-6多肽来研究顶体反应的可诱导性,通过荧光素偶联的豌豆凝集素(FITC-PSA)/Hoechst 33258双染色来分析;用氯四环素(CTC)法来检测用木黄酮处理后的获能情况;免疫印迹法检测冻存的牛精子蛋白酪氨酸磷酸化情况.结果:酪氨酸磷酸化蛋白的免疫检测显示木黄酮对冻存的牛精子的酪氨酸磷酸化没有影响,但木黄酮显著降低了由孕酮和ZP3-6调控的顶体反应,抑制了剂量依赖的精子-透明带结合.通过计算机辅助的精子运动分析和CTC分析发现,这种植物雌激素对精子的运动和获能都没有影响.结论:本研究结果表明在冻存的牛精子中,木黄酮影响了酪氨酸磷酸化非依赖的信号转导通路,这一通路参与了精子的获能、顶体反应和精子-卵透明带的结合.
-
NYD-SP27,一个新的精子内源性去获能因子
在受精之前精子必须完成一个被称为"获能"的活化过程,终发生项体反应.到目前为止,虽然已有研究证实多种来源的去获能因子在这一过程中发挥作用,但对于阻止精子发生过早获能的详细机制还不甚了解.在本文的研究中,我们通过特异性抗体的免疫荧光证实NYD-SP27,磷脂酶C Zeta 1(PLCZl)的一种亚型,定位于小鼠和人精子的顶体部.Western blot和双染的研究表明在精子发生获能和顶体反应的过程中NYD-SP27逐渐从精子上丢失.关键性获能活化因子HCO3的缺乏可以阻止NYD-SP27自精子上的丢失.抗NYD-SP27的抗体也同样能够阻止NYD-SP27自精子上的丢失,减少获能精子的数量,抑制ATP和孕酮诱发的顶体反应以及抑制精子内PLC偶联的Ca2+的动员,而这些均能够由PLC inhibitor u73122所模拟.这些数据有力的表明NYD-SP27是一种生理性的PLC抑制剂,它作为精子内的内源性的去获能因子发挥作用以阻止过早的获能和顶体反应的发生.
-
附睾特异RNase9蛋白对精子的作用
目的 研宄附睾特异表达的RNase9蛋白在精子获能过程中的作用及对精子运动的影响.方法 本实验主要采用免疫荧光技术、金霉素染色法以及计算机辅助精子分析法研究RNase9蛋白或抗体对精子的作用.结果 精子在获能过程中RNase9蛋白的定位不断发生改变,顶体反应发生后,精子头部的RNase9蛋白荧光信号明显减弱或消失.精子与RNase9蛋白共同孵育后,精子运动能力也明显降低.结论 RNase9蛋白参与精子获能过程并在体外抑制精子的运动.
-
酸性磷酸酶检测评价人精子获能和顶体反应
目的探讨酸性磷酸酶(ACP)检测评价人精子获能和顶体反应(AR)的可行性.方法32名健康生育男性的精子悬液,于37℃下孵育1h获能,用孕酮在有无苯甲基磺酰氟(PMSF)下诱导AR 15、30、45、60min,分别检测获能前后及AR各时间点的精子悬液上清中ACP活性,同时用CASA分析精子运动参数证实精子发生获能和AR.结果精子获能前后的ACP活性无显著性差异;AR(有PMSF)各时间点的ACP活性显著高于获能前后及不加PMSF时的ACP活性;CASA分析证实,精子运动参数的改变与其发生获能和AR的运动特性一致.结论ACP分析为一种简便易行、耗时少、能反映精子群体AR状态的较为客观的方法,但蛋白酶的潜在影响不容忽视.
-
磷酸二酯酶-5抑制剂对精子参数和受精能力的影响
为了解磷酸二酯酶-5(PDE5)抑制剂对精子参数和受精能力的影响,Dimitriadis F等人进行了一项研究,系统回顾了PDE5抑制剂对于精子活动度、获能过程、以及与卵细胞结合等方口自j所起的作用.环磷(酸)鸟苷环化酶系统等第二信使系统可调节精子的功能,增加环磷(酸)腺苷浓度水平以提高精子活动度和生存力.使用低剂量一氧化氮鸟苷酸环化酶系统治疗能够改善和维持精子的活动度,然而高度浓缩物却对精子的参数有不利作用.
-
GABA和孕酮对人及豚鼠精子的体外获能作用
为了探讨γ-氨基丁酸(GABA)是否参与人及豚鼠精子体外获能的调节, 将生育男子和豚鼠精子分别悬浮于BWW和低Ca2+小获能培养基(LCa2+-MCM)中,加入GABA、孕酮(P4)、GABAA受体激动剂及其拮抗剂,在5% CO2孵箱38.5℃培养2 h.然后用ionophore A23187激发精子顶体反应(AR)和超激活运动(HAM).以精子与金霉素(CTC)荧光结合类型、AR和HAM为指标来评价精子获能情况.结果表明:(1)GABA和P4可明显地增加精子AR,这种作用可被GABAA受体激动剂muscimol所替代.GABA所致的获能作用不仅可被GABAA受体拮抗剂(-)荷包牡丹碱和印防己苦毒素所阻断,而且可被Ca2+螯合剂EGTA所抑制.(2)GABA具有明显地增强P4对精子的获能作用,并可明显地激发豚鼠精子的HAM.上述结果表明,GABA参与人及豚鼠精子体外获能的调节,这种作用通过精子表面的GABAA受体所介导.
-
钙调蛋白抑制剂对小鼠精子获能影响的研究
目的:探讨钙调蛋白是否参与小鼠精子获能过程. 方法:用50、100、200μmol/L浓度的钙调蛋白抑制剂W7和10、20、30μmol/L浓度的钙调蛋白抑制剂卡米达佐(CZ)分别与小鼠精子孵育2 h,通过金霉素染色法计算出B型精子百分率.并用100μmol/L钙调蛋白抑制剂W7和10μmol/L CZ分别与小鼠精子孵育2 h后,再加入5μmol/L孕酮诱发顶体反应,计算精子顶体反应百分率. 结果:不同浓度的W7和CZ作用小鼠精子,B型精子百分率呈浓度依赖性方式下降,与对照组比较,均有显著性差异(P＜0.05).顶体反应率与对照组相比均有极显著差异(P＜0.01). 结论:钙调蛋白参与小鼠精子获能,是精子获能过程中的关键蛋白.
